甘露寡糖(MOS)检测
甘露寡糖对肉鸡生产性能和消化功能的影响
甘露寡糖对肉鸡生产性能和消化功能的影响高林【摘要】To study the influence of mannan oligosaccharides on production performance of broiler and index of immune organ, it took the method of contrast test to discuss the influence of mannan oligosaccharides on the indexes of slaughter weight, feed conversion, mortality rate and colibacillus. The result shows that adding mannan oligosaccharides in based diet can increase slaughter weight of broiler, and decrease feed conversion and mortality rate, meanwhile, it can positively promote the growth of digestive organ, the optimal addition quantity is 1%mannan oligosaccharides adding.%为研究甘露寡糖对肉鸡生产性能和免疫器官指数的影响，采用对比试验的方法，探讨甘露寡糖对出栏均重、料肉比、死淘率、大肠杆菌等指标的影响。
试验结果表明：基础饲粮中添加甘露寡糖可以增加肉鸡的出栏均重，降低肉料比及死淘率，并且对消化器官的发育具有积极地促进作用，以1％的甘露寡糖添加量效果最好。
【期刊名称】《农业科技与装备》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】4页(P56-59)【关键词】甘露寡糖;雏鸡;生产性能;消化功能【作者】高林【作者单位】沈阳爱地生物科技有限公司，沈阳 110167【正文语种】中文【中图分类】S831.5近年来，肉鸡生产中长期使用抗生素所导致的动物生产性能下降以及药物残留等问题已引起全社会的关注，开发抗生素替代品成为研究热点。
甘露聚糖酶检测方法
甘露聚糖酶活力的测定1.甘露聚糖酶活力单位定义在37℃、pH值为5.5的条件下，每分钟从浓度为3mg/ml的甘露聚糖（Sigma G0753）溶液中降解释放1umol还原糖所需要的酶量为一个酶活力单位u。
2.测定原理甘露聚糖酶能将甘露聚糖降解成寡糖和单糖。
具有还原性末端的寡糖和有还原基团的单糖在沸水浴条件下可以与DNS试剂发生显色反应。
反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中甘露聚糖酶的活力成正比。
因此，通过分光比色测定反应液颜色的强度，可以计算反应液中甘露聚糖酶的活力。
3.试剂与溶液除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682中规定的三级水。
3.1甘露糖溶液，c（C6H12O6）为10.0mg/ml：称取无水D-甘露糖1.000g，加水溶解，定容至100ml。
3.2乙酸溶液，c（CH3COOH）为0.1mol/L：吸取冰乙酸0.60ml。
加水溶解，定容至100ml。
3.3 乙酸钠溶液，c（CH3COONa）为0.1mol/L：称取三水乙酸钠1.36g。
加水溶解，定容至100ml。
3.4 氢氧化钠溶液，c（NaOH）为200g/L：称取氫氧化鈉20.0g。
加水溶解，定容至100ml。
3.5乙酸——乙酸钠缓冲溶液，c（CH3COOH—CH3COONa）为0.1mol/L，pH值为5.5：称取三水乙酸钠23.14g，加入冰乙酸1.70ml。
再加水溶解，定容至2000ml。
测定溶液的pH值。
如果pH值偏离5.5，再用乙酸溶液（3.2）或乙酸钠溶液（3.3）调节至5.5。
3.6甘露聚糖溶液：0.6%（w/v）称取甘露聚糖（Sigma G0753）0.60g，加入80ml乙酸—乙酸钠缓冲溶液（3.5）。
磁力搅拌，同时缓慢加热，直至甘露聚糖完全溶解（注：在搅拌加热的过程中可以补加适量的缓冲液，但是溶液的总体积不能超过100ml。
）。
然后停止加热，继续搅拌30min，用乙酸—乙酸钠缓冲溶液（3.5）定容至100ml。
甘露寡糖——精选推荐
甘露寡糖甘露寡糖是一种寡聚糖,甘露寡糖是寡聚糖中最具前景的一个。
其作为一种安全有效的饲料添加剂在养殖生产上具有重要的作用。
1甘露寡糖的理化性质甘露寡糖(Mannose-oligosaccharides,MOS),又称甘露低聚糖或葡甘露寡聚糖。
甘露寡糖是寡聚糖中最具前景的一个,主链的连接方式为α-1,6糖苷键,侧链主要通过α-1,2和α-1,3糖苷键连接,一般在生理pH 值和通常饲料加工条件下较为稳定,易溶于水和其他极性溶剂。
当溶液中加入有机溶剂时会使其沉淀或结晶,甜度低于蔗糖。
甘露寡糖广泛存在于魔芋粉、瓜儿豆胶、田菁胶及多种微生物细胞壁内(葡萄糖甘露寡聚糖)。
目前商品用甘露寡糖主要通过酶解法进行生产。
饲料用甘露寡糖主要来源于酵母细胞壁提取物,多为二糖、三糖、四糖等结构的混合物。
甘露寡糖不为单胃动物消化道酶分解,而且由酵母细胞壁提取而来的甘露寡糖能承受饲料加工的高温处理(121 ℃,20 min)而保持其结构和功能的完整性不被破坏。
2甘露寡糖的作用机理甘露寡糖化学性质稳定,不被动物消化也不能被有害菌利用,只能被消化道有益菌群如双歧杆菌和乳酸菌利用,通过优化肠道微生物生态系对宿主起有益的保健功能。
改善肠道微生物组成、形成以双歧杆菌和乳酸杆菌为优势菌的肠道菌丛,抑制病原菌。
MOS对病原菌有识别、粘附和排除作用,同时有利于排除内毒素保持动物健康。
加速细菌从肠道排出,促进肠道正常微生物区系的平衡,增强动物非特异性免疫,提高动物抵抗力,从而提高动物日增重和饲料转化率,降低胃肠道疾病的发生率和死亡率。
马志红等[1]以甘露寡糖为饲料添加剂进行鲤鱼的对比饲喂试验,通过测定和比较对照组和试验组鲤鱼的生长性能和免疫功能指标,探讨甘露寡糖对鲤鱼生长及免疫功能的影响。
结果显示,试验组鲤鱼的饲料系数、相对增重率、白细胞吞噬率、吞噬指数、脾脏指数和血清溶血素活力较对照组均显著提高;周淑芹[2]研究了甘露寡糖对肉鸡后期(5～7周)大肠杆菌病的控制效果,结果表明饲粮中添加MOS显著降低了肉鸡感染大肠杆菌后的发病和死亡率。
甘露聚糖检测标准-概述说明以及解释
甘露聚糖检测标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述甘露聚糖是一种在自然界中广泛存在的多糖分子，它在植物细胞壁的构建和生长发育中发挥着重要作用。
随着人们对甘露聚糖的研究不断深入，对其检测标准的需求也日益增加。
本文旨在探讨甘露聚糖检测标准的制定和应用，以提高检测结果的准确性和可靠性。
通过系统地概述目前的检测方法和标准的不足之处，我们希望能为未来的研究和实践提供有益的借鉴和指导。
1.2 文章结构本文主要分为三个部分：引言、正文和结论。
在引言部分中，将首先概述甘露聚糖检测的重要性，介绍文章的结构以及讨论本文的目的。
在正文部分中，将详细探讨甘露聚糖的重要性，目前广泛使用的检测方法以及甘露聚糖检测标准的必要性。
最后，在结论部分将对文章进行总结，展望未来可能的发展方向，并得出结论。
通过以上结构的安排，读者将能够全面了解甘露聚糖检测标准相关的内容，同时也能够清晰地把握文章的脉络和逻辑。
1.3 目的本文的目的是探讨甘露聚糖检测标准的重要性和必要性。
随着甘露聚糖在食品、药品和生物医学领域的广泛应用，确立统一的检测标准对于保障产品质量、维护消费者权益和推动行业发展具有重要意义。
通过对目前甘露聚糖检测方法及其存在的问题进行分析，本文旨在提出具体的检测标准建议，为相关行业的规范化发展和提升产品质量提供参考。
同时，本文也将探讨未来甘露聚糖检测标准的发展方向和展望，以期为相关研究和实践提供借鉴和指导。
2.正文2.1 甘露聚糖的重要性甘露聚糖作为一种重要的多糖类物质，在生物体内发挥着重要的功能。
它是植物细胞壁中主要的结构性多糖，不仅能够维持植物细胞的形态和稳定性，还能够增强细胞壁的强度和硬度，使植物能够抵抗外界的压力和损伤。
除此之外，甘露聚糖在生物体内还具有一系列生理功能，如参与植物的生长发育、调节植物的抗病性和适应环境的能力等。
在动物体内，甘露聚糖也被发现具有调节免疫系统、维持肠道健康、促进伤口愈合等重要功能。
因此，了解甘露聚糖的含量和结构对于研究生物体的生长发育、抗病机制、药物研发等方面具有重要意义。
甘露寡糖
甘露寡糖(Mannose-oligosaccharides,MOS)1.范围本标准规定了甘露寡糖的术语和定义、产品分类要求、实验方法、检测规则、标准包装、运输和贮存等。
本标准适用于从酵母培养细胞壁中提取的一类新型抗原活物性物质的生产、检验和销售。
2．规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T602 化学试剂杂质测定用标准溶液的制备(GB/T602-2002,ISO63531:1982,NEQ)GB/T603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备(GB/T603-2002,ISO6353-1:1982,NEQ)GB/T5917.1 饲料粉碎粒度测定两层筛筛分法GB10648 饲料标签GB/T14699.1饲料采样(GB/T14699.1-2005,ISO6497:2002,IDT)3. 术语和定义下列术语和定义适用于本标准3.1甘露寡糖(Mannose-oligosaccharides,MOS)甘露寡糖又称为甘露低聚糖，是从酵母培养细胞壁中提取的一类新型抗原活性物质，广泛存在于魔芋粉、瓜儿豆胶、田菁胶及多种微生物细胞壁内。
与β-葡聚糖为同一工艺开发的一种新的产品，其来源于新鲜的食品啤酒酵母。
它是一种多糖，主要化学结构β-1，3葡聚糖和β-1，6葡聚糖，其中前者具有抗肿瘤性质，而且能够极大地提高人体自然免疫力。
3.2甘露寡糖含量甘露寡糖含量为≥15%4. 产品分子量甘露寡糖结构分子示意图5. 要求5.1 感官要求粉状低聚木糖颜色为浅黄色，具有特有的甜味、香气，无异味，无正常视力可见异常。
6. 检测方法6.1 原理甘露寡糖经酸水解后形成甘露糖，甘露糖经衍生化后注入高效液相色谱柱进行色谱分离，在245nm波长处用紫外检测器检测甘露糖的含量。
甘露寡糖检测
甘露寡糖检测甘露寡糖（MOS），又称甘露低聚糖，是从酵母细胞壁内提取到的一种多糖类活性物质，由甘露糖和葡萄糖通过α-1,6、α-1,2、α-1,3等糖苷键组合而成，主要分布在多种植物和微生物细胞壁中。
甘露寡糖作为一种新型的饲料添加剂，在饲料工业和畜牧生产业应用广泛。
甘露寡糖分子结构式甘露寡糖的生物学功能1. 增强免疫力：甘露寡糖可以通过调节机体的细胞免疫系统和体液免疫系统，提高IgG和IgA免疫球蛋白含量。
此外，甘露寡糖能刺激机体内有益菌大量增殖，促进抗体分泌，从而增强机体免疫力。
2. 吸附霉菌毒素：甘露寡糖可以通过物理方法或直接结合的方式吸附霉菌毒素，是一种天然的吸附剂，有报道称甘露寡糖对玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的结合率可达到52%以上。
3. 调节肠道菌群：甘露寡糖主要是通过两个方面来调节肠道菌群：一是促进有益菌的生长繁殖，形成微生态竞争优势，抑制致病菌，从而提高动物健康水平；二是直接与病原菌的某些表面物质结合，使其无法获取生长所需营养物质而饥饿死亡。
4. 改善生产性能：甘露寡糖可以通过多条途径改善动物生产性能。
1) 甘露寡糖发酵产生的酸性化合物能促进肠道对钙的吸收，加速动物的食量和消化，从而提高生产性能；2) 甘露低聚糖促进有益菌的增殖，则有益菌的代谢物积累，为机体生长提供充足的维生素、氨基酸等营养物质。
3) 甘露低聚糖通过抑制病原菌的生长繁殖，减少有毒有害物质产生，降低动物发病率；甘露寡糖的检测原理甘露寡糖经酸水解后，生成甘露糖，甘露糖通过衍生化处理后利用高效液相色谱（HPLC）进行色谱分离，利用紫外检测器/示差折光检测器检测甘露糖含量。
本文由北京迪信泰检测平台（Biotech-Pack-Analytical）整理编辑北京迪信泰检测平台基于高效液相色谱（HPLC）配备紫外、示差折光、蒸发光散射等多种检测器，建立了甘露寡糖检测体系，可高效、准确的检测甘露寡糖含量。
此外，迪信泰还提供LC-MS、GC-MS检测服务，以满足您的不同需求。
甘露寡糖对动物免疫功能的影响
１提高免疫器官指数（质量）
大量研究表明：ＭＯＳ能够提高免疫器官指数或 质量。马志红等（２００９）报道，免疫功能低下的小鼠 灌服ＭＯＳ溶液后，体质量、脾指数及胸腺指数均 显著提高。袁缨等（２００７）在１日龄肉仔鸡日粮中添
２增强非特异性免疫作用
关于寡糖对非特异性免疫的影响，目前报道
较少。马志红等（２００９）通过皮下注射环磷酰胺制 造免疫功能低下小鼠模型，然后灌服０．２ ｍＬ质量 浓度为８０ ｒａｇ／ｍＥ的ＭＯＳ溶液，经１１ ｄ观察后发现。
疫机能的影响，结果表明：半乳甘露寡糖组与抗生
素组相比，胸腺、脾和法氏囊相对质量差异不显著，
但当二者混合使用时脾和法氏囊的相对质量有提高 的趋势，说明机体细胞的免疫机能增强，并且半乳 甘露寡糖在肉鸡日粮中的应用效果在一定程度上
可替代饲料中的抗生素，二者有一定的协同作用。
并且被认为是最有研究价值的功能性寡糖之一。 ＭＯＳ具有一定的免疫原性，能够刺激机体免疫 应答，而且能与某些毒素、病毒和真菌细胞的表面
５
ｇ／ｋｇ添加ＭＯＳ就能明显地促进Ｔ细胞增殖，提高
Ｔ细胞百分率。Ｃｏｔｔｅｒ等（１９９７）报道，日粮中添加
甘露寡聚糖后，鸡肉垂体对ＰＨＡ的反应显著增强。 Ｙｏｓｈｉｄａ等（１９９５）报道，ＭＯＳ能显著提高鲇鱼的白 细胞活性。上述研究证明，ＭＯＳ对不同动物都具 有刺激细胞介导免疫的作用。
对血清中新城疫抗体效价不明显。周红丽等（２００２） 也报道，ＭＯＳ虽能显著提高血清ｔｓＧ的含量，Ｉ舭
免疫系统。
军等（２００２）研究表明：肉用雏鸡从１日龄开始灌喂
ＭＯＳ ７５
ｍｓ／ｋｓ，到１０日龄时，盲肠扁桃体面积较
对照组增长了１５０％；４９日龄时，盲肠扁桃体面积
较对照组增长了８７％，胸腺质量较对照组增加了 １１．７％。陈永军等（２０００）在１日龄蛋雏鸡饲料中添 加２．５％ＭＯＳ，结果发现，到１６日龄时，法氏囊 和胸腺的质量分别比对照组增加３１．７％和１１．５％。
β-葡聚糖、甘露寡糖的测定方法
A.1原理根据β-葡聚糖和甘露寡糖在流动相和液相色谱柱的固定相之间具有不同的分配系数，将样品注入液相色谱柱，用H2O做流动相，糖类分子流出后，经示差检测器检测，用外标法定量。
A.2试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂；蒸馏水或去离子水或符合GB/T6682中规定的一级水或相当纯度的水。
试验中所用制品按GB/T 603的规定制备。
A.2.1盐酸：37%。
A.2.2乙腈：色谱纯。
A.2.3氢氧化钠：40%。
A.2.4葡萄糖和甘露糖混合标液（1000mg/L）：分别称取葡萄糖和甘露糖各0.100g，用纯水定容100mL后用0.45μm微孔滤膜过滤，备用。
A.3仪器A.3.1水浴锅。
A.3.2漩涡混合器。
A.3.3电炉。
A.3.4手提式压力蒸汽灭菌锅。
A.3.5高压液相色谱仪；带示差检测器。
A.4分析步骤A.4.1样品处理精确称取1.000g（准确至0.0002g）样品放入一个20mL的耐热玻璃制的带螺帽的小试管中，加入7.5mL盐酸（37%），小心的将小瓶盖近后用漩涡混合器混合，得到均一的悬浮液。
将小瓶放入30℃水浴中处理45min，每15min用漩涡混合器震荡混合一次。
然后将悬浮物定量的转移到200mL杜氏瓶中（同时用约70-80mL的水洗涤后倒入瓶中），将瓶子放入高压灭菌锅121℃处理60min。
完成后马上冷却，将溶液调pH到6-7，然后定容至200mL。
使用0.45微米孔径的醋酸纤维素膜过滤备用。
A.4.2测定A．4.2.1 液相色谱参考条件A．4.2.1．1 色谱柱：Hyper REZ XP Carbohydrate Ca++，长300mm，内径7.7mm，粒径8μm。
A．4.2.1．2 柱温：70℃。
A．4.2.1．3 流动相：H2O，用前过0.22μm滤膜。
A．4.2.1．4 流速：0.6 ml/min。
A．4.2.1．5 进样体积:40μl。
A.4.3标准曲线的绘制分别吸取甘露糖/葡萄糖标液12.5、25.0、37.5mL到50mL容量瓶中，用高纯水定容到刻度，得到甘露糖、葡萄糖各为250、500、750、1000mg/L的混合标样。
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甘露寡糖（MOS）检测
甘露寡糖（Mannose-oligosaccharides, MOS），又称为甘露低聚糖，是从酵母培养细胞壁中提取的一类新型抗原活性物质，广泛存在于魔芋粉、瓜儿豆胶、田菁胶及多种微生物细胞壁内。
具有保护肠道和提高免疫力等作用，国外已将其作为饲料添加剂广泛用于饲料工业。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和生化法，可高效、精准的检测甘露寡糖的含量变化。
对于稀有的糖代谢物，如提供标准样品，迪信泰检测平台可提供定制检测。
对于无法用HPLC检测的样品，迪信泰检测平台可提供定制检测或试剂盒代测定服务。
此外，我们还提供其他糖代谢物检测服务，以满足您的不同需求。
样品制备
糖代谢物提取方法（此部分涉及到公司的核心工艺，以下提供常规的提取工艺）
1）称取500 mg的固体样品；
2）加入5 mL去离子水；
3）超声处理30 min；
4）取2 mL，用乙腈定容至10 mL；
5）用HPLC-ELSD检测。
HPLC测定甘露寡糖样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 甘露寡糖含量信息。