生物化学实验 血清、乳蛋白含量测定
• 一.目的:学会用染料结合分析法测定血清 总蛋白的含量,掌握比色分析的方法及原理。
• 二.基本原理：在酸性条件下，蛋白质与考马斯
亮兰G-250产生颜色反应，最大吸收波长为595 nm。根据蛋白质溶液的A595值(吸光值)与蛋白质 浓度成线性正比的特点测定蛋白质含量。实验时 以已知浓度的牛血/ml BSA。
2.蛋白显色剂：溶解考马斯亮兰G-250 100mg于50ml 95%酒精中，再加入100ml 85%的磷酸，然后用蒸馏水稀释到1L。
3.样品液：蛋白稀释液(稀释50倍)
• 四.操作： 取4只干净试管，分别标记为
“空白、标准、样品1、 样品2”。依次加入蒸 馏水、标准蛋白、稀释的样品各50 ul，然后每 管中均加入蛋白显色剂2.5 ml，混匀，2 min后 比色，记录各管的A595nm值。
• 五.结果及分析：
• 蛋白中蛋白质含量:
• C测=0D测/0D标× C标 单位:(g/100ml)
02 生物化学实验--酚试剂法(改良Lowry法)测定血清蛋白质含量
酚试剂法（改良 Lowry 法）测定血清蛋白质含量【目的】1 ．掌握酚试剂法测定蛋白质含量的含量与操作技术。
2 ．熟悉标准曲线的制作方法和分光光度计的应用。
【原理】蛋白质分子中所含的肽键在碱性溶液中与 Cu 2+ 络合产生紫红色化合物 ( 双缩脲反应 ) ，同时使肽链展开，其中带有酚基的酪氨酸残基充分暴露，后者在碱性条件下使酚试剂中磷钨酸 - 磷钼酸还原，生成钼蓝和钨蓝的化合物，其蓝色深浅与蛋白质含量成正比，与已知浓度的标准蛋白质溶液进行比色，即可计算出测定样品中蛋白质的含量。
酚试剂法测定样品中蛋白质的含量，其特点为方法简便，灵敏度高，能够测定2 ～100 μ g 的微量蛋白质。
其方法比凯氏定氮法操作简便，其灵敏度比双缩脲法高 100 倍左右。
因此经常被用于科研与临床检验。
【器材】1 ．座标纸2 ． 50ml 容量瓶3 ． 722 型分光光度计【试剂】1 ．碱性铜试剂甲液称取无水碳酸钠 2 . 0g ，溶于 0 . 1mol ／ L 氢氧化钠溶液 100ml 中。
乙液取硫酸铜(CuSO 4 ·5H 2 O) 0 . 5g 溶于 1 ％酒石酸钾溶液 100ml 中。
临用前取甲液 50ml, 乙液 1ml 混合，即为碱性铜试剂。
2 ．标准蛋白质溶液 ( 0.25g /L)准确称取结晶人血清清蛋白 25mg ，溶于 0 . 9 ％氯化钠溶液中，以容量瓶定容至 100ml 。
3 ． 0 . 9 ％氯化钠溶液4 ．酚试剂（有成品出售）取钨酸钠(Na 2 WO 4 ·2H 2 O) 100g 和钼酸钠(Na 2 MO 4 ·2H 2 O) 25g , 溶于 700ml 蒸馏水中，再加入 85 ％磷酸 50ml 和浓盐酸 100ml 混合，置于1500ml 圆底烧瓶中温和地回流 10h ，回流结束后加入硫酸锂(LiSO 4 ·H 2 O) 150g ，水 50ml ，溴 3 ～ 4 滴，除去回流装置，继续沸腾 15min ，以除去剩余的溴，冷却后稀释至 1000ml ，过滤，溶液应呈黄色或金黄色 ( 如带绿色者不能使用，应继续加溴煮沸 ) 。
血清蛋白含量测定实验报告
血清蛋白含量测定实验报告实验目的：本实验旨在通过测定血清中蛋白质的含量来了解血清的营养状态，并探究不同条件下血清蛋白含量的变化情况。
实验原理：血清是血液中去除了红细胞和凝血因子的部分，主要由蛋白质组成。
蛋白质含量是衡量血清中营养状况的重要指标之一。
本实验利用比色法测定血清中总蛋白质的含量，其原理是利用试剂与蛋白质发生特定颜色的反应，通过光度计测定反应产物的吸光度来推算蛋白质的浓度。
实验步骤：1. 准备工作：取适量标准蛋白溶液（如丙酮酸钙溶液）按一定比例稀释，制备一系列标准溶液，其浓度分别为1、2、3、4、5 g/L。
2. 取血清标本：从受试者血液中取得一定量的血清标本。
3. 样本处理：将血清样本与提取试剂按照一定比例混合，待沉淀形成后，离心分离，收集上清液。
4. 加入试剂：将上述收集到的上清液分别与试剂液按照一定比例混合，充分搅拌，反应一定时间。
5. 测定吸光度：将反应溶液分别放入光度计中，设置为适当的波长，记录吸光度值。
6. 绘制标准曲线：将实验得到的吸光度值与对应的标准溶液的浓度进行配对，绘制标准曲线。
7. 测定血清样本：将血清样本与试剂按照一定比例混合，重复步骤5，测定吸光度。
8. 计算血清蛋白含量：根据标准曲线，将血清样本的吸光度值转换为蛋白质的浓度。
实验结果与讨论：根据实验步骤进行操作并记录各个标准溶液和血清样本的吸光度值。
根据标准曲线计算出血清样本中蛋白质的浓度。
讨论血清蛋白含量的变化情况，可以比较不同个体、不同年龄段或不同疾病状态下的血清蛋白含量是否存在显著差异。
并结合其它相关指标进行综合分析与判断。
结论：根据实验数据计算出的血清蛋白质含量为X g/L，证明了血清样本中存在蛋白质，并可作为评估营养状况的指标。
实验结果进一步揭示了血清蛋白质含量在不同条件下的变化情况，为疾病诊断、个体健康管理等提供了一定的参考依据。
实验一血清蛋白质测定(范玉平)
【试剂与器材】
1．6 mol/L NaOH溶液 2．双缩脲试剂 3．双缩脲空白试剂 4．60～70g/L蛋白质标准液 5．仪器 分光光度计。
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【试剂与器材】
大试管
1ml吸管 5ml吸管 洗耳球
4支 ３支
2支 １只
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操作步骤
1.取试管4支，标明测定管（U）、标准管 （S）、标本空白管（B）、试剂空白管（ RB）。
【注意事项】
4. 实验证明，BCG不但与白蛋白呈色，而且与血 清中多种蛋白质成分呈色，其中以α1-球蛋白、 运铁蛋白、结合珠蛋白更为显著，其反应速度较 白蛋白稍慢。由于在30s内呈色对白蛋白特异， 故BCG与血清混合后，在30s读取吸光度，可明 显减少非特异性呈色反应。为了减少本法基质效 应的影响，最好用参考血清作标准。
【方法学评价】
1.本法操作简便、快速，胆红素和一般脂血对测定 无明显干扰。
【方法学评价】
2.血红蛋白和BCG产生与白蛋白相等的颜色强度， 血红蛋白在1g/L以下无明显干扰，2g/L使吸光度 增高3.2%，3g/L使吸光度增高7.4%，4g/L使吸 光度增高7.7%，5g/L使吸光度增高8.8%，所以 溶血标本不宜做BCG法白蛋白测定。
二 物理法：
又可分为紫外吸收法、折射法和重量法 等。除紫外吸收法外，其他方法现已很少 使用或被淘汰。
三 蛋白质与染料结合的方法
是比较灵敏而特异的一类方法。用的较多的染料有丽春红 、考马斯亮蓝G250和邻苯三酚红钼。丽春红蛋白结合法 测得的结果与凯氏定氮法相符，并且显色后在室温可稳 定24小时；考马斯亮蓝G250结合蛋白法灵敏度高，特异 性强，操作简便，广泛用于尿蛋白，脑脊液蛋白及各种 微量蛋白的检测，但该方法测定蛋白浓度的线性范围不 宽，与白、球蛋白反应的灵敏度不同，反应强度亦受温 度的影响，且比色杯吸附色素而干扰测定，不能用于自 动化分析仪，因此该法的应用受到了一定的限制；邻苯 三酚红钼络合显色法克服了考马斯亮蓝G250结合蛋白法 的上述缺点，且具有简便、稳定等优点，可用于自动化 分析仪。
生物化学实验2.双缩脲测定血清蛋白质含量
标准溶液
实验原理
绘制出蛋白质标准溶液的标准曲线：以吸光 度为纵坐标，蛋白质浓度（mg/mL）为横坐 标，绘制标准曲线。
在相同的实验条件下，测定未知蛋白质含量 的血清样品溶液，在540nm处的吸光度，查 标准曲线求得样品的蛋白质浓度（g/L）。
试剂和仪器
(一）试剂 1、双缩脲试剂：取3g硫酸铜，500mL蒸馏水 溶解，加9g酒石酸钾钠、5g碘化钾，加入 100mL6mol/L氢氧化钠，用蒸馏水稀释到 1000mL，贮存于塑料瓶中，避光保存。 2、0.9%（W/V)NacL溶液 3、小牛血清 4、蛋白质标准溶液
(二）仪器 恒温水浴锅、722型可见分光光度计、
刻度吸量管、微量移液器、试管、试管架
3 4 5 6
蛋白质标准液
-
（10g/l）
0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
0.9%Nacl 双缩脲
蛋白质含量
1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 -
实验结果与分析
查标准曲线即可得出蛋白质的含量（g/L）。
蛋白质浓度(g/L)= 蛋白质含量(mg)×10-3 0.1ml×10-3
临床意义
正常值：60 ～ 80g/L 血浆总蛋白上升
常见于脱水导致的血浆浓缩，例如急性失 水、休克、肾上腺皮质功能不全等 血浆总蛋白下降
血浆水分增加，如水钠潴留 长期消耗性疾病，如肺结核、肿瘤等 肝功能损伤、肾功能损伤等
试剂(mL） 血清
0.9%Nacl 双缩脲
测定管 0.1 0.9 4.0
空白管 1.0 4.0
混匀后，37℃水浴中放置20分钟，以空白管调零， 测定其540nm波长处的吸光度。
722G型分 光光度计
比色皿
乳与乳制品常规理化指标检验蛋白质含量的检测
乳与乳制品常规理化指标检验蛋白质含量的检测YLNB 2.8一、凯氏定氮仪常量检测法1.原理样品中加入催化剂和浓硫酸，经加热后硫酸分解成亚硫酸酐、水和氧。
有机物被氧化为二氧化碳和水，而蛋白质的氨态氮与过量的硫酸反应转变为硫酸铵，硫酸铵在碱性溶液中进行蒸馏。
将蒸馏出来的氨用硼酸吸收，再用酸标准溶液滴定，根据酸标准溶液的用量和浓度计算出蛋白质含量。
2.试剂所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。
2.1浓硫酸2.2硫酸钾2.3硫酸铜2.4氢氧化钠溶液：400g/L2.5硼酸溶液：30g/L2.6甲基红一澳甲酚绿混合指示剂：用体积分数为95%的乙醇，将澳甲酚绿及甲基红分别配成1g/L的乙醇溶液，使用时按1g/L澳甲酚绿：1g/L甲基红为5： 1的比例混合。
2.7硫酸标准溶液：c (H+)=0.1000±0.005mol/L2.7.1标准溶液的配制：取3ml浓硫酸加到15ml水中，冷却后洗入1000ml容量瓶中，定容。
2.7.2标准溶液的标定：（见GB/T601-2002 ）2.7 3硫酸铵：干燥后最低含量99.9%,使用前直接将硫酸铵在102±2℃干燥至少2h，在干燥器中冷却至室温。
3.仪器及器材3.1凯氏定氮仪，包括消化炉、废气排放装置、蒸馏单元及电位滴定仪3.2消化管，适用于凯氏定氮仪（3.1）3.3接收瓶：300ml三角瓶或烧杯4.方法4.1样品称取4.1.1原料奶和纯牛奶样品：称取约5g4.1.2乳饮料：称取约8g4.1.3冰淇淋：称取约5g4.1.4乳粉：称取约0.5g4.2测量4.2.1消化4.2.1.1将上述样品称入消化管中，同时称取5g硫酸钾，0.5g 硫酸铜，然后加入15-20ml浓硫酸，将消化管放入消化炉中，将温度旋钮设定在大约6档左右，连接好排气装置并打开开关，开始进行消化，消化30分钟或直到白烟消失后，将消化炉旋钮调节至9档，继续消化直到消化液透明。
乳中蛋白质含量测定(精)
实训十九 鲜牛乳中蛋白质含量测定
第8 页
三、实训内容
（二）分析步骤 3、蒸馏：向接收瓶内加入10.0mL硼酸溶液及1滴～2滴混合指示液，并使冷凝管的下端插入液面 下，根据试样中氮含量，准确吸取2.0mL～10.0mL试样处理液由小玻杯注入反应室，以10mL水洗涤 小玻杯并使之流入反应室内，随后塞紧棒状玻塞。将10.0mL氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其 缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸馏10min 后移动蒸馏液接收瓶，液面离开冷凝管下端，再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下 蒸馏液接收瓶。 4、滴定：将洗净的滴定管用滴定管夹夹住固定于滴定架台上，装好已标定的盐酸或硫酸标准溶液， 滴定接受瓶的吸收液至溶液颜色由蓝绿色变为酒红色时为终点，记录消耗的标准溶液的浓度和体积。
（五）精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
实训十九 鲜牛乳中蛋白质含量测定
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二、实训要求
（二）仪器和设备要求
1、天平：感量为1mg。
2、全套凯氏定氮装置：如图2所示。
实训十九 鲜牛乳中蛋白质含量测定
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三、实训内容
（一）原理 牛乳中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游 离，用硼酸吸收后，在用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量得到样品中的氮的含量，乘 以换算系数，即为蛋白质的含量。 （二）分析步骤 1、试样处理：称取充分混匀的牛乳试样10g～25g（约相当于30mg～40mg氮），精确至0.001g， 移入干燥的100mL、250mL或500mL定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜、6g硫酸钾及20mL硫酸，轻摇后于 瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停 止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热0.5h～1h。取下
动物生物化学实验教程正式
动物生物化学实验教程正式实验一血清蛋白质含量测定牛血清蛋白：BSA。
血浆：指血液的液体成分，淡黄色（因含胆红素）。
含白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原。
血液经抗凝处理、离心沉淀后，获得的液体部分。
血清：血液凝固后，释出的液体。
不含纤维蛋白原及游离钙离子。
蛋白质定量分析是动物生物化学和其他生命科学研究中经常用到的实验项目。
蛋白质是生物体内最为重要的生物大分子之一，其种类繁多、结构多样、功能各异，而且分子量相差很大，所以很难建立一个理想而通用的蛋白质定量分析方法。
目前测定蛋白质含量的方法很多，常用的测定方法有Folin—酚法（Lowry法）、紫外吸收法、凯氏定氮法、考马斯亮蓝染料结合法等，每种方法在实践中都有其优点和局限性。
本实验采用考马斯亮蓝染料结合法（Bradford法）。
(灵敏度最高)一、实验目的1．掌握分光光度法测定的原理，分光光度计的结构和基本操作要点（光源-单色器-样品室-检测器-显示器）2．掌握考马斯亮蓝染料结合法测定蛋白质含量的原理和操作方法3．掌握微量移液器的使用方法4．了解蛋白质含量测定中标准曲线的制作方法二、实验原理染料考马斯亮蓝G-250（R250，结合后可以解离）在游离状态下呈红色，最大吸收峰为465nm。
它能与蛋白质的疏水微区结合，形成蓝色复合物，该复合物的最大吸收峰为595nm，在一定浓度范围内（为什么在一定范围内），其吸光度值与蛋白质含量成正比，故可用于蛋白质含量的测定。
三、实验操作步骤表1-1考马斯亮蓝染料结合法测定蛋白质含量试管号稀释的血清样品（mL）0.9%NaCl溶液（mL）考马斯亮蓝G-250溶液（mL）空白管-0.15样品管0.1-5室温静置5min，于波长595nm处，以空白管调“0”，测定样品管的吸光度值，查标准曲线，吸光度测定值所对应的蛋白质浓度就是稀释样品的蛋白质含量，然后乘以血清的稀释倍数（10倍），可得血清中蛋白质的含量。
四、实验试剂1．考马斯亮蓝G-250溶液（0.01%）：称取考马斯亮蓝G-250100mg，溶于50mL95%乙醇中，再加入100mL85%(W/V)浓磷酸，然后用蒸馏水定容至1000mL，置棕色瓶过夜（如有不容物，可用二层滤纸过滤）。
01 生物化学实验--凯氏(Kjeldahl)微量定氮法测定血清蛋白质含量
凯氏（ Kjeldahl ）微量定氮法测定血清蛋白质含量【目的】1 ．掌握微量凯氏定氮法的操作技术，包括未知样品的消化蒸馏、滴定及其含氮量的计算等。
2 ．熟悉微量凯氏定氮法的原理。
【原理】凯氏定氮法是蛋白质含量测定的经典方法，它是根据蛋白质分子中含氮量来测定的，各种蛋白质含氮量比较近似，平均约为 16 ％，即 1g 氮相当于 6.25g 蛋白质。
由测定出的氮量即可换算出蛋白质含量。
血清蛋白质或其它有机含氮物与浓硫酸加热进行消化 ( 氧化 ) 时，其中碳、氢、氧元素分别被氧化为二氧化碳和水，而氮原子则转变成氨，后者与硫酸结合生成硫酸铵，留在溶液中，为了加速有机物质的氧化分解，在消化时加入硫酸铜做为催化剂，加入硫酸钾以提高消化液的沸点。
硫酸铵与氢氧化钠作用，放出氨，通过水蒸气蒸馏将氨带入接收瓶中被硼酸溶液吸收，使溶液中氢离子浓度降低，指示剂颜色发生改变，用已知浓度的标准盐酸滴定，直至原来溶液中氢离子的浓度恢复，即指示剂变为原来的颜色。
根据所消耗的标准盐酸量，即可计算出样品中的总氮量。
化学反应式如下：1 ．消化含氮化合物 +H 2 SO 4 —→CO 2 ↑+H 2 O +(NH 4 ) 2 SO 4 +SO 2 ↑2 ．蒸馏(NH 4 ) 2 SO 4 + 2NaOH—→2NH 4 OH+Na 2 SO 4NH 4 OH—→NH 3 ↑+ H 2 O3NH 3 +H 3 BO 3 —→(NH 4 ) 3 BO 33 ．滴定(NH 4 ) 3 BO 3 +3HCl—→3NH 4 Cl+H 3 BO 3以上测定为样品中的总氮量，由总氮量减去非蛋白氮，即为蛋白质含氮量，再乘以 6 . 25 即为血清蛋白质含量。
【器材】1 ．电炉2 ．铁三角架3 ．酒精灯4 ．锥形瓶5 ．消化管（凯氏烧瓶）6 ．滴定管7 ．微量凯氏定氮器8 ．刻度吸量管9 ．玻璃珠10 ．漏斗11 ．血清【试剂】1 ．硫酸钾粉末2 ． 12 . 5 ％硫酸铜水溶液3 ．浓硫酸4 ． 2 ％硼酸水溶液5 ．混合指示剂取 0 . 1 ％溴甲酚绿乙醇溶液 10ml 与 0 . 1 ％甲基红乙醇溶液 4ml 混合6 ． 30 ％氢氧化钠溶液7 ． 0 . 0lmol / L 盐酸标准溶液【操作】一、消化取消化管二支，标明测定管与空白管，按下表进行操作：混匀，置于电炉上加热消化（图 3-1 ），开始有水蒸气逸出，继而溶液呈现棕色并冒出白烟 (SO 3 ) ，此时火力应减小，并在管口上盖一小漏斗，以免硫酸损失过多，再继续消化至溶液变为澄清的蓝绿色，即消化完毕 ( 此过程约需 25 分钟左右 ) ，冷却后加水 3 . 8ml ，使总量成为 5ml( 内有 1 . 2ml 硫酸 ) ，混匀，准备蒸馏。
生物化学实验 血清、乳蛋白含量测定
• 三试剂：
1.标准蛋白：1mg/ml BSA。
2.蛋白显色剂：溶解考马斯亮兰G-250 100mg于50ml 95%酒精中，再加入100ml 85%的磷酸，然后用蒸馏水稀释到1L。
3.样品液：蛋白稀释液(稀释50倍)
• 四.操作： 取4只干净试管，分别标记为
“空白、标准、样品1、 样品2”。依次加入蒸 馏水、标准蛋白、稀释的样品各50 ul，然后每 管中均加入蛋白显色剂2.5 ml，混匀，2 min后 比色，记录各管的A595nm值。
• 五.结果及分析：
• 蛋白中蛋白质含量:
• C测=0D测/0D标× C标 单位:(g/100ml)
血清、乳蛋白含量测定
• 一.目的:学会用染料结合分析法测定血清 总蛋白的含量,掌握比色分析的方法及原理。生颜色反应，最大吸收波长为595 nm。根据蛋白质溶液的A595值(吸光值)与蛋白质 浓度成线性正比的特点测定蛋白质含量。实验时 以已知浓度的牛血清白蛋白（BSA）溶液为标准。
血清总蛋白及白蛋白测定
的含量。
紫外吸收法可测定0.1-0.5mg/ml的蛋白质溶液，此操作简便，测定 迅速，不消耗样品，低浓度盐类不干扰测定。因此，此法在蛋白质的
制备中广泛应用。 此法的缺点是：（1）对于测定那些与标准蛋白质
中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定的误差；（2）若 样品中含有嘌呤，嘧啶等吸收紫外线的物质，会出现较大的干扰。
思
考
问题：如何测定血清中蛋白质的总浓度？蛋白质的 浓度测定方法？ 双缩脲法 酚试剂(Follin-酚)法测定蛋白质 紫外吸收法测定蛋白质 凯氏(Kjeldahl)微量定氮法 考马斯亮蓝G—250染色法 如何测定血清中某一种蛋白质的浓度？ 分离后再测定
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量是双缩脲法的发民，所用
的试剂是由两部分组成的。第一部分相当于双缩脲试剂， 第二部分为Folin-酚试剂(磷钨酸和磷钼酸混合液)。因此， 反应的程序也是分两步进行的。第一步相当于双缩脲反应， 在碱性条件下蛋白质中的肽键与Cu2+作用生成络合物；
第二步是基于Folin试剂(磷钼酸和磷钨酸试剂)在碱性条件
下极不稳定，易被酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物 (呈蓝色反应)。由于蛋白质中含有带酚羟基的酪氨酸，故
Hale Waihona Puke 时，白/球比值变小，甚至倒置。
血清总蛋白增高： （1）血液浓缩，导致总蛋白浓度相对增高：严重腹泻、呕吐、 高热时急剧失水，血清总蛋白浓度可明显升高。休克时，由于 毛细血管通透性增加，血液中水分渗出血管。血液可发生浓缩， 慢性肾上腺皮质功能减退的患者，由于丢失钠的同时伴随水的 丢失，血浆也可出现浓缩现象。 （2）血浆蛋白质合成增加：主要见于球蛋白合成增加，多发 性骨髓瘤患者。 血清总蛋白降低： （1）血液稀释，导致总蛋白浓度相对降低：如静脉注射过多 低渗溶液或因各种原因引起的钠、水潴留。 （2）摄人不足和消耗增加：食物中长期缺乏蛋白质或慢性胃 肠道疾病所引起的消化吸收不良，因患消耗性疾病，如严重结 核病，甲状腺功能亢进，恶性肿瘤等，均可造成血清蛋白浓度 降低。 （3）蛋白质丢失：严重烧伤时大量血浆渗出，大量失血，肾 病综合征时大量蛋白尿，溃疡性结肠炎时肠道长期丢失一定量 的蛋白质，这些病理改变均可使血清总蛋白浓度降低。