沙门氏菌原始记录表
沙门氏菌操作记录(质控)
XXX中心
沙门氏菌鉴定原始记录
报告单号：共页第页样品名称: 样品数量：
生产厂家：样品性状及包装：
样品来源：检测地点：
采或送样单位：采或送样人：
检验依据：编号或批号：
收样日期：检验日期：
检验项目：分离鉴定致病菌
一、危险性评估：
二、样品前处理
共页第页
血清学凝集试验：
菌种处理：
终末消毒：
四、使用设备、标准菌株和主要试剂：
1、使用设备
恒温培养箱：
恒温培养箱：
显微镜：
高压蒸汽灭菌器：
生物安全柜：
2、标准菌种来源、菌号及代数
沙门氏菌标准菌株：
3、主要试剂、批号及配制记录
SC增菌液：
TTB增菌液：
BS琼脂平板：
科玛嘉沙门氏显色培养基：
三糖铁琼脂：
沙门氏菌诊断血清：
生化鉴定管：
五、检验结果
检毕时间年月日检测者：复核者：
XXX中心
沙门氏菌鉴定原始记录
报告单号：共页第页样品名称: 样品数量：
样品性状及包装：检测地点:
收样日期：检验日期：
检验依据： GB4789.4-2010
检验项目：分离鉴定沙门氏菌
一、样品前处理
用0.45um滤膜过滤500ml水样，将滤膜无菌手续剪碎，分别取适量滤膜进行如下操作。
共页第页
血清学凝集试验：
盐水对照：
沙门氏菌A-F多价O血清：
O4:
O5:
H多价2：
Hf：
三、检验结果
检毕时间年月日检测者：复核者：。
微生物检验原始记录
微生物检验原始记录
培养基配制：见培养基配制记录
样品制备：按GB/T 4789 的要求进行
□ 1.固体样品：无菌称取25g样品加225mL生理盐水，均质；稀释倍数：□1:10 □1:100 □1：1000 □ 2.液体样品：需稀释的，无菌称取25mL样品加225mL生理盐水，混匀；稀释倍数：□1:10 □1:100 □1：1000
□ 3.液体样品：不需要稀释的直接吸取样液检验
□菌落总数：检验依据：□GB 4789.2 -2010 □GB/T 5750.12-2006
检验时间：菌落总数：霉菌和酵母：
□大肠菌群：检验依据：GB/T4789.3-2003
注：“—”表示在选择性培养基上无可疑菌落生长检验时间：
□大肠菌群：检验依据：GB 4789.3-2010
检验时间：
注：“—”表示在选择性培养基上无可疑菌落生长检验时间：
注：“—”表示在选择性培养基上无可疑菌落生长检验时间：
检验时间
□致病菌□沙门氏菌□志贺氏菌□金黄色葡萄球菌
□螨：检验依据 GB 317.4-.10-2006
检测人：复核人：。
疾控中心沙门氏菌检验原始记录
检验原始记录（沙门氏菌）样品编号：疾控检[201 ] 号_______________________________________________检验依据：《年国家食品污染和有害因素风险工作手册》___________ 检验项目：沙门氏菌_________一、培养基及试剂：1、缓冲蛋白胨水（BPVV：生产厂家____________________ 批号 _________________2、四硫磺酸盐煌绿增菌液（TTB）:生产厂家 ___________ 批号 _________________3、亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）:生产厂家_____________ 批号 _________________4、沙门氏菌显色平板：生产厂家_________________ 配置日期 __________________5、BS平板：生产厂家 ___________________________ 配置日期 __________________6、三糖铁琼脂（TSI）:生产厂家 _________________ 配置日期 _________________7、革兰氏染液：生产厂家___________________________ 批号 __________________&沙门氏菌属诊断血清：生产厂家______________________ 批号 __________________二、样品处理：无菌操作取检样g （mL加入盛有—BPW的无菌均质袋内，固体样品用拍击式均质器拍打1 mins 2min，制成1：10均匀稀释液备用。
液体样品不需均质，振荡混匀。
如需要，测定pH 值，用1mol/L无菌氢氧化钠或盐酸调pH至±。
冷冻产品，应在45C以下不超过15min或2Cs 5C不超过18h解冻。
三、实验记录：25g 检样+BPW225mL------------- BS显色培养基°C放入时间: 取出时间: C放入时间: 取出时间: C放入时间：取出时间:C放入时间：取出时间：C放入时间：取出时间:菌落形态观察1、菌落形态观察：SC转显色培养基:SC转BS平板:TTB转显色培养基:TTB转BS平板:2、鉴定:四、结果报告:沙门氏菌(/25 (g/mL)):检验者：复核者：。
沙门氏菌鉴定检验原始记录
检验：审核：报告日期：20年月日
XXXX食品有限Βιβλιοθήκη 司沙门氏菌鉴定检验原始记录
编号：ANST/JL/14
产品名称
生产日期及批号
批量
检验依据
GB4789.4-2010《食品国家安全标准食品中卫生微生物学检验沙门氏菌检验》
检验日期
20年月日
取样地点
1.前增菌：
取检样加入含BPW225mL的无菌均质袋中，拍打min，转入锥形瓶℃培养h；
2.增菌：
轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL，转种于10 mL TTB内，于℃培养h。同时，另取1 mL，转种于10 mL SC内，于℃培养h；
观察结果：□透亮，颜色无变化
□浑浊，颜色异常
3.分离：
分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板。于℃分别培养h（XLD琼脂平板）h（BS琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落,
表1在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果
三糖铁琼脂
赖氨酸脱羧酶试验
培养基
初步判断
斜面
底层
产气
硫化氢
注：K：产碱，A：产酸；＋：阳性，－：阴性；初步判断：可疑沙门氏菌属或非沙门氏菌。
表2生化反应初步鉴别表
硫化氢（H2S）
靛基质
pH7.2尿素
氰化钾（KCN）
赖氨酸脱羧酶
反应序号（判断）
注：＋阳性；－阴性；＋/－阳性或阴性；反应序号（判断）：A1、A2、A3或非沙门氏菌。
BS上可疑菌落形态：※菌落颜色：□黑色有金属光泽□棕褐色□灰色□灰绿色
※周围培养基：□呈黑色或棕色□不变□※□其它：
XLD上可疑菌落形态：□粉红色□黄色□黑色中心□全部黑色的菌落□其它：
微生物检验原始记录
微生物检验原始记录样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：检测依据：一、菌落总数：筷子：用无菌生理盐水润湿棉拭子，分别在五根筷子的下端（进口端）5cm处表面范围均匀涂抹3次后，用无菌剪刀减去棉拭子与手接触部分，将棉拭子置于无菌生理盐水中，做成1∶10样品液。
其他餐（饮）具：用无菌生理盐水润湿棉拭子，分别在2个25cm2（5cm×5cm）面积范围内来回均匀涂抹整个方格3次后，用无菌剪刀减去棉拭子与手接触部分，将棉拭子置于无菌生理盐水中，做成1∶10样品液。
取1∶10稀释液1ml加入到9ml生理盐水中，混匀，做成1∶100样品均液。
以上法制备10倍系列稀释样品均液。
选择2-3个适宜稀释度的样品均液，吸取1ml样品均液于无菌平皿内，每个稀释度做2个平皿。
同时，分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照，及时将15-20ml冷至46℃的平板计数培养基倾注平皿，转动平皿使其混合均匀，凝固后翻转平板，置 36℃±1℃培养小时，计数平板上菌落数（CFU）。
二、大肠菌群：纸片法：将已采样的纸片置37℃培养箱培养小时，观察结果。
纸片保持蓝色不变，则报告为大肠菌群阴性；纸片变黄，并在黄色背景上有红色斑点或片状红晕，则报告为大肠菌群阳性。
发酵法：将采集的样液/棉拭子/纸片置于10mll双料乳糖胆盐/乳糖胆盐发酵管内，36℃±1℃培养箱培养24h ±2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告大肠菌群阴性；如有产气，将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置36℃±1℃培养箱培养18h~24h，然后取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和验证试验。
在上述平板上，挑去1~2个进行革兰氏颜色，同时接种乳糖发酵管，置36℃±1℃培养箱培养24h±2h，观察产气情况。
凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。
沙门氏菌检验原始记录
D
E
阳性
报告
检验员： 审核员：
4.分别划线BS和沙门氏显色培养基；于36℃±1℃培养40～48h（BS）或18～24h（沙门氏显色培养基）观察典型菌落；
5.据生化鉴定试剂盒要求做沙门氏菌生化鉴定；据生化鉴定结果做沙门氏菌血清学鉴定；
样品
观察结果
项目
是否典型菌落
血清学鉴定
三糖铁琼脂
靛基质
尿素
KCN
赖氨酸
ONPG
甘露醇
山梨醇
抗原O
抗原H
□液体样品：吸取25mL于样品置于盛有225mLBPW的无菌均质袋内,振荡混匀。
检验程序
1.实验采集抽样方案来自GB4789.1；
2.上述样品匀液于36℃±1℃培养8～18h；
3.移取1mL转种于10mLTTB内42℃±1℃培养18～24h；移取1mL转种于10mLSC内36℃±1℃培养18～24h；
沙门氏菌检验原始记录表
样品名称
样品编号
检验项目
沙门氏菌检验
检验日期
检验地点
BSL-2实验室
温湿度（℃，RH%）
检验依据
GB 4789.4—2016
判定依据
检验仪器
生化培养箱均质器电子天平
生物安全柜
检验试剂
BPW，TTB、SC增菌液，BS平板，沙门氏显色平板，生化鉴定试剂盒，诊断血清等
样品制备
□固体和半固体样品：无菌称取25g样品，置于盛有225mLBPW的无菌均质袋内，拍击式均质器均质1min～2min。
医疗机构污水微生物检测原始记录表
受理编号：
实验编号：
样品名称：医院污水
受检单位：格瑞尔医院
受检日期：
检验日期：
检验项目：粪大肠菌群、沙门氏菌、志贺氏菌
检验方法依据：GB18466-2005 、 GB15982-2012 、 WS/T367-2012
一、样品前处理：按GB18466-2005附录A、B、C执行。
二、检测结果：
1、粪大肠菌群 培养温度： 44℃ 培养箱号：水渗箱Байду номын сангаас
接种量
（ml）
乳糖胆盐培养基初发酵
EMB菌落特征、染色
37℃ 24W
乳糖蛋白胨培养基复发酵
阳性（产气）
阴性（不产气）
10ml X 5管
0
- 5
无菌落生长
0
1ml X 5管
0
- 5
无菌落生长
0
0.1ml X 5管
0
- 5
无菌落生长
0
结果100ML MPN：0
2、致病菌 培养温度：37℃ 培养箱号： 77
增菌 时间:
分离 时间:
菌落特征与染色
TSI 结果
沙门氏菌
SF 6.12
SS. BS 6.13
无可疑菌落
-/-
志贺氏菌
GN 6.12
SS. EMB 6.13
无可疑菌落
-/-
生化反应：
血清学试验：
检验结果：未检出沙门氏菌；未检出志贺氏菌。
检验者： 复核者：
医疗机构水污染物排放-沙门氏菌原始记录表
IL-161CT
1022A1-001
沙门氏菌生化鉴定盒
广东Байду номын сангаас凯
沙门氏菌诊断血清
广东环凯
方法依据： ☑GB18466-2005附录B□其它：收样日期：_2023年____月____日 测定日期：____年___月____日~___月___日
检验
步骤
1.样品处理和增菌：☑取污水200mL，用灭菌滤膜进行抽滤，用100mL二倍浓度SF增菌液把滤膜上截留的杂质洗脱到灭菌三角烧瓶内，充分摇匀，于__37.0__℃增菌培养_24__h。
3.初步生化试验：自选择性琼脂平板上分别挑取5个以上典型或可疑菌落，分别接种TSI、半固体，于__37___℃培养__24___h。
4.血清学鉴定及生化试验：挑选已培养的营养琼脂斜面上生长的典型或可疑的菌苔，进行生化试验和血清学分型。
5.血清学鉴定：玻片上划出2个约1cm×2cm的区域，挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个区域下部加1滴抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对照。再用无菌的接种环或针分别将两个区域内的菌落研成乳状液。将玻片倾斜摇动混合1min，并对着黑暗背景进行观察。
BS上可疑菌落形态：□1黑色有金属光泽□2棕褐色□3灰色□4灰绿色，周围培养基呈□5黑色□6棕色□7不变色；SS上可疑菌落形态：□1无色透明菌落□2中间有黑心的菌落；
检测人：复核人：审核人：
样品名称： ☑医疗废水 □其它__________环境条件：__23__℃，ＲＨ__61__（％）
主要仪器设备
名称
型号
编号
主要培养基及
试剂
名称
生产批号
生产厂家
高压蒸汽灭菌锅
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沙门氏菌检验原始记录表
检测员： 校核人： 审核人：
年 月 日 年 月 日 年 月 日
样品编号
检测类别
环境条件
温度： ℃ 湿度： ％
检测标准 医疗水污染物排放标准 医疗机构污水和污泥中沙门氏菌的检验方法 GB18466-2005 附录B
设备名称
设备编号
增菌
□ 污水 移取200mL 污水，用灭菌滤膜抽滤，用100mL 二倍浓度SF 增菌液将滤膜上的杂质洗脱到灭菌三角烧瓶中，摇匀。
37℃下培养12~24h
□ 污泥 称取20g 污泥，加200mL 灭菌水，制成1:10混悬液，移取100mL 混悬液，加入到装有100mL 二倍浓度SF 增菌液的已灭菌三角烧瓶中，摇匀。
37℃下培养24h
检验项目
现象
初判断
分离 培养
SS 培养基平板 37℃培养， h （24~48h ）
BS 培养基平板 37℃培养， h （24~48h ）
生化试验
表1 在TSI 试验培养基内的反应结果
TSI 培养基 37℃培养， h （18~24h ）
初步判断
斜面 底层 产气 硫化氢
注：K ：产碱，A ：产酸；+：阳性，—阴性：初步判断：可疑沙门氏菌或非沙门氏菌。
表2 生化反应初步鉴定表
葡萄糖
甘露醇 麦芽糖
乳糖 蔗糖 靛基质 硫化氢 动力 尿素酶
注：＋阳性；－阴性；＋/－阳性或阴性
表3 补做试验（选做）
侧金盏花醇
水杨素 氰化钾
结果判断
注：＋：阳性，－：阴性；结果判断：沙门氏菌或非沙门氏菌。
血清学鉴定
盐水 ，多价抗O 型抗血清（ A-F ） 。
结果 mL 样品中 沙门氏菌 备注。