GB 4789.4-2010食品微生物学检验 沙门氏菌检验
食品中沙门氏菌和副溶血性弧菌污染状况的调查与分析
食品中沙门氏菌和副溶血性弧菌污染状况的调查与分析摘要：考察江苏地区181份高危食品（包括肉制品、熟食制品、水产品、蛋制品）中沙门氏菌和副溶血性弧菌的污染与分布情况。
调查结果显示：181份食品中，肉类食品108份，检出沙门氏菌4株，均在生畜禽肉类中检出。
49份生制水产类食品中检出副溶血性弧菌15份，检出率为30.6%。
针对两菌的污染状况进行分析，为寻找可能引起食源性疾病的重点食品，开展食品安全研究和控制食品市场食源性疾病的发生提供技术依据。
关键词：沙门氏菌副溶血性弧菌污染状况沙门氏菌（salmonella）是一种常见的病原菌，作为温血和冷血动物的肠道菌，分布范围十分广泛，它经污染食品传播，能在人类肠道中迅速繁殖，侵入肠粘膜组织，产生肠毒素，导致发热、腹痛、腹泻等全身症状，严重者出现败血症，由沙门氏菌引起的食物中毒一直占世界食物中毒病例前列。
1998年以来国家食源性疾病监测网的数据显示，副溶血性弧菌（vibrio parahaemolyticus， vp）引起食物中毒的发生规模及人群暴露规模已经超过沙门氏菌，高居微生物性食物中毒首位。
考虑到江苏省某些沿海沿江城市水产品中副溶血性弧菌危害的潜在性，因此同时选择沙门氏菌和副溶血性弧菌作为主要研究对象，考察其在我省地区食品中的污染和分布情况，为了解其在居民主要消费食品污染的本底情况，寻找可能引起食源性疾病的重点食品，为开展食品安全研究和控制食品市场食源性疾病的发生提供技术依据。
1、材料与方法1.1样品来源生肉类、蛋制品类采集自我省大型集贸市场、个体销售点及大型超市；散装熟食制品类采集自个体熟食销售点及大型超市熟食柜台；水产类包括生鲜水产品、冷冻水产品及水产制品类采集自水产品批发市场及大型超市。
1.2材料干燥培养基均使用北京陆桥技术有限公司产品。
沙门氏菌及弧菌显色培养基为郑州博赛生物技术研究所产品。
诊断血清为兰州生物制品研究所产品。
1.3方法1.3.1沙门菌检测参照gb 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》。
GB4789.4
表 3 沙门氏菌属生化反应初步鉴别表
硫化氢 反应序号
（H2S）
靛基质
氰化钾 pH7.2尿素 （KCN）
赖氨酸脱羧酶
A1
＋
－
－
－
＋
A2
＋
＋
－
－
＋
A3
－
－
－
－
＋/－
注：＋阳性；－阴性；＋/－阳性或阴性。
注：＋阳性；－阴性；＋/－阳性或阴性。 5.4.2.1 反应序号 A1：典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、KCN 和赖氨酸脱羧酶 3 项中 有 1 项异常，按表 4 可判定为沙门氏菌。 如有 2 项异常为非沙门氏菌。 表 4 沙门氏菌属生化反应初步鉴别表
GB 4789.4-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
前言 本标准代替 GB/T 4789.4-2008《食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验》。 本标准与 GB/T 4789.4-2008 相比，主要变化如下 ——修改了标准的中英文名称； ——修改了标准的范围； ——修改了培养基和试剂； ——修改了设备和材料； ——修改了附录 A。 本标准的附录 A、附录 B 为规范性附录。 本标准所代替的历次版本发布情况为： ——GB 4789.4-84、GB 4789.4-1994、GB/T 4789.4-2003、GB/T 4789.4-2008。
图 1 沙门氏菌检验程序 5 操作步骤 5.1 前增菌
称取 25 g（mL）样品放入盛有 225 mL BPW 的无菌均质杯中，以 8 000 r/min～10 000 r/min 均质 1 min～2 min，或置于盛有 225 mL BPW 的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1 min～2 min。若样 品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定 pH 值，用 1 mol/mL 无菌 NaOH 或 HCl 调 pH 至 6.8±0.2。 无菌操作将样品转至 500 mL 锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于 36 ℃±1 ℃培 养 8 h～ 18h。 如为冷冻产品,应在 45 ℃以下不超过 15 min,或 2 ℃～5 ℃不超过 18 h 解冻。 5.2 增菌 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取 1 mL，转种于 10 mL TTB 内，于 42 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。同时，另取 1 mL，转种于 10 mL SC 内，于 36 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。 5.3 分离 分别用接种环取增菌液 1 环，划线接种于一个 BS 琼脂平板和一个 XLD 琼脂平板（或 HE 琼脂 平板或沙门氏菌属显色培养基平板）。于 36 ℃±1 ℃分别培养 18 h～24 h （XLD 琼脂 平板、HE 琼脂 平板、沙门氏菌属显色培养基平板） 或 40 h～48 h （BS 琼脂平板），观察 各个平板上生长的菌落, 各个平板上的菌落特征见表 1。 表1 沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征
沙门氏菌检验详细流程图
1 mL+SC10 mL 36 ℃±1 ℃，18 h～24 h
BS
XLD（或HE、科玛嘉显色培养基）
36 ℃±1 ℃，40 h～48 h
36 ℃±1 ℃，18 h～24 h
挑取可疑菌落
TSI，赖氨酸，NA， 靛基质， 尿素 (pH 7.2)， KCN
商 品 化 生 化 H2S+靛基质- 尿素- H2S+靛基质+ 尿 H2S-靛基质-尿素 反应结果与左
为了最大可能的检出沙门氏菌，原则上必须使用 两种以上选择性分离培养基。
进口-SS 进口-SS 国产-SS 进口-HE 国产-HE 进口-XLD 国产-XLD 进口-BS 国产-BS CHRO显色 国产-DHL 国产-WS TSA（对照）
65.3 81.0 52.0 83.2 80.0 83.0 86.2 106.6 77.7 68.4 98.4 71.6 100.0
初筛微生 物
沙门氏菌
柠檬酸杆 菌属
变形杆菌
菌落颜色
紫色(直径约 1mm)
蓝色(直径约 1mm)
无色或被抑 制
特异性 灵敏度
89％ 100%
---
---
(铜绿假单胞菌也呈紫红色， 可以通过前增菌排除。所以推 荐在检测中的前增菌用TTB。 粉红色、深红色、干燥菌落、 边缘锯齿状等 均非沙门氏菌菌 落。）
被分成2500多个血清型。
Vi抗原 O抗原 H抗原
沙门氏菌命名与书写方式
目前的命名方法规定：
肠道沙门菌肠道亚种（亚种Ⅰ）给予专用名，并采用 标本分离地址的地名。菌名的第一个字母需大写，且 亚种Ⅰ的所用菌名不能用斜体。例如：肠道沙门菌鼠 伤寒血清型应书写为Salmonella enterica subsp.enterica serotype Typhimurium，但在实际工作中，可简写为S. Typhimurium。
中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和
中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体检验方法Mic伪biological examination of food hygi叨ewe Examination of Salmonellae , Shigellae , and diarrhoea causative及cherich血coli妙means of thed泣agnostic typing phage set for enterobacteriaceae前言本标准对GB/T4789.31一1994袭食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌肠杆菌科噬菌体检验方法》进行修订。
本标准与GB/T4789.31一19料相比主要修改如下：―按照GB/T1.1一2000对标准文本的格式和文字进行修改。
―规范原标准中的“设备和材料”。
本标准自实施之日起，GB/T4789.31一19944同时废止。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准起草单位：江西省卫生防疫站、中国疚病预防控制中心营养与食品安全所。
本标准主要起草人：何晓青、付萍、计融。
本标准于1994年首次发布，本次为第一次修订。
范围本标准规定了应用肠杆菌科噬菌体诊断法检验食品中沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的基本要求、操作程序和结果判定本标准适用于各种食品、食物中毒的检验，也适用于食品从业人员的肠道沙门氏菌和志贺氏菌带菌检验．2、规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其墩新版本适用于本标准。
GB／T4789.4食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB/T4789.5一2003食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验GB/T4780.6食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验GB/T4789.28一2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3、设备和材料3.1恒温培养箱：36℃士1℃。
沙门氏菌鉴定检验原始记录
检验：审核：报告日期：20年月日
XXXX食品有限Βιβλιοθήκη 司沙门氏菌鉴定检验原始记录
编号：ANST/JL/14
产品名称
生产日期及批号
批量
检验依据
GB4789.4-2010《食品国家安全标准食品中卫生微生物学检验沙门氏菌检验》
检验日期
20年月日
取样地点
1.前增菌：
取检样加入含BPW225mL的无菌均质袋中，拍打min，转入锥形瓶℃培养h；
2.增菌：
轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL，转种于10 mL TTB内，于℃培养h。同时，另取1 mL，转种于10 mL SC内，于℃培养h；
观察结果：□透亮，颜色无变化
□浑浊，颜色异常
3.分离：
分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板。于℃分别培养h（XLD琼脂平板）h（BS琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落,
表1在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果
三糖铁琼脂
赖氨酸脱羧酶试验
培养基
初步判断
斜面
底层
产气
硫化氢
注：K：产碱，A：产酸；＋：阳性，－：阴性；初步判断：可疑沙门氏菌属或非沙门氏菌。
表2生化反应初步鉴别表
硫化氢（H2S）
靛基质
pH7.2尿素
氰化钾（KCN）
赖氨酸脱羧酶
反应序号（判断）
注：＋阳性；－阴性；＋/－阳性或阴性；反应序号（判断）：A1、A2、A3或非沙门氏菌。
BS上可疑菌落形态：※菌落颜色：□黑色有金属光泽□棕褐色□灰色□灰绿色
※周围培养基：□呈黑色或棕色□不变□※□其它：
XLD上可疑菌落形态：□粉红色□黄色□黑色中心□全部黑色的菌落□其它：
肉鸡中沙门菌污染监测
肉鸡中沙门菌污染监测令狐采学[摘要] 目的对肉鸡养殖和屠宰环节进行沙门菌监测，确定肉鸡在养殖和屠宰环节中沙门菌的污染状况，分析肉鸡中沙门菌的污染来源，为食品安全风险评估提供基础数据，同时也为预防和控制由沙门菌起的食源性疾病提供科学依据。
方法在四川省成都市、遂宁市选取肉鸡养殖场和屠宰场作为监测点。
采集肉鸡活体肛拭、养殖场环境样本，肉鸡胴体，屠宰场环境样本进行沙门菌分离，并对检出菌株运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型，用微量肉汤稀释法进行14种抗生素药物敏感实验。
结果共从2个肉鸡屠宰场和1个肉鸡养殖场采集样本417份，检出沙门菌12株，检出率为2.87%。
通过PFGE分型，共得到4个带型。
其中遂宁养殖场的1株环境分离株和遂宁屠宰场的3株肉鸡胴体分离株具有相同PFGE型别，成都屠宰场的2株环境分离株和该屠宰场4株肉鸡胴体分离株具有相似PFGE型别。
遂宁分离的4株沙门菌对14种抗生素100%敏感。
成都分离的8株沙门菌对14抗生素耐药程度各异,其中4株沙门菌能耐受3种以上药物。
结论四川省部分地区肉鸡在养殖和屠宰环节存在沙门菌污染，且有多重耐药菌株出现，应进一步加大监测力度。
沙门菌是引起食源性疾病的常见致病菌之一。
在自然界沙门菌分布广泛, 主要由于食入污染食品,引起感染性腹泻。
在全球范围内沙门菌引起的细菌性食物中毒都位居前列[1,2]，并且呈现上升趋势。
在我国导致细菌性食物中毒的致病菌中沙门菌位居首位[3]。
鸡肉作为沙门菌污染的主要食物之一[4]，监测肉鸡中沙门菌的来源、污染和耐药状况,对因肉鸡沙门菌污染导致食物中毒的风险评估和预防、控制、治疗沙门菌引起的食物中毒具有非常重要的意义。
近年来养殖中抗生素的过度和不正确使用导致动物中分离到耐药沙门菌的情况越来越普遍，且多重耐药的沙门菌也多有报道[5]。
降低沙门菌对食品的污染是控制沙门菌食源性疾病的总要途径之一。
通过溯源找出并消除污染源是防治沙门菌污染的有效手段。
2010版沙门氏菌检验
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表2 沙门氏菌属在不同选择性琼基平板上的菌落特征
三塘铁琼脂
斜面
K K A 初步判断
赖氨酸脱羧酶试验 培养基 硫化氢
+（-） +（-） +（-） + +
底层
A A A
产气
+(-) +（-） +（-）
可疑沙门氏菌 属 可疑沙门氏菌 属 可疑沙门氏菌 属
非沙门氏菌
非沙门氏菌
A
K
A
K
+/+/-
+/+/-
蛋白胨水、靛基质试剂 氰化钾（KCN ） 培养 尿素琼脂 赖氨酸脱羧酶试验培养基 糖发酵管 邻硝基酚 β-D 半乳糖苷 （ONPG）培养基 半固体琼脂 丙二酸钠培养基 沙门氏菌O 和H 诊断血清。 生化鉴定试剂盒
操作步骤
1、前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养 基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。 2、选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间， 样品进一步增菌的一个步骤。此培养基允许沙门氏菌持续增 殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。 3、选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基，抑制 非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的 识别。 4、生物化学筛选——排除大多数非沙门氏菌。也提供了沙门 氏菌培养物菌属的初步鉴定。 5、血清学技术——提供了培养物菌种的鉴定。
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表1 沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征
选择性琼 脂平板 BS 琼脂
（36 ℃±1 ℃ 40 h～48 h）
沙门氏菌
菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可 呈黑色或棕色；有些菌株形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。
食品微生物检验技术W4304沙门氏菌检验-检验操作程序及要点-传统鉴定-4-微教材
《农产品/食品微生物检验》课程-微教材知识讲解沙门氏菌操作程序及要点——传统鉴定沙门氏菌操作程序及要点分为检验程序和操作步骤一、检验程序根据国标，沙门氏菌的检验程序为: 检样经无菌处理后，称取25 g(mL)样品加入到225 mL BPW中36±1℃培养8~18h；取培养物1mL 接种到10mL的TTB中同时取1mL 接种到10mL 的SC中，分别于42±1℃和36±1℃培养18~24h；取培养后的增菌液分别划线接种于BS琼脂平板和XLD琼脂平板（或HE琼脂平板、显色培养基平板）中，于36±1℃培养18~24h，BS 需延长至40~48h；培养后挑取可疑菌落做生化试验。
挑取2 个以上典型或可疑菌落——接种三糖铁琼脂，赖氨酸脱羧酶试验管和对照管、供做靛基质试验的色氨酸肉汤、尿素（pH7.2)，KCN试验管和对照管，同时划线营养琼脂平板——如5项生化都符合——则直接判定为沙门氏菌——如五项中靛基质阳性——则补做甘露醇和山梨醇试验，如果两项均为阳性——为可疑沙门氏菌，但需结合血清学鉴定结果进行判定——如五项中H2S阴性——则需补做ONPG试验，ONPG阴性，同时赖氨酸脱羧酶阳性——为沙门氏菌——也可在三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验初步判断结果后，使用商品化的生化鉴定系统进行生化鉴定——判定是否为沙门氏菌——如果5项反应中有2项以上不符合——则沙门氏菌阴性——最后报告结果二、操作步骤主要分为：1、样品处理与前增菌；2、增菌；3、分离；4、传统生化鉴定试验；5、系统生化鉴定试验；6、血清学鉴定。
其中传统生化鉴定试验又分为三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验，靛基质、尿素和氰化钾试验、甘露醇、山梨醇以及ONPG试验三个部分。
本片以鸡肉为样品，演示沙门氏菌检验的样品处理和前增菌的操作过程。
1、前增菌：在无菌室内，以75%酒精擦拭样品外包装，尤其是包装的开口处，用无菌剪刀在样品封口处剪开包装袋，换用一个无菌剪刀将鸡肉样品剪碎至无菌罐内，用无菌镊子称取25 g样品至盛有225 mL BPW的样品瓶中，再转入注明样品信息、检测人员以及检测日期的均质袋中，密封，用拍击式均质器拍击2 min。
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食品微生物学检验 沙门氏菌检验GB GB 4789.44789.44789.4-20-20-201010北京陆桥技术有限责任北京陆桥技术有限责任公司公司技术服务电话：010-******** 销售服务电话：010-********技术部邮箱：luqiaotech@www. beijinglandbridge .com北京陆桥技术有限责任公司目 录�沙门氏菌简介�2010版国标主要修订内容�沙门氏菌的检验步骤及注意事项�沙门氏菌检验过程中的常见问题www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司沙门氏菌简介�沙门氏菌属沙门氏菌属：肠杆菌科：肠杆菌科�沙门氏菌能引起胃肠炎、伤寒、败血症等人类疾病，严重时能导致死亡。
�种类繁多，抗原结构复杂，种类繁多，抗原结构复杂，在在《ANTIGENIC FORMULAE OF THE SALMONELLA SEROVARS FORMULAE OF THE SALMONELLA SEROVARS》》(2007 9th edition)(2007 9th edition)中已公布了中已公布了2579个血清型个血清型。
�食物是人类感染沙门氏菌的主要途径。
www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�形态特征：形态特征：革兰氏阴性革兰氏阴性革兰氏阴性、、两端钝圆短杆菌两端钝圆短杆菌，，无芽孢无芽孢，，一般无荚膜，除鸡沙门氏菌一般无荚膜，除鸡沙门氏菌和和雏沙门氏菌外，都有周身鞭毛，运动力强�培养特性：需氧或兼性厌氧，10℃~42℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH 为6.8~7.8�革兰氏阴性、需氧或兼性厌氧无芽孢杆菌沙门氏菌简介：生物学特征www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�修改了标准的中英文名称�修改了标准的范围�修改了培养基和试剂；�修改了设备和材料；�修改了附录修改了附录A A （规范性附录）培养基和试剂2010版国标主要修订内容www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司——关于培养基和试剂的修订说明�修改了修改了HE HE HE琼脂和三糖铁琼脂的配方。
琼脂和三糖铁琼脂的配方。
�删除了删除了080808版国标中一些培养基、试剂盒及设备版国标中一些培养基、试剂盒及设备的商品名，如科玛嘉，的商品名，如科玛嘉，VITEK VITEK VITEK等。
等。
2010版国标主要修订内容我们的产品均按20102010版国标要求的版国标要求的配方生产GB 4789.4-2010检验流程7www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�称取称取25g 25g 25g（（mL mL）样品于盛有）样品于盛有）样品于盛有225mL BPW 225mL BPW 225mL BPW的无菌均质杯中，以的无菌均质杯中，以80008000～～10000r/min 10000r/min均质均质均质1min 1min 1min～～2min 2min，或置于盛有，或置于盛有，或置于盛有225mLBPW 225mLBPW 225mLBPW的的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min 1min 1min～～2min 2min。
若样品为。
若样品为液态，不需要均质，振荡混匀即可。
�如需测定如需测定pH pH pH值，用值，用值，用1mol/L 1mol/L 1mol/L无菌无菌无菌NaOH NaOH NaOH或或HCl HCl调调pH pH至至6.86.8±±0.20.2。
�无菌操作将样品转至无菌操作将样品转至500mL 500mL 500mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接锥形瓶中，如使用均质袋，可直接培养，培养，363636℃±℃±℃±11℃培养培养8h 8h 8h～～18h 18h。
检验步骤及注意事项：前增菌www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�任何样品均需进行前增菌。
�缓冲蛋白胨水（缓冲蛋白胨水（BPW BPW BPW）：不含任何抑菌成分，有利于受损）：不含任何抑菌成分，有利于受损沙门氏菌的复苏，使受损伤细胞恢复到稳定的生理状态。
�冷冻样品解冻：冷冻样品解冻：454545℃℃以下不超过以下不超过15min 15min 15min，或，或，或22℃-5-5℃℃不超过18h 18h。
�建议采用拍击式均质的方式，更为便利，且节省培养空间。
检验步骤及注意事项：前增菌√www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�轻轻摇动培养过的样品混合物，移取轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL 1mL 1mL，转种于，转种于，转种于10mL10mL TTB TTB内，于内，于内，于424242℃±℃±℃±11℃培养培养18h 18h 18h～～24h 24h。
同时另取。
同时另取。
同时另取1mL 1mL 1mL转种转种于10mL SC 10mL SC内，于内，于内，于363636℃±℃±℃±11℃培养培养18h 18h 18h～～24h 24h。
�TTBTTB和和SC SC两种选择性增菌肉汤必须同时使用两种选择性增菌肉汤必须同时使用两种选择性增菌肉汤必须同时使用（（注意区分增菌培养温度增菌培养温度）。
）。
�SCSC：如果干粉或溶液变红，则不能使用。
：如果干粉或溶液变红，则不能使用。
：如果干粉或溶液变红，则不能使用。
开封后建议用开封后建议用封口膜密封后冷藏保存封口膜密封后冷藏保存，，可延缓变质可延缓变质。
检验步骤及注意事项：选择性增菌www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�分别用接种环取增菌液分别用接种环取增菌液11环，划线接种于一个环，划线接种于一个BS BS BS琼脂平琼脂平板和一个板和一个XLD XLD XLD琼脂平板（或琼脂平板（或琼脂平板（或HE HE HE琼脂平板或沙门氏菌显色琼脂平板或沙门氏菌显色培养基平板），于培养基平板），于363636℃±℃±℃±11℃分别培养分别培养18h 18h 18h～～24h 24h（（XLD XLD、、HE HE、显色培养基）或、显色培养基）或、显色培养基）或40h 40h 40h～～48h 48h（（BS BS琼脂平板）琼脂平板）�为了最大可能的检出沙门氏菌，必须使用两种或以上选择性分离培养基检验步骤及注意事项：选择性分离www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司生长抑制粪链球菌棕色至绿色大肠埃希氏菌棕色至绿色弗氏志贺氏菌黑色菌落有金属光泽鼠伤寒沙门氏菌菌落特征菌 名�使用使用注意事项注意事项注意事项：：不可过度加热；不可过度加热；使用前一天配制，且在使用前一天配制，且在48h 内使用；内使用；倾注平板前需摇匀；不能反复溶解倾注平板前需摇匀；不能反复溶解倾注平板前需摇匀；不能反复溶解；平板需避；平板需避；平板需避光光保存于室温环境检验步骤及注意事项：选择性分离亚硫酸铋琼脂亚硫酸铋琼脂BSBSwww. beijinglandbridge .com北京陆桥技术有限责任公司�使用注意事项：使用前一天配制，避免过度加热！室温避光储存�该培养基对沙门和志贺氏菌的灵敏度均较高，在国外应用广泛粉红色菌落，有黑心鼠伤寒沙门氏菌生长抑制金黄色葡萄球菌粉红色菌落，无黑心弗氏志贺氏菌黄色菌落，有胆酸盐沉淀大肠埃希氏菌粉红色菌落，无黑心甲型副伤寒沙门氏菌菌落特征菌 名检验步骤及注意事项：选择性分离XLD XLD琼脂琼脂www. beijinglandbridge .com北京陆桥技术有限责任公司�使用注意事项：避免过度加热！黄色菌落，有胆酸盐沉淀大肠埃希氏菌生长抑制金黄色葡萄球菌蓝绿色菌落，无黑心福氏志贺氏菌蓝绿色菌落，有黑心鼠伤寒沙门氏菌菌落特征质控菌株名称检验步骤及注意事项：选择性分离HE HE琼脂琼脂www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�原理原理：：特异性酶与底物特异性酶与底物的的显色反应。
�与传统培养基相比的优势与传统培养基相比的优势：：甲型甲型副伤寒副伤寒副伤寒、伤寒、伤寒、伤寒等不产或弱产等不产或弱产等不产或弱产HH 2S 的沙门氏菌在传统培养基上门氏菌在传统培养基上易易漏检；奇异变形杆菌等产漏检；奇异变形杆菌等产HH 2S 的非沙门氏菌在传统培养基上假阳性率很高，会增加后期生化鉴定的工作量。
在传统培养基上假阳性率很高，会增加后期生化鉴定的工作量。
而而使用显色培养基则不存在这些问题使用显色培养基则不存在这些问题。
�沙门氏菌沙门氏菌：：紫红色菌落�非沙门氏菌：蓝绿色、无色非沙门氏菌：蓝绿色、无色或抑制或抑制检验步骤及注意事项：选择性分离陆桥陆桥ESM ESM ESM沙门氏菌显色培养基沙门氏菌显色培养基检验步骤及注意事项：选择性分离�沙门氏菌种类复杂，在分离培养基上的菌落形态不唯一�凡是符合表凡是符合表11描述的典型菌落及可疑菌落均需进行后期生化鉴定（科玛嘉、陆桥显色平板上沙门氏菌显现紫红色菌落）www. beijinglandbridge .com北京陆桥技术有限责任公司www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司检验步骤及注意事项：生化鉴定�自分离平板上分别挑取自分离平板上分别挑取22个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂（先在斜面划线，再于底层穿刺）、赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板（穿刺脂平板（穿刺TSI TSI TSI后不要烧针，直接接种后两者），于后不要烧针，直接接种后两者），于后不要烧针，直接接种后两者），于3636℃±1℃培养18h 18h～～24h 24h，必要时可延长至，必要时可延长至，必要时可延长至48h 48h 48h。
�结合结合TSI TSI TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的结果，可筛掉大部分非沙琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的结果，可筛掉大部分非沙门氏菌www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司检验步骤及注意事项：生化鉴定�可以在接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时可以在接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时,,直接接种蛋白胨水、尿素琼脂、氰化钾（蛋白胨水、尿素琼脂、氰化钾（KCN KCN KCN）培养基；也可在初步判断结果后）培养基；也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑取可疑菌落再接种这三项。