agilent高效液相色谱仪使用维护保养操作规则
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器，广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。
为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器，以下是一些规范操作的步骤和注意事项。
1.仪器准备-开启仪器电源，并等待仪器自检完成。
-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。
-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净，并按需更换柱筒。
2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品，并确保其纯度和浓度符合实验要求。
-制备规范的稀释液或内标溶液，以便进行质量控制和校准。
3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。
-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。
-根据实验要求选择合适的检测器（如紫外检测器、荧光检测器等）。
4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱，并将柱安装在柱底座上。
-将导线连接到柱温控制系统，并设置柱温。
-选择适当的流动相溶剂，用它们预平衡柱，以确保柱达到稳定状态。
5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。
-定期进行质控分析，以检验仪器的准确性和精确性。
-根据需要，进行合适的质量控制和校正操作。
6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式（如自动进样器、手动进样器等）。
-通过进样器吸取样品，并确保进样量准确无误。
-进行一定的进样准备，如过滤、稀释等。
7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置，样品进样准备完毕，并进行柱的平衡。
-点击“开始”按钮，启动分析程序。
-监测分离曲线或结果，确保分析结果的准确性与可靠性。
8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。
-对结果进行后处理和数据分析，如绘制色谱图、峰面积计算等。
-存储数据，以备后续分析和查阅。
9.仪器维护与清洁-使用完毕后，关闭仪器并断开电源。
-清洗注射器和柱等关键部位，以防止残留的样品引起交叉污染。
高效液相色谱仪的操作与维护指南
高效液相色谱仪的操作与维护指南高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作为一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、药学、环境科学等领域。
为了保证仪器的正常运行和获得可靠的分析结果，正确的操作和科学的维护是非常重要的。
本指南将详细介绍高效液相色谱仪的操作和维护方法，以帮助用户正确使用该仪器。
一、高效液相色谱仪的操作方法1. 准备工作在操作前，需要先进行一些准备工作。
首先，检查仪器是否处于稳定的工作环境中，以确保仪器不受外界干扰。
其次，检查所有的连接与密封件是否完好，确保流体不会泄漏。
最后，检查溶剂和样品的储存条件，保证其符合要求。
2. 开机与关闭正确的开机和关闭步骤可以延长仪器的寿命。
开机前，需要检查电源和其他外部连接。
按照仪器的说明书，按顺序打开电源和其他必要的开关。
关闭仪器时，应按照相反的顺序关闭开关，并断开电源。
3. 样品准备与进样在进行进样操作前，需要准备好样品和溶剂。
样品准备时，应遵循相应的样品制备方法，确保样品的准确性和稳定性。
进样时，应根据实验需求设置适当的进样方式，并注意定量准确。
4. 仪器参数设置在进行分析之前，需要设置仪器的参数，以调整流速、温度、检测波长等参数。
仪器的参数设置应根据实验目的和样品特性进行优化调整，确保获得准确的分析结果。
5. 分析运行与数据处理设置好仪器参数后，可以开始进行分析运行。
根据实验要求和样品特性，选择合适的分析方法和梯度程序。
在分析过程中，应定期检查仪器运行状态，注意观察流速、峰面积、保留时间等数据，并记录相关结果。
6. 仪器清洗与维护分析结束后，必须对仪器进行清洗和维护。
首先，关闭流体通道，清除流体残留物和样品残留物。
然后，根据仪器说明书的要求，进行仪器的常规清洗和维护工作。
定期检查和更换液相柱、检测器等易损件，以保证仪器的正常运行。
二、高效液相色谱仪的维护方法1. 液相柱维护液相柱作为HPLC分离的重要组件，需要定期维护和保养。
Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程
Agilent1100 高效液相色谱仪使用与维护操作规程 已有 179 次阅读 2023-7-17 13:351 目的制定 Agilent1100 高效液相色谱仪使用与维护操作规程，确保操作人员能正确标准地操作，维护液相色谱仪。
2 适用范围适用于Agilent1100 高效液相色谱仪的使用，维护。
3 编写依据Agilent1100 高效液相色谱仪使用说明书 4 职责QC 相关检验人员对本仪器操作规程的实施负责。
5 内容5.1安全留意事项本仪器应良好接地，以防止触电及释放静电；本仪器常常处于高浓度的有机蒸汽环境中，故应通风良好，制止消灭电火花；配制流淌相或接触有机溶剂时应戴橡胶手套及其它防护用品。
5.2仪器组成本仪器由 LC-10ATVP 泵、7725 手动进样器、柱温箱、Agilent1100 紫外-可见光检测器、色谱工作站(N2023 或其它工作站)。
5.3 日常使用操作步骤 5.3.1 开机翻开计算机，进入 Windows 系统，CAG Bootp Server 程序将自动运行。
翻开 HPLC 1100 各模块电源，等仪器自检通过，并且与计算机通讯成功〔约 1～2min 〕后，进入 Online 工作站。
5.3.2 系统初始化〔主要目的：排解系统中的气泡〕 5.3.2.1 翻开Purge 阀 5.3.2.2加大泵流量并开启泵，快速冲洗试验通道，至无气泡从废液管排出。
降低流量及溶剂比例成试验初始条件，并单击OK 确认执行；5.3.2.3 关闭Purge 阀，完成系统初始化。
5.3.3 系统平衡〔主要目的：平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量〕调出本次试验所需方法，保持泵连续工作，以试验初始的流淌相冲洗、平衡柱子一段时间。
〔一般约 30min ，可自己依据本人的仪器配置状况计算，要求至少以色谱柱几何体积 5～10 倍体积的流淌相冲洗、平衡系统。
〕 5.3.4在适当时间，开启柱温箱和检测器，使得柱温稳定，检测器灯的能量稳定。
高效液相色谱荧光检测器操作和维护保养规程
文件制修订记录1.目的建立高效液相色谱（荧光检测器）的操作规程，使检验员正确使用高效液相色谱，确保实验结果准确性。
2.适用范围适用于检验人员使用高效液相色谱。
3.操作规程3.1开机：按下输液泵和检测器模块电源开关，蜂鸣器短暂鸣响，进入自检界面，然后进入程序主界面。
打开柱温箱，设置柱温。
3.2排液：将进液管及过滤头放入相应流动相，将排液阀旋钮以逆时针方向旋转180°，以打开排液阀。
开启purge键，以9mL/min的流速开始排空，3min后自动停止排空。
3.3流量设定：在输液泵模块，按“Func”光标在“流量设定”字段中闪烁，按照标准要求，输入0.8或1.0mL，按“Enter”确认。
开始走基线，以低流速运行30min左右。
3.4波长设定：在检测器模块，按“Func”键，光标闪烁，根据国标输入标准中要求的Ex和Em波长，按“Enter”确认。
按“CE”回到初始界面。
按“zero”基线归零。
3.5登录在线用户：电脑开机，打开色谱工作站软件“N2000+在线”，点击仪器1登陆，阶层：管理员，密码：123456。
3.6设置实验方法：点击“实验信息”编辑项目、单位、简介，设置保存路径，勾选是否扣除背景。
点击“方法”设置仪器配置、组分表、计算、谱图显示、报告编辑。
在“仪器配置”菜单下的“仪器描述1”模块中设置波长、流速、柱温等仪器信息，在“进样阀”模块下设置进样体积、结束时间和标题格式（样品批号），点击“采用”，保存方法。
下次可直接调用方法。
3.7设置积分方法：在“采集数据”模块下，点击“零点校正”下方的按钮，可显示隐藏菜单，在“方法：全局参数”的积分参数表中设置峰宽、峰高、最小面积、锁定时间、漂移、负峰阈值、扣除背景，点击“采用”完成设置并保存。
在“方法：手动积分”模块下，可以对谱图进行手动积分。
在“结果”模块下，可以查看谱图积分结果。
3.8数据采集：在进样信息模块下输入样品批号后，点击“采集数据”，进入采集界面，点击“查看基线”，待基线走稳后，点击“零点校正”，并在检测器上按“zero”按钮，使基线归零。
高效液相色谱仪操作及维护保养规程
1.目的本文件规定了SPD-10A型高效液相色谱仪的操作及维护保养程序。
以规范高效液相色谱仪的操作及维护和保养，保证仪器正常使用，延长仪器使用寿命。
2.适用范围适用于SPD-10A型高效液相色谱仪的操作及维护保养。
43.内容3.1 方法简述3.1.1 高效液相色谱法是一种现代液体色谱法，其基本方法是将具一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液，作为流动相，用泵将流动相注入装有填充剂的色谱柱，注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后，各成分先后进入检测器，用记录仪或数据处理装置记录色谱图或进行数据处理，得到测定结果。
3.1.2 由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高，分析速度快的特点。
3.1.3 高效液相色谱法适用于能在特定填充剂的色谱柱上进行分离的药品的分析测定，特别是多组分药品的测定、杂质检查和大分子物质的测定。
3.2 仪器组成本仪器由公司泵，UVD检测器(190～600nm)和N-2000工作站组成。
3.3 使用前准备3.3.1 接入稳压电源将稳压电源的交流电源的输入插口插在固定的插板上。
打开稳压电源工作电源开关。
3.3.2 更换泵头里清洗瓶中纯化水更换蠕动泵清洗瓶中的纯化水(如果仪器经常使用则建议每周更换两次，如果仪器使用很少则每次使用前必须更换)。
3.3.3 清洗手动进样阀的定量环首先将手动进样阀的扳手反时针扳到头，手动进样阀将处于“Load”状态，用平头医用注射器吸入约1～2ml的50%的甲醇后，从手动进样阀的进样口注入，进行手动进样阀的清洗。
3.3.4 流动相的混匀与过滤3.3.4.1 若流动相为非单一溶剂，配好后要用玻璃棒或其它工具搅匀。
3.3.4.2 如果使用的流动相非色谱纯的、水相或配好的混合溶液，需要用0.45μm的一次性过滤膜过滤(纯有机相或含一定比例有机相的就要用有机系的滤膜，水相或缓冲盐的就要用水系滤膜)。
3.3.5 流动相的超声脱气过滤后的流动相需要超声脱气，一般超声约10～20分钟。
安捷伦液相操作维护保养规程
安捷伦液相操作维护保养规程一、安全操作规范：1.操作前必须穿戴个人防护装备，包括实验服、手套、护目镜等。
2.在操作液相设备时，要保证周围环境干燥、清洁无尘。
3.不得将有机溶剂直接排放到下水道中，应按照相关规定进行处理。
4.避免与有机溶剂发生直接接触，防止引起火灾和爆炸。
在操作过程中要小心避免溢漏。
二、操作准则：1.严密密封液相系统，避免泄漏。
2.在使用气溶胶短管时，注意定期更换新管，并将废弃管进行妥善处理。
3.当不使用设备时，要关闭电源，并将设备清洁干净，避免灰尘和污渍。
4.设备放置时要水平摆放，不可放置在湿润或有机溶剂易波及的地方。
5.使用过程中，要定期检查设备的密封部分是否正常，如有破损应及时更换。
三、操作流程：1.根据实验要求，合理选用相关仪器设备，并调整好设备的参数。
2.操作前先进行设备的预热，保持设备恒定的温度。
3.将待测样品注入进样装置中，确保样品完全进入进样管。
4.打开进样阀，将样品注入到色谱柱中，观察色谱曲线并记录相关数据。
5.实验结束后，使用合适的溶剂将色谱柱进行洗脱，防止发生堵塞现象。
6.将设备进行清洗，除去可能残留下来的污物。
7.对设备进行维护检查，保证下次使用时设备处于良好状态。
四、设备保养：1.定期检查设备的电源线和数据线，如有破损应及时更换。
2.定期清洗仪器的进样口和进样管，防止堵塞。
3.对仪器设备进行定期润滑，确保设备的正常运转。
4.定期校准仪器的测量参数，确保仪器的准确性。
5.确保仪器设备的周围环境干燥，避免设备受潮。
五、事故及处理方法：1.发生溢漏情况时，立即关闭设备，及时清理溢漏物，并通风排气。
3.发生火灾或爆炸时，迅速撤离现场，并使用灭火器等灭火工具进行灭火。
六、员工培训和操作技能提升：1.新员工入职时，进行液相操作培训，包括安全操作规范、设备操作流程等方面的培训。
2.定期组织员工进行操作技能培训和考核，提高员工的操作技能和专业知识水平。
3.鼓励员工参加相关培训和学习，提升专业水平和操作技能。
高效液相色谱仪安全操作及保养规程
高效液相色谱仪安全操作及保养规程前言高效液相色谱仪（HPLC）是一种用于化学分析和检测的重要工具。
为了确保高效液相色谱仪的安全运行和最佳性能，需要遵守一系列的安全操作和保养规程。
本文档提供了详细的操作和保养步骤，以协助用户正确地使用和保护高效液相色谱仪。
安全操作规程操作前1.确保操作人员已经接受了高效液相色谱仪的操作培训并掌握了正确的操作方法。
2.在操作前检查仪器的电源是否正常，仪器的机械结构是否稳定，是否有明显损坏或松动的部件。
3.确保试剂和溶剂的选择和准备符合分析要求，并遵守相关安全规程，如使用防护手套和护目镜。
4.加载样品前必须确定样品的性质和浓度，并根据需要适当稀释和过滤。
操作时1.操作人员应当始终注意安全。
在操作过程中避免直接接触样品和溶剂，避免口误和吞咽样品或溶剂。
2.操作过程中，若发现异常状况，如机器停滞或跑偏、压力急剧增高等，应立即停止操作并检查仪器或相关部件。
3.调整某些参数时，如流速、温度、压力等，应尽量保持小幅度调整，避免快速快速调整。
4.操作结束后，必须关闭仪器并注销相关操作，清理工作区域和操作台面，清洗使用的管道、器皿和附件，并将物品归位。
操作恢复1.若长时间未使用高效液相色谱仪，请在使用前仔细检查机器各部位是否存在异常。
2.重新启动仪器时，请按照操作手册上的步骤重新进行仪器的初始化和调试。
废物处理高效液相色谱仪所使用的溶剂和其他化学废物，必须按照当地的环保规定进行处理和处置。
在处理前应该咨询相关专业人员。
保养规程日常检查和保养1.每天开始操作前，检查仪器的所有零部件是否齐全，零部件是否完整，清洁状态如何。
2.操作后，每天对样品室、管路等部位进行清洁，确保无污物堆积和管路没有堵塞现象。
3.每周对色谱柱进行洗涤和清洁，可以使用去离子水和乙醇为主要清洗溶剂，以确保柱子的性能和使用寿命。
4.定期对机械结构和电子部件进行检查和保养，保证设备运行的稳定性。
液路检查和保养1.定期检查操作中常温箱的工作状态和温度。
安捷伦液相色谱仪操作维护清洁规程
安捷伦液相色谱仪操作维护清洁规程1.目的依据厂家指导说明书及仪器资料建立仪器操作规程，详细规定安捷伦液相色谱仪仪器使用方法，以及仪器设备的维护、保养和卫生清洁，确保仪器不受损坏，检测稳定性好，正常运行。
2.适用范围本规程适用于安捷伦液相色谱仪的操作、维护、保养和卫生清洁。
3.职责由质检部检测人员负责。
4.相应记录表格《仪器使用清洁记录》《仪器维护保养记录》5.仪器：安捷伦高效液相色谱仪（安捷伦1220）6.用途：检测物质组分及含量检测7.环境要求7.1 稳定无震动的安放位置。
7.2 避免阳光直射，强烈的温度变化，电磁干扰。
8.系统组成高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、手动进样器、检测器等部件组成。
9.程序9.1 准备流动相9.1.1流动相配置：按产品需要配置9.1.2 抽滤将抽滤瓶连接好并放上滤膜，将娃哈哈水倒入最上层开口瓶中，启动泵的按钮即开始抽滤，抽滤一半时将电源关掉（防止抽滤时间过长将滤膜抽破，以免达不到过滤的效果），让水慢慢流入接收瓶内。
抽滤两遍，用蓝盖瓶装好，即过滤完，加入少许乙腈（占总体积10%）即可。
磷酸盐缓冲液同以上方法抽滤即可。
新倒出来的乙腈与甲醇不用过滤，按需要量直接倒入蓝盖瓶内即可。
若乙腈或甲醇是头一天剩下的第二天再用时需过滤，方法同上。
（水相与磷酸盐缓冲溶液时用0.22UM的水系滤膜（蓝色盒装），抽滤有机相时用0.22UM的有机滤膜（红色盒装））抽滤流动相的多少根据当天的检测量来定。
9.1.3 超声将已抽滤好的流动相（水相，磷酸盐缓冲液，乙腈，甲醇）置超声波清洗仪上超声20分钟，超声完后，将流动相至仪器顶端的流动相盒内，换下头一天的流动相，A管路放在水相瓶子内，B管路放在乙腈瓶子内，准备开机。
9.1.4开机先打开仪器电源，打开电脑桌面上的【1220联机】图标，进入软件视图介面，双击【控制】图标下的【仪器状态】图标，点视图介面上的【开启】图标，待视图介面各状态都变成绿色后，先打开【冲洗阀】排除系统中的气泡，光标移到视图菜单【梯度泵】，右键点击【方法】将【流量】改成3ML/MIN,溶剂A （100%）、B（100%）各放空冲洗3－5分钟后（无气泡），关闭【冲洗阀】。
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变更内容及定期审核
制定Agilent 1260型高效液相色谱仪操作维护规程，使操作维护规范化，保证检测结果准确可靠。
二、适用范围
本规程适用于Agilent 1260型高效液相色谱仪的操作维护。
三、职责
QC对本规程的实施负责，项目主管、研发总监对本规程实施进行监督。
四、程序内容
4.1仪器配置
本仪器由梯度泵，自动进样器，柱温箱，VWD检测器或DAD检测器和操作软件工作站组成。
4.2操作前的准备
色谱纯的试剂配制流动相，必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查，应符合要求；水为新鲜制备的重蒸馏水。
对规定pH值的流动相，应使用精密pH计进行调节，配制好的流动相应通过0.45μm以下的滤膜滤过，用前脱气，应配制足量的流动相。
4.2.2 供试溶液的配制供试品用规定溶剂配成供试溶液。
定量测定时，对照品溶液和样品供试溶液均应分别配制2份。
供试溶液在注入色谱仪前，一般应经0.45μm以下的滤膜滤过，必要时，在配制供试溶液前，样品需经提取净化，以免对色谱系统产生污染。
4.2.3 检查上次使用记录和仪器状态，检查色谱柱是否适用于本次试验，色谱柱进出口位置是否与流动相的流向一致，原保存溶剂与现用流动相能否互溶，流动相的pH值与该色谱柱是否相适应，仪器是否完好，仪器的各开关位置是否处于关断的位置。
4.3仪器的操作
4.3.1 接通电源，打开计算机及工作站其他各部件开关，约30秒后，各部件进入待机状态，指示灯为橘黄色，启动完成。
→梯度泵→柱温箱→检测器的状态，橘黄色为未就绪状态，绿色为空闲状态，粉色为进样状态，蓝色为运行状态，红色为出错状态。
显示所有数据：即打开运行样品时所有记录运行状态的数据图谱。
平铺数据：即将所有运行状态图谱平铺。
重叠数据：即将所有运行状态图谱重叠。
4.4色谱条件的设定及数据采集操作过程
一模块图标中的控制来开或关。
把泵上的Purge阀逆时针松开，调流速为3.0ml/min,启动泵，系统开始排气泡，直到管线内（由容器瓶到泵出口）无气泡为止，切换通道继续Purge，直到所用流动相通道中无气泡为止，调流速为1.0ml/min，再把Purge 阀顺时针旋紧。
“与泵和进样器一致”使柱温箱温度一致，单击确定进入下一画面。
“最大压力限度”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子，单击确定进入下一画面。
VWD检测器参数的设定
在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm，在“峰宽（响应时间）”下方点击下拉成三角框，选择合适的响应时间，如〉0.1min（2秒响应时间）。
点击确定进入下一画面。
参数设定检测波长：一般选择最大吸收处的波长，最多可同时检测8个波长。
样品带宽：一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。
参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。
参比带宽：至少要与样品信号的带宽相等，通常情况下用100nm作为缺省值。
可以根据所需保存光谱图的张数最多同时设定5个通道采集信号，无需采集光谱时应将“存储”设在“无”，若做峰纯度检测或优化求知的样品检测条件，建议选择“全部”。
峰宽（响应时间）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。
狭缝：窄时，光谱分辨率高；宽时，噪音低。
同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。
根据检测波长选择氘灯或钨灯。
“方法”菜单，选中“方法另存为”，输入一方法名。
如“test”，单击确定。
到右边的框中，点击确定。
（如同时检测两个信号，则重复1、2
话框，输入样品信息：样品总体名称，数据路径中为将数据保存在规定文件夹中，在样品名称项中输入样品名称，未知样品运行次数项中输入样品瓶数，在每次运行重复次数输入进样针数，单击确定进入下一对话框，在样品瓶项中输入第一个样品瓶的位置，在样品架上放入样品瓶，在进样量选项中选择使用方法，然后单击确定。
出现一个有样品瓶数的序列，将每一个样品名称都区别开来，以防保存数据时将相同名称的数据覆盖掉，将序列保存在规定文件夹中，在运行队列中进行提交。
“停止时间”进行适当的调整，可使主峰出完并与使杂质峰出完。
4.6图谱数据的处理
择分析。
任何颜色，在数据结果中单击鼠标右键选择报告属性将需要的积分参数选入，如理论塔板数，分离度等。
在报告结果中就会出现应保存的结果。
4.5关机操作
各部件开关，断开电源。
4.6 注意事项：
μm或更细的膜过滤)。
4.6.2 流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。
4.6.3 不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4.6.4 长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。
4.6.5 每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
4.6.6 C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。
4.6.7 堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查
并清洗。
清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清洗；③用10％稀硝酸清洗。
4.6.8 气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
4.6.9 要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
周期和持续时间）或单次清洗，点击确定，注意溶剂不能干涸。
4.7 仪器维护
4.7.2 10%甲醇水的更换：夏天使用周期不得过3天，冬天不得超过一个星期。
4.7.5仪器发生故障时应及时向管理员汇报，并及时处理。
不能处理时应及早报修。