沙门氏菌检验
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌（Salmonella）是一类革兰氏阴性的杆状细菌，是引起沙门氏菌属感染的病原菌。
这种细菌可以引发食物中毒和伤寒症，其中食物中毒是最常见的感染途径。
因此，对沙门氏菌的快速、准确的检测非常重要。
目前，沙门氏菌的检测方法主要包括传统培养分离法、免疫学方法和分子生物学方法。
以下是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。
1. 传统培养分离法传统的沙门氏菌检验方法是利用富含寡糖的培养基，如XLD、SS等，以及一些选择性供氧培养基，如亚硫酸和肉汤琼脂培养基等，将样品进行培养。
通过培养，沙门氏菌会形成典型的红色或蓝绿色菌落。
然后，从菌落中挑取纯培养物，并进行生理生化反应和田纳氏试验以确定是否为沙门氏菌。
2. 免疫学方法免疫学方法是通过检测沙门氏菌特异性抗原或抗体来诊断沙门氏菌感染。
常用的方法有：- 血清凝集试验：利用特异性沙门氏菌抗原和患者血清，在特定条件下观察血清与抗原的凝集反应，可确定是否感染沙门氏菌。
- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：利用特异性沙门氏菌抗原或抗体和酶标记的二抗，通过检测光学密度来判断是否存在沙门氏菌。
3. 分子生物学方法分子生物学方法可以通过检测沙门氏菌的基因或DNA来快速、准确地诊断沙门氏菌感染。
常用的方法有：- PCR（聚合酶链式反应）：通过特异性引物扩增沙门氏菌的DNA片段，然后进行凝胶电泳分析。
PCR可以提供快速、高效的沙门氏菌检测结果。
- 实时荧光PCR：使用带有荧光探针的PCR引物，通过检测荧光信号的强度来定量沙门氏菌的存在量。
- 基因芯片技术：基因芯片上固定了沙门氏菌特异性的探针，可以同时检测多个基因或DNA序列，提高检测效率。
除了上述方法，还可以利用质谱仪等仪器进行快速鉴定，甚至利用抗生素敏感试验、细菌溶解酶试验等进行进一步的鉴定和鉴别。
总结起来，沙门氏菌的检验方法主要包括传统培养分离法、免疫学方法和分子生物学方法。
这些方法可以单独或联合使用，以提供准确、快速的沙门氏菌检测结果，对于预防和控制沙门氏菌感染具有重要意义。
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性杆菌，可引起许多动物和人类的肠道感染。
为了检验沙门氏菌的存在，可以采用以下一些常见的方法：1.培养方法：沙门氏菌是一种需氧的微生物，在富含营养成分的寒凝琼脂或低酸性洗涤剂和生物素的培养基上培养。
常用的培养基如VRB （XLD）琼脂、SS琼脂、MS琼脂等。
培养基可以选择均匀地涂布在平板上，也可以用于液体培养。
2.表型特征：沙门氏菌的菌落通常呈现红色或无色，个别品系可能为粉红色。
如在VRB琼脂上，沙门氏菌会变为红色或橙色。
沙门氏菌也可以产生硫化氢，导致MS琼脂呈现黑色。
3.生化特性：沙门氏菌通常可以进行一些常规的生化测试，如产生气泡的气液反应，碳源利用测试和酸碱指示剂变色等。
这些测试可以帮助进一步确认沙门氏菌的存在。
4.血清学方法：采用沉淀试验或血清凝集试验检测血清中的抗生素，以确定是否感染了沙门氏菌。
这些试验通常利用鸡血清，鸡蛋白和羊血清制备的具有特异性的血清反应。
5. 分子生物学方法：沙门氏菌的检验还可以利用PCR技术进行，通过检测沙门氏菌特异性基因如invA基因的存在来确定沙门氏菌的存在。
6.抗生素敏感性试验：通过对沙门氏菌菌株进行抗生素敏感性测试，可以了解菌株对不同抗生素的抗性情况，为临床使用合适的抗生素提供参考。
除了以上提到的方法，还有其他一些检验方法如酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光PCR等也常被用于沙门氏菌的检验。
这些方法不仅可以准确快速地检测沙门氏菌的存在，还可以区分不同菌株和进行进一步的流行病学分析。
总之，通过上述的方法，可以对沙门氏菌进行有效的检验，从而帮助人们及时判断感染情况并及时采取措施进行治疗和预防。
沙门氏菌检验
实验六食品中沙门氏菌的检验一、概述：1.沙门氏菌的形态特征：革兰氏阴性，两端钝圆的短杆菌，无芽孢，一般无荚膜，周身鞭毛，运动力强，具菌毛。
2.沙门氏菌需氧或兼性，10-42℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH 为6.8-7.8。
3.沙门氏菌食物中毒的食品主要为动物性食品，特别是畜肉类及其制品，污染肉类食物的几率很高。
冷冻对沙门氏菌无杀灭作用，即使在-25℃低温仍可存活10个月左右。
意义：沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。
在世界各国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。
因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出口食品的必检项目之一。
二、操作步骤：1．前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
2．选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。
此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。
3．选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。
4．生化鉴定——排除大多数非沙门氏菌，提供了沙门氏菌培养物菌属的生理生化鉴定结果。
5．血清学技术——对沙门氏菌属培养物进行血清学分型鉴定，确定菌型。
主要沙门氏菌有2000多个血清型，可先用多价血清鉴定，再用单因子血清鉴定，先有常见菌型的血清鉴定，再用不常见菌型的血清鉴定。
三、实验过程：1.前增菌将样品鸡蛋壳用灭菌棉签查拭蛋壳后，将棉签上部剪掉，下部放入前增菌培养基BPW中，5个棉签放入150mL前增液中，将制备好的预增菌液于37℃培养8-18h。
（样品液变浑浊即可）2.选择性增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取4mL前增菌液转种于40mL TTB选择性增菌液内，于42 ℃±1 ℃培养18h-24h。
如果菌株生长过慢（TTB 培养基需现配现用，每组制备40ml增菌液，需加入816uL的碘液后再加入前增液）。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析一、简介沙门氏菌是一种能引起人类和动物肠道感染的细菌，也可以引起食品中毒。
它主要通过食品、饮用水和接触感染物传播。
对于食品中的沙门氏菌进行检验和分析，对保障食品安全至关重要。
二、检验方法1.纳氏肠杆菌培养基法用纳氏肠杆菌培养基法检验食品中的沙门氏菌，是一种常用的方法。
它利用富含养分的培养基，使得沙门氏菌能够在培养基中迅速生长，并形成典型的菌落。
检验人员可以根据菌落的形态、颜色和大小等特征来识别沙门氏菌的存在。
2.血液平板培养法血液平板培养法是另一种常用的检验方法。
将待测样品涂抹在富含养分的血液平板上，再将平板置于恒温培养箱中培养一段时间，观察是否有典型的沙门氏菌菌落的产生。
3. PCR法PCR法是一种较为快速、敏感的检验方法。
通过PCR技术可以快速对样品中的沙门氏菌进行检测，结果准确可靠。
这种方法对实验条件和检验人员的要求较高，但可以提高检测的速度和准确性。
三、分析结果通过上述方法进行检验后，需要进行有关分析。
针对检验结果，进行有关的分析可以有效地判断食品中是否存在沙门氏菌污染，并确定污染的程度。
1. 菌落计数通过检验方法得到的菌落数可以反映食品中的沙门氏菌污染程度。
一般来说，菌落数越多，说明沙门氏菌污染越严重。
2. 菌株鉴定对分离出的菌株进行鉴定，可以确定其是否为沙门氏菌。
根据鉴定结果，可以进一步分析菌株的来源和特性。
3. 毒素检测有些沙门氏菌会产生毒素，对食品中的毒素进行检测，可以确定食品中是否存在具有毒素产生能力的沙门氏菌。
四、实验注意事项在进行沙门氏菌检验及分析时，有一些实验注意事项需要遵守。
1. 实验室操作检验和分析工作要在严格的实验室条件下进行，保证实验室内的环境洁净，避免交叉污染。
2. 操作规范操作人员要求严格遵守相关操作规程，使用消毒剂对实验仪器、培养基和工作台进行处理。
3. 实验安全在进行检验和分析实验时，要注意个人防护，避免因接触致病菌而导致感染。
五、应用领域沙门氏菌检验及分析在食品安全领域具有广泛的应用。
第五章沙门氏菌的检验ppt课件
血平板：中等大小、灰白色菌落。
生物学特性
生化反应：
不发酵乳糖和蔗糖，不产生吲 哚，不分解尿素，VP试验阴 性，大多产生硫化氢。发酵葡 萄糖、麦芽糖和甘露醇，除伤 寒杆菌产酸不产气外，其他沙 门氏菌均产酸产气。
ONPG －
沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验
非沙门氏菌
报告
沙门氏菌在BS平板上
沙门氏菌在HE平板上
沙门氏菌的TSI试验
三糖铁（TSI）琼脂试验
本试验可同时观察乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气（变黄）；产生硫化氢 （变黑）。葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸 ，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物， 故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍 保持黄色。
商品化生化鉴定系统
API 20E API 20E 生化鉴定 是根据快速酶促反应 及代谢产物的检测技 术发展的一种细菌编 码鉴定法，广泛应用 于临床、食品中革兰 氏阴性杆菌的快速鉴定。
API 20E
第1位数
O AL N DD P HC G
第2位数 第3位数 第4位数 第5位数
O CI H U T
1、未接种 2、尿素酶阳性 3、尿素酶阴性
KCN生长试验
右：抑制生长
沙门氏菌在TSI和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的结果
斜面 底层 产气 硫化氢 赖氨酸脱羧酶 初步判断
K A ＋(－ ) ＋(－ )
＋
K A ＋(－ ) ＋(－ )
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种主要引起食物中毒的致病菌，其检验方法主要包括培养分离、生化检测和分子生物学方法等。
下面是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。
1. 培养分离沙门氏菌可以通过在选择性培养基上进行培养分离来检测。
常用的选择性培养基包括XLD培养基、SS培养基和BS培养基等。
将待检样品接种于选择性培养基上，并采用适当的温度和培养时间进行培养。
沙门氏菌在培养基上形成红色或无色的菌落，可以通过形态特征进行初步判断。
2. 生化检测生化检测是通过检测沙门氏菌代谢产物或酶活性来进行的。
常用的生化检测方法包括气体产生试验、亚甲蓝试验和尿嘧啶酸试验等。
气体产生试验通过观察沙门氏菌在培养基中是否产生氢气或硫化氢气体来判断其存在。
亚甲蓝试验则是通过观察沙门氏菌对亚甲蓝的还原作用来进行检测。
尿嘧啶酸试验则是通过检测沙门氏菌产生的尿嘧啶酸来进行。
3. 血清学检测血清学检测是通过检测人体血清中对沙门氏菌特异性抗体的存在来进行的。
常用的血清学检测方法包括凝集试验、间接荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验等。
在这些方法中，沙门氏菌抗原与患者血清中的抗体结合，形成可见的凝集物或荧光产物，从而判断是否感染沙门氏菌。
4. 分子生物学方法分子生物学方法是通过检测沙门氏菌特异性基因序列来进行的。
常用的分子生物学方法包括聚合酶链式反应（PCR）、核酸杂交和基因测序等。
PCR方法可以通过特异性引物扩增沙门氏菌基因的特定片段，从而进行检测。
核酸杂交可以通过与沙门氏菌特异性探针结合，形成杂交信号来进行检测。
基因测序则可以直接检测沙门氏菌菌株中的特定基因序列，确定其身份。
总结：沙门氏菌的检验方法主要包括培养分离、生化检测、血清学检测和分子生物学方法等。
这些方法通过不同的途径检测沙门氏菌的存在，可以提供准确鉴定和检测结果。
在实际应用中，结合多种方法的综合应用可以提高检测结果的准确性和可靠性。
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病，可能会导致严重的胃肠道感染。
为了保障食品安全，确保公众的健康，我们需要进行沙门氏菌的国标检验。
下面是一份生动、全面且有指导意义的文章，详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。
第一步：样品准备在进行沙门氏菌检验之前，我们首先需要准备样品。
常见的样品包括食品、水、动物排泄物等，可能携带沙门氏菌。
样品应该收集自具有代表性的地点，并采取无菌采样容器进行收集。
收集样品时要注意避免污染，并确保样品的数量足够进行检验。
第二步：样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来，并进行后续的检测。
可以采用不同的方法进行样品处理，常见的方法包括富集培养和选择性培养。
富集培养是将样品放入富集培养基中，利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。
选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长，从而使沙门氏菌生长出来。
第三步：菌落鉴定在样品处理后，我们需要对培养基上的菌落进行鉴定，确认是否为沙门氏菌。
常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。
形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。
生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。
分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因，通常使用PCR技术进行检测。
第四步：抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。
通过抗菌药敏试验，我们可以选择合适的药物来治疗感染。
可以使用各种常见的抗生素盘进行试验，然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。
根据抗生素的抑菌效果，可确定沙门氏菌的耐药性情况。
第五步：结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析，并撰写检验报告。
检验结果要结合国家标准进行评估，确定样品是否合格。
如果样品中检测到沙门氏菌，还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。
在撰写报告时，需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果，以及相应的建议和措施。
沙门氏菌的检验方法与注意事项
沙门氏菌的检验方法与注意事项在日常微生物检验中，沙门氏菌比较常见，是一种致病性细菌，国家规定在每25g的食品样本中不能检测出沙门氏菌，所以在检验沙门氏菌时，对试剂与培养基有很高的要求，下面本文针对沙门氏菌的检验方式和注意事项作出简单介绍！一、沙门氏菌检测的原因和意义根据相关统计显示，我们国家因细菌性食物中毒的人中，有70%-80%左右的人是通过沙门氏菌造成的。
人体倘若含有过多的大量沙门氏菌的动物性食物，就会造成细菌性感染，以此在毒素的影响下产生食物中毒，造成伤寒、胃肠炎及副伤寒。
而且沙门氏菌的传播途径较多，肉、蛋和其他食物，从加工至销售的整个过程当中都极易引发感染情况，所以准确、有效检验沙门氏菌有重大意义。
二、沙门氏菌的检验（一）前增菌(无选择性)BPW（缓冲蛋白胨水）属于一种比较常见的增菌培养基，不包括任何抑制物质，有助于修复受损的沙门氏菌。
促使受损的沙门氏菌细胞复苏至相对平稳的生理状态。
（二）选择性增菌TTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）内含有硫代硫酸钠，结合四硫磺酸钠，能够对肠道共生菌进行有效抑制，而包含四硫磺酸钠还原酶的细菌，可以在这一培养基当中生长繁殖；煌绿及胆盐能够控制大肠群菌、革兰氏阳性菌的繁殖，而伤寒沙门氏菌依旧可以生长。
SC（亚硒酸盐胱氨酸增菌液）能够对其他和伤寒沙门氏菌进行选择性增菌，其含有的亚硒酸结合蛋白胨内的含硫氨基酸，促使亚硒酸与硫的复合物生产，对细菌硫的代谢产生干扰，进而减少肠球菌、变形杆菌、大肠埃希氏菌的繁殖生长。
（三）分离培养基(选择性)①BS（亚硫酸铋琼脂）内含亚硫酸铋指示剂，可对大肠菌群、革兰氏阳性菌进行抑制，但不会对沙门氏菌的繁殖产生影响；其他沙门氏菌、伤寒杆菌可以借助葡萄糖，还原亚硫酸铋，使其形成硫酸铋，使黑色菌落附近有黑棕色的环，对光可看到金属光泽。
BS的压力和温度不可过高，避免选择性下降，需在使用前配制，放置阴暗处储存，48小时后丧失选择性，储存不合理会造成色浅，表示效果开始减弱，联合TTB、SC使用能够提高检出率。
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可能的菌属
沙门氏菌属、变形杆菌属、枸橼 酸杆菌属、爱德华氏菌属
沙门氏菌属亚属Ⅲ、枸橼酸杆菌 属、变形杆菌属
沙门氏菌属、埃希氏菌属、哈夫 尼亚菌属、摩根氏菌属、普罗菲 登斯菌属
伤寒沙门氏菌 鸡沙门氏菌 志贺 氏菌属 埃希氏菌属 哈夫尼亚菌 属 摩根氏菌属 普罗菲登斯菌属
§ 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL，转种于10 mL四 硫酸钠煌绿增菌液（TTB），42℃±1℃, 18h~24h
• 含有胆盐，抑制除沙门氏菌以外的肠道菌（主要抑制革兰氏阳性球菌 和部分大肠埃希氏菌的生长），而伤寒与副伤寒沙门氏菌仍能生长
• 选择性效果相对较好，杂菌最少 • 配置时最好用无菌温水，先煮沸基础液，分装至无菌瓶，临用时再加
平板分离——HE琼脂
v 菌落为蓝绿色或蓝色，多数菌落产硫化 氢，菌落中心为黑色或几乎全部黑色
v 亚利桑那沙门氏菌，因发酵乳糖，菌落 为黄色，根据产硫化氢情况而带或不带 黑色中心
平板分离——XLD琼脂
v 菌落为粉红色，据产硫化 氢情况有或没有黑色中心
v 产硫化氢的多数菌株产生 大的有光泽的黑色中心或 几乎全黑色
前增菌
v Day1：
§ 25g(mL)样品+225mL缓冲蛋白胨水（BPW）
• BPW是基础增菌培养基，不含任何抑制成分，有利于受损伤的沙门氏 菌复苏。使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态
§ 36℃±1℃, 8h~18h § 样品呈酸性、碱性时，需调PH值至6.8±0.2
选择性增菌
v Day2：
初步鉴定——三糖铁（TSI）
v TSI操作：
1、接种针挑取至少两个典型或疑似菌落，先于斜面由里到外划 一条直线
2、于斜面中心穿刺，尽量直刺，不要刺到底 3、抽出接种针，在斜面由里到外划Z字线使菌分散 4、可直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基或尿素酶试验培养基和
营养平板
v TSI观察：
§ 底层及斜面：产酸(A)变黄；产碱(K)变红 § 中下部：产硫化氢者变黑(+) § 培养基内部有裂痕甚至被顶起为产气
§ 伤寒型：由伤寒、副伤寒沙门氏菌引起，未接受过治疗的病 人致死率可超过10%，而对经过适当医疗的病人其致死率低 于1%
§ 败血症型：最常由猪霍乱、鼠伤寒和肠炎沙门氏菌引起 § 无症状携带者不显示发病症状仍能将微生物传染给其他人
（传统的例子就是玛丽伤寒）
目录
v 概述 v 致病性 v 细菌学特性 v 生化特性 v 血清学特性 v GB 4789.4-2010检验方法
v 是一大群寄生于人类和动物肠道内，形 态、培养、生化反应和抗原构造相类似 的革兰氏阴性杆菌，种类繁多。已发现 近3000个种（或血型）。
v 共分为7个亚属（生化群），亚利桑那菌 为第三群。
DANIEL ELMER SALMON
(1850-1914)
肠杆菌科隶属关系
肠杆菌科(肠道内菌群)
耶尔森
Enterobacteriaceae
§ XLD、HE、显色培养基 36℃±1℃, 18h~24h
• XLD培养基中含有去氧胆酸钠作指示剂，在该浓度下的去氧胆酸钠也同时作为 大肠埃希氏菌的抑制剂，而不影响沙门氏菌属和志贺氏菌属的生长
• HE在保证细菌所需营养的基础上，加入了一些抑制剂，如：胆盐、柠檬酸盐、 去氧胆酸钠等，可抑制某些肠道致病菌和革兰氏阳性菌的生长，但对革兰氏阴 性的肠道致病菌则无抑制作用
沙门氏 菌属
氏菌属
大肠菌群Coliform
变形杆
克雷伯
菌属
柠檬酸杆菌属
氏菌属
摩根菌 属
粪大肠菌群 Fecal Coliform
志贺氏 菌属
沙雷氏 菌属
克罗诺
肠杆菌属
……
大肠埃希氏菌属(大肠杆菌)E.Coli
出血性
侵袭性
致病性 非致泻
O157:H7
（非典
集聚性 产毒性
型）
目录
v 概述 v 致病性 v 细菌学特性 v 生化特性 v 血清学特性 v GB 4789.4-2010检验方法
沙门氏菌致病性
v 重要的肠道致病菌，可引起人类的伤寒、副伤寒、感染性 腹泻、食物中毒和医院内感染，并引起动物发生沙门氏菌 病。据世界卫生组织不完全统计，每年至少有1600万病 例，导致死亡约60万。
v 人类沙门氏菌感染的临类型主要有四类：
§ 胃肠炎型：主要由沙门氏菌I的各种血清型引起，最常见的是 沙门氏菌食物中毒和感染性腹泻，是由于沙门氏菌在食品中 大量繁殖，侵入肠道后继续繁殖并释放出大量肠毒素，引起 剧烈的胃肠炎。通常表现为轻度，持久性腹泻。
沙门氏菌细菌性特性
v 0.7µm~1.5µm×2.0µm~5.0µm的G-直杆菌 v 多数具有周身鞭毛，能运动，但也有无鞭毛者，不能运
动，如鸡沙门氏菌、雏白痢沙门氏菌 v v 血清学特性 v GB 4789.4-2010检验方法
生化特性——培养特性
沙门氏菌检验方法
GB 4789.4-2010
李天添
目录
v 概述 v 致病性 v 细菌学特性 v 生化特性 v 血清学特性 v GB 4789.4-2010检验方法
沙门氏菌属（ Salmonella ）
v 美国兽医微生物和病理学家。1884年任 美国农业部畜牧局首任局长，他首次从 病猪中分离出猪霍乱沙门氏菌。隶属于 肠杆菌科，是一种重要的肠道致病菌， 可引起人类的伤寒、副伤寒、感染性腹 泻、食物中毒和医院内感染，并引起动 物发生沙门氏菌病。
v 需氧或兼性厌氧 v 在10℃～43℃内均能生长，35℃～43℃最适，一般沙门氏
菌在40℃～43℃培养能提高阳性检出率，而伤寒沙门氏菌 在37℃培养阳性检出率最高 v 最适pH6.8～7.8
生化特性
v 沙门氏菌生化特性比较复杂 v 常见的沙门氏菌均属于第I亚属 v 常见的典型特性如下
§ 不分解乳糖（亚利桑那菌除外） § 分解葡萄糖产酸产气（伤寒沙门氏菌产酸不产气） § 多数产H2S，能利用枸橼酸盐，能还原硝酸盐为亚硝酸盐 § 多数不产生靛基质（吲哚），不液化明胶，不分解尿素，不
v 亚利桑那菌因发酵乳糖而 呈黄色，带或不带黑色中 心
平板分离——科玛嘉显色平板
初步鉴定——三糖铁（TSI）
v TSI原理：
§ 部分细菌可分解含硫氨基酸（胱氨酸、半胱氨酸等）或其它 含硫组分而生成H2S，H2S遇铁盐或铅盐生成黑色沉淀（如 FeS）。但氧气含量大时则不产H2S，故使用穿刺培养法，中 间部分可产H2S变黑。
v 以上选择性平板均不需灭菌，且须注意制备过程不要过分加热及各组 分加入顺序。最好第一天配置置于暗处，第二天使用（注意加热）。
平板分离——BS琼脂
v 产硫化氢菌落为黑色有金 属光泽、棕褐色或灰色， 菌落周围培养基可呈黑色 或棕色；
v 有些菌株不产生硫化氢， 形成灰绿色的菌落，周围 培养基不变。
v 亚利桑那菌为黑色有金属 光泽
埃希氏菌属 肠杆菌属 克雷伯氏 菌属 沙雷氏菌属 枸橼酸杆菌属
初步鉴定——赖氨酸
v 赖氨酸脱羧酶试验培养基：
§ 制备时在试管上部加入液体 石蜡封盖，阻止空气的氧化 作用
§ 阳性反应使氨基酸脱羧产碱 显示为紫色，培养基不改变 颜色，而阴性发酵葡萄糖产 酸培养基呈黄色
§ 沙门氏菌多数为(+)
空白；阳性(紫色)；阴性(黄色)
初步鉴定——三糖铁（TSI）
v 沙门TSI现象：
§ 最典型者（不发酵乳糖、产硫化氢）：底层黄、斜面红、中 间黑
§ 少数不产硫化氢：底层黄、斜面红、中间不黑 § 亚利桑那多数：底层黄、斜面黄、中间黑
§ 2010GB排除底层变红和底层斜面全变黄不产硫化氢且赖氨 酸阴性者
肠杆菌科各菌属的反应结果
斜面 底层 产气 H2S
v 沙门氏菌生长情况：阴性（不生长）。 v 注：本试验必须设置对照管（不加氰化钾），若对照管细
菌生长良好，试验管细菌不生长，可判定为阴性。若对照 管与试验管均无细菌生长，则应重复试验。试验失败的主 要原因是封口不严，氰化钾逐渐分解，生成氢氰酸气体逸 出，以致药物浓度降低细菌生长，呈假阳性反应。
初步鉴定——*尿素
v 尿素酶试验：
§ 阴性为黄色不变，阳性为变 红色或粉红色
§ 沙门氏菌几乎全部为(-)，除 极个别变体
空白;强阳性(红色);弱阳性(粉红);阴性(黄色不变)
初步鉴定
v 经TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基（或者另加尿素酶） 的选择后，可筛掉大部分非沙门氏菌株，大大减少了工作 量，同时也满足了下一步生化鉴定的需要。
§ 其中乳糖:蔗糖:葡萄糖比例为10:10:1。一般沙门只发酵葡萄 糖产酸，底层产酸变黄，斜面先变黄，后酸被氧气氧化，加 之利用氨基酸产生碱性物质致使斜面产碱变红。
v TSI制备：
§ 121℃ 10min或115℃ 15min § 使用小试管则倒入2mL~4mL，制成斜面高度为总高度的
1/2~2/3
v Day3：
§ 分别用接种环取每种增菌液1 环，划线接种于两种平板，一 种为亚硫酸铋琼脂（BS），另一种建议从木糖赖氨酸脱氧胆 盐（XLD）、HE琼脂（Hektoen enteric）、显色培养基选择 其一
§ BS琼脂36℃±1℃, 40h~48h
• BS含有煌绿、亚硫酸铋能抑制大肠埃希氏菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的生 长，但对伤寒、副伤寒等沙门氏菌的生长无影响。伤寒杆菌及其他沙门氏菌能 利用葡萄糖将亚硫酸铋还原成硫酸铋，形成黑色菌落周围绕有黑色和棕色的 环，对光观察可见有金属光泽。
目录
v 概述 v 致病性 v 细菌学特性 v 生化特性 v 血清学特性 v GB 4789.4-2010检验方法