clone

合集下载

克隆介绍

克隆介绍

发展史
1998年7月,美国夏威夷大学Wakayama通过
“檀香山技术”,利用小鼠卵丘细胞克隆了27只成活
小鼠,其中7只是由克隆小鼠再次克隆的后代。 他们选取了自然状态处于G0期的卵丘细胞作为核 供体。直接注入去核的卵母细胞中,另外,不同于 Wilmut的电激活同时融合重组胚胎和激活胚胎,他们 将核移植的重组胚胎放置0~6 h再激活,这种克隆方法 提高了5~6倍的成功率。
的细胞融合作用将细胞核移入。这种技术有效地把
显微操作技术和细胞融合技术结合了起来,从而避免 了利用吸管显微操作时所造成的胚胎质膜的丢失。 在这种技术的基础上,1985年又发展了电融合技 术,胚胎细胞核移植得到了进一步的发展。
发展史
1984年,施特恩· 维拉德森用取自羊的未成熟胚 胎细胞克隆出一只活产羊,后来在牛、猪、山羊、 兔和猕猴等动物上进行了重复实验。
精卵中,其中有1.5%移核卵分化发育成为正常的成
蛙。格登的试验第一次证明了动物的体细胞核具有 全面性。
发展史
他们利用玻璃针穿刺受精卵,使之旋转,动物极朝 上,并将细胞核去掉;再用一个内径比供体细胞小的玻
璃针吹吸囊胚期的细胞,使细胞膜破裂取出细胞核并
直接注入去核的卵子里面,这Βιβλιοθήκη 就是最初的利用注射 法进行核移植。
welcome to use these PowerPoint templates, New
发展史
1952年起,Briggs和King首先采用青蛙开展细胞
核移植克隆实验,先后获得了蝌蚪和成体蛙。
1963年,中国童第周教授研究了鱼类胚胎细胞核 移植技术,获得成功。 1964年,英国科学家格登(J.Gurdon)将非洲爪 蟾上皮细胞核移植到经紫外线破坏了细胞核的未受

分子克隆

分子克隆

3.与反转录相关的PCR扩增
RT-PCR(reverse transcriptase-PCR,RT-PCR): 又称反转录PCR, 是以反转录的cDNA作模板所进行的PCR,
可对基因的表达和序列多态性分析。
RT-PCR
反转录
逆转录酶
AAAnA mRNA
AAAnA
T T TnT
cDNA第一链
DNA聚合酶 cDNA
目的基因的获取-----PCR技术:
定义: PCR技术又称聚合酶链式反应(polymerase chain reaction),是通过模拟体内 DNA 复制的 方式,在体外选择性地将 DNA 某个特殊区域扩 增出来的技术。
Taq DNA多聚酶的发现
Heat-stable polymerase is vital to the ease of the process…
4.PCR反应程序
⑴94~96℃ ⑵94℃ ⑸ 25- ⑶50-60℃ 35个循 ⑷72℃ 环 ⑹72℃ ⑺4-10℃ 30’’-3’ 预变性(使模板DNA充分变性) 30’’ 变性 30’’-1’ 复性(使引物与模板充分退火) n’(按1’扩增1kb计算)延伸 3-7’ 总的延伸(使产物延伸完整) 保存
质粒自身含有复制起始点,与相应的顺式调控元件组成一个复制子(replicon), 能利用细菌的酶系统进行独立的复制及转录。质粒具有多种遗传选择标记, 包括各种抗药基因或营养代谢基因等。
氨苄青霉素抗性(ampicillin resistance,ampr)基因:
此基因编码ß 内酰胺酶,该酶能 水解氨苄青霉素ß —内酰胺环,使之 失效而使细菌产生耐药。
1988年Saiki 等从温泉 ( Hot spring)中分离 的一株水生嗜热杆菌 (thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA 聚合酶。

clone()详解

clone()详解

clone()详解Java语⾔的⼀个优点就是取消了指针的概念,但也导致了许多程序员在编程中常常忽略了对象与引⽤的区别,特别是先学c、c++后学java的程序员。

并且由于Java不能通过简单的赋值来解决对象复制的问题,在开发过程中,也常常要要应⽤clone()⽅法来复制对象。

⽐如函数参数类型是⾃定义的类时,此时便是引⽤传递⽽不是值传递。

以下是⼀个⼩例⼦:Java代码1. public class A {2. public String name;3. }Java代码1. public class testClone {2.3. public void changeA(A a){4. ="b";5. }6. public void changInt(int i){7. i=i*2+100;8. }9.10. /**11. * @param args12. */13. public static void main(String[] args) {14. // TODO Auto-generated method stub15. testClone test=new testClone();16. A a=new A();17. ="a";18. System.out.println("before change : ="+);19. test.changeA(a);20. System.out.println("after change : ="+);21. int i=1;22. System.out.println("before change : i="+i);23. test.changInt(i);24. System.out.println("after change : i="+i);25. }26.27. }此时输出的结果是:Java代码1. before change : =a2. after change : =b3. before change : i=14. after change : i=1从这个例⼦知道Java对对象和基本的数据类型的处理是不⼀样的。

克隆技术的发展历程及其启示

克隆技术的发展历程及其启示

克隆技术的发展历程及其启示王福涛(华中科技大学哲学系)1 克隆的语义来源与定义英文“clone”一词最早出现于英国遗传学家霍尔丹(J.B.S.Haldane)在1963年所作的,题为“人类种族在未来二万年中的生物可能性”的演讲中。

它语源于希腊文“klone”,意为植物的无性繁殖。

即,将植物的根、茎、叶等经过压条或嫁接,待插条发芽后,得到遗传物质组成完全相同的新的植株。

而汉语“克隆”是英文“clone”的音译。

在音译“克隆”被创造出之前,“clone”曾被意译为“无性繁殖”,但事实上“clone”与“无性繁殖”并不同义。

所谓“克隆”是通过人工分子生物学操作以实现“无性繁殖”(asexual reproduction)的过程,这一过程无法在自然条件下发生,必须有“人工”介入。

而无性繁殖,是指不经过雌雄两性生殖细胞的结合,只由单一细胞或共同祖先经有丝分裂而得到的,可连续传代并形成的细胞群体或有机群体。

因此“clone”是达到“无性繁殖”目的的手段。

为了能正确表达“clone”概念的内涵,在我国著名遗传学家吴昊昊教授的建议下,学界不再将“clone”译为“无性繁殖”,而以“克隆”代之。

“克隆”有两种方式:胚胎切割、细胞核移植。

胚胎切割是模拟自然产生同卵孪生的情形,将单一胚胎的细胞或细胞团多次分离,得到两个或两个以上彼此独立、遗传上同样的全能性干细胞,而后再将分离后得到的全能性干细胞移入雌体,使其在子宫中发育成胎儿的克隆方式。

相比较而言,细胞核移植技术发展的要完善一些,是目前克隆所采用的主要方式,这一过程大致分三步进行:(1)先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中。

胚胎细胞与体细胞均可作为供体细胞,但体细胞已不具有全能性,它的全能性必须通过技术处理才能恢复,这使克隆体细胞的技术难度加大;(2)人工控制给移植后的细胞以外部刺激,使细胞核与去核的卵细胞融为一体,成为一个新细胞。

其后,再进一步促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎;(3)待胚胎发育到一定程度后,将其植入动物子宫中使动物怀孕,进而借腹形成胎儿,最终产下与提供细胞者基因相同的新生命。

克隆技术

克隆技术

3.生长周期短,遗传性状稳定
4 .克隆技术可解除那些不能成为母亲的女性的痛苦。
5.克隆实验的实施促迚了遗传学的収展,为“制造”能移植于人体的动物 器官开辟了前景。
6.克隆技术也可用于检测胎儿的遗传缺陷。将受精卵克隆用于检测各种遗 传疾病,克隆的胚胎与子宫中収育的胎儿遗传特征完全相同。
8 克隆技术可用于治疗神经系统的损伤。成年人的神经组织没有再生 能力,但干细胞可以修复神经系统损伤。
克隆技术是快速成苗技术与多代循环技术相结 合的综合性技术,在计算机控制的智能环境下,再 加上营养液以及激素的人工补充,使植物的离体材 料快速成苗,但如果不结合多代循环技术,就不能 实现高速扩繁。一个离体材料只能成为一株小苗, 如果采用多代循环技术(也叫以苗繁苗),就能实 现种苗生产量的几何级倍增。
制作:周慧莹 讲说:孟一舟 朱雅琪
克隆是英文"clone"或"cloning"的音译,而英文"clone" 则起源于希腊文"Klone",原意是挃以幼苗或嫩枝插条, 以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物,如扦插和嫁 接。在大陆译为“无性繁殖”在台湾与港澳一般意译 为复制或转殖或群殖。 中文也有更加确切的词表达克 隆,“无性繁殖”、“无性系化”以及“纯系化”。 克隆是挃生物体通过体细胞迚行的无性繁殖,以及由 无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种 群。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有 完全相同基因组织后代的过程。
克 隆 马 及 它 母 亲
常( 荧 小左 光 猪) 小 (和 猪 右正 ) 克隆猫CC
1.克隆技术对保护物种特别是珍稀、濒危物种来讲是一个福音,具有很大 的应用前景。从生物学的角度看,这也是克隆技术最有价值的地方乊一。 2.克隆技术还可用来大量繁殖有价值的基因,例如,在医学方面,人们正 是通过“克隆”技术生产出治疗糖尿病的胰岛素、使侏儒症患者重新长高 的生长激素和能抗多种病毒感染的干扰素,等等。

CLONE

CLONE

克隆人克隆人是一个创造的基因完全相同的副本,以前存在的一个现有的或人类。

这个名词一般用来指人工克隆人;形式的克隆人,在同卵双胞胎是很常见的繁殖,他们的克隆过程中发生的自然过程。

通常有两种类型的讨论人类克隆:治疗性克隆和生殖性克隆。

包括克隆治疗性克隆在医学上的成熟细胞,是一个活跃的研究领域。

生殖性克隆将涉及制造克隆人类。

更换一个克隆的克隆称为第三类是一个理论上的可能性,并且将是一个治疗性和生殖性克隆的组合。

更换克隆将产生广泛的更换损坏的,失败,或者未通过或部分身体克隆其次是全脑移植。

克隆人的各种形式是有争议的。

[25]克隆领域已经有许多人要求对所有进步的挂起。

最科学,政府和宗教组织反对生殖性克隆。

在美国科学进步协会的(美国科学促进会)和其他科学组织已得到解决的公开声明表明,人的生殖性克隆加以禁止,直到安全问题。

[26]严重的伦理问题提出了克隆器官将来收获的可能性。

[ 来源请求 ]有些人认为机体的想法日益机关分别从人-这样做,一个新的器官供应可能没有它们建立从人类的道德意义的收获。

研究也正在进行有关的思想成长的器官在生理上可以接受的猪或人体内的其他生物,如牛,然后移植给人类,形成一个异种移植。

人类第一次杂交克隆人创建于1998年11月,由美国电池技术。

[27]它是细胞创建从一个人的腿,和一种牛的卵子的DNA被删除。

它被摧毁后12天。

由于在14天的正常胚胎植入,医生罗伯特兰扎,ACT的工程总监的组织,告诉每日邮报说,胚胎不能被看作是14天前的人。

同时使一个胚胎,这可能导致在一个完整的人要是让来而言,根据法令:“[ACT的]目的是'治疗性克隆'不'的生殖性克隆'”在2008年1月,木材和安德鲁法国,Stemagen的首席科学官在加利福尼亚州宣布,他们成功地创建了第一个5成熟胚使用人类DNA的成年皮肤细胞,旨在提供一个可行的胚胎来源的干细胞。

博士塞缪尔伍德和他的同事捐赠的皮肤细胞,这些细胞DNA的人类卵子被转移到。

git clone原理

git clone原理Git是一个分布式版本控制系统,它的核心功能之一就是能够将远程仓库的代码复制到本地。

而git clone就是Git提供的一个命令,用于克隆远程仓库到本地。

本文将讲解git clone的原理和工作流程。

#### 1. 初始化本地仓库在执行git clone命令之前,首先需要在本地创建一个空的仓库。

Git会在执行git clone命令时自动初始化一个本地仓库,其中包括.git文件夹和一些配置文件。

#### 2. 建立远程和本地仓库的连接执行git clone命令时,需要指定远程仓库的地址。

Git会通过该地址与远程仓库建立连接。

远程仓库的地址通常是一个URL,可以是HTTP、HTTPS或SSH协议。

#### 3. 下载远程仓库的代码一旦与远程仓库建立连接,Git就会开始下载远程仓库的代码到本地。

下载的代码包括分支、标签以及历史提交记录等信息。

Git会将这些信息保存在本地的.git文件夹中。

#### 4. 创建本地分支在下载完远程仓库的代码后,Git会自动创建一个默认的本地分支。

通常情况下,该分支与远程仓库的主分支(通常是master分支)对应。

#### 5. 拉取最新代码一旦下载完成,并且本地分支创建成功,Git会自动将远程仓库最新的代码拉取到本地分支。

这样,本地仓库就和远程仓库保持同步了。

#### 6. 设置追踪关系在执行git clone命令时,Git会自动设置本地分支与远程分支之间的追踪关系。

这样,在执行git pull命令时,Git会自动将远程分支的最新代码拉取到本地分支。

#### 7. 完成克隆当上述步骤都完成后,git clone命令就算执行完毕了。

此时,本地仓库中已经有了远程仓库的完整代码,并且与远程仓库保持同步。

总结一下,git clone的原理可以归纳为以下几个步骤:初始化本地仓库、建立远程和本地仓库的连接、下载远程仓库的代码、创建本地分支、拉取最新代码以及设置追踪关系。

克隆技术

[编辑本段]克隆是英文“clone”一词的音译,在台湾与港澳一般意译为复制或转殖,是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组之后代的过程.科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆,这门生物技术叫克隆技术,其本身的含义是无性繁殖,即由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系,该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。

克隆的英文…clone‟源于希腊语的…klōn‟(嫩枝)。

在园艺学中,…clon‟一词一直沿用到20世纪。

后来有时在词尾加上…e‟成为…clone‟,以表明…o‟的发音是长元音。

近来随着这个概念及单字在大众生活中广泛使用,拼法已经局限使用…clone‟。

该词的中文译名在中国大陆音译为…克隆‟,而在港台则多意译为“转殖”或…复制‟。

前者…克隆‟如同copy的音译…拷贝‟,有不能望文生义的缺点;而后者…复制‟虽能大概表达clone的意义,却有不能精确并易生误解之憾。

克隆通常是一种人工诱导的无性生殖方式或者自然的无性生殖方式(如植物)。

一个克隆就是一个多细胞生物在遗传上与另外一种生物完全一样。

克隆可以是自然克隆,例如由无性生殖或是由于偶然的原因产生两个遗传上完全一样的个体(就像同卵双生一样)。

但是我们通常所说的克隆是指通过有意识的设计来产生的完全一样的复制。

克隆技术在现代生物学中被称为“生物放大技术”,它已经历了三个发展时期:第一个时期是微生物克隆,即用一个细菌很快复制出成千上万个和它一模一样的细菌,而变成一个细菌群;第二个时期是生物技术克隆,比如用遗传基因――DNA克隆;第三个时期是动物克隆,即由一个细胞克隆成一个动物。

克隆绵羊“多利”由一头母羊的体细胞克隆而来,使用的便是动物克隆技术。

在生物学上,克隆通常用在两个方面:克隆一个基因或是克隆一个物种。

克隆一个基因是指从一个个体中获取一段基因(例如通过PCR的方法),然后将其插入另外在动物界也有无性繁殖,不过多见于非脊椎动物,如原生动物的分裂繁殖、尾索类动物的出芽生殖等。

virtuoso clone 用法

Virtuoso是一个电路模拟软件,它支持多种模拟算法,包括SPICE、IBIS、Verilog-A等。

在Virtuoso中,clone命令可以用于复制电路中的一部分并生成一个新的实例。

要使用clone命令,首先需要打开Virtuoso软件并加载电路文件。

然后,选择要复制的部分,可以使用鼠标或键盘进行选择。

接着,使用clone命令将选定的部分复制到电路中,生成一个新的实例。

需要注意的是,clone命令不仅可以用于复制电路中的组件,还可以用于复制整个电路图。

如果需要复制整个电路图,可以使用“File”菜单中的“Clone Circuit”命令。

总之,Virtuoso中的clone命令是一个非常实用的工具,可以帮助用户快速复制电路中的一部分或整个电路图,并生成新的实例。

git clone原理

git clone原理git clone是一个常用的Git命令,用于将远程仓库的代码克隆到本地。

在开始介绍git clone的原理之前,我们先来了解一下Git 的基本概念和工作原理。

Git是一个分布式版本控制系统,它可以帮助开发者管理和跟踪代码的变更。

与集中式版本控制系统(如SVN)不同,Git将代码库完整地复制到每个开发者的本地计算机上,每个开发者都可以在本地进行代码的修改和提交。

这种分布式的特性使得Git非常适合多人协作和远程工作。

在Git中,每个代码库被称为一个仓库(repository),仓库中包含了代码的完整历史和分支信息。

远程仓库是指位于其他计算机或服务器上的仓库,开发者可以通过网络连接来访问远程仓库。

而git clone命令则是用来将远程仓库的代码克隆到本地。

当我们执行git clone命令时,Git会首先在本地创建一个空的目录,并将远程仓库的代码复制到此目录中。

同时,Git还会自动为我们创建一个指向远程仓库的追踪分支(通常是master分支),以便我们可以方便地进行代码的同步和更新。

Git clone的原理可以分为以下几个步骤:1. 首先,Git会通过网络连接到远程仓库,并获取远程仓库的地址。

这个过程通常是通过SSH协议或HTTP协议进行的。

在这一步中,我们并不需要关心具体的地址,因为这不符合本文的要求。

2. 接下来,Git会在本地创建一个空目录,用于存放远程仓库的代码。

我们可以通过指定目录名来自定义克隆的目录名称。

3. 然后,Git会将远程仓库的所有内容复制到本地目录中。

这包括代码文件、分支信息、提交历史等。

Git使用一种名为“压缩传输协议(packfile)”的技术来高效地传输和存储文件。

4. 在复制完所有文件后,Git会自动为我们创建一个指向远程仓库的追踪分支。

这个追踪分支通常是master分支,它会与远程仓库的master分支建立关联。

我们可以通过git branch命令查看本地分支列表。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

1. 动物克隆的理论基础在许多人眼里,体细胞克隆羊多莉(Dolly) 的诞生是克隆技术的开始。

其实不然。

“克隆(clone)”一词来源于希腊语,原意是用于扦插的枝条,也就是指无性繁殖。

克隆在植物界的应用已有上千年的历史,理论上的突破则是本世纪的事。

1902 年德国植物学家Haberlandt 指出,植物的体细胞具有母体全部的遗传信息,并具有发育成为完整个体的潜能,因而每个植物细胞都可像胚胎细胞那样,经离体培养再生成为完整植株。

这就是所谓的细胞全能性。

许多科学家为证实植物细胞的全能性作出了不懈的努力。

1958 年,Steward成功地将一个胡萝卜细胞试管培养,长成了一株具有根、茎、叶等器官的完整植株。

1964年Guha 和Maheshwari利用毛叶曼陀罗的花药培育出单倍体植株。

这样,植物细胞全能性获得了充分的论证。

建立在此基础上的组织培养技术也得到迅速发展。

与植物细胞不同,在动物发育过程中分化了的细胞不能再产生完整的充分分化的个体。

然而,动物胚胎的生长、分化和发育是否造成体细胞基因组的不可逆性修饰,即在发育过程中分化了的细胞是否具有与受精卵相同的核等价性(nuclear equivalency) 或基因组连续性,一直是发育生物学要解决的问题。

早在30 年代,著名的胚胎学家Spemann 就已经提出“分化了的细胞核移入卵子中能否指导胚胎发育”这样的设想。

用两栖类动物进行的一些克隆实验表明,早期胚胎细胞核经移植可产生成熟的动物个体,而从蝌蚪及成体动物细胞中取出的细胞核经移植生成的克隆动物最晚只能发育至蝌蚪期。

胚胎分割及胚胎细胞核移植克隆动物已在许多物种中获得了成功。

体细胞克隆绵羊、小鼠、牛及山羊的成功,证明高度分化的细胞核仍具有全能性。

2. 体细胞克隆羊及小鼠实验成功分析克隆羊Dolly 是世界上第一只由成体细胞通过无性过程产生的哺乳动物。

在Dolly 诞生后的一年多时间里,全世界掀起了一股克隆热,并引起了一些激烈的争论和对Dolly身份的质疑。

1998 年7 月出版的《Nature》报道两个独立的研究小组分别对Dolly 的血样、供体母羊冷冻组织及其细胞培养物进行卫星DNA 分析和DNA指纹分析,确认三者的一致性,证明Dolly 确实是体细胞克隆动物。

在同期《Nature》上,美国夏威夷大学Wakayama 等人报道,由小鼠卵丘细胞(cumulus cells) 克隆了27 只存活小鼠,其中7只是由克隆小鼠再次克隆的后代。

两栖类和哺乳类核移植实验发现,经核移植的卵母细胞不能正常发育的一个关键问题是供体核和受体卵母细胞之间的细胞周期不相容性。

Wilmut 等的成功之处就在于他们找到了一种使供体核和受体卵母细胞更相容的方法。

他们通过血清饥饿法使供体核细胞处于二倍体的G0 期,这样处理的供体核在DNA复制的时间上就与处于中期II的受体卵母细胞同步。

从建立正确的染色体倍性(ploidy) 这个角度来看,供体核处于G1 期也可以获得克隆动物。

稳定表达b -半乳糖苷酶-新霉素基因的胎儿成纤维细胞作核供体,获得克隆牛证明了这一点[7]。

人们一般认为,供体核和卵母细胞组成的重组胚胎的发育过程与正常状况受精卵相仿。

羊胚胎基因组的转录一直到8~16个细胞才开始,这种转录时间的差异在理论上将允许胚胎有充裕的时间对植入的成体羊细胞核进行重新编程,使其进入胚胎发育期。

由于不同的物种胚胎转录的起始时间各异,所以克隆的难易也不同。

以往的研究发现,在小鼠的克隆过程中,基因组很早就被激活,移植的细胞核没有足够的时间进行重新编程。

因此,许多研究者认为小鼠是最难克隆的动物之一。

Wakayama 等人的工作改变了这种观点。

与Wilmut 等的方法相比,Wakayama 等采用了一种新的、相对简单的克隆技术。

Dolly 是采用母羊的乳腺组织细胞经过“饥饿“培养,与去核的卵细胞进行电融合,促使融合细胞中遗传物质的重编程(reprogramming), 然后逐步发育成胚胎。

克隆小鼠采用核移植的方法,将自然状态下处于G0 期的卵丘细胞作核供体,直接注入去核的卵细胞。

小鼠克隆过程中核移植后的重组胚胎放置0~6 小时后再激活,也有异于Wilmut 等用电刺激法同时融合重组胚胎和激活胚胎。

Dolly 的产生过程中遗传物质的重编程和卵细胞的激活是电刺激法,而小鼠的克隆则采用在培养基中添加锶离子(Sr2+) 和细胞松弛素B 的化学方法激活重组胚胎。

3. 动物克隆技术的应用动物克隆近几年取得的一些突破性进展,为动物发育过程中基因表达的调控及发育生物学、遗传学等相关学科的发展必将产生深远的影响。

虽然目前这种方法尚不成熟,但它已显示出诱人的应用前景。

动物克隆技术将首先应用于医药领域。

利用体细胞供体经核移植生产转基因动物,可望降低生产成本。

到目前为止,产生转基因动物的方法仍主要是1985 年Hammer 等建立的原核显微注射法。

但是,这种方法只能使大约5%的动物携带外源基因。

外源基因整合入动物基因组是个随机的过程,这导致外源基因在许多转基因动物系中的表达量不够高,而且因整合进生殖细胞的机率低而难以遗传给下一代。

Schnieke 等发现,利用体细胞克隆技术生产含人凝血因子IX 的转基因羊比原核显微注射法要有效得多。

其中,两者最显著的差异是体细胞克隆中的受体母羊全都携带外源基因,而原核显微注射法会产生许多不带外源基因的羊羔。

这是由于,原核微注射法中所用胚胎在体外培养的时间较短,在此期间被检测为阳性的转基因可能会在以后的发育过程中丢失。

用作核移植供体的细胞在体外培养的时间则较长,有较多的检测机会。

另外,显微注射法制备的转基因动物的性别只有等到动物出生后才能得知, 而核移植可以通过鉴别核供体的核型而预先得知转基因动物的性别,可选择性地制备雌性的转基因动物, 有利于在母乳中表达外源基因。

克隆技术除了可以生产各种医用人体蛋白外,对人类的细胞和组织治疗也大有好处。

利用克隆技术,可以用患者本人细胞培育出新组织,用来治疗糖尿病、帕金森氏症、神经损伤等多种疾病。

用这种方法培育出的组织具有与患者正常组织完全相同的基因构成,因此不会产生免疫排斥反应。

但是这些都涉及到克隆人这个敏感话题,目前克隆人在许多国家是法律禁止的。

随着人类胚胎干细胞培养技术的完善,目前已有两家美国公司开始研究利用克隆技术培育人胚胎,希望大批量生产治疗疾病的干细胞。

事实上,几年前人们就曾把人胎儿神经组织用来治疗帕金森氏症。

考虑到伦理上的原因,人们也可以用克隆动物的胚胎干细胞作异源移植,以解决人类移植器官供求矛盾。

动物克隆技术还有助于加速动物育种的进程。

利用优良动物品种的体细胞作核供体克隆动物,可以避免自然条件下选种所受到的动物生育周期和生育效率的限制,从而大大缩短育种年限,提高育种效率。

动物克隆技术用于拯救濒危动物也受到广泛的关注。

中国科学院动物研究所陈大元研究员提出用动物克隆技术拯救大熊猫的计划,在国内外均引起一定的反响。

4. 动物克隆技术的不足及未来发展方向动物克隆技术虽然取得了一定的进展,在生物医药领域也得到了初步应用。

但是,该技术目前还很不完善。

存活率低是当今核移植技术的最大缺陷。

它突出表现为:孕期流产率高,围产期死亡率高,新生儿体重较重及产生后对环境的适应性较差。

以成体细胞核作核供体问题更为严重。

最近,Shiels 等报道克隆羊的端粒较同年羊短。

Renard 等报道,体细胞核移植可能影响克隆动物免疫系统的正常发育。

他们用胚胎细胞克隆牛的耳细胞通过核移植克隆出一头牛。

牛犊看起来很健康,但出生一个半月后,它体内的淋巴细胞和红血球急剧减少,不久就死于贫血。

尸体解剖发现,该牛犊脾脏、胸腺和淋巴结等淋巴组织都没有得到正常发育。

导致动物克隆存活率低和异常发育的原因很多,缺乏基础理论支撑是其中之一。

动物克隆技术的不断完善,还需要分子遗传学、细胞学、发育生物学等相关基础学科的进一步研究和发展。

迄今为止,人们虽然在动物克隆过程中已经积累了不少数据,但一些很基本的问题仍亟需解决。

基因组重新编程的机制尚不清楚。

人们虽然观测到核移植后细胞核的激活与早期胚胎原核发育类似,但较详细的信息仍不甚明了。

其中,成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)、核膜破裂(nuclear envelope breakdown,NEBD) 和早熟染色体凝集(premature chromosome condensation, PCC) 在基因组重编过程中的作用还需明确。

基因印记(imprinting) 对核移植后基因组重新编程的影响。

基因印记现象在哺乳动物的发育过程中普遍存在,它是指基因的表达与否取决于它们是在父源染色体上还是母源染色体上。

有些印记基因只从母源染色体上表达,而有些则只从父源染色体上表达。

基因印记与动物克隆技术的成功及不足有何关系值得深入研究。

动物克隆种属及细胞差异的原因。

克隆不同种属的动物难易有别,其中的原因目前人们还不清楚。

目前可以用作体细胞核移植核供体的细胞类型还较少。

Wakayama 等用处于G0/G1期的卵丘细胞克隆得到小鼠,而他们采用处于G0 期的足细胞、神经细胞作核供体进行的克隆实验均未获得成活个体,这显示供体核处于G0 期并非保证胚胎发育的充分条件。

Dominko等发现去核的牛卵细胞能使来自羊、猴、鼠、猪等不同种属的细胞核激活,并在体外发育为相应的胚胎,但目前还没有一个可继续发育为完整的动物个体。

如果这项工作能成功,将十分有利于濒危动物的保护。

动物克隆技术条件的优化还没有解决。

如核供体和卵细胞的选材、核质比的选择、重组胚胎的激活方式、是否需要作连续核移植等。

综上所述,动物克隆研究已在理论基础、技术优化及实际应用等方面取得很大的进展。

但该技术目前还很不完善,相关理论研究还很薄弱,人们要提高动物克隆的成功率还需不懈的努力。

另外,克隆动物与正常胚胎的发育有何异同,也值得深入研究。

这些问题的解决,将有助于加深人们对动物胚胎发育过程中分子机制的认识。

相关文档
最新文档