22.12.常用特殊染色
特殊染色
结缔组织染色法Mallory三色染色法：胶原和网状纤维蓝色，软骨、淀粉样变物质淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色，髓鞘和红细胞橘红色。
2.Masson三色染色法：胶原纤维绿色，肌纤维红色，红细胞橘红色。
鉴别胶原纤维和肌纤维最宜采用的方法。
3.三联染色法：胶原纤维红色，网状纤维黑色，弹性纤维绿色，肌肉和红细胞淡黄色。
二.胶原纤维染色1.Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法：胶原纤维鲜红色，肌纤维、细胞质和红细胞黄色，胞核蓝褐色。
与胶原纤维染色相比的缺点是：易褪色和对比度差。
2.天狼星红（Sirius Red）苦味酸染色法：胶原纤维红色，细胞核绿色，其他黄色。
在偏光显微镜下可见4种胶原纤维。
三.网状纤维染色：包括：Gomori和James。
Gomori银氨染色法：网状纤维黑色，胶原纤维红色。
鉴别诊断中的应用：1）癌和肉瘤的鉴别。
2)恶性淋巴瘤和组织细胞肉瘤。
3）血管内皮细胞瘤和外皮细胞瘤。
4）黏液纤维瘤和黏液肉瘤。
四.弹性纤维染色：效果最好的固定液是：甲醛生理盐水。
Gomori醛复红染色法：弹力纤维深紫色，黏液紫色（肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色），背景不同程度的黄色。
1）配制后需在室温静置1-2日。
2）是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成。
3）醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色。
3)可使胃主细胞着色。
5）应放置在冰箱内保存。
五.显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法：维多利亚蓝+丽春红S：弹性纤维蓝绿色，胶原纤维红色，背景淡黄色。
六.横纹肌组织染色：Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、横纹肌等均蓝色；胶原、网状纤维、骨基质及骨黄色或玫瑰红色。
1）要在室温下成熟。
2）可使用高锰酸钾促使PATH成熟。
3）乙醇分化时要保存一定的红色。
4）染色后用无水乙醇快速脱水，冷风稍干燥后封固。
七.糖类染色：过碘酸的作用是氧化。
过碘酸-Schiff（PAS）染色法：糖原及其他PAS反应阳性物质红色，细胞核蓝色。
生物学常用染色液汇总
生物学常用染色液汇总常用染料介绍（一）天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸—酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末，提取出虫红，再用明矾处理，除去其中杂质，就制成洋红。
单纯的洋红不能染色，要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料，染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜，尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
（二）人工染料人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。
1、酸性品红酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
他跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法Mallory三色染色法可用于胶原和网状纤维的染色，其中蓝色代表胶原和网状纤维，淡蓝色代表软骨、粘液和淀粉样变物质，红色代表神经胶原纤维、肌纤维和酸性颗粒，橘红色代表髓鞘和红细胞。
图表A1.1展示了Mallory三色染色法的效果，其中A组排列规则。
1.2 Masson三色染色法Masson三色染色法可用于胶原纤维和肌纤维的染色，其中绿色代表胶原纤维，红色代表肌纤维，橘红色代表红细胞。
图表B1.2和C1.2展示了Masson三色染色法在胃癌组织和血管平滑肌中的应用。
1.3 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法三联染色法可用于显示胶原、网状和弹性纤维，其中红色代表胶原纤维，黑色代表网状纤维，绿色代表弹性纤维，淡黄色代表肌肉和红细胞。
图表D展示了Weigert间苯二酚法的效果。
胶原纤维染色法2.1 天狼星红苦味酸染色法天狼星红苦味酸染色法可用于胶原纤维的染色，其中红色代表胶原纤维，绿色代表细胞核，黄色代表其他物质。
天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察，Ⅰ型呈强双折光性，呈黄色或红色纤维，Ⅱ型呈弱双折光，呈多种色彩疏网状分布，Ⅲ型呈弱双折光，呈绿色的细纤维，Ⅳ型呈弱双折光的基膜，呈淡黄色。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
2.2 Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法可用于胶原纤维的染色，其中鲜红色代表胶原纤维，黄色代表肌纤维、细胞质和红细胞，蓝褐色代表胞核。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
三、网状纤维染色3.1 XXX-Sweets银氨染色法XXX-Sweets银氨染色法可用于网状纤维的染色，其中黑色代表网状纤维，红色代表胞核（核固红复染），黄棕色代表胶原纤维，淡红色代表细胞质（红液复染）。
病理学技术—特殊染色最最全总结
病理学技术—特殊染色最最全总结病理学技术是医学研究领域中的一个重要分支，它利用各种不同的方法和技术，对组织和细胞进行分析和研究。
其中，特殊染色技术是病理学技术中的一个重要组成部分，通过使用不同的染色剂，有助于观察并区分不同的细胞和组织结构，以辅助诊断和研究。
以下是对特殊染色技术的最全总结。
1. PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）：PAS染色可以用于检测细胞和组织中的多糖物质，如糖原、粘多糖和黏多糖等。
PAS染色通过一系列的化学反应，将含有醛基的物质氧化，然后与PAS染料反应生成染色物质。
2. 铁染色：铁染色可用于检测细胞和组织中的铁含量，它可以帮助鉴别铁负荷过多或过少的情况。
常用的铁染色方法包括Perls染色和Prussian blue染色。
3.去脂酸和酶染色：去脂酸和酶染色用于检测细胞和组织中的脂质和酶活性。
去脂酸染色通过将组织切片浸泡在油酸中，然后用溴化黄染色，观察脂质的分布情况。
酶染色通过使用特定的染色剂来观察细胞中的酶活性，如碘化物染色用于检测过氧化物酶活性。
4.免疫组织化学染色：免疫组织化学染色是通过使用特异性抗体来检测细胞和组织中的蛋白质和其他分子。
常见的免疫组织化学染色方法包括免疫荧光染色和酶联免疫组化染色。
这些染色技术可以用于确定特定抗原的存在和定位，从而帮助确定疾病的诊断和预后。
5.组织切片染色：组织切片染色是一种常见的特殊染色技术，它可以用于检测细胞和组织中的结构和细胞器。
常用的组织切片染色方法包括伊红染色、苏木素-伊红染色和单色染色等。
6.核酸染色：核酸染色用于检测细胞和组织中的核酸结构和功能，其中最常用的核酸染色方法是荧光原位杂交（FISH）和DAPI染色。
荧光原位杂交可以用来检测染色体异常和基因重排等。
7.肉眼可见染色：肉眼可见染色是一种用于检测显微镜下不易观察到的细胞和组织结构的染色技术。
常见的肉眼可见染色方法包括钙化染色和淀粉样变染色等。
总结以上所述，特殊染色技术在病理学领域中具有重要的应用意义，通过使用不同的染色剂，可以对细胞和组织进行全面和准确的分析和研究。
几种常用的特殊染色 ppt课件
ppt课件
1
磷钨酸-苏木素染色法（PTAH）
试剂配制： 磷钨酸苏木素液 苏木素 0.1g 磷钨酸 2.0g 蒸馏水 100ml 先将苏木素加热溶于 20ml 蒸馏水,再将 磷钨酸溶于 80ml 蒸馏水。等苏木素液冷却 后，加入磷钨酸溶液混合，放置数周后才可 使用（可保存 2-3 年） 。如急用，可加入 0.2g 高锰酸钾,加速其成熟（但几天后即失效） 。
ppt课件 26
染色方法： 1 常规切片 、脱蜡至蒸馏水 2 0.5%高碘酸氧化5-10分钟 3 流水冲洗数分钟，蒸馏水洗一次 4 无色品红20分钟 5 水洗 5分钟后苏木素染核 6 常规脱水(或烤箱烘干)透明封固 结果：糖原或中性粘液或霉菌等 鲜红色，核蓝色。
ppt课件 27
注意事项
•1 配制过程中玻璃器皿要干净，试剂要纯。
常规切片脱蜡至水
苏木素染核(可省) 入VG液中1-2分钟 快速水洗,烘干透明封固
ppt课件 5
结果: 胶原纤维红色
肌纤维黄色
优点: 省去分化，两种纤维着色均
且鲜明艳丽
ppt课件
6
弹力纤维染色法
间苯二酚品红液: 碱性品红2.0g ① 30%三氯化铁25ml ④ 间苯二酚4.0g ② 浓盐酸 4ml ⑤ 蒸馏水 200ml ③ ①+②+③加热溶解,玻棒搅拌煮沸后慢慢加入④,搅 拌继续煮沸3-5分钟,冷却过滤,滤液倾去不用, 将滤 纸和沉淀物一起放回烧杯内, 温箱中烘干,取出后加 95%酒精200ml,隔水煮至沉淀物完全溶解后取出滤 纸,冷却后过滤,补足蒸发的酒精,最后加入⑤,冰箱保 存(3-6℃)。
•4 快速水洗.蒸馏水洗
•5 1%磷钼酸滴染1-3分钟 •6 倾去余液直接滴加亮绿液5分钟 •7 快速水洗后烤箱烘干,透明封固 •结果：胶原纤维绿色
常用特殊染色结果速记
常用特殊染色结果速记注：为了方便广大病理技术人员熟悉和掌握常用病理技术特殊染色的结果，现将作者摘录整理的“常用特殊染色结果速记”呈现给大家，以便使用者在日常工作和学习中记忆。
内容不一定全面，如有错误请以人民卫生出版社出版的《2016年全国卫生技术资格考试指导-病理学技术》一书为准。
结缔组织染色：1.Mallory三色染色结果：胶原和网状纤维蓝色，软骨、黏液、淀粉样变物资呈淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色，髓鞘和红细胞橘红色。
2．Masson三色染色结果：胶原纤维绿色，肌纤维红色，红细胞橘红色。
胶原纤维染色：1.Van Gieson(V G)苦味酸-酸性品红染色结果：胶原纤维鲜红色，肌纤维、细胞质和红细胞黄色，细胞核蓝褐色。
2．天狼星红苦味酸染色结果：胶原纤维红色，细胞核绿色，其他黄色。
网状纤维染色：1.Gordon-Sweets银氨染色结果：网状纤维黑色，细胞核红色（核固红复染），胶原纤维黄棕色，细胞质淡红（红液复染）。
弹性纤维染色：1.弹性、胶原纤维的双重组合染色法：弹性纤维蓝绿色，胶原纤维红色，背景淡黄色。
2.Gomori醛品红染色法：弹性纤维呈紫红色，背景橘红色。
横纹肌组织染色：1.Mallory磷坞酸苏木素（PTAH）染色结果：细胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌均为蓝色；胶原纤维、网状纤维软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色；粗弹性纤维有时为微紫色；有缺氧早期病变的心肌为紫蓝色或棕黄色。
早期心肌病变组织染色：1.Nagar-Olsen染色结果：缺氧心肌、红细胞红色，正常心肌黄色或黄棕色，细胞核蓝色。
2.Poley显示缺氧心肌染色结果：缺氧心肌红色，细胞核紫色，其他组织呈绿色。
糖类染色：1.过碘酸-Schiff（PAS）染色结果：糖原红色，细胞核蓝色。
黏液物质染色：1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫AB/PAS染色结果：中性黏液物资红色，酸性黏液物资蓝色，混合性黏液物资紫红色。
病理学技术——特殊染色最全总结
病理学技术——特殊染色最全总结特殊染色是病理学中常用的一种技术手段，用于染色并可视化细胞、组织或病理标本中特定的结构、细胞成分或病理损伤，从而帮助诊断人员更准确地判断疾病类型和病理变化程度。
特殊染色的种类繁多，下面将对一些常见的特殊染色进行全面总结。
一、银染色法银染色法是通过化学反应使待染物质与银盐结合，生成黑色或褐色沉淀，并在显微镜下观察变化。
常见的银染色方法有：Reticulin（網狀纖維）染色、Gomori银染色、Grocott-Methenamine银染色。
二、PAS染色PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）是一种常见的特殊染色技术，用于检测糖原以及其他多糖类物质。
通常使用的PAS染色是将待染物标本与过氧化铬酸溶液（Periodic Acid）处理后再使用Schiff试剂进行染色的方法。
PAS染色为酸性物质染成红色，大多为胞浆染色。
常见的应用包括鉴别肝细胞变性、神经纤维、肾小管等结构。
三、 Masson三色染色法Masson三色染色法是一种多彩染色方法，通过染色剂的组合可染出细胞核、胶原纤维和细胞质等不同组织成分。
Masson三色染色方法包括酸性区域以绿色染色显示胶原纤维，细胞核以黑色或暗蓝色染色显示，胞质以红色染色显示。
该染色法在组织纤维化、炎症反应等病变的检测中应用广泛。
四、Mallory三色染色法Mallory三色染色法和Masson三色染色法类似，可以用于显示胶原纤维、细胞核和胞质等组织成分。
其区别在于Mallory三色染色法标本在染色前需用盐酸处理，使染色剂更易于沉积在纤维上，能更清晰地显示组织纤维结构。
五、Giemsa染色Giemsa染色通常用于血液和骨髓涂片的染色，并可以显示细胞核、染色质和胞质等成分。
Giemsa染色法有多种方法，如Giemsa-Eosin染色法、Giemsa-Wright染色法等，可根据需要选用。
六、von Kossa染色法von Kossa染色法用于检测组织中的钙盐沉积，如血管壁的钙化、尿路结石等。
病理学技术特殊染色最最全总结均配图
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)绿色：细胞核黄色：其他三、网状纤维染色3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。
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④2%苯胺蓝液 苯胺蓝 2g 2%苯胺蓝液 冰醋酸 2ml 蒸馏水加至 蒸馏水加至 100ml ⑤亮绿液 亮绿 1g 冰醋酸 1 ml 蒸馏水 99 ml
操作方法: 操作方法: ①组织常规固定脱水包埋切片 ②切片脱蜡至水 ③ weigert氏铁苏木素液5-10分钟 weigert氏铁苏木素液5 10分钟 ④流水稍洗 ⑤1%盐酸酒精迅速分化 1%盐酸酒精迅rdon-sweets氏银氨液: Gordon-sweets氏银氨液: 用小量杯盛10%硝酸银水溶液2ml,逐滴 用小量杯盛10%硝酸银水溶液2ml,逐滴 加入氢氧化胺,边滴边摇动容器. 加入氢氧化胺,边滴边摇动容器.先出现 沉淀物, 沉淀物,继续滴入氢氧化胺至形成的沉 淀恰好溶解.加入3%氢氧化钠水溶液2ml, 淀恰好溶解.加入3%氢氧化钠水溶液2ml, 再次形成沉淀. 再次形成沉淀.继续滴入氢氧化胺至形成 的沉淀又恰好溶解.最后加蒸馏水至40ml, 的沉淀又恰好溶解.最后加蒸馏水至40ml, 配好后用棕色砂塞瓶装,放于冰箱内保存, 配好后用棕色砂塞瓶装,放于冰箱内保存, 用时恢复至室温. 用时恢复至室温.
2.Masson三色法 2.Masson三色法 试剂配置: 试剂配置: ① weigert氏铁苏木素液 weigert氏铁苏木素液 ② 丽春红酸性品红液 丽春红 酸性品红 蒸馏水 冰醋酸 ③ 1%磷钼酸水溶液 1%磷钼酸水溶液 磷钼酸1 磷钼酸1g加蒸馏水至 100ml 0.7g 0.7g 0.3g 0.3g 99ml 99ml 1 ml
注意事项: 注意事项: ①所使用的玻璃器皿都必须用洗液浸泡并 冲洗干净 ②所用试剂质量要纯, GR或AR级试剂, ②所用试剂质量要纯,用GR或AR级试剂,最 好用双蒸水配置试剂 ③配置银氨液时加氢氧化胺要恰当. ③配置银氨液时加氢氧化胺要恰当.配置的 银氨液至冰箱内可保存数天至数周. 银氨液至冰箱内可保存数天至数周.
Zenker氏液固定的组织脱蜡至水后 Zenker氏液固定的组织脱蜡至水后 入0.5%碘酒精作用10分钟,稍水洗, 0.5%碘酒精作用10分钟,稍水洗, 5%硫代硫酸钠作用5分钟,流水冲洗 5%硫代硫酸钠作用5分钟, 10分钟后染色. 10分钟后染色
二.网状纤维 网状纤维分布很广泛. 网状纤维分布很广泛.网状纤维的形态 分布增多或减少断裂或崩解等的病理 变化在病理诊断上具有重要意义. 变化在病理诊断上具有重要意义.特别 是对协助肿瘤诊断和鉴别诊断有较大 帮助.如用于区别癌与肉瘤. 帮助.如用于区别癌与肉瘤.鉴别早期癌 鉴别血管内皮瘤和血管外皮瘤等. 鉴别血管内皮瘤和血管外皮瘤等.
注意事项: 注意事项: ① 本染色法组织最好用Bouin氏或Zenker氏 本染色法组织最好用Bouin氏或Zenker氏 液固定为佳.如已用10%甲醛固定. 液固定为佳.如已用10%甲醛固定.切片脱 蜡至水后放入Bouin氏液作用一晚或至37 蜡至水后放入Bouin氏液作用一晚或至37 度温箱内1 小时, 度温箱内1-2小时,流水冲洗切片至黄色 消失.再染色. 消失.再染色.
乙液 硫酸 0.5ml 0.5ml 蒸馏水 99.5ml 99.5ml 甲乙两液分瓶盛放, 甲乙两液分瓶盛放,临用时两液等量混合 ③ 2%草酸 草酸2g 2%草酸 草酸2 蒸馏水加至 100ml 100ml ④0.5%碘酒精液 碘片 0.5g 0.5%碘酒精液 0.5g 70%酒精加至100ml 70%酒精加至100ml ⑤5%硫代硫酸钠液 硫代硫酸钠 5g 5%硫代硫酸钠液 蒸馏水加至100ml 蒸馏水加至100ml
操作方法: 操作方法: ①组织固定10%甲醛液,常规脱水包埋切片 组织固定10%甲醛液, ②切片脱蜡至水 ③ weigert氏铁苏木素液5-10分钟 weigert氏铁苏木素液5 10分钟 ④流水稍洗 ⑤ 1%盐酸酒精迅速分化 1%盐酸酒精迅速分化 ⑥流水冲洗数分钟 ⑦ Van Gieson 氏染液染1-5分钟 氏染液染1 ⑧倾去染液,直接用95%酒精分化和脱水, ⑧倾去染液,直接用95%酒精分化和脱水,吹干 ⑨中性树胶封闭 结果:胶原纤维呈鲜红色, 结果:胶原纤维呈鲜红色,肌纤维胞质及红细胞黄色 胞核蓝褐色
②间苯二酚品红液 间苯二酚品红液 碱性品红 1 g 间苯二酚 2 g 蒸馏水 100 ml 30%三氯化铁液 30%三氯化铁液 12.5 ml 浓盐酸 2 ml
取一300ml烧杯,放入碱性品红, 取一300ml烧杯,放入碱性品红,间苯二酚 和蒸馏水,用玻璃棒搅拌加热煮沸,再慢加入30% 和蒸馏水,用玻璃棒搅拌加热煮沸,再慢加入30% 三化铁液 ,搅拌煮沸3-5分钟,冷却后过滤,倾 搅拌煮沸3 分钟,冷却后过滤, 去滤液,将滤纸和沉淀物一同放入烧杯, 去滤液,将滤纸和沉淀物一同放入烧杯,置干燥 箱内烘干,加入95%乙醇100ml在水浴锅内加热搅 箱内烘干,加入95%乙醇100ml在水浴锅内加热搅 拌至沉淀物完全溶解,取出滤纸,冷却后过滤, 拌至沉淀物完全溶解,取出滤纸,冷却后过滤,补 充乙醇至100ml,加浓盐酸2ml,混合后用. 充乙醇至100ml,加浓盐酸2ml,混合后用.
⑥滴入Gordon-sweets氏银氨液作用1分 滴入Gordon-sweets氏银氨液作用1 钟,蒸馏水稍洗 ⑦10%中性甲醛还原1分钟,流水洗5-10分 10%中性甲醛还原1分钟,流水洗5 10分 钟 ⑧常规脱水透明 ⑨中性树胶封闭 结果:网状纤维呈黑色, 结果:网状纤维呈黑色,胶原纤维黄棕色
② 1%磷钼酸水溶液处理时可在镜下控制,见 1%磷钼酸水溶液处理时可在镜下控制, 肌纤维红色, 肌纤维红色,胶原纤维呈淡红色即可
附:
Bouin氏固定液 Bouin氏固定液 饱和苦味酸水溶液 75 ml 甲醛 25 ml 冰醋酸 5 ml Zenker氏液固定液 Zenker氏液固定液 升汞 5g 重铬酸钾 2.5g 冰醋酸 蒸馏水 5 ml 100 ml
② 酸化高锰酸钾水溶液 甲液 高锰酸钾 0.5g 0.5g 蒸馏水加至 100ml 100ml 乙液 硫酸 0.5m 0.5m l 蒸馏水 99.5ml 99.5ml 甲乙两液分瓶盛放, 甲乙两液分瓶盛放,临用时两液等量混合 ③ 2%草酸 2%草酸 草酸2 草酸2g 蒸馏水加至 100ml 100ml
操作方法: 操作方法: ①组织固定10%甲醛液,常规脱水包埋切片 组织固定10%甲醛液, ②切片脱蜡至95%乙醇 ②切片脱蜡至95%乙醇 ③入间苯二酚品红液1-2小时 入间苯二酚品红液 ④直接用95%乙醇洗去多余染液并分化至无 ④直接用95%乙醇洗去多余染液并分化至无 色脱下:镜下观察,如染色不清晰, 色脱下:镜下观察,如染色不清晰,可再用 1%盐酸酒精稍分化,自来水冲洗 1%盐酸酒精稍分化,
④ 2%硫酸铁胺液 2%硫酸铁胺液 硫酸铁胺 2g 蒸馏水加至 100ml 100ml ⑤10%中性甲醛液 10%中性甲醛液 甲醛 10ml 10ml 蒸馏水 90ml 90ml 碳酸钙 加至饱和,用时取上清液 加至饱和,
操作方法: 操作方法: ①组织固定10%甲醛液,常规脱水包埋切片 组织固定10%甲醛液, ②切片脱蜡至水 ③滴入酸化高锰酸钾液 氧化5分钟, ③滴入酸化高锰酸钾液,氧化5分钟,稍水洗 ④ 2%草酸水溶液漂白1-2分钟,稍水洗 2%草酸水溶液漂白1 分钟, ⑤ 2%硫酸铁胺水溶液媒染5分钟,稍水洗, 2%硫酸铁胺水溶液媒染5分钟,稍水洗, 蒸馏水洗一次
取一烧杯盛蒸馏水30ml,加入苏木素, 取一烧杯盛蒸馏水30ml,加入苏木素,稍加温 使苏木素完全溶解.另一烧杯盛蒸馏水70ml, 使苏木素完全溶解.另一烧杯盛蒸馏水70ml, 加入磷钨酸使其完全溶解. 加入磷钨酸使其完全溶解.待苏木素液冷却 后与磷钨酸液混合,置于光亮处数周或数月. 后与磷钨酸液混合,置于光亮处数周或数月. 待成熟后才可使用. 待成熟后才可使用. ② 酸化高锰酸钾水溶液 甲液 高锰酸钾 0.5g 0.5g 蒸馏水加至 100ml 100ml
注意事项: 注意事项: ① weigert氏铁苏木素液因分甲乙两液 不宜 weigert氏铁苏木素液因分甲乙两液 预先混合, 预先混合,否则易氧化沉淀而逐渐失去染色 力 ② Van Gieson 氏染液也甲乙两液分瓶盛放,临 氏染液也甲乙两液分瓶盛放, 用时取甲液1 乙液9份混合, 用时取甲液1份,乙液9份混合,放置一段时 间后, 间后,酸性品红则不易着色 ③ V.G法染色容易褪色 V.G法染色容易褪色
1.Van Gieson 氏苦味酸-酸性品红染色法(V.G法) 氏苦味酸-酸性品红染色法(V.G法 试剂配制: 试剂配制: ① weigert氏铁苏木素液 weigert氏铁苏木素液 甲液: 甲液: 苏木素 1 g 无水酒精 100 ml 乙液: 30%三氯化铁 乙液: 30%三氯化铁 4 ml 蒸馏水 100 ml 盐酸 1 ml 甲乙两液分瓶盛放,临用时两液等量混合. 甲乙两液分瓶盛放,临用时两液等量混合.
常用特殊染色
特殊染色是近代病理学研究工作和临床病理检验工作 不可忽视的重要手段. 不可忽视的重要手段. 一.胶原纤维:广泛分布于各脏器内,胶原纤维染色主要 胶原纤维:广泛分布于各脏器内, 用于和肌纤维鉴别.来源于间胚叶的肿瘤,如纤维瘤, 用于和肌纤维鉴别.来源于间胚叶的肿瘤,如纤维瘤, 平滑肌瘤,横纹肌瘤,神经纤维瘤. 平滑肌瘤,横纹肌瘤,神经纤维瘤.甚至它们 的肉瘤都 产生一定的纤维.H.E染色难以区别. 产生一定的纤维.H.E染色难以区别.用胶原纤维染色 可以区别. 可以区别.慢性炎症 机化和瘢痕形成中出现胶原纤维, 机化和瘢痕形成中出现胶原纤维, 通过胶原纤维染色可证实, 慢性肾小球肾炎, 通过胶原纤维染色可证实,如:慢性肾小球肾炎,大叶 性肺炎,良性高血压,小动脉玻璃样变等. 性肺炎,良性高血压,小动脉玻璃样变等.
②Van Gieson 氏染液 甲液: 1%酸性品红水溶液 甲液: 1%酸性品红水溶液 酸性品红 1 g 蒸馏水 100ml 乙液: 苦味酸饱和水溶液( 乙液: 苦味酸饱和水溶液(约1.2%) 甲乙两液分瓶盛放,临用时取甲液1 甲乙两液分瓶盛放,临用时取甲液1份,乙液 9份混合使用 ③ 1%盐酸酒精液 1%盐酸酒精液 70%酒精 70%酒精 99 ml 盐酸 1 ml