食品中黄曲霉毒素的检测2

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食品中黄曲霉毒素的检测2

食品中黄曲霉毒素的检测2
其纯品为无色结晶,耐高温,黄曲霉毒素B1的分 解温度为268℃,紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一 定的破坏性.
黄曲霉毒素的检测
检测标准
其它
(1)WHO/FAO标准。国家卫生组(WHO)世界粮农组织 所属的食品法典委员(CAC)推荐食品、饲料中黄曲霉 毒素最大允许量标准为总量(B1+B2+G1+G2) 15ug/kg 牛奶中M1的最大允许量为0.5ug/kg
3.黄曲霉毒素B1标准应用液I(1ug/mL):吸取1.0mL 10ug/mL的黄曲霉毒素B1标准贮备液于10mL容量瓶中,加苯乙腈混合溶液定容。
4.黄曲霉毒素B1标准应用液II(0.2ug/mL):吸取1.0mL 1ug/mL的黄曲霉毒素B1标准应用液I于5mL容量瓶中,加苯-乙 腈混合溶液定容。
2.结构
B1
B2
G1
G2
M1
M2
黄曲霉毒素的性质
在紫外线下,黄曲霉毒素B1,B2发蓝色荧光,黄 曲霉毒素G1,G2发绿色荧光.
黄曲霉毒素的相对分子量为312-346.难溶于水, 易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂,但不溶 于石油醚、己烷和乙醚中.
一般在中性溶液中较稳定,但在强酸性溶液中稍有 分解,在pH9-10的强碱溶液中分解迅速.
黄曲霉毒素的种类及其结构
1.种类 黄曲霉毒素在紫外线照射下能产生荧光,根据
荧光颜色不同,将其分为B族(蓝色荧光)和G 族(绿色荧光)两大类及其衍生物 ,主要有 B1,B2,G1,G2以及B1的代谢产物M1和M2。 B1是最危险的致癌物,经常在玉米,花生,棉 花种子及一些干果中常能检测到,M1和M2 主 要存在于牛奶中 。
线上用微量注射器滴加样液和标准液 第一点:10uL 0.04ug/mL AFT B1 标液 第二点:20uL样液 第三点:20uL 样液 + 10uL 0.04ug/mL AFT B1 标液 第四点:20uL 样液 + 10uL 0.2ug/mL AFT B1 标液

黄曲霉素检测法

黄曲霉素检测法

食品中黄曲霉毒素的测定—免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法1 范围本标准规定了免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法测定食品中黄曲霉毒素的条件和详细分析步骤。

本标准适用于玉米、花生及其制品(花生酱、花生仁、花生米)、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

样品中黄曲霉毒素的检出限:免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法为1mg/kg;免疫亲和层析净化—荧光光度法测定酱油样品中黄曲霉毒素检出限为2.5mg/kg。

2 免疫亲和层析净化高效液相色谱法2.1 方法提要试样经过甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化,此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性,黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。

用水或吐温/PBS将免疫亲和柱上杂质除去,以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱,洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定黄曲霉毒素的含量。

2.2 试剂和溶液除非另有规定,仅使用分析纯试剂、重蒸馏水。

2.2.1甲醇(CH3OH):色谱纯2.2.2甲醇-水(7+3):取70mL甲醇加30mL水2.2.3 甲醇-水(8+2):取80mL甲醇加20mL水2.2.4甲醇-水(45+55):取45mL甲醇加55mL水2.2.5 苯:色谱纯2.2.6乙腈:色谱纯2.2.7苯-乙腈(98+2):取2mL乙腈加98mL苯2.2.8氯化钠(NaCl)2.2.9磷酸氢二钠(Na2HPO4)2.2.10磷酸二氢钾(KH2PO4)GB/T 18979-20032.2.11氯化钾(KCl)2.2.12 PBS缓冲溶液:称取8.0g氯化钠,1.2g磷酸氢二钠,0.2g磷酸二氢钾,0.2g氯化钾,用990mL纯水溶解,然后用浓盐酸调节pH值至7.0,最后用纯水稀释至1000mL。

2.2.13 吐温-20/PBS溶液(0.1%):取1mL吐温-20,加入PBS缓冲溶液并定容至1000mL。

食品中黄曲霉毒素检测方法概述

食品中黄曲霉毒素检测方法概述

食品中黄曲霉毒素检测方法概述黄曲霉毒素是一种由黄曲霉属真菌产生的毒素,它主要存在于一些谷物和豆类等食品中。

长期摄入过量的黄曲霉毒素会对人体健康造成严重危害,包括肝脏损伤、免疫抑制、致癌和致突变等。

对食品中的黄曲霉毒素进行检测至关重要。

黄曲霉毒素检测的方法通常可以分为生物学法、生化法和物理化学法等多种类型,每种方法都有其特点和适用范围。

本文将对食品中黄曲霉毒素检测的常见方法进行概述,以期加深对这些方法的认识和理解。

一、生物学法1.担体法担体法是一种常见的黄曲霉毒素检测方法,其原理是利用含有特定受体蛋白的担体来结合毒素,然后通过测定结合后的复合物来检测毒素的含量。

担体法可以分为放射性担体法、酶标记担体法和免疫检测法等。

这些方法具有检测灵敏度高、特异性好和操作简便等优点,但也存在着高成本和对设备、试剂和技术人员的要求高等缺点。

2.胚胎法胚胎法是一种利用胚胎生物对黄曲霉毒素进行毒性测定的方法,其原理是将黄曲霉毒素溶液与受精鸡卵一起触发孵化,然后观察胚胎的死亡率和畸形率等指标来评价毒素的毒性。

胚胎法具有检测方法简便、成本低廉和结果可靠等优点,但也存在着操作繁琐、耗时长和对实验条件的要求严格等缺点。

二、生化法1.高效液相色谱法高效液相色谱法是一种利用液相色谱仪对食品样品中的黄曲霉毒素进行定量分析的方法,其原理是首先将样品中的黄曲霉毒素提取出来,然后通过液相色谱技术对其进行分离和检测。

高效液相色谱法具有分析速度快、灵敏度高和分辨率好等优点,但也存在着设备昂贵、操作复杂和需要专业技术人员等缺点。

食品中黄曲霉毒素检测方法有着不同的特点和适用范围,选择合适的检测方法需要综合考虑样品的特性、检测要求和实验条件等因素。

希望本文的概述能够为相关领域的科研工作者和食品生产企业提供一定的参考和帮助,促进食品中黄曲霉毒素检测技朧的进步和完善。

黄曲霉素检测法

黄曲霉素检测法

食品中黄曲霉毒素的测定—免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法1 范围本标准规定了免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法测定食品中黄曲霉毒素的条件和详细分析步骤。

本标准适用于玉米、花生及其制品(花生酱、花生仁、花生米)、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

样品中黄曲霉毒素的检出限:免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法为1mg/kg;免疫亲和层析净化—荧光光度法测定酱油样品中黄曲霉毒素检出限为2.5mg/kg。

2 免疫亲和层析净化高效液相色谱法2.1 方法提要试样经过甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化,此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性,黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。

用水或吐温/PBS将免疫亲和柱上杂质除去,以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱,洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定黄曲霉毒素的含量。

2.2 试剂和溶液除非另有规定,仅使用分析纯试剂、重蒸馏水。

2.2.1甲醇(CH3OH):色谱纯2.2.2甲醇-水(7+3):取70mL甲醇加30mL水2.2.3 甲醇-水(8+2):取80mL甲醇加20mL水2.2.4甲醇-水(45+55):取45mL甲醇加55mL水2.2.5 苯:色谱纯2.2.6乙腈:色谱纯2.2.7苯-乙腈(98+2):取2mL乙腈加98mL苯2.2.8氯化钠(NaCl)2.2.9磷酸氢二钠(Na2HPO4)2.2.10磷酸二氢钾(KH2PO4)GB/T 18979-20032.2.11氯化钾(KCl)2.2.12 PBS缓冲溶液:称取8.0g氯化钠,1.2g磷酸氢二钠,0.2g磷酸二氢钾,0.2g氯化钾,用990mL纯水溶解,然后用浓盐酸调节pH值至7.0,最后用纯水稀释至1000mL。

2.2.13 吐温-20/PBS溶液(0.1%):取1mL吐温-20,加入PBS缓冲溶液并定容至1000mL。

食品中黄曲霉毒素检测方法概述

食品中黄曲霉毒素检测方法概述

食品中黄曲霉毒素检测方法概述黄曲霉毒素是一种有潜在致癌危险的真菌代谢产物,存在于各种食品中,如谷类、坚果、干果、酒精饮料等,对人体健康有很大危害。

因此,黄曲霉毒素检测方法的研究与应用非常重要。

现如今,黄曲霉毒素检测方法主要有以下几种:1.高效液相色谱法(HPLC)此法以无色或微黄色的液体色谱柱作为固定相,溶剂为流动相,实现对黄曲霉毒素含量的检测。

其优点是具有高分离效率、快速、简单等特点,也适用于其他真菌毒素检测。

但其高昂的设备成本和较长的分析时间是不可忽视的缺点。

通过气相色谱的分离机理,将样品中的黄曲霉毒素分离出来,然后使用质谱法或紫外分光光度计进行定量分析。

其优点是分离效果较好,分析结果比较可靠,但其检测灵敏度较低,同时样品的前处理和准备工作比较繁琐。

3.荧光光谱法(FLU)该方法利用黄曲霉毒素的红外光谱图能与荧光特性产生关联的特点,通过对样品进行荧光光谱分析实现对黄曲霉毒素含量的检测。

其优点是对多种毒素具有高选择性和灵敏度,检测结果准确可靠,但标准化程度较差。

4.酶联免疫吸附法(ELISA)此法利用双抗体夹心ELISA,将样品中的黄曲霉毒素与反应所需的抗体结合,产生免疫复合物,最后以光学密度为依据,通过比较样品与标准品反应的差异,从而确定检测样品中的黄曲霉毒素含量。

该方法灵敏度高、检测速度快,并且易于进行批量检测,但会受到一些干扰因素的影响,如样品中的杂质等等。

5.涂片显微镜法该方法适用于对饲料等繁杂样品中的黄曲霉毒素进行检测。

检测方法是把样品制成涂片,然后使用显微镜下光学显微镜进行观察,判断样品中是否出现了黄曲霉菌丝,从而判断样品是否受到黄曲霉毒素的污染。

其优点是操作简单,要求不高,适用范围广泛,但准确度和检测灵敏度相对较低。

总之,黄曲霉毒素检测方法各有优劣,选择适当的检测方法取决于样品类型、检测目的、检测精度和检测成本等方面的考虑。

随着技术的不断发展和进步,已经有不少基于快速光谱和生物芯片等技术的黄曲霉毒素检测新方法应运而生,对黄曲霉毒素检测的进一步完善提供了更多的可能性。

黄曲霉毒素检测方法

黄曲霉毒素检测方法

黄曲霉毒素检测方法
一、黄曲霉毒素检测方法二、黄曲霉毒素的临床特征三、黄曲霉毒素中毒的急救措施
黄曲霉毒素检测方法1、生物鉴定法可检测黄曲霉素
其特点是待检样品不需很纯,主要用于定性,共有10种:抑菌试验;对微生物遗传因子影响试验;细菌发光试验;荧光反应;组织培养检测法;鸡胚试验;鸭胚试验;鳟鱼试验;植物试验;饲喂实验动物试验。

生物鉴定法是利用AFT能影响微生物、水生动物、家禽等生物体的细胞代谢,来鉴定AFT的存在。

其方法专一性差,灵敏度低,一般只作为化学分析法的佐证。

2、化学分析法可检测黄曲霉素
最常用的为薄层层析法(TLC),适用于粮食及其制品、调味品等AFB1的检测,主要是半定量。

利用AFB1具有荧光性的特点,提取和浓缩样品中的AFB1,用单向或双向展开法在薄层上分离后,在365nm紫外光照射下产生蓝紫色荧光,根据在薄层上显示荧光的最低检出量定量,其灵敏度为5μg/kg。

由于薄层层析法测定AFB1不是很专一,因此样品中其他荧光物质的干扰造成测定误差。

3、仪器分析法可检测黄曲霉素
高效液相色谱法(HPLC)是20世纪70年代初发展起来的一种以液体为流行相的新型色谱技术。

是分离分析各种AFT的好方法,如配以荧光检测器,则该法具有灵敏度高、分离能力强、特异性好、测定结果准确可靠等优点。

在国外己广泛地用于食品中AFT的测定。

但由于食物样品成分复杂,在进行液相色谱分离分析前,需对样品作彻底有效的净化处理。

常用的净化方法是柱色谱法,该法操作繁琐,且需使用大量有机溶剂。

食品中黄曲霉毒素检测方法概述

食品中黄曲霉毒素检测方法概述

食品中黄曲霉毒素检测方法概述黄曲霉毒素是一种由黄曲霉菌(Aspergillus flavus和Aspergillus parasiticus)和黄曲霉菌(Penicillium verrucosum)产生的毒素。

这些毒素经常出现在各种食品(包括玉米、花生、大米、小麦、各种豆类、香料等)中,并已被证明对人类和动物的健康产生了严重的负面影响。

因此,为了确保食品的安全和质量,必须对黄曲霉毒素进行检测。

这篇文章将重点介绍几种常见的食品中黄曲霉毒素的检测方法。

1. 便携式分析仪便携式分析仪是测试食品中黄曲霉毒素非常便捷的一种方法,例如五羰基二氧化钒分析仪(VICAM),可以快速检测大麦、燕麦、小麦、小米和高粱等谷物中的黄曲霉毒素。

这种测量方法对于食品加工厂、农民和小商贩等需要迅速测试黄曲霉毒素的人来说非常有用。

2. 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)是一种广泛用于黄曲霉毒素检测的方法。

这是一种分析化学方法,它可以通过将食品中的黄曲霉毒素分离出来,然后使用UV或荧光检测器进行检测。

HPLC法可以检测多种黄曲霉毒素,包括黄曲霉素和掌状芽孢菌毒素等,同时它也是准确、可重复的方法。

不过这种方法需要专业技能的人员,并且设备价格比较昂贵。

3. 气相色谱-质谱法气相色谱-质谱法(GC-MS)是一种常用的现代技术。

与HPLC相比,它可以检测更广泛的黄曲霉毒素,包括黄曲霉酮和芜湖霉素等。

GC-MS法有高效的分辨能力,可以清晰地分析样品中不同的毒素种类、含量和结构等信息。

但是与HPLC相比,GC-MS需要更加昂贵的仪器和更高的技术要求。

4. 免疫学方法免疫学方法包括酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫色谱法。

这些方法基于特定的抗体和抗原的反应,可以检测食品中的黄曲霉毒素。

这些方法具有快速、高通量和灵敏度高等优点,同时在大规模食品安全检测中也有很高的可靠性。

但是,这些方法的不足之处是需要求样品的抽提质和反应基质的影响。

综上所述,不同的方法都有各自的优缺点,对于食品生产企业和监管部门来说,需要根据具体的需求选择合适的黄曲霉毒素检测方法。

食品中黄曲霉毒素检测方法概述

食品中黄曲霉毒素检测方法概述

食品中黄曲霉毒素检测方法概述黄曲霉毒素是一种常见的食品毒素,主要是由黄曲霉菌产生的,能够污染谷物、豆类、坚果等多种食品。

黄曲霉毒素不仅对人体健康造成威胁,还会对食品质量和安全造成影响。

食品中黄曲霉毒素的检测十分重要。

针对不同食品中黄曲霉毒素检测的特点和要求,科学家们开发出了多种检测方法,以保障食品安全和人体健康。

一、化学分析法化学分析法是目前最为常用的食品中黄曲霉毒素检测方法之一,它包括了高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、液相色谱质谱联用法(LC-MS/MS)等多种技术手段。

这些方法通过分离和检测食品中的黄曲霉毒素,能够快速准确地确定食品样品中的黄曲霉毒素含量。

HPLC和GC是较为常用的方法,它们能够对黄曲霉毒素进行有效的分离和检测,具有灵敏度高、结果稳定可靠的特点。

而LC-MS/MS技术结合了液相色谱和质谱的优势,不仅能够对黄曲霉毒素进行高效分离,还能够确定其结构和含量,因此在食品中黄曲霉毒素的检测中具有重要意义。

二、免疫学检测法免疫学检测法是另一种常用的食品中黄曲霉毒素检测方法,它主要利用抗体与黄曲霉毒素之间的特异性结合来进行检测。

免疫层析法(IA)、酶联免疫吸附法(ELISA)等技术被广泛应用于食品中黄曲霉毒素的检测。

这些方法具有操作简便、快速、高效等特点,能够在短时间内准确地进行黄曲霉毒素的定量检测。

免疫学检测法还可以进行高通量检测,适用于大批量食品样品的检测,因此在食品安全监测中具有重要的应用前景。

生物学检测法是近年来新兴的食品中黄曲霉毒素检测方法,它利用生物传感器和生物标记等技术手段来进行食品中黄曲霉毒素的检测。

生物传感器是一种利用生物成分对特定物质进行特异性识别的检测技术,其具有灵敏度高、结果快速等优点,因此逐渐受到人们的关注。

生物标记技术则是通过对黄曲霉毒素分子进行标记来进行检测,其具有对食品样品中黄曲霉毒素进行直接、快速的检测的特点。

由于生物学检测法具有操作简便、快速、准确等特点,因此在食品中黄曲霉毒素的检测中具有广阔的应用前景。

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黄曲霉毒素的种类及其结构
1.种类 黄曲霉毒素在紫外线照射下能产生荧光,根据 荧光颜色不同,将其分为B族(蓝色荧光)和G 族(绿色荧光)两大类及其衍生物 ,主要有 B1,B2,G1,G2以及B1的代谢产物M1和M2。 B1是最危险的致癌物,经常在玉米,花生,棉 花种子及一些干果中常能检测到,M1和M2 主 要存在于牛奶中 。
黄曲霉毒素的毒性相当于氰化钾的10倍,砒霜的 68倍,它属于肝脏毒,除抑制DNA、RNA的合成外, 也抑制肝脏蛋白质的合成。
致癌性
长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。它诱发肝癌的能 力比二甲基亚硝胺大75倍,是目前公认的致癌性最强 的物质之一。另据世界卫生组织报道,黄曲霉毒素含量 在30-50ug/kg时为低毒,50-100ug/kg时为中毒, 100-1000ug/kg时为高毒,1000ug/kg以上为极毒。
样品测定
(1)薄层板的制备 硅胶→加水研磨至糊状→倒入涂布器→空气 中干燥约15分钟→在100℃下活化2小时(干 燥器中保存)
(2)点样 将薄层板边缘附着的吸附剂刮净,在距薄层板底端3cm的基 线上用微量注射器滴加样液和标准液 第一点:10uL 0.04ug/mL AFT B1 标液 第二点:20uL样液 第三点:20uL 样液 + 10uL 0.04ug/mL AFT B1 标液 第四点:20uL 样液 + 10uL 0.2ug/mL AFT B1 标液
黄曲霉毒素的检测方法
薄层色谱法(TLC) 快速检测法--黄曲霉毒素B1酶联免疫 (ELISA)快速检测
薄层色谱法(TLC)
原理 样品中AFT B1经有机溶剂提取,净化,浓 缩并经薄层色谱分离后,再波长365nm紫 外光下产生荧光,根据其在薄层板上显示荧 光的强度与标准品AFT B1最低检出量产生 的荧光强度比较来测定样品中AFT B1的含 量。
(5)验证试验
于另一薄板上左边依次点二个样: 第一点:10uL0.04ug/mL AFT B1标液 第二点:20uL样液 在以上两点各加一小滴三氟乙酸(TFA),待反应5分钟后,用电吹 风热风2分钟,使温度不高于40℃。 再于薄层板的右边点以下二个点: 第三点:10uL 0.04ug/L AFT B1 标液 第四点:20uL样液 同第(3)步展开后,于紫外光下观察样液是否产生与AFT B1标准点 相同的衍生物AFT B2a ,未加TFA的第三、四点作空白对照。
2.结构
B1 B2
G1 M1
G2 M2
黄曲霉毒素的性质
在紫外线下,黄曲霉毒素B1,B2发蓝色荧光,黄 曲霉毒素G1,G2发绿色荧光. 黄曲霉毒素的相对分子量为312-346.难溶于水, 易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂,但不溶 于石油醚、己烷和乙醚中. 一般在中性溶液中较稳定,但在强酸性溶液中稍有 分解,在pH9-10的强碱溶液中分解迅速. 其纯品为无色结晶,耐高温,黄曲霉毒素B1的分 解温度为268℃,紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一 定的破坏性.
食品中黄曲霉毒素(AFT)的检测

黄曲霉的简介 黄曲霉的性质 黄曲霉的检测 黄曲霉的控制
黄曲霉的简介
黄曲霉毒素(AFT)是黄曲霉 (aspergillus flavus) 、寄生曲霉 (a.parasiticus) 等产毒菌株 次生代谢产物,他是一类结构相似的化合物 的混合物,基本结构是二呋喃和氧杂萘邻酮。 在湿热地区食品和饲料中,黄曲霉毒素出现 的机率最高。 当粮食未能及时晒干及储藏不当时,往往容 易被黄曲霉或寄生曲霉污染而产生此类毒素。

试剂的准备 1.5%次氯酸钠溶液:称取100g漂白精,加入500mL水,搅匀。
另将80g工业用碳酸钠(Na2CO3.10H2O)溶于500mL温水中, 倒入上述溶液中,搅匀,澄清过滤后贮存于带橡皮塞的玻璃瓶中,用 作消毒剂。
2.黄曲霉毒素B1标准贮备液:用百万分之一的微量分析天平精密称 取AFT B1标准品,先加入乙腈溶解后,再用苯稀释,避光置于4℃冰箱 中保存。使用前用紫外分光光度计测定其浓度,再用苯-乙腈混合溶液 调整其浓度为10ug/mL。(在350nm测定AFT B1的苯-乙腈溶液的吸 光度,其摩尔消光系数为19800,可根据朗伯-比尔定律求出其浓 度)。
黄曲霉毒素的检测
检测标准
其它 (1)WHO/FAO标准。国家卫生组(WHO)世界粮农组织
所属的食品法典委员(CAC)推荐食品、饲料中黄曲霉 毒素最大允许量标准为总量(B1+B2+G1+G2) 15ug/kg 牛奶中M1的最大允许量为0.5ug/kg (2)南非标准.1990颁布了黄曲霉毒素的最大允许标准:食 品中黄曲霉毒素总量小于10ug/kg,其中黄曲霉毒素B1 小于5ug/kg (3)其它标准.印度标准是花生中黄曲霉毒素B1小于 30ug/kg;越南和阿根廷的标准为黄曲霉毒素B1小于 20ug/kg.
黄曲霉毒素是到目前为止所发现的毒性最大 的真菌毒素。它可通过多种途径污染食品和 饲料,直接或间接进入人类食物链,威胁人 类健康和生命,,对人体以及动物内脏器官 尤其是肝脏损害严重。 黄曲霉毒素十分耐热,加热至230℃才能被 完全破坏,因此一般的烹饪加工也不易消除。
黄曲霉对人体的危害
引起急、慢性中毒
3.黄曲霉毒素B1标准应用液I(1ug/mL):吸取1.0mL 10ug/mL的黄曲霉毒素B1标准贮备液于10mL容量瓶中,加苯乙腈混合溶液定容。 4.黄曲霉毒素B1标准应用液II(0.2ug/mL):吸取1.0mL 1ug/mL的黄曲霉毒素B1标准应用液I于5mL容量瓶中,加苯-乙 腈混合溶液定容。 5.黄曲霉毒素B1标准应用液III(0.04ug/mL):吸取1.0 mL0.2ug/mL的黄曲霉毒素B1标准应用液II于5mL容量瓶中, 加苯-乙腈混合液定容。
要求点距边缘和点间距约为1cm,样点直径约3cm,大小相同, 点样时可用电吹风冷风边吹边点。
(3)展开 在展开槽内加10mL无水乙醚,将点好样的 薄层板预展12cm,取出挥干。再于另一展 开槽内加10mL 丙酮+三氯甲烷(8+9.2) 混合溶剂,展开10-12cm,取出挥干。
(4)结果观察
将展开好的薄板放在365nm的紫外灯光下观察: a.若第一点无荧光或都无荧光。说明薄板或展开剂 未制备好,需重新制备。 b.第一点有荧光,而其余三点无荧光。说明样液中 有荧光猝灭剂,样液需重新制备。 c.第一点有荧光,第二点无荧光,三、四点有荧光。 说明样液不含AFT B1或含量小于最低检出量。 d.四个点都有荧光。需做确证实验后再进行定量。
花生油样品中AFT B1的检测
样品的预处理
1.花生油样品(石油醚或正己烷混匀)→ 甲醇-水溶液萃 取→收集滤液 2.滤液经三氯甲烷二次萃取→用三氯甲烷湿润的无水硫酸 钠的慢速滤纸过滤→蒸发皿 3.蒸发皿→65℃水浴上挥干→冰盒中冷却2-3分钟 4.冷却过程中,会有结晶析出,此时用苯-乙腈混合液,溶 解,混匀,用滴管吸取上清液转移至2ml的具塞试管 中。

黄曲霉毒素酶联免疫(ELISA)快速检测
A:样品稀释液 C:酶标抗原 E:浓缩洗涤液 G:显色底物液b B:AFT B1标准溶液 D:酶标抗原稀释液 F:显色底物液a H:终止液
请大家观看快速检测的视频
控制措施
推广抗黄曲霉毒素的品种(种皮维生素E含量 低的品种 ) 改良种植技术和收获方法 不要将受黄曲霉毒素污染的饲料喂养牲畜 适时应用防霉剂 (丙酸或其盐、山梨醇及其 盐类、双乙酸钠、延胡索酸等 )
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