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玻璃器皿的清洗包扎和高压蒸汽灭菌(2)课件
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2、吸管应在管口约0.5厘米
以下的地方塞入少许长约 1.5厘米的棉花，以拉直的 曲别针一端放在棉花的中 心，轻轻捅入管口，松紧 必须适中，松紧程度以吹 气时通气顺畅而不致下滑 为准，管口外露的棉花纤 维统一通过火焰烧去。然 后，将吸管尖端放在4-5厘 米宽的长条纸的一端约与 纸条成45°角，折叠纸条， 包住吸管尖端，然后将吸 管卷入纸条内，末端剩余 纸条折叠打结，待灭菌。
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（2）高压蒸汽灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽 ？灭菌完毕后，为什么要待压力降到0时才能打开排气阀 ，开盖取物？
• 其他：牛皮纸或报纸，酒精灯，棉花，高压蒸汽 菌锅，电烘箱，线绳,毛刷等
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四、操作方法
（一）、玻璃器皿的清洗包扎
• 玻璃器皿在灭菌前必 须经正确包裹和加塞 ，以保证玻璃器皿于 灭菌后不被外界杂菌 所污染。
1. 将平皿用纸包扎好， 以5～8个为一包；
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（3）干热灭菌法：通过使用干热空气杀灭微 生物的方法叫干热灭菌。一般是把待灭菌 的物品包装就绪后，放入电烘箱中烘烤， 即加热至160～170℃维持1～2h。
（4）火焰灭菌：直接用火焰灼烧灭菌，迅速 彻底。对于接种环，接种针或其它金属用 具，可直接在酒精灯火焰上烧至红热进行 灭菌。此外，在接种过程中，试管或三角 瓶口，也采用通过火焰而达到灭菌的目的 。
实验一 常用玻璃器皿的清洗及包扎
实验一常用玻璃器皿的清洗及包扎一.目的与要求（一）熟悉微生物实验所需各种常用器皿的名称和规格。
（二）学会正确的清洗玻璃器皿的方法和包扎方法二.原理为了包装实验顺利进行，要求把实验用器皿清洗干净，保持灭菌后无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎，试管和三角瓶要做棉塞。
清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗净剂的类别和沾污程度等的不同而有所不同，不同的器皿包扎方法也不同。
三.材料与仪器（一）常用的各种玻璃器皿。
（二）洗涤工具和去污粉、肥皂、洗涤液。
四.操作步骤（一）清洗1.新玻璃器皿的清洗新购置的玻璃器皿均含有游离碱，故应先将其浸于洗液或2%的盐酸溶液中数小时，再用自来水冲洗干净。
2.用过的玻璃器皿的清洗（1）试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯可用瓶刷或海绵沾上肥皂、洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后在用自来水充分冲洗干净。
经洗涤后，若内壁的水均匀分布在一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则需用洗涤液（或洗液）浸泡数小时，再用自来水充分冲洗，洗涤干净的器皿倒置与铁丝框内或有空心格子木架上，室内晾干。
（2）玻璃吸管、滴管一般用完后应立即用清水和蒸馏水浸泡（或冲洗），免得干燥后难以冲洗干净，如附有污物可用洗液浸泡。
（3）载玻片与盖玻片带有油污的应擦去有无后用热乙醇、丙酮、二甲苯等溶液浸泡10~15min，溶液油垢然后用水冲洗，再用洗涤液浸泡、冲洗，干后置于95%乙醇中保存备用。
（二）玻璃器皿的包扎1.培养皿常用旧报纸或牛皮纸包紧，一般以5~10套培养皿作一包。
包好后进行干热或湿热灭菌，如将培养皿放入金属（不锈钢）筒内进行热灭，则不必用纸包。
2.试管和三角瓶试管管口和三角瓶都需要塞以棉花塞（或泡膜塑料塞），棉花塞的作用是起过滤作用，避免空气中的微生物进入试管或三角瓶。
棉花塞的制作要求使用棉花塞紧贴玻璃壁，没有皱纹和缝隙，不能过紧也不能过松，长度不少于管口直径的二倍，约2/3塞进管口。
若干支试管用绳扎在一起，在棉塞部分外包裹牛皮纸或2层旧报纸，再扎好。
玻璃器皿的清洗包扎、培养基的制备及灭菌 18页PPT文档
基本原理
（一）实验室中使用的玻璃器皿简介
微生物学实验所用的玻璃器皿，大多要进行消毒、灭菌 和用来培养微生物，因此对其质量、洗涤和包装方法均有一 定的要求。玻璃器皿的质量一般要求硬质玻璃，才能承受高 温和短暂灼烧而不致破坏；玻璃器皿的游离碱含量要少，否 则会影响培养基的酸碱度；对玻璃器皿的性状和包装方法的 要求，以能防止污染杂菌为准；洗涤玻璃器皿的方法不当也 会影响实验的结果。目前微生物学实验室中，有些玻璃器皿 （如培养皿、吸管等）已被一次性塑料制品所代替，但玻璃 器皿仍是重要的实验室用具。
• 清洗 • 包装 • 灭菌
洗涤剂、试管刷等 报纸、牛皮纸、专用塑料袋或器皿等 干热灭菌 湿热灭菌 紫外灭菌 过滤
玻璃器皿的清洗 器皿包扎
二、基本原理
（二）培养基简介
培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积 累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、 保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样， 加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很 多。
培养基的成分和pH
不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、 氮源、无机盐和生长因子等。不同微生物对pH要求 不一样，霉菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的， 而细菌和放线菌培养基的pH一般为中性或微碱性的 （嗜碱细菌和嗜酸细菌例外）。所以配制培养基时， 都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适 的范围。
此外，为了加强紫外线灭菌效果，在打开紫外线 灯以前，可在无菌室内（或接种箱内）喷洒3—5％ 的石炭酸溶液，一方面使空气中附着有微生物的尘 埃降落，另一方面也可以杀死一部分细菌。无菌室 内的桌面，凳子可用2—3％的来苏尔擦洗，然后再 开紫外线灯照射，即可增强杀菌效果，达到灭菌目 的。
实验2 常用玻璃器皿的清洗及包扎
实验——常用玻璃器皿的清洗及包扎一、目的与要求（一）熟悉微生物实验所需各种常用器皿的名称和规格。
（二）学会正确的清洗玻璃器皿的方法和包扎方法。
二、原理为了保证实验顺利进行，要求把实验用器皿清洗干净，保持灭菌后无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎，试管和三角瓶要做棉塞。
清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗净剂的类别和沾污程度等的不同而有所不同，不同的器皿包扎方法也不同。
三、材料与仪器（一）常用的各种玻璃器皿。
（二）洗涤工具和去污粉、肥皂、洗涤液。
四、操作步骤（一）清洗1.新玻璃器皿的清洗新购置的玻璃器皿均含有游离碱，故应先将其浸于洗液或2%的盐酸溶液中数小时，再用自来水冲洗干净。
2.用过的玻璃器皿的清洗（1）试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯可用瓶刷或海绵沾上肥皂、洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后再用自来水充分冲洗干净。
经洗涤后，若内壁的水均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则需用洗涤液（或洗液）浸泡数小时，再用自来水充分冲洗，洗涤干净的气密倒置于铁丝框或有空心格子的木架上，室内晾干。
（2）玻璃习惯、滴管一般用完后立即用清水和蒸馏水浸泡（或冲洗），免得干燥后难以冲洗赶紧，如附有污物可用洗液浸泡。
（3）载玻片与盖玻片带有油污的应擦去油污后用热乙醇、丙酮、二甲苯等溶液浸泡10~15min，溶解油污然后用水冲洗，再用洗涤液浸泡、冲洗，干后置于95%乙醇中保存备用。
（4）凡是装有对人、畜有传染性或者是属于植物检疫范围内的微生物的试管，培养皿及其他容器，应先浸泡在2%煤酚皂溶液或0.25%新洁尔消毒液内24h 或煮沸0.5h，在进行洗涤。
（二）玻璃器皿的包扎1.培养皿常用旧报纸密密包紧，一般以5~10套培养皿作一包。
包好后进行干热或湿热灭菌，如将培养皿放入金属（不锈钢）筒内进行热灭菌，则不必用纸包。
2.试管和三角瓶试管管口和三角瓶都需要用棉花塞（或泡膜塑料塞），棉花塞的作用是起过滤作用，避免空气中的微生物进入试管或三角瓶。
电子教材-玻璃器皿的包扎及棉塞的制备.
引导教学
多媒体
任
务
计
划
1.分组讨论，初步讨论制定玻璃器皿清洗及包扎的实验方案。
2.在教师的引导下，完善方案，并细化各项操作的步骤以及操作过程的注意事项。
教师参与讨论，适当引导，但是不做决定意见
3.在教师的引导下，学生了解实训室的规章制度和注意事项。
天津现代职业技术学院
教学过程实施方案
课程名称
食品应用微生物基础
实训学时
4
子情境
玻璃器皿的洗涤、包扎和棉塞制备
实训地点
工业发酵实训室
教学要求
1.通过本情境的学习训练让同学掌握玻璃器皿的洗涤、包扎及棉塞的制备技术及要求。
2.掌握玻璃器皿的洗涤方法和要求。
3.掌握棉塞的制备方法。
4.掌握玻璃器皿的包扎方法。
引导教学
分组讨论
多媒体
实训室
任
务
实
施
1.根据实验清单清点仪器及其他用具来保证实施顺畅，做好生产记录。
2.每个学习小组独立完成玻璃器皿的清洗。
3.每个学习小组独立完成棉塞的制备。
4.每个学习小组独立完成玻璃器皿的包扎。
5.建立经验交流制度：每完成一次学习任务，同学及小组间可进行经验交流，教师可针对共性问题在课堂上组织讨论。
掌握玻璃器皿的包扎的重要性。
素质目标
培养规范意识
树立严谨、科学的态度
加强安全意识ຫໍສະໝຸດ 教学手段1.情境式教学和引导教学，
2.分组实训。
教学过程
教学过程
任务组织和分析
1.分组并选出组长，下达工作任务，分发引导文
2.教师引导教学：
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌培训课件
8注．长意无，事菌即项检可：查待使用将用。已灭灭菌菌锅培应养严基格于按3照7℃操培作养程2序4进h，行无，杂避菌免生发 生事故；灭菌时，操作者切勿擅自离开，务必待压力下降
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
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斜面划线法（a） 不同细菌直线接种长出的菌苔形态（b）
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
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穿刺接种 （a）水平穿刺接种；（b）垂直穿刺接种
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
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四、实验报告
列表比较各种接种方法及注意事项。
五、问题和讨论
1、斜面接种取菌前为什么要将灼烧过的接种针在 无菌培养基上沾一下？
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
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一、实验目的：
了解各种微生物接种方法。
二、实验材料和用具：
已灭菌培养基、接种环、接种针、酒精灯、 移液管、记号笔
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
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三、实验步骤：
1、斜面接种技术 斜面接种是从已生长好的菌种斜面上挑取少量
菌种移植至另一新鲜斜面培养基上的一种接种方法 。具体操作如下： (1)贴标签 接种前在试管上贴上标签，注明菌名、
5
(3)操作步骤：
1）称药品 按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧 杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶解后 倒入大烧杯；也可放在称量纸上称量，随后放人热水中，牛 肉膏便与称量纸分离，立即取出纸片。蛋白胨极易吸潮，故 称量时要迅速。
2）加热溶解 在烧杯中加入少于所需要的水量，小火加热，并 用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配 制固体培养基，则将称好的琼脂放入已溶解的药品中，再加 热融化，此过程中需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后 补足所失的水分。
器皿的洗涤包扎灭菌ppt课件
2、吸管的包扎
准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 ，塞一小段1.5cm长的棉花，然后将吸管尖端斜 放在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角，并将 左端多余的一段纸覆折在吸管上，再将整根吸管 卷入报纸，右端多余的报纸打一小结。
3、试管和三角瓶等的包扎
（6）开锅。当锅内蒸汽完全排尽时即压力表指针降
到零时，打开锅盖，取出灭菌物品： （7）排水。最后将高压灭菌器内的剩余水排出。 （8）观察灭菌效果。把灭菌培养基放入25℃温箱 中，培养48小时观察灭菌效果。 48小时后不见杂
菌生出，便证明培养基已达到灭菌目的，可以使
用。
器皿的洗涤包 扎灭菌
一、实验目的
1、掌握玻璃器皿的洗涤和包扎方法；
2、了解玻璃器皿的灭菌方法和原理
二、实验原理
为确保实验顺利地进行，要求把实
验所用的玻璃器皿清洗干净。
为保持灭菌后和无菌状态，需要对
培养皿、吸管等进行包扎，
三、实验器材 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、培养 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、报纸等
四、操作步骤
（一）、玻璃器皿的洗涤方法
1、新玻璃器皿的洗涤
在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干 净（本次实验不要求）
2、旧玻璃器皿的洗涤 试管、培养皿、三角瓶：
洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗
装有固体培养基：
刮掉，洗涤
带病原菌培养物的器皿：
先高压蒸汽灭菌，倒去培养物后再洗涤
Байду номын сангаас
（二）玻璃器皿的包扎
（3）通电加温，排冷空气
通常当压力表指针升至0.05MPa时，打开排气阀
放气，待压力表指针降至零点一小段时间后，再
6.玻璃器皿的包扎
加塞后，将全部试管用棉绳捆好，再在棉塞
外包一层报纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉 塞，最后用棉绳扎好。同时用记号笔注明培 养基名称、配制日期、组别。
3、试管和锥形瓶的包扎
2.试管的包扎
三、实验任务
1、每人包扎10mL和1mL移液管各1支。 2、每人包扎5个培养皿。
3、每人包扎1个装有200mL水的250mL锥形瓶。
4、每人包扎4支装有2/3水的试管。
玻璃器皿的包扎
一、玻璃器皿为何要包扎？
微生物实验讲求无菌操作。为了保证实验的准确性和可靠性
进行，实验前均要求把实验器皿清洗干净，清洗后还需要对器皿 进行灭菌处理。为保持灭菌后器皿的无菌状态，需要对培养皿、 吸量管、试管、锥形瓶等进行妥善包扎。 这些工作看来很普通，如操作不当或不按规定要求去做，会 导致实验的失败。因此应看作是微生物实验的基本操作。
1.移液管的包扎
2、移液管的包扎方法
①
③
④
② ⑤
二、玻璃器皿如何包扎？
3、试管和锥形瓶的包扎
试管和三角瓶都要作合适的棉花塞或硅胶塞。 棉花塞或硅胶塞的作用是起过滤作用，避免空气中的 微生物进入试管或三角瓶。棉花塞的制作要求使棉花塞紧 贴玻璃壁，没有皱纹和缝隙，不能过松，过紧易挤破管口 和不易塞入，过松易掉落和污染。棉花塞的长度不少于管 口直径的二倍，约2/3塞进管口。 若干支试管用两层旧报纸或牛皮纸包裹，再用绳扎紧。 三角瓶每个单独用两层旧报纸或牛皮纸包裹，再用绳扎紧。
二、玻璃器皿如何包扎？
1、培养皿的包扎纸将其包紧（边包扎边把纸张 往里折叠，以免包扎后松散），然后进行灭菌。 使用时在无菌室中才打开取出培养皿。
1、培养皿的包扎
二、玻璃器皿如何包扎？
实验七、玻璃器皿的清洗与包扎一、目的要求：1、熟悉微生物实验所需...
实验七、玻璃器皿的清洗与包扎一、目的要求：1、熟悉微生物实验所需的各种常用器皿名称和规格。
2、掌握对各种器皿清洗方法。
3、掌握玻璃器皿的干热灭菌操作过程。
二、材料：1、常用各种玻璃器皿。
2、清洗工具和去污粉、肥皂、洗涤液。
3、电热干燥箱。
三、概述：为了保证实验顺利进行，要求把实验用器皿清洗干净。
保持灭菌后无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎。
试管和三角瓶要做棉塞。
这些工作看来很普通，如操作不当或不按规定要求去做，会导致实验的失败。
因此应看作是微生物实验的基本操作。
四、方法：（一）器皿洗涤的注意事项和方法：1、任何洗涤方法，都不应对玻璃器皿有所损伤，所以不能用有腐蚀作用的化学药剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦拭玻璃器皿。
2、一般新的玻璃器皿用2%的盐酸溶液浸泡数小时，用水充洗干净。
3、用过的器皿应立即洗涤，有时放置太久会增加洗涤困难。
4、难洗涤的器皿不要与易洗涤的器皿放在一起。
有油的器皿不要与无油的器皿放在一起，否则使本来无油的器皿也沾上了油垢，浪费药剂和时间。
5、强酸、强碱、琼脂等腐蚀、阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须倒在废缸内。
6、含有琼脂培养基的器皿，可先用小刀或铁丝将器皿中的琼脂培养基刮去，或把它们用水蒸煮，待琼脂融化后趁热倒出，然后用水洗涤。
7、一般的器皿都可用去污粉、肥皂或配成5%热肥皂水来清洗油质很重的器皿，应先将油层擦去。
8、如果器皿沾有煤膏、焦油及树脂类的一些物质，可用浓硫酸或40%的氢氧化钠液洗，或用洗涤液浸泡。
9、当器皿上沾有蜡或油漆等物质，用加热方法使之融化揩去，或用有机溶剂（苯、二甲苯、丙酮、松节油等）拭揩。
10、洗涤后的器皿达到玻璃能被水均匀湿润而无条纹和水珠。
11、载玻片或盖玻片可先在2%盐酸溶液中浸1小时，然后在水中冲洗2~3次，最后用蒸馏水洗2~3次，洗后烘干冷却或浸于95%酒精中保存备用。
用过的载玻片或盖玻片，先擦去油垢，再放在5%肥皂水中煮10分钟后，立即用清水冲洗，以后放在洗涤液（稀释）中浸泡2小时，再用清水洗至无色为止，最后用蒸馏水洗数次，干后浸于95%酒精中保存备用。
实验二玻璃器皿的清洗、包扎与灭菌
1、玻璃器皿的清洗方法 (1)、新购的玻璃器皿
首先浸泡于１～２％的盐酸或洗涤液
中数 小时，最后用流水冲净。
（2）、使用过的玻璃器皿的清洗方法
试管、培养皿、等 刷 洗然后自来水冲洗干净。 若内壁水均匀分布成一薄层而不出 现水珠， 为油污完全洗净。否则，再浸泡数 小时。 可用瓶刷及去污粉
装有固体培养基的器皿，应先将其刮去，再洗涤 带菌的先浸在2%煤酚皂溶液或0.25%新洁尔 灭消毒液内24h或煮沸0.5h，再洗涤 带病原菌的先高压蒸汽灭菌，然后将培养
养基的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌
高 压 蒸 汽 消 毒 器
高 压 蒸 汽 消 毒 器
（干热灭菌）
(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥
后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。
(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中， 彼此间留有一定的空隙以便流通空气。
(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。
(4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭 上排气孔，继续加热至一定温度后，调
附：棉塞的制作
棉塞的作用
防止杂菌污染 保证通气良好
棉塞：加塞时，1／3在试管口外，2／3在试管 口内。如图2-2所示。做棉塞的棉花要选 纤维较长的，一般不用脱脂棉做棉塞 通气塞：几层纱布（一般8层）相互重叠，或两 层纱布间均匀铺一层棉花而成
3、消毒与灭菌
消毒：一般是消灭病原菌和有害微生物的
物倒去，再进行洗涤
玻璃吸管 立即浸泡在自来水中，免得干燥后难以冲洗 干净，待实验结束后集中冲洗 若吸管顶部塞有棉花，则先用水将棉花冲 出，再洗涤 吸过微生物培养物的吸管应立即浸泡在盛有 2%的煤酚皂溶液或 0.25%新洁尔灭消毒液 内，24h后方可取出冲洗 吸管内部如有油垢，同样应先在洗涤液中 浸泡数小时，然后冲洗