9基因工程抗体和抗体工程
抗体工程意义
抗体工程意义摘要：一、抗体工程概述二、抗体工程的意义1.疾病诊断与治疗2.生物安全与防御3.生物研究与发展三、抗体工程发展现状与展望四、我国抗体工程的发展正文：抗体工程是一种生物技术，旨在通过基因工程方法制备具有特定抗原结合能力的抗体。
抗体工程在医学、生物学和农业等领域具有广泛的应用。
本文将从抗体工程的意义、发展现状与展望以及我国抗体工程的发展等方面进行阐述。
一、抗体工程概述抗体工程主要利用重组DNA技术，将编码抗体的基因片段克隆到表达载体中，转染到细胞中表达，从而获得具有特定功能的抗体。
这种技术使得科学家可以大规模制备具有高度特异性和亲和力的抗体，为研究和应用提供有力支持。
二、抗体工程的意义1.疾病诊断与治疗抗体工程为制备针对各种疾病的特异性抗体提供了可能。
例如，制备针对肿瘤细胞的抗体，可以用于癌症的诊断和治疗；制备针对病原体的抗体，可用于疫苗研究和病原体检测。
2.生物安全与防御抗体工程在生物安全和防御领域具有重要意义。
例如，制备针对病毒、细菌等病原体的抗体，可以用于预防和治疗相关传染病；制备针对生物毒素的抗体，可以用于中毒解毒和生物恐怖事件的应对。
3.生物研究与发展抗体工程为生物学研究提供了强大的工具。
例如，制备针对特定蛋白质的抗体，可以帮助研究者深入研究目标蛋白的结构和功能；制备具有特定功能的抗体，可以用于蛋白质药物的开发和生物传感器的研制。
三、抗体工程发展现状与展望近年来，抗体工程在全球范围内得到了广泛重视，各国纷纷加大研究力度。
目前，抗体药物已成为生物制药领域的重要组成部分，市场份额持续增长。
此外，单克隆抗体、双特异性抗体等新型抗体的研发成为热点，为疾病治疗带来新希望。
四、我国抗体工程的发展我国抗体工程研究始于20世纪80年代，经过30多年的发展，我国抗体工程取得了世界领先的成果。
在抗体药物研发、生产和销售方面，我国已经形成了一定的产业规模。
同时，政府加大对生物制药产业的扶持力度，为我国抗体工程发展创造了有利条件。
基因工程抗体名词解释
基因工程抗体名词解释基因工程抗体是利用基因工程技术对人工合成抗体进行定制和改造的一种生物工程技术。
抗体是一种由免疫系统产生的蛋白质，它可以识别和结合体内外的异物，从而协助机体进行免疫防御。
基因工程抗体通过选择性克隆和定制抗体基因序列，可以产生特异性更强、稳定性更好、生产成本更低的抗体。
基因工程抗体包括以下几种：1. 单克隆抗体（Monoclonal Antibodies）：基因工程技术可以使得单个淋巴细胞克隆产生大量相同的抗体，从而获得具有高度特异性的单克隆抗体。
这种抗体广泛应用于医学诊断、疾病治疗和科学研究等领域。
2. 重链抗体（Recombinant Antibodies）：重链抗体是利用基因工程技术使抗体重链蛋白的编码基因与其他蛋白的编码基因相融合，生成融合抗体。
这种重链抗体可以通过改变其结构和功能来提高其生物活性和稳定性。
3. 组合抗体（Bispecific Antibodies）：基因工程技术可以将两种不同的单克隆抗体的编码基因进行融合，产生具有双特异性的组合抗体。
这种抗体可以同时结合两个不同的目标分子，从而实现更强的疗效和更多样化的应用。
4. 人源化抗体（Humanized Antibodies）：由于小鼠源抗体和人类抗体在体内效价和安全性方面存在差异，基因工程技术可以通过改造抗体的基因序列，使得抗体具有更接近人类抗体的结构和功能。
这种人源化抗体更适合在治疗和预防疾病时使用。
基因工程抗体的应用广泛，其中的一些常见应用包括：1. 肿瘤治疗：通过基因工程技术，可以定制针对特定肿瘤抗原的单克隆抗体，用于治疗癌症。
2. 自身免疫性疾病治疗：基因工程抗体可以定制具有特异性和高效的抗体，用于治疗自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等。
3. 传染病治疗：通过基因工程技术，可以改造抗体的结构和功能，用于治疗传染病，如艾滋病、流感和乙肝等。
4. 分子诊断：基因工程抗体可以用于检测和诊断疾病，如癌症标志物的检测和感染性病原体的检测等。
基因工程制备抗体方案有哪些
基因工程制备抗体方案有哪些引言抗体是一种可以识别并结合特定抗原的蛋白质，具有重要的生物学功能和临床应用价值。
传统制备抗体的方法主要是从动物（如小鼠、兔子等）中提取抗体，但该方法存在一些缺点，如周期长、成本高、质量不稳定等。
因此，基因工程技术的发展使得制备抗体的方法得到了革命性的改变，可以通过基因工程技术在体外合成抗体，提高了抗体的质量和稳定性。
本文将介绍基因工程制备抗体的方法和流程，包括抗体的选择和克隆、表达、纯化和鉴定等环节。
通过基因工程方法获得的抗体，可以应用于药物研发、医学诊断、生物学研究等领域，具有广阔的应用前景。
1. 抗体的选择和克隆（1）抗原的选择制备抗体的第一步是选择合适的抗原。
抗原是引发免疫反应的物质，可以是蛋白质、多肽、多糖、药物等。
根据需要制备的抗体类型，可以选择相应的抗原。
例如，如果需要制备单克隆抗体，可选择单个抗原蛋白作为抗原进行制备。
（2）抗体基因的克隆在选择了合适的抗原后，下一步是将抗体基因克隆到表达载体中。
通常可以利用PCR方法从免疫细胞中扩增出抗体基因，并将其插入表达载体中。
选择合适的表达载体是非常重要的，通常选择在哺乳动物细胞或大肠杆菌中表达。
2. 抗体的表达（1）表达载体的构建在决定抗体表达载体后，接下来是进行表达载体的构建。
通常表达载体包括启动子、终止子、选择标记基因等，通过合成或限制性内切酶切割等方法将抗体基因插入表达载体中。
（2）转染和筛选将构建好的表达载体导入宿主细胞中，可以通过转染等方法实现。
转染后，需要进行筛选，筛选出表达抗体的稳定细胞株。
通常可以利用克隆技术选取高表达的细胞株。
3. 抗体的纯化（1）细胞培养和收获经过筛选的稳定细胞株可以进行大规模培养，收获细胞培养上清液。
（2）亲和层析纯化常用的抗体纯化方法包括亲和层析纯化。
可以利用蛋白A/G或其他具有特异性结合抗体的配体进行纯化。
通过这种方法可以高效地将目标抗体从细胞培养上清液中纯化出来。
4. 抗体的鉴定（1）免疫印迹（Western blot）通过Western blot方法，可以验证纯化得到的抗体是否具有结构完整，是否与目标抗原结合。
抗体工程简答
（3）单链抗体（ ScFv）：具有良好的结合性，但有时ScFv比其亲本抗体的亲和力明显降低，并常常显示聚集倾向，尤其在37℃是稳定性极差。
（4）单区抗体（Single domain antibody）：优越性在于（1）分子量进一步减小，（2）操作简便，避免了Fv段需分别克隆轻链和重链可变区基因的麻烦。（3）较ScFv稳定。
2. 基因工程抗体技术：主要包括两部分内容，一是用DNA重组技术对已有的单克隆抗体进行改造，包括鼠单克隆抗体的人源化、小分子抗体及抗体融合蛋白的制备；二是用抗体库技术筛选新的单克隆抗体和对抗体性能的改良。
3．抗体库技术：抗体库技术的主导内容是将某种动物的所有抗体可变区基因克隆在质粒或噬菌体中表达，利用不同的抗原筛选出携带特异抗体基因的克隆，从而获得相应的特异性抗体。
另一条是补救途径,补救途径合成DNA需依赖次黄嘌呤、胸腺嘧啶脱氧核苷等DNA前体的存在，而且细胞内要有次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸,两种酶缺一不可。
用两种突变细胞株，一种缺失TK酶，但保留HGPRT酶，另一种则相反，缺失HGPRT酶，但保留TK酶，在通常培养条件下，因为细胞可利用叶酸经主要合成途径合成DNA，所以这些酶的缺失对细胞生存并无影响。只要当这要合成途径被甲氨蝶呤封闭时，具有酶缺失的这些细胞便不能存活。若将这两种细胞融合，只有杂交瘤细胞能在HAT培养液中生存。因为一种亲代细胞补充了另一种亲代细胞的酶缺失，因此杂交瘤细胞能在筛选培养基中存活。没有融合的亲代细胞，或相同亲代细胞融合后产生的同核体则不能存活，因为他们仍然缺失TK酶或HGPRT酶。这样就可以筛选出杂交瘤细胞。
↓
磁珠-链亲和素-生物素-抗原-抗体生物素-抗原-抗体+ 磁珠-链亲和素
基因工程抗体的例子
基因工程抗体的例子
基因工程抗体是通过基因重组技术将特定抗体基因导入至其他生物细胞中，使其具备产生抗体的能力，从而实现大规模生产高效、高纯度的抗体。
以下是一些基因工程抗体的例子：
1. 重组抗体药物：例如，重组人源单克隆抗体药物，如阿达木单抗（Adalimumab）和帕尼单抗（Panitumumab），用于治疗自身免疫疾病和某些癌症。
2. 基因工程抗体治疗疫苗：例如，COVID-19疫苗中使用的mRNA 疫苗，通过基因工程技术将病毒的抗原编码序列导入到人体细胞中，诱导免疫系统产生抗体来抵抗病毒感染。
3. 重组抗体诊断试剂：例如，基因工程技术可用于生产特定病原体抗体，如新冠病毒SARS-CoV-2抗体，用于开发快速诊断试剂盒，帮助早期检测和诊断疾病。
4. 基因工程抗体治疗：例如，CAR-T细胞疗法，通过基因工程技术将患者自身T细胞中的受体基因改造，使其能够识别和杀死癌细胞，用于治疗某些血液恶性肿瘤。
5. 基因工程抗体生产：基因工程技术可用于大规模生产特定抗体，如重组人源单克隆抗体，用于研究和治疗领域。
这些基因工程抗体的例子说明了基因工程技术在抗体研究、生产和
应用中的重要性和广泛应用性。
基因工程抗体制备原理
基因工程抗体制备原理
1. 靶抗原选择：根据需要制备的抗体的特定功能和应用领域，选择合适的靶抗原。
靶抗原可以是纯化的蛋白质，细胞表面分子等。
2. 基因克隆：将靶抗原的基因序列克隆到适当的表达载体中，例如质粒或病毒载体。
这个过程通常涉及使用限制性内切酶切割目标基因和载体，并通过DNA连接酶将它们连接起来。
3. 转染宿主细胞：将重组载体导入宿主细胞，使其表达靶抗原基因。
可以使用多种方法进行转染，包括电穿孔、高压转染或病毒介导的转染。
4. 细胞培养与表达：培养被转染的宿主细胞，在适当的培养基中表达靶抗原。
这些细胞通常是哺乳动物细胞，如CHO细胞。
5. 抗体纯化：通过多种分离技术将抗体从培养物中纯化出来。
常用的纯化方法包括亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等。
6. 抗体测试和鉴定：通过各种实验方法，如ELISA、Western blot等，验证所制备的抗体的特异性和相关功能。
基因工程抗体制备利用了基因重组技术和细胞工程技术，能够高效、精确地制备特定的抗体，具有广泛的应用前景。
基因工程抗体研究进展及其临床应用
基因工程抗体研究进展及其临床应用一、引言基因工程抗体是基于人工合成的DNA序列，经过转染到适当的宿主细胞中，通过细胞的代谢和转录过程转化为抗体蛋白。
自20世纪70年代以来，基因工程抗体领域取得了长足的发展。
本文将对基因工程抗体的研究进展及其在临床应用中的应用进行详细介绍。
二、抗体研究进展1、抗体的结构与特性1.1 抗体的基本结构1.2 抗体的免疫学特性1.3 抗体的结构与功能关系2、基因工程抗体的制备方法2.1 体外基因合成法2.2 表达载体构建与转染2.3 细胞培养与抗体表达2.4 抗体纯化与鉴定3、基因工程抗体的改良与优化3.1 抗体亲和力改良3.2 抗体稳定性提高3.3 抗体毒性降低4、基因工程抗体的多样化应用4.1 体外诊断应用4.2 肿瘤治疗应用4.3 感染性疾病治疗应用4.4 自身免疫性疾病治疗应用三、基因工程抗体临床应用研究1、基因工程抗体在肿瘤治疗中的应用1.1 单克隆抗体的临床应用1.2 双特异性抗体的临床应用1.3 抗体药物联合治疗的临床应用2、基因工程抗体在感染性疾病治疗中的应用2.1 抗抗体的临床应用2.2 抗细菌抗体的临床应用3、基因工程抗体在自身免疫性疾病治疗中的应用3.1 抗体与自身免疫性疾病的关系3.2 自身免疫性疾病治疗中的抗体应用四、附件本文涉及的附件包括：- 图表：包括抗体结构示意图、抗体改良实验结果图等。
- 数据表格：包括基因工程抗体的制备方法比较表、抗体在不同疾病治疗中的临床应用表等。
五、法律名词及注释- 法律名词1：注释1- 法律名词2：注释2- 法律名词3：注释3。
基因工程抗体名词解释
基因工程抗体名词解释
基因工程抗体是由人工合成或修改的基因来产生的抗体，也称为重组抗体。
与传统的抗体不同，基因工程抗体不受限于动物来源，可以通过人工合成的方式来获得。
基因工程抗体的制备过程包括选择目标抗原、构建重组抗体基因、转染宿主细胞、高效表达和纯化等步骤。
因为基因工程抗体可以定制化地设计和制备，具有高度特异性和亲和力，因此在生物医学研究、临床诊断和治疗等方面具有广泛的应用前景。
常见的基因工程抗体包括单克隆抗体、人源化抗体、嵌合抗体和重组抗体等。
其中，单克隆抗体是指由单一克隆细胞产生的抗体，具有高度特异性和一致性；人源化抗体是将动物源的抗体人源化，避免了人体免疫系统对异种抗体的攻击；嵌合抗体是将两种或以上不同来源的抗体结合起来产生的新型抗体，具有更广泛的抗原覆盖范围和高亲和力；重组抗体则是根据目标抗原的结构和性质，设计并合成新的抗体基因来产生新型抗体，具有更高的特异性和亲和力。
基因工程抗体的发展将会在生物医学领域带来更多的应用和发展机会，同时也将推动基础研究和药物研发的进步。
抗体工程重组模式
抗体工程重组模式引言：抗体是一种由免疫系统产生的特异性蛋白质，能够识别并结合特定的抗原。
抗体工程重组模式是利用基因工程技术对抗体进行改造和重组，以获得具有特定功能和更好效果的抗体分子。
本文将介绍抗体工程重组模式的基本原理、常用方法和应用领域。
一、抗体工程重组模式的基本原理抗体工程重组模式的基本原理是利用基因工程技术对抗体的基因进行改造和重组。
首先，需要获取目标抗体的基因序列，可以通过免疫细胞或抗体库等方式获得。
然后，利用DNA重组技术将目标抗体基因插入到合适的表达载体中，如细胞质或细胞核表达载体。
最后，将重组后的表达载体导入到宿主细胞中，经过表达、纯化和鉴定等步骤，最终获得重组抗体。
二、抗体工程重组模式的常用方法1. 亚基重组：将不同来源的抗体亚基（如重链或轻链）进行重组，形成新的抗体。
通过亚基重组，可以将不同的亚基组合起来，获得具有不同特性的抗体，如人-小鼠嵌合抗体、全人源抗体等。
2. 亲和力成熟：通过引入点突变或DNA重组技术，改变抗体与抗原结合的亲和力。
亲和力成熟可以使抗体与抗原结合更紧密，提高抗体的特异性和亲和力。
3. 重链抗体：通过删除抗体的轻链，将重链与特定的功能分子连接，形成重链抗体。
重链抗体可以应用于药物传递、肿瘤治疗等领域。
4. 单克隆抗体工程：通过克隆和表达单个抗体细胞，获得具有单一特异性的抗体。
单克隆抗体工程可以扩大抗体的生产，提高抗体的一致性和稳定性。
三、抗体工程重组模式的应用领域1. 临床医学：抗体工程重组模式已广泛应用于临床医学领域。
例如，通过改造抗体的结构和功能，可以研发出用于治疗癌症、自身免疫性疾病等的抗体药物。
此外，抗体工程重组模式还可用于诊断试剂的开发，如免疫组化试剂盒等。
2. 生物技术：抗体工程重组模式在生物技术领域有着广泛的应用。
例如，通过重组抗体技术可以提高生物药物的产量和稳定性，改善生产工艺。
此外，抗体工程重组模式还可用于分子识别、蛋白质纯化和酶标记等实验技术。
基因工程抗体
（三）双链抗体（diabody)及三链抗体 （triabody)
通过缩短scFv的接头，使两个单链抗体分子间互 相形成VH和VL配对，以非共价键结合在一起形成二 聚体，从而构建出的双价小分子抗体。
如果将两个不同特异性的单链抗体分子的VH和VL 交叉组合构建两个杂合的单链抗体基因，重组到同 一表达载体中，则可在大肠杆菌中表达出双特异双 链抗体。
• 细胞内抗体的应用 表型敲除：在细胞内表达特定抗体分子阻断某 内源蛋白的活性，可用研究靶蛋白的生物学功 能。 基因治疗：通过细胞内抗体对某些蛋白功能的 干扰也可达到基因治疗的目的，如利用癌基因 的细胞内抗体为抗肿瘤的基因治疗提供了一个 新的途径。 目前抗HIV gp120（外壳蛋白）的Fab段和抗Tat （调节蛋白）的scFv已进入临床试用。
• 缺点 有时ScFv比其亲本抗体的亲和力明显降
低，并常常显示聚集倾向，尤其在37度
时稳定性较差，这与轻重链可变区由作
用力较弱的非共价键连接在一起有关。
四、dsFv
• 在VH和VL之间导入了一个链间二硫键，构 建了disulfide-stabilized Fv, dsFv。 二硫键可设计在CDR也可在骨架区。由于 CDR涉及抗原结合，需了解Fv段的立体结构 才能确定正确的引入二硫键的部位。在远 离CDR的结构较保守的骨架区设计二硫键， 具备通用性。
创新的癌症免疫疗法——BiTE抗体技。
• 今年9月，安进向FDA提交首个BiTE疗法blinatumomab上市 申请。
• FDA日前表示，已接受审查BiTE免疫疗法blinatumomab生物
制品许可申请（BLA），同时已授予该药优先审查资格。 • 此前，FDA和EMA均已授予该药孤儿药地位，FDA还授予该 药突破性疗法认定。
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The diversity of germline information
Figure 24.9 The human and mouse kappa families consist of V gene segments linked to 5 J segments connected to a single C gene segment.
④测定HIV（人免疫缺陷病毒）抗 原的酶标抗体诊断试剂
⑤甲胎蛋白（AFP）酶标抗体诊 断试剂
⑥癌胚抗原（CEA）的酶标抗体 诊断试剂
⒊放射免疫用抗体诊断试剂
放射免疫技术是将放射性核素 分析的高度灵敏性与抗原抗体 反应的特异性结合起来建立的 检测技术。
放Байду номын сангаас性核素标记抗体的方法：
①氯胺-T法 ②Iodogen氏法
第五节 抗体工程
抗体研究进展3个阶段： ①1890年白喉抗毒素，多克隆抗体； ②1975年杂交瘤技术单克隆抗体； ③1994年基因工程抗体；
Immunoglobulin genes are assembled from their parts in lymphocytes
C genes code for the constant regions of immunoglobulin protein chains. V gene is sequence coding for the major part of the variable (N-terminal) region of an immunoglobulin chain.
建立预定位技术需解决3个问题： ①抗体在肿瘤组织滞留要7天以上。 ②Ab-DTPA偶联物比较稳定； ③内源性金属离子对DTPA的封闭 作用要小。
Immunoglobulin genes are assembled from their parts in lymphocytes
Family
Lambda Kappa Heavy
V Genes
Man Mouse
<300
2
<300 ~1000
~300 >1000
C Genes
Man Mouse
>6
噬菌体表面展示系统(phage surface display system )
1990年Mc Cafferty等成功地建立了噬菌体表面展示系 统，通过将抗溶菌酶单链抗体基因克隆于fd噬菌体基因3 的下游，使ScFv以融合蛋白的形式展示于噬菌体表面，利 用亲和层析，两轮富集达106倍。该技术的成功给抗体基 因的筛选工作带来了革命性的变革。
⒊妊娠诊断试剂 ⒋抗ABO血型系统血清
二、免疫标记技术用的抗体 类试剂
⒈荧光抗体诊断试剂 ⑴荧光抗体的制备 ⑵免疫荧光测定方法
⒉免疫酶抗体诊断试剂 ⑴免疫酶染色法用抗体诊断试剂 ⑵酶免疫测定用抗体诊断试剂 ①HBsAg酶标诊断试剂 ②HBeAg酶标诊断试剂
③HAVAg（甲型肝炎病毒抗原） 酶标诊断试剂
③小分子抗体易到达肿瘤部位， 可显著提高N/NT值。
④抗体在肿瘤部位可保留6～9日 ⑤能观擦抗体在血中的半衰期和
可能出现的不良反应。
放射免疫显像定位技术
将抗肿瘤单克隆抗体（Ab）与二乙基 三胺五乙酸（DTPA）在体外偶联成 Ab-DTPA，再注入体内后，就能与体 内组织相结合。由于抗体分子量大， 需3天完成。3天后注入放射性核素In113M（半衰期100m），因DTPA是重 金属离子络合剂，所以In-113M可以结 合到DTPA分子上，使肿瘤组织显像。 这一过程在2小时内可完成。
Figure 15.9 Reciprocal recombination between inverted repeats inverts the region between them.
一、噬菌体抗体库技术的 基本方法
⒈获取目的基因 ⒉抗体库技术的载体 ⒊淘筛 ⒋表达与鉴定
噬菌体抗体库技术
它是在PCR技术和Phage Display的基础上实现的。 其过程是把用PCR法得到的抗体基因插入丝状噬菌 体的DNA，与噬菌体外壳蛋白的基因相连，在辅助 噬菌体的帮助下，噬菌粒包装成丝状噬菌体，抗体 分子通过与P Ⅲ或PⅧ相连，在噬菌体表面的一端 或分散分布，然后可直接对噬菌体表面的抗PCR扩增抗体全套基白的基因 g3或 g8 的先导系列的紧靠下游
外源基因表达多肽以融合蛋白形式展示在外壳蛋白N端
用固相化抗原经“亲和结合一洗脱一扩增”数个循环直接、 方便、简捷、高效地筛选出表达特异性好、亲和力强的抗 体噬菌体库。
筛选到的噬菌体再将基因g3或g8切除后，转入大肠杆菌，
使翻译出的抗体分泌到细菌的质周腔内，形成游离的抗体 片段，经过纯化即可获得目的抗体。
该项技术的优点:
将抗体的基因型和表型紧密联系起来; 可绕过杂交瘤技术，不需要复杂的基因工程技术; 抗体基因筛选的范围广; 技术稳定、可靠、生产周期短;可规模化生产; 适用范围广，既可用于抗体制备，也适用于其它蛋白如 激素、酶、药物、随机多肽等的生产。
第六节 抗体诊断试剂
一、血清学鉴定用的抗体类试剂 ⒈鉴定病原菌的抗体试剂 ⑴常用诊断血清的品种和用途
①沙门氏菌属诊断血清 ②志贺氏菌属诊断血清 ③病原性大肠埃希氏菌诊断血清
⑵诊断血清的制备步骤 ①制备细菌抗原 ②免疫动物和制备抗体血清
⑶诊断血清诊断方法
⒉乙型肝炎病毒表面抗原的 反向被动血凝诊断试剂
Figure 24.12 Consensus sequences are present in inverted orientation at each pair of recombining sites. One member of each pair has a spacing of 12 bp between its components; the other has 23 bp spacing.
Figure 24.6 The kappa C gene segment is preceded by multiple J
segments in the germ line. V-J
joining may recognize any
one of the J segments, which is then spliced to
Immunoglobulin genes are
assembled from their parts in lymphocytes
Figure 24.4 Heavy and light chains combine to generate an immunoglobulin with several discrete domains.
reactions. First a D segment is joined to a J segment; then a V gene segment is joined to the D segment.
The diversity of germline information
Figure 24.8 The lambda family consists of V gene segments linked to a small number of J-C gene segments.
③HAV抗原放射性核素标记抗体 诊断试剂
④AFP放射性核素标记抗体 诊断试剂
⑤CEA放射性核素标记抗体 诊断试剂
三、导向诊断药物
放射性核素标记抗体 肿瘤放射免疫显像 放射免疫显像优点： ①在体内确切肿瘤定位作用，准确性 达90%，灵敏度达100%。 ②在体内可检出0.5cm大小的病灶，并 可检出肺脑的转移灶。
The diversity of germline information
Figure 24.10 A single gene cluster in man contains all the information for heavy-chain gene assembly.
Recombination between V and C gene segments generates deletions and rearrangements
噬菌体抗体库技术的发展具有很大优越性。它简 单易行，筛选容量大，效率高，绕过了细胞融合及 免疫等步骤，而且在表型一基因型的统一和识别一 增殖过程上模拟了B细胞的成熟过程，从而在实际 应用上具有很大意义。
二、噬菌体抗体库技术的 特点
⒈模拟天然全套抗体库 ⒉避开了人工免疫和杂交瘤技术 ⒊可获得高亲和力的人源化抗体
宿主细胞: 筛选范围 : 时间: 操作: 免疫: 人源抗体: 费用: 生产量: 基因获取:
应用前景:
单克隆抗体 杂交瘤技术
杂交瘤 ~103 几个月 繁杂 必须
高 有限 再克隆
有限
噬菌体抗体 展示技术
细菌 107109 几周 相对简单 可避免
+ 低 无限 直接
不可估
三、基因工程抗体表达
⒈原核细胞表达 ⒉真核细胞表达 ⒊转基因植物表达 ⒋转基因动物表达
抗原的测定有： ①夹心法 ②间接法 ③竟争法
1.夹心法
E
E
底物
固相
标本
2.间接法
酶标抗体
酶标二抗
底物
终止液 显色
标本 固相
3.竞争法
Ag ※ + Ab
Ag(标本) (定量)
显色
Ag※Ab AgAb
常用标记抗体试剂有：
①HBsAg放射性核素标记抗体 诊断试剂
②HBeAg放射性核素标记抗体 诊断试剂
the C gene segment during RNA processing.
Immunoglobulin genes are assembled from their parts in lymphocytes