寄生虫病常免疫学诊断
寄生虫病的诊断与防治
寄生虫的发育史复杂，必须针对其发育史和流行病学中的 各个关键性环节，采取综合措施，才能收到防治之效。单一驱 虫和杀虫的做法常不能奏效，有时甚至是有害的。
作者简介：帅国彪（1969—），男，贵州贞丰人，兽医师，从事动物疫病预防工作。 １２０ 农家科技
畜 牧兽医 ＸＵＭＵＳＨＯＵＹＩ
寄生虫病的诊断与防治
帅国彪
（贵州省贞丰县动物疫病预防控制中心，贵州 贞丰 562200）
［ 摘要 ］ 简述了寄生虫病的诊断及防治措施。 ［ 关键词 ］ 寄生虫病；诊断；防治
2018 年 7 月 19 日下午，贞丰县某养鸡户来报 , 他饲养的 雏鸡于 7 月 17 日发病 , 鸡群精神不好 , 羽毛逆立 , 鸡冠发白 , 采食量下降 , 不愿走动 , 有拉溏稀粪便、桔红色粪便的 , 还有小 部分血便。17 日下午死亡 9 只 ,18 日死亡 16 只 ,19 日死亡 21 只 , 已发病 3d, 血便越来越多。接到报诊后 , 兽医人员赶往养场， 经诊断该群鸡发生了球病，用球虫药该病很快得到控制。
搞好灭鼠工作。 2.1.3 加强卫生检验。某些寄生虫病可以通过被感染的动物
性食品传播给人类和动物，如猪带绦虫病、旋毛虫、弓形虫等。 因此，要加强卫生检验工作，防止病原体扩散。
2.1.4 外界环境除虫。环境是易被寄生虫污染的场所，也是 宿主遭受感染的场所，搞好环境卫生是减少或预防寄生虫感染 的重要环节。环境卫生有两方面的内容：一方面是尽可能地减 少宿主与感染源接触的机会，如清除粪便，打扫厩舍；另一方 面是设法杀灭外界环境中的病原体，如粪便堆积发酵，利用生 物热杀灭虫卵或幼虫 ( 也包括清除各种寄生虫的中间宿主或媒 介等 )。
２ 寄生虫病的防治措施
2.1 消除感染源 通过治疗患病动物或减少患病动物和带虫者向外界散播病 原体。 2.1.1 预防性驱虫。按寄生虫病的流行规律定时投药，预防 性驱虫尽可能实施成虫期前驱虫。如肉仔鸡饲养中，把抗球虫 药作为添加剂加入饲料中使用；北方地区防治绵羊蠕虫病多采 取一年两次驱虫的措施，春季驱虫在放牧前进行，防止牧场被 污染；秋季驱虫在转入舍饲后进行，将动物已经感染的寄生虫 驱除，防止发生寄生虫病畜散播病原体。 2.1.2 控制保虫宿主。某些寄生虫病的流行，与犬、猫、野 生动物和鼠类等保虫宿主关系密切，因此应对犬和猫严加管理，
检验科常见寄生虫感染检测方法
检验科常见寄生虫感染检测方法寄生虫感染是一种常见而严重的健康问题，尤其是在发展中国家。
检验科的主要职责之一就是确保及时准确地检测出寄生虫感染，以便进行有效的治疗和控制。
本文将介绍一些常见的寄生虫感染检测方法，以帮助读者更好地了解这个领域的知识。
一、粪便检测法粪便检测法是检验科中最常用的一种检测方法，在寄生虫感染的早期诊断中发挥重要作用。
该方法通过检测患者的粪便样本中是否存在寄生虫卵或囊泡，来确定是否感染了寄生虫。
常见的粪便检测方法有直接涂片法、福尔马林浓度法、酸胆染色法等。
这些方法具有操作简便、成本低廉的特点，但需要训练有素的技术人员进行操作，以确保结果的准确性。
二、血液检测法血液检测法是另一种常见的寄生虫感染检测方法，适用于一些通过血液传播的寄生虫疾病的诊断。
该方法通过血液样本中的抗体或寄生虫特异性抗原的检测，来确定是否感染了寄生虫。
常见的血液检测方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）、血原虫显微镜检查等。
血液检测法相对于粪便检测法来说，具有操作简便、便于大规模筛查的优势，但也需要专业设备和技术支持。
三、组织检测法组织检测法适用于一些疑难病例或特殊情况下的寄生虫感染检测。
该方法通过对患者的组织样本进行显微镜检查或基因分析，来确定是否存在寄生虫感染。
常见的组织检测方法有组织切片检查、PCR检测等。
组织检测法具有高度的准确性和可靠性，但需要手术取样或侵入性操作，适用范围较窄。
四、免疫学检测法免疫学检测法是一种新兴的寄生虫感染检测方法，通过测定人体的免疫反应来确定是否感染了寄生虫。
常见的免疫学检测方法有免疫荧光检测、免疫电镜检测等。
免疫学检测法具有敏感性高、特异性强的特点，能够检测出低浓度的寄生虫感染，但需要专业的实验室设备和操作技术。
五、分子生物学检测法分子生物学检测法是一种基于DNA或RNA的寄生虫感染检测方法，具有高度的准确性和特异性。
常见的分子生物学检测方法有实时荧光定量PCR、核酸杂交检测等。
寄生虫实验诊断方法
寄生虫感染的诊断1临床诊断：A病史、症状、体征 B物理诊断：X线、B超、CT、MRI 2实验室检查：A病原学方法：粪便检查；血液检查；排泄物分泌物检查；其他器官组织检查B免疫学方法 C分子生物学方法（一）粪便检查：直接涂片法；厚涂片法；浓集法；毛蚴孵化法；肛门拭子检查法；钩蚴培养法；虫卵计数法；定量透明法；带绦虫孕节检查法。
粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。
要取得准确的结果1）粪便必须新鲜，送检时间一般不宜超过24小时； 2）盛粪便的容器要干净，并防止污染与干燥； 3）粪便不可混杂尿液等，以免影响检查结果； 4）取材部位：尽可能取病变部位。
直接涂片法:用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便，适用范围广，但检出率相对较低。
一般要求连续作3次涂片，可提高检出率。
⑴蠕虫卵检查：方法：一般在低倍镜下检查，如用高倍镜观察，需加盖片。
应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵内含卵细胞或幼虫。
⑵原虫检查：1）活滋养体检查：方法同查蠕虫卵。
注意事项。
2）包囊的碘液染色检查：方法同上，以一滴碘液代替生理盐水。
若同时需检查活滋养体，可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液，再盖上盖片。
涂片染色的一半查包囊；末染色的一半查活滋养体。
3）隐孢子虫卵囊染色检查：目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10％福尔马林固定保存的含卵囊粪便都可用此法染色。
染色过程是先用金胺－酚染色，再用改良抗酸染色法复染。
厚涂片透明法（改良加藤法）取约5mg粪便，置于载玻片上，覆以浸透甘油－孔雀绿溶液的玻璃纸片，轻压，使粪便铺开（20×25mm）。
待粪膜稍干，即可镜检。
玻璃纸准备：将玻璃纸浸于甘油－孔雀绿溶液中，至少浸泡24小时，至玻璃纸呈现绿色。
使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。
如粪膜厚，透明时间短，虫卵难以发现；如透明时间过长，则虫卵变形，也不易辨认。
沉淀法：原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底，有助于提高检出率。
各种寄生虫免疫学检查
各种寄生虫免疫学检查一、引言寄生虫是一种常见的病原体，它们可以感染人类和动物，引起各种疾病。
随着社会经济的快速发展和人们生活水平的提高，寄生虫病在全球范围内仍然是一个重要的公共卫生问题。
对于各种寄生虫的免疫学检查显得尤为重要。
二、常见的寄生虫及其免疫学检查1. 弓形体弓形体是一种单细胞原生动物，可以引起弓形体病。
弓形体感染通常通过食用被感染动物（如家畜）的肉或接触被感染动物（如宠物）的粪便而传播。
免疫学检查：补体结合试验（CFT）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫测定法（RIA）等。
2. 绦虫绦虫是一种长而扁平的寄生虫，可以感染人类和动物。
常见的绦虫包括棘头绦虫、条带绦虫等。
免疫学检查：间接荧光抗体试验（IFA）、ELISA等。
3. 蛔虫蛔虫是一种长而细的寄生虫，可以感染人类和动物。
蛔虫感染通常通过食用被感染动物（如猪）的肉或接触被感染动物（如宠物）的粪便而传播。
免疫学检查：ELISA、免疫荧光试验等。
4. 钩虫钩虫是一种小型寄生虫，可以感染人类和动物。
钩虫感染通常通过接触被感染土壤或水源而传播。
免疫学检查：ELISA、血凝试验等。
5. 丝虫丝虫是一种长而细的寄生虫，可以引起淋巴丝虫病和象皮癣等疾病。
丝虫通常通过蚊子叮咬传播。
免疫学检查：CFT、ELISA等。
6. 血吸虫血吸虫是一种寄生在人类和动物的血管中的寄生虫，可以引起血吸虫病。
血吸虫通常通过接触被感染水源而传播。
免疫学检查：CFT、ELISA等。
三、结论寄生虫病是一种常见的传染病，对人类和动物的健康造成了威胁。
免疫学检查是诊断和治疗寄生虫病的重要手段。
通过各种免疫学检查方法，可以准确快速地检测出寄生虫感染，为治疗提供科学依据。
寄生虫常见诊断方法
动物接种法
有些原生动物，在病畜体内用上述显微镜 检查法不易查到，为了确诊常采用动物接 种试验。接种用的病料、被接种的动物种 类和接种的途径均依病的种类不同而异
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动物剖检法
在动物死亡（或捕杀）后，首先制作血片，染色 检查，观察血液中有无寄生虫，而后仔细检查体 表，观察有无体表寄生虫。 而后剥皮，观察皮下组织中有无虫体寄生。 将各内部脏器依次取出，先收集胸水，腹水，沉 淀后观察其中有无寄生虫。而后取出全部消化器 官及其所附的肝、胰等腺体。取出呼吸系统、泌 尿系统和生殖系统、心脏和大的动脉和静脉血管， 分别进行检查。
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3．沉淀集卵法sedimentation method
用水处理粪便，经离心或自然沉淀，使虫卵沉淀 集中，更易于检查。 自然沉淀集卵法是取粪便5~10g加水混合成悬浮 液，经40~60孔/2.54cm2铜筛滤去大块物质，静 置15min后倾去上清液,如此反复操作，直至上层 液体透明为止,最后弃去上层液体，置沉淀物于载 玻片上，镜检虫卵。 离心沉淀法是取1~2g被检粪便于试管中，加5倍 量的水制成悬浮液，经40孔/cm2铜筛过滤到一离 心管中，以800rpm离心3~5min,弃上清，将沉渣 置载玻片上，镜检虫卵。 本法也适用于检查尿液内的虫卵。
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DNA探针（DNA probe）技术
DNA探针是带有标记物的已知序列的DNA片段。 DNA探针技术的基本原理是碱基配对。在变性而 成为单链的被检DNA中加入变性的探针，随着温 度的降低，探针便可与被检DNA中的互补序列形 成双链，这一过程称杂交。通过捕捉探针标记物 释放出的信号，便可知被检DNA中有无与探针序 列相同的DNA。每一种病原体都具有独特的DNA 片段，通过分离和标记这些片段，就可制备出探 针，氏计数法MacMaster method
检验科寄生虫学常见检测与分析方法
检验科寄生虫学常见检测与分析方法大标题：检验科寄生虫学常见检测与分析方法引言：寄生虫病是一类由寄生虫引起的传染病，严重危害着人类和动物的健康。
在检验科寄生虫学领域，准确、快速地检测和分析寄生虫是至关重要的。
本文将介绍常见的检测与分析方法，旨在提供一些有用的参考。
一、细菌学常见检测与分析方法1. 直接涂片法直接涂片法常用于分析寄生虫卵或幼虫，通过显微镜观察来确定寄生虫种类和数量。
该方法简单、快速，但需要熟练技术操作。
2. 钩虫培养法钩虫培养法适用于检测钩虫卵的孵化及幼虫发育情况。
通过培养基中的条件，如温度、湿度等，观察寄生虫的生长情况并进一步分析其特性。
3. 血液检测法血液检测法常用于检测寄生虫在血液中的存在，如疟原虫。
这种方法通过血液细胞计数器或显微镜来观察血涂片中的寄生虫，进而进行分析和诊断。
二、分子生物学常见检测与分析方法1. PCR技术PCR（聚合酶链式反应）技术是一种灵敏且特异的检测方法，可用于定性和定量检测寄生虫DNA。
该方法准确度高，且可以同时检测多个寄生虫种类。
2. 实时荧光定量PCR技术实时荧光定量PCR技术结合了PCR技术和荧光探针技术，能够准确测量PCR体系中的DNA含量，并实时监测PCR反应的进程。
该方法操作简便，结果可靠。
3. 微阵列技术微阵列技术可同时检测多种寄生虫，并定性和定量其存在。
通过该技术，可以快速获得大量寄生虫检测结果，并进一步进行生物信息学分析。
三、免疫学常见检测与分析方法1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）ELISA是一种常见的免疫学检测方法，可用于检测寄生虫特异抗原或抗体。
该方法操作简单、敏感，广泛应用于临床和实验室诊断。
2. 免疫荧光法免疫荧光法通过对标本中寄生虫特异抗原或抗体与荧光标记物的结合情况观察，来判断是否存在寄生虫。
该方法具有高灵敏度和特异性。
3. 红细胞凝集试验红细胞凝集试验适用于检测与红细胞寄生虫相关的抗体。
该试验通过观察抗原与抗体间的聚集情况来确定寄生虫感染的存在与程度。
确诊寄生虫病的检验方法
确诊寄生虫病的检验方法
确诊寄生虫病的检验方法常见的有以下几种：
1. 外观检查：通过对患者粪便、尿液、血液等样本的外观检查，观察寄生虫的卵、包囊、幼虫等是否存在。
2. 粪便检查：常用的检测方法有直接涂片法、浮选法、离心法等。
通过显微镜观察粪便样本中是否存在寄生虫卵或幼虫。
3. 血液检查：常见的方法包括原虫抗体检测、免疫学检测、PCR检测等。
通过检测血液中的寄生虫抗体或寄生虫的DNA
来确定是否感染寄生虫。
4. 组织检查：对于一些寄生虫感染引起的组织病变，可以通过组织活检或手术切除标本来进行病理学检查。
5. 影像学检查：如X线、CT、超声等影像学检查可以对寄生
虫引起的组织病变进行观察，辅助确诊。
在进行寄生虫病检验时，需要根据具体疾病和临床表现选择合适的检验方法，有时可能需要多种方法的综合应用来提高诊断的准确性。
同时，检验前要正确采集和保存样本，以确保结果的可靠性。
寄生虫免疫学诊断方法
弓形虫速殖子
免疫荧光专用载玻片
将待检血清稀释后，取30μL加入抗原片反应区内，置湿盒内室 温反应30 min，用PBS漂洗3次，每次5 min，自然凉干。 滴加用PBS稀释的FITC标记二抗30μL，湿盒内室温反应30 min， 同上洗涤、晾干。 再加PBS稀释的伊文斯蓝（0.02%）30μL，湿盒内室温反应5 min，PBS洗1次，5 min，晾干。 各反应区内滴加90%的磷酸盐缓冲甘油一滴，覆以盖玻片，荧光 显微镜下检查。
二、免疫荧光技术
免疫荧光技术(Immunofluorescence method)又称荧 光抗体标记技术(Fluorescent-labelled antibody technique)，是指用荧光素对抗体或抗原进行标记， 然后用荧光显微镜观察所标记的荧光以分析示踪相 应的抗原或抗体的方法。
➢判定结果时，-为无荧光，+为荧光弱但清楚可见， ++为荧光明亮，+++~++++为荧光强而明亮。
间接法 是将含有寄生虫或其抗原的组织或细胞标本，用特
异性抗体处理，使抗原抗体结合，洗涤清除未结合的 部分，再用酶标记的抗抗体(酶标二抗)进行处理，使 其形成抗原抗体-酶标记抗抗体复合物，最后滴加底 物显色，进行镜检。
间接法虽然多一步骤，但比直接法特异性强，使用范 围更广。酶标记第二抗体可用葡萄球菌A蛋白SPA或生 物素与亲合素系统等代替，亦成功地用于许多抗原和 抗体的检测。同时在不同程度上提高了检测方法的特 异性与敏感性。
弓形虫IFA结果 A ： 一 抗 1:60 稀 释 时 检 测结果；
B：一抗1:120稀释时检 测结果；
C ： : 一 抗 1:480 稀 释 时 检测结果；
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寄生虫病常用的免疫学诊断方法
刘凡 @ 2006-04-26 12:53
寄生虫病目前还是危害我国人民身体健康的重要疾病。
根据近年的全国调查报告，共发现我国有人体寄生虫56种，主要为肠道寄生虫。
其中半数以上为不常见虫种，尚不包括疟疾、黑热病、血吸虫、丝虫以及弓形虫、卡氏肺孢子虫、巴贝西虫和锥虫等重要寄生虫。
人均寄生虫感染率高达62.6%。
估计全国有7亿多人感染寄生虫，最多的1人同时感染9种寄生虫，特别在农村人口中。
因此对寄生虫的检验工作是一项非常重要和基本的技术。
对寄生虫的检验不仅要能熟悉各种寄生虫的生活史及它们各个时期的形态特征，而且要求掌握对各种标本的处理技术(如取材、制片、染色、镜检)及必要的免疫学等检验方法。
目前,寄生虫诊断技术主要包括病原检查、免疫学检查和分子生物学检查三个方面。
实际应用中免疫学检查比较高效和准确，几乎所有的免疫学方法均可用于寄生虫病的诊断，但是各有各的优缺点，各有各的应有条件，主要而且常用的免疫检验方法有：
1.环卵沉淀试验(COPT)：这是国内外公认的用以诊断血吸虫病的有效血清学方法之一。
现在该法已趋向完善，不但提高了它的诊断效果，而且使该法更适合于现场推广应用。
虫卵的处理有甲醛处理冰冻干卵抗原；热处理超声干卵抗原等。
方法有双面胶纸条法、蜡封片法、塑料管、薄膜抗原片COPT，聚乙烯醇缩甲醛氯仿COPT(PVF-COPT)等，均有实用价值，已经作为基本消灭和消灭血吸虫病地区首先考虑应用的血清免疫学诊断方法。
2.间接红细胞凝集试验：已用于多种寄生虫病的诊断和流行病学调查。
可分为间接血凝(IHA)，反向间接血凝(RIHA)，间接血凝抑制试验(IHAI)，反向间接血凝抑制试验(RIHAI)，可以检测抗原或抗体，有较高的敏感性和一定的特异性。
单克隆抗体的应用使敏感性和特异性有所提高。
3.酶联免疫吸附试验(ELISA)：目前国外ELISA已广泛应用于寄生虫病免疫学诊断中。
许多商品试剂盒已被引入国内，但是价格较高。
国内也研制了多种试剂盒，推广应用于各种寄生虫病诊断中。
例如：血吸虫病、肺吸虫病、黑热病、包虫病、弓形虫病、隐孢子虫病、卡氏肺孢子虫病、囊虫病、阿米巴病等。
除传统的ELISA 外，又发展了K-ELISA、ABC-ELISA、DOT-ELISA、薄膜ELISA等，应用于血吸虫病、肺吸虫病、肝吸虫病等。
可测抗体，也可测循环抗原及粪便样品、脓液及其它体液中的抗原。
目前存在的问题主要有抗原制备和试验方法尚需进一步标准化和规范化。
4.间接荧光抗体试验(IFAT)：在国外已广泛应用IFAT作为寄生虫病的免疫学诊断方法。
国内主要应用该法诊断疟疾、丝虫病、弓形虫病。
在血吸虫病、肺吸虫病、华支睾吸虫病、包虫病、阿米巴病等也有应用。
IFAT有较高的敏感性、特异性和重现性。
但试验结果需要用荧光显微镜观察反应，限制了该法的广泛应用。
结果判定需要有经验的人员，有一定的主观性。
该法可检测血清中的抗体，也可检测组织内的寄生虫，如利什曼原虫、阿米巴、疟原虫、弓形虫等。
5.乳胶凝集试验(LAT)：LAT是以胶乳微粒作为载体的凝集反应。
主要应用于弓形虫病、囊虫病、旋毛虫病、血吸虫病、棘球蚴病等诊断。
该法有较好的敏感性和特异性，方法简便，判断结果快速，适于现场应用。
6.免疫印迹技术(IBT)：（又称Western印迹试验）是以聚丙烯酰胺凝胶电泳、转移电泳、固相酶免疫试验三种方法合一的实验技术，是近年来发展迅速的一种新技术。
已应用于血吸虫病、绦虫病、包虫病、肺吸虫病、卡氏肺孢子虫、阿米巴病、囊虫病等。
随着技术的完善，IBT可望成为高度敏感和特异的诊断寄生虫病和区别寄生虫感染期的有效方法。
7.免疫层析技术(ICT)：ICT是近年来发展的快速诊断技术，可检测抗体或抗原。
应用于寄生虫病的有恶性疟原虫/间日疟原虫抗原检测和班氏丝虫抗原及利什曼原虫抗原检测。
该法敏感、快速、特异性较好，适于临床快速诊断和现场调查。
8.PCR和核酸分子杂交技术：随着分子生物学的发展，PCR基因扩增技术及核酸分子杂交技术已越来越多的应用于寄生虫病的诊断和研究之中。
如锥虫病、利什曼病、肺孢子虫病、贾第虫病、弓形虫病、血吸虫病、阿米巴病、包虫病、疟疾、丝虫病和肠球虫病等。
PCR技术虽具有高度的敏感性和特异性，但由于技术条件的要求很高，目前尚仅限于实验室试用阶段。
由于免疫技术的发展及分子生物学、单克隆抗体的应用，已使寄生虫病的诊断方法达到了简易、微量、快速、准确和经济的目的，显著地提高了诊断效率和准确性。
随着越来越多其它学科新技术在寄生虫学上的应用，将使寄生虫学拥有更多、更为理想的研究方法，这对作为生物进化最重要模型之一的寄生虫的研究将是极大的推动。
如：伴随免疫、带虫免疫、免疫抑制等的阐述将有助于其他疾病如肿瘤、爱滋病等的发生机制、发展、治疗及预防提供参考依据；对真核生物与原核生物分界线的原虫和真菌、低等动物向高等动物进化桥梁的蠕虫的研究将有助于生命奥秘的揭开。
而对于我们来说，了解寄生虫学的各种研究方法对我们加深理解寄生虫学、免疫学、生物化学、细胞学、生态学、生物信息学等多门学科的原理和应用有很大的帮助，并能使我们在各学科的交叉中学会更多的东西，开拓更广的思维空间，进行更深层次的创新。