第六节枸橼酸杆菌属
临床医学检验学主治医师：肠杆菌(强化练习)
临床医学检验学主治医师：肠杆菌（强化练习）1、单选在肠杆菌科的细菌鉴定中，选择性培养基的选择主要取决于（）.A.标本种类B.取材时间C.标本量的多少D.临床要求E.细菌的种类正确答案：A参考解析：血尿及穿刺液标本（江南博哥）不需选择培养基，而粪便标本则需接种于肠道选择培养基而排除正常菌群或污染菌的干扰。
2、单选苯丙氨酸脱胺酶试验阳性的细菌是（）.A.枸橼酸杆菌属B.哈夫尼亚菌属C.普罗威登斯菌属D.耶尔森菌属E.爱德华菌属正确答案：C参考解析：苯丙氨酸脱胺酶阳性、氧化酶阴性是变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属的共同特点.3、单选大肠埃希菌的IMViC试验结果为（）.A.++--B.--++C.+---D.-+--E.+-+-正确答案：A参考解析：大肠埃希菌的吲哚试验阳性、甲基红阳性、VP阴性、枸橼酸盐试验阴性。
4、单选对全部氨基青霉素、一代二代头孢菌素和一代喹诺酮类抗生素呈天然耐药的细菌是（）.A.大肠埃希菌B.恶臭假单胞菌C.粪产碱杆菌D.鲍曼不动杆菌E.铜绿假单胞菌正确答案：D参考解析：鲍曼不动杆菌对全部氨基青霉素、一代二代头孢菌素和一代喹诺酮类抗生素呈天然耐药。
5、单选患伤寒病后，带菌者最常见的带菌部位是（）.A.胆囊B.十二指肠C.胰腺D.肠系膜淋巴结E.直肠正确答案：A参考解析：伤寒沙门菌感染后常见的带菌部位是胆囊。
6、单选肠杆菌科细菌与O特异性血清反应时常不出现凝集反应，可采取的方法有（）.A.增加特异性血清的浓度B.增加用于反应的菌体量C.加热除去细菌表面抗原D.降低反应温度E.更换试剂正确答案：C参考解析：细菌表面抗原存在时能阻断O抗原与相应抗血清的凝集作用，加热60℃，30分钟可消除Vi抗原对O抗原的阻断作用。
7、单选鼠疫耶尔森菌的生物学性状描述正确的是（）.A.25℃动力阴性，37℃动力阳性B.无荚膜、鞭毛、芽孢C.生长迅速，繁殖快D.陈旧培养物上细菌形态呈现多样性E.在液体培养物上细菌形态呈现多形性正确答案：D参考解析：鼠疫耶尔森菌在陈旧培养物上呈明显多样性。
肠杆菌科细菌讲义
第五节变形杆菌属、普罗威登菌属、摩根菌属( Proteus , Providencia , Morgannella )为一群苯丙氨酸脱氨酶阳性细菌，是肠道正常菌群，亦是引起医源性感染的重要条件致病菌。
变形杆菌属包括4个种：普通变形杆菌(P.vulgaris，又分为生物2群和生物3群)、奇异变形杆菌( P.mirabilis)、潘氏变形杆菌(P.penneri) 、产粘变形杆菌( P.myxofaciens )。
广泛存在于泥土、水和被粪便污染的物质中。
与人类致病有关是前3种，普通变形杆菌和奇异变形杆菌能引起人的原发性和继发性感染，泌尿系感染的主要病原菌之一，还常引起伤口、呼吸道、新生儿脐带感染等，此外还能引起食物中毒，奇异变形杆菌是婴儿肠炎的病原菌之一。
潘氏变形杆菌是新近发现命名的，是引起医院感染的病原菌。
生物学性状：G-杆菌，呈多形性，有周身鞭毛，运动活泼，大多数菌株在普通琼脂平板上呈迁徙生长现象(可被石碳酸或胆盐等抑制)，产硫化氢、苯丙氨酸和脲酶均阳性，KIA 呈K(不发酵乳糖)/A++。
抗原构造；本属菌X19、X2、Xk的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，用这些菌株替代立克次体与患者血清作凝集反应，可作为立克次体病的辅助诊断，称外-斐反应。
普罗威登菌属包括5种：产碱普罗威登菌(P.alcalifaciens)、斯氏普罗威登菌(P.stuartii)、雷氏普罗威登菌(P.rettgeri)、拉氏普罗威登菌(P.rustigianii)和海氏普罗威登菌(P.heimbochae).与人类致病有关常见前3种，有碱化尿液的作用，促使尿结晶形成，与泌尿系统结石形成有关。
斯氏普罗威登菌和雷氏普罗威登菌可致泌尿道感染和其他肠外感染，并引起许多医院感染的爆发流行。
种间鉴定见书P174表17-16摩根菌属只有摩根摩根菌一个种，可致泌尿道和伤口感染，并与腹泻有关。
种属间鉴别如下：总鉴定见表17-17（P176）第六节耶尔森菌属(Yersinia)它包括7个种，与人类致病关系较大的有3种，即鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌。
枸橼酸杆菌属
11 95 1 0 5
89 40 9 10 0 20
11 40 1 2 85
0 99 0 0 0
44 0 5 10 0 10
10 0 0 0 10 0 10
杨氏
Ｄ枸橼酸杆菌各菌种生物特性
菌 名 吲 哚 Ｈ ２ Ｓ 60 100 0 0 67 尿 素 酶 47 100 100 100 0 鸟 氨 酸 93 0 100 100 0 Ｋ Ｃ Ｎ 100 100 100 0 100 丙 二 酸 0 100 100 100 100 蔗 糖 7 0 0 0 33 卫 矛 醇 33 0 100 0 0 阿 东 醇 0 0 0 0 0 棉 子 糖 7 0 0 0 0 密 二 糖 80 0 100 0 67
枸橼酸杆菌属
枸橼酸杆菌属包括弗劳地枸橼酸杆菌、异 型枸橼酸杆菌、无丙二酸枸橼酸杆菌、杨 氏枸橼酸杆菌、布氏枸橼酸杆菌、魏氏枸 橼酸杆菌、塞氏枸橼酸杆菌（C.rodentium) 等９个种．临床上以弗劳地枸橼酸杆菌最 为常见．
弗劳地枸橼酸杆菌
弗劳地枸橼酸杆菌 １形态与染色 革兰阴性杆菌，有鞭毛能动动， 无芽胞，无荚． ２培养特性 在血平板直２-４mm 、灰白色、湿 、 润、隆起、边缘整齐、不溶血菌落；在麦康凯中 等大小、红色、混浊的菌． ３生化反应 氧化酶阴性、发酵葡萄糖、不发酵 阿拉伯糖、水杨苷；甲基红、动力、ＯＮＰＧ和 硝还阳性、赖氨酸和ＶＰ试验，鸟氨酸脱羧酶均 为阴性，大多数菌株产Ｈ２Ｓ．
布氏 33 魏氏 0 塞氏 83
Ｃ.rode ntiun
0 0
DNA10
DNA11
100
67
67
0
100
பைடு நூலகம்
0
33
100
肠杆菌科细菌
20
临床意义 (Clinical Significance)
埃 希 菌 属
E.coli以肠道外感染多见，主要有泌尿系统感染 以肠道外感染多见， 以肠道外感染多见 E.coli中的致病菌株能引起各种类型的腹泻，根 中的致病菌株能引起各种类型的腹泻， 中的致病菌株能引起各种类型的腹泻 据其不同的血清型别、 据其不同的血清型别、毒力和临床症状 致泻性E.coli分为 类： 分为5类 致泻性 分为 肠毒素型大肠埃希菌 (ETEC) 肠致病性大肠埃希菌 (EPEC) 肠侵袭型大肠埃希菌 (EIEC) 肠出血型大肠埃希菌 (EHEC) 肠凝聚型大肠埃希菌 (EAggEC)
Enterobacteriaceae
17
Contents
1 2 3
Escherichia Shigella Salmonella
Escherichia, Shigella, and Salmonella are classified in the family Enterobacteriaceae. Species in these three genera are gram-negative rods that grow well on MacConkey agar.
Enterobacteriaceae
26
形态结构
埃 希 菌 属
形态：革兰阴性短杆菌 形态： 特殊结构： 特殊结构： 有鞭毛 无芽胞 少数有荚膜
Enterobacteriaceae
27
培养特性
埃 希 菌 属
对氧需求： 对氧需求：需氧或兼性厌氧 营养要求: 营养要求 不高 菌落: 圆形、扁平、 菌落 圆形、扁平、灰白色 血平板: 可有β-溶血环 血平板 可有β 溶血环 肠道鉴别培养基: 肠道鉴别培养基 可形成乳糖 发酵型菌落
枸橼酸杆菌属
肠杆菌科其他菌属细菌临床常见的还有枸橼酸杆菌属、肠杆菌属、沙雷菌属。
这些菌属细菌是医院内感染的常见病原茵，可引起泌尿道感染、呼吸道和伤口、菌血症、腹泻、肠道外感染及多菌混合感染，偶可引起脑膜炎和脑脓肿。
一、枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属目前包括弗劳地枸橼酸杆菌，科泽枸橼酸杆菌、丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌、布拉克枸橼酸杆菌、雷登枸橼酸杆菌、塞德拉克枸橼酸杆菌、沃克曼枸橼酸杆菌、杨氏枸橼酸杆菌、吉伦枸橼酸杆菌、穆利枸橼酸杆菌和法默枸橼酸杆菌等11个菌种。
DNA G+C含量为50～52mol％。
该菌属细菌为革兰阴性杆菌，有动力(周身鞭毛)、无芽胞、无荚膜。
兼性厌氧，营养要求不高，能在普通琼脂平板上生长良好。
在BAP上形成灰白色、湿润、隆起、边缘整齐，直径2～4mm的不溶血菌落。
在MAC上为无色透明或红色。
弗劳地枸橼酸杆菌可产生硫化氢，在SS和Hektoen(HE)琼脂上形成有黑色中心的菌落。
取可疑菌落(EMB上半透明，乳糖发酵菌株产生绿色金属光泽；MAC上无色透明或红色；SS上菌落中央黑色，周围透明；XLD上呈不透明红色)，将可疑菌落进一步鉴定到属和种。
枸橼酸杆菌的基本生化反应特征：TsIA中产酸／产酸产气或产碱／产酸、产气、产生硫化氢，枸橼酸盐阳性，脲酶阴性／阳性，吲哚阳性／阴性，动力阳性，V-P阴性，鸟氨酸阳性／阴性，精氨酸双水解酶阳性，赖氨酸脱羧酶阴性。
本菌属的生化反应与沙门菌属(亚属1和3)及爱德华菌属相似，应进一步鉴别。
与沙门菌属及爱德华菌属的主要鉴别点是赖氨酸脱羧酶阴性，其他鉴别要点见表9-18。
本菌属的部分生化特性和抗原性(O抗原)与沙门菌属相似，应注意鉴别。
弗劳地枸橼酸杆菌大部分菌株吲哚阴性，硫化氢多为阳性，而其他几个菌种相反。
枸橼酸杆菌属的主要生化特征和种间鉴别见表9-19。
枸橼酸杆菌属
枸橼酸杆菌的耐药机制
对喹诺酮类类药物的耐药机制 1.先天性耐药：是由药物靶位的敏感性和内 源性的多数药物溢出泵决定的，往往认为 是染色体介导机制 2.获得性耐药机制：是由质粒携带的喹诺酮 耐药决定因子，保护DNA旋转酶，使喹诺酮 类药物对其不产生作用
卫生部全国细菌耐药监测网2007 － 2008 年报告
枸橼酸杆菌的耐药机制
对β-内酰胺类抗菌药物的耐药机制 产生灭活酶：Ampc酶和ESBLs酶 对氨基糖苷类药物的耐药机制 修饰酶活性的改变，使氨基糖苷类修饰酶乙酰化，导 致氨基糖苷类结构的改变，阻止这类抗菌药物和它的 核糖体靶位相互作用，从而产生耐药 对碳青霉烯类药物的耐药机制 1. 产生灭活酶kpc酶 2.因膜孔蛋白的丢失导致细菌细胞膜结构的改变，外 膜通透性降低，使碳青霉烯类抗菌药物不能进入菌体 内部发生作用
2012年中国CHINET细菌耐药监测
从上表可以看出，2011年卫生部的耐药监测 和2012年CHINET的细菌耐药监测枸橼酸杆菌 属对各类抗生素耐药结果类似，对碳青霉烯类 耐药率仍然比较低，只有亚胺培南的耐药率不 到10%；对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮舒 巴坦、头孢吡肟和阿米卡星的耐药率低于27%； 但对环丙沙星的耐药率为31.9%，比卫生部 2011年的数据38.5%稍低。 可以看出碳青霉烯类抗菌药物的耐药性呈逐年 上升趋势，但目前仍然是治疗该菌的主要药物。
其中共收集肠杆菌科细菌134296株，弗劳地枸橼酸杆菌2003株，占1。5%
卫生部监测网2011年肠杆菌科细菌耐药监测
微生物检验实验室枸橼酸杆菌属标准操作规程
微生物检验实验室枸橼酸杆菌属标准操作规程1. 概述枸橼酸杆菌属包括弗劳地枸橼杆菌、异型枸橼酸杆菌、无丙二酸枸橼酸杆菌、魏氏枸橼酸杆菌、塞氏枸橼酸杆菌等11个种。
临床上以弗劳地枸橼酸杆菌最为常见。
2. 标本类型痰液、脑脊液、穿刺液、脓液、血液等标本。
3. 鉴定形态与染色：革兰阴性杆菌，有周鞭毛，能运动，无芽胞，无荚膜。
3.2 培养特性在血琼脂平板上形成直径2～4mm、灰白色、湿润、隆起、边缘整齐的不溶血菌落；在麦康凯琼脂平板上形成中等大小、红色、混浊的菌落；在中国蓝琼脂平板上形成中等大小、蓝色菌落。
异型枸橼酸杆菌在麦康凯琼脂平板上形成较大、黄色的菌落。
3.3 生化反应氧化酶试验阴性；发酵葡萄糖和甘露醇，不发酵阿拉伯糖，甲基红、动力、ONPG和硝酸盐还原试验阳性，赖氨酶脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、V-P试验均为阴性，大多数菌株产H2S.3.4 鉴别要点：3.4.1 本菌特征在麦康凯琼脂平板上多数呈粉红色菌落，赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶试验阴性，大多数菌株产H2S。
3.4.2 枸橼酸杆菌属各种之间的鉴别：见表5-44。
表5-44 枸橼酸杆菌属各种之间的生物学特性（阳性％）菌名吲哚H2S尿素酶鸟氨酸KCN丙二酸盐蔗糖卫矛醇阿东醇棉子糖蜜二糖弗劳地枸橼酸杆菌337844 08911 89 11 0 44 100异型枸橼酸杆菌99 0 75 99 0 95 40 40 99 0 0无丙二酸枸橼酸杆菌105 85 95991 9 1 0 5 0法氏枸橼酸杆菌100 59 10093102 0 100 100杨氏枸橼酸杆菌156580 5955 20 85 0 10 10布氏枸橼酸杆菌33647 9310 7 33 0 7 80魏氏枸橼酸杆菌01100 01100 0 0 0 0 0塞氏枸橼酸杆菌83 0 100 100 0 100 0 100 0 0 100C.rodentium0 0 100 100 0 100 0 0 0 0 0DNA基因种100670 01100 33 0 0 0 67DNA基因种11 106767 010 33 100 0 33 333.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验参见氧化酶试验标准操作规程。
枸橼酸杆菌肺炎护理
目录 护理措施 呼吸支持 营养支持 感染控制 并发症防治
护理措施
护理措施
早期识别和预防：对于高危人群， 应进行早期筛查，及时进行预防措 施，如接种疫苗和加强个人防护意 识。
病情观察和监测：密切监测患者的 体温、呼吸、血压、氧饱和度等指 标，及时发现病情变化并做出相应 处理。
肠内营养支持：对于不能口服或经胃管 摄入足够营养的患者，可考虑肠内营养 支持，通过肠道给予合适的营养补充。
感染控制
感染控制
严格隔离措施：对于枸橼酸杆 菌肺炎患者，应采取严密的隔 离措施，包括单间隔离、穿戴 防护服和戴口罩等。
手卫生：医护人员和患者应注 意常规的手卫生，包括频繁洗 手、使用消毒剂等，以减少交 叉感染的风险。
感染控制
环境清洁与消毒：对于患者接触过的物 品和空间，应进行彻底清洁和消毒，以 杀灭病原体和预防传播。
并发症防治
并发症防治
呼吸道感染：加强患者的护理，包 括保持呼吸道通畅、适当体位调整 、合理使用抗生素等，以预防或减 少呼吸道感染的发生。
营养不良：根据患者的营养状况， 适时调整饮食方案，并给予合适的 营养支持ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ以预防营养不良的发生 。
护理措施
药物治疗：根据患者具体情况，选择合 适的抗生素进行治疗，并根据病情调整 药物剂量和给药途径。
呼吸支持
呼吸支持
氧疗：根据患者氧合情况，给 予合适的氧气浓度和流速，维 持良好的氧合状态。
支气管扩张剂：根据患者的支 气管收缩情况，使用合适的支 气管扩张剂来缓解呼吸困难和 支气管痉挛。
呼吸支持
并发症防治
心血管并发症：密切监测患者的心血管 情况，包括血压、心率等指标，及时发 现并处理心血管并发症的发生。
临床微生物：变形杆菌属 枸橼酸杆菌属
变形杆菌属
Proteus
[′prəutju:s]
分类：
变形杆菌属（Proteus）：肠杆菌科成员， 现有5个种。
普通变形杆菌（P. vulgaris） 奇异变形杆菌（P. mirabilis） 产黏变形杆菌（P. myxofaciens） 潘氏变形杆菌（P. penneri） 豪氏变形杆菌（P. hauseri）
观察菌落(迁徙现象）→涂片革兰染色G-b→氧化 酶、葡萄糖ＯF(定科试验)→H2S + 、尿素酶+、 苯丙氨酸脱氨酶+ （定属）→种间鉴定。
IDENTIFICATION
Gram stain negative Facultative anaerobes Motile Rod shaped Oxidase negative Reduce nitrate positive Produce phenylalanine deaminase Produce urease H2S test positive Swarming growth phenomenon
潘氏
普通
豪氏
变形杆菌 变形杆菌 变形杆菌 变形杆菌 变形杆菌
－
－
－
+
+
鸟氨酸脱羧酶
+
－
－
－
－
七叶苷水解
－
－
－
+
－
麦芽糖发酵
－
+
+
+
+
木糖发酵
+
－
+
+
+
水杨苷水解
－
－
－
+
－
氯霉素敏感性
肠杆菌科细菌课件
•肠杆菌科细菌
•30
第七节 克雷伯菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
•肠杆菌科细菌
•31
肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）
产酸（催娩）克雷伯菌（K.axytoca）
解鸟氨酸克雷伯菌（K.ornithinolytica）
植生克雷伯菌（K.planticola）
土生克雷伯菌（K.terrigena）
•肠杆菌科细菌
•16
小肠结肠炎耶尔森菌
（一）细菌特性 （二）临床意义 （三）微生物学检验
•肠杆菌科细菌
•17
细菌特性
▪ 形态特征 ▪ 培养特性 ▪ 生化反应
•肠杆菌科细菌
•18
小肠结肠炎耶尔森菌革兰染色
•肠杆菌科细菌
•19
小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征（MAC）
•肠杆菌科细菌
•20
小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征（CIN琼脂平板) ：粉红色
肺炎克雷伯菌检验程序
•肠杆菌科细菌
•45
检验方法
1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定
•肠杆菌科细菌
•46
肺炎克雷伯菌荚膜肿胀试验
•肠杆菌科细菌
•47
第八节 肠杆菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
•肠杆菌科细菌
返回 •48
产气肠杆菌（E.aerogenes） 阴沟肠杆菌 （E.cloacea） 日勾维肠杆菌（E.gergoviae） 阪崎肠杆菌（E.sakazakii） 中间型肠杆菌（E.intermedium） 泰洛肠杆菌（E.taylorac） 河生肠杆菌（E.amnigenus） 阿氏肠杆菌（E.asburiac） 致癌肠杆菌（E.cancerogenus） 溶解肠杆菌（E.dissolvens） 超压肠杆菌（E.nimipressualis）
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1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定
肺炎克雷伯菌荚膜肿胀试验
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细菌特性
• 形态特征
• 培养特性 • 生化反应
肺炎克雷伯菌革兰染色
肺炎克雷伯菌电镜图
肺炎克雷伯菌荚膜染色
肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）
肺炎克雷伯菌的菌落特征（MAC）
肺炎克雷伯菌粘丝试验
肺炎克雷伯菌KIA（A A＋＋ ）、MIU（－－＋）
肺炎克雷伯菌IMViC试验（－－＋＋）
枸橼酸杆菌IMViC (＋－＋＋)
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第七节 克雷伯菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）
产酸（催娩）克雷伯菌（K.axytoca） 解鸟氨酸克雷伯菌（K.ornithinolytica） 植生克雷伯菌（K.planticola） 土生克雷伯菌（K.terrigena） 肺炎克雷伯菌又可分为3个亚种： 肺炎克雷伯菌肺炎亚种（subsp. pneumoniae） 肺炎克雷伯菌臭鼻亚种（subsp. ozaenae） 肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种（subsp. r h i n o s c l e r o m a t i s ）
临床意义
克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低 下的人群，是医院感染中最重要的条件 致病菌。
所致疾病：肺炎、脑膜炎、腹膜炎、 泌尿系统感染、败血症
微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
肺炎克雷伯菌易产生超广谱β-内酰胺酶 （ESBL），近年来文献报道我国产酶率已 达30%左右，产酶株对青霉素类、第1、2、 3代头孢菌素及单环β-内酰胺类抗生素均产 生耐药，而仅对头霉素类、碳青霉烯类及 酶抑制剂敏感。ESBL检测现已作为医院细 菌室常规检测项目。
第六节 枸橼酸杆菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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• 弗劳地枸橼酸杆菌（C.freundii） • 异型枸橼酸杆菌（C.diversus） • 无丙二酸盐枸橼酸杆菌 （C.amalonaticus）
细菌特性
• 形态特征
• 培养特性 • 生化反应
弗劳地枸橼酸杆菌菌落特征（MAC）