遗传性血色病的实验室诊断
遗传性血色病的实验室诊断
遗传性血色病的实验室诊断【摘要】遗传性血色病是一组由基因突变引起的遗传性疾病，主要包括地中海贫血、珠蛋白病和镰状细胞性贫血等。
临床表现多样，常见的症状包括贫血、黄疸、肝脾肿大等。
实验室检查是诊断遗传性血色病的重要手段，包括血常规、血红蛋白电泳等。
遗传学分析和分子诊断技术可以帮助确定病因和进行遗传咨询。
治疗方案主要包括输血治疗、脾切除术和骨髓移植等。
实验室诊断在遗传性血色病中起着至关重要的作用，可以帮助医生准确诊断病情并制定合理的治疗方案，从而提高患者的生存率和生活质量。
加强实验室诊断的重要性不可忽视。
【关键词】遗传性血色病、实验室诊断、临床表现、遗传学分析、分子诊断技术、治疗方案、实验室诊断的重要性1. 引言1.1 遗传性血色病的概述遗传性血色病是一类遗传性疾病，主要表现为红细胞中的血色素合成缺陷，导致血红蛋白异常。
这些疾病包括地中海贫血、镰状细胞贫血、珠蛋白疾病等。
遗传性血色病主要受遗传因素影响，通常是由基因突变导致血红蛋白合成异常。
患者常常表现出贫血、黄疸、肝脾肿大等症状，严重者甚至会导致贫血危及生命。
在临床上，遗传性血色病的诊断需要结合临床表现、实验室检查和遗传学分析等多方面的信息，以确保准确诊断和合理治疗。
通过分子诊断技术，可以更精准地鉴定病因基因的突变，为个体化治疗提供重要参考。
治疗方案主要包括输血、药物治疗、干细胞移植等，早期诊断和治疗对提高患者的生存率和生活质量至关重要。
实验室诊断在遗传性血色病中起着重要作用，能够帮助医生准确诊断疾病，制定合理治疗方案，提高患者的生存率和生活质量。
2. 正文2.1 临床表现遗传性血色病的临床表现是多样化的，取决于疾病的类型和严重程度。
最常见的遗传性血色病包括地中海贫血、镰状细胞病和珍珠贫血。
患有地中海贫血的患者通常在婴儿期或儿童时出现贫血的症状，包括乏力、疲倦、头晕和心悸。
他们还可能出现黄疸、脾脏肿大和生长迟缓。
严重的地中海贫血患者可能需要定期输血来维持血红细胞水平。
遗传性血色病的实验室诊断
遗传性血色病的实验室诊断遗传性血色病是一类由单个基因突变引起的遗传性疾病，主要表现为红细胞形态异常、溶血、贫血等，早期诊断和治疗可明显改善患者生活质量。
因此，实验室诊断成为遗传性血色病的重要手段之一。
一、临床表现遗传性血色病的临床症状和体征与突变基因的不同类型有关。
其中，最常见的两种类型为镰状细胞贫血和地中海贫血。
镰状细胞贫血表现为患者血红蛋白S含量增加，红细胞形态异常，易口腔溃疡及骨髓坏死等。
地中海贫血表现为患者血红蛋白含量降低，红细胞数量减少，易出现感染、黄疸、肝脾肿大等。
二、实验室检查1. 血常规检查遗传性血色病患者的血常规检查通常呈现贫血、血红蛋白水平降低等异常。
镰状细胞贫血患者的血涂片中出现镰状红细胞等形态异常细胞。
3. 血红蛋白电泳血红蛋白电泳是用来确定患者的血红蛋白类型的一种常用检查方法。
不同的血红蛋白类型代表不同的基因突变类型，因此可以用来确定遗传性血色病的类型。
镰状细胞贫血患者血红蛋白Electrophoresis呈现相应的血红蛋白S带，地中海贫血患者呈现相应的血红蛋白F带或E带。
4. 基因突变分析基因突变分析是确定遗传性血色病突变基因类型的重要手段。
针对不同类型的遗传性血色病，目前已经开发出了许多基因突变分析方法。
例如，针对镰状细胞贫血，可以通过寻找β-球蛋白基因中常见的HbS突变进行分析。
针对地中海贫血，可通过β-球蛋白、α-球蛋白和肌红蛋白基因等进行分析。
三、遗传咨询遗传性血色病属于遗传性疾病，因此根据所得到的检查结果，对患者和其家庭成员进行遗传咨询是非常必要的。
遗传咨询应当包括疾病的遗传方式、风险评估、数字基因检测等建议。
四、结论实验室诊断对于遗传性血色病的早期诊断和治疗具有重要的意义，可以帮助患者提高生活质量和延长寿命。
同时，实验室诊断应当结合临床体征和病史来进行，不仅可以更好地诊断疾病，还能指导遗传咨询和个性化治疗。
血色病诊断标准
血色病诊断标准
血色病是一种罕见的遗传性疾病，主要表现为患者皮肤和黏膜呈现鲜红色。
由
于其罕见性和独特的症状，血色病的诊断一直是一个难题。
为了帮助临床医生更准确地诊断血色病，制定了以下的血色病诊断标准。
一、临床表现。
1. 皮肤和黏膜呈现鲜红色，无瘙痒感和疼痛感。
2. 患者在出生后不久即出现鲜红色皮肤，随着年龄增长，颜色不会改变或减轻。
3. 除了皮肤和黏膜颜色异常外，患者无其他明显症状。
二、家族史。
1. 患者有家族史，患者的父母或近亲中有人患有相似的症状。
2. 家族中有多人患有血色病的情况。
三、实验室检查。
1. 血液检查，患者血液中的红细胞数量和血红蛋白浓度正常。
2. 基因检测，通过基因检测可以发现患者携带了与血色病相关的基因突变。
四、皮肤活检。
1. 皮肤活检显示表皮和真皮的毛细血管扩张，血管壁增厚，毛细血管内有红细
胞充盈。
五、其他相关检查。
1. 排除其他原因引起的皮肤红斑，如过敏性皮炎、药物反应等。
2. 对于疑难病例，可进行皮肤病理学检查，以排除其他皮肤病。
六、诊断标准。
根据临床表现、家族史、实验室检查和皮肤活检等综合分析，如符合以上标准，可诊断为血色病。
血色病是一种罕见的疾病，但随着对其认识的不断深入，诊断和治疗都有了较
大的进展。
希望通过本文提出的血色病诊断标准，能够帮助临床医生更准确地诊断血色病，为患者提供更好的治疗和管理。
遗传性血色沉积病的研究
遗传性血色沉积病的研究遗传性血色素沉着病是一种以铁过度沉积导致组织损伤为特征的遗传性疾病。
临床表现包括全身症状、肝脏病变、心肌病、糖尿病、勃起功能障碍及关节病。
可根据血清铁蛋白水平、铁含量及转铁蛋白饱和度升高以及基因检测进行确诊。
治疗通常为连续性静脉放血。
病因遗传性血色病有4种类型，分为1到4，取决于基因的突变1型：HFE 基因突变2型(青少年血色病)：HJV 和HAMP 基因突变3型：TFR2 基因突变4型(转铁蛋白病)：SLC40A1 基因突变其他罕见的遗传性疾病可引起肝脏铁过载，但临床症状常以其他器官功能衰竭所引起的症状和体征为主(如，低转运蛋白血症或无转运蛋白血症引起的贫血，或无铜蓝蛋白血症所引起的神经障碍)。
尽管不同类型的发病年龄有很大差异，但铁过载的临床结局是相似的。
1型遗传性血色病1型是经典的遗传性血色病，也称为HFE- 相关的血色素沉着症。
80%以上的患者是C282Y 纯合突变或C282Y/H63D 复合型杂合突变。
该病为常染色体隐性遗传，在北欧血统中，该病的纯合子频率为1:200，杂合子频率为1：8。
在黑人和极少的亚洲人中，该病不常见。
伴有临床血色病的患者，83%是纯合子。
然而，原因仍不明确的是，通过基因频率所预测的疾病表型(临床疾病)不常见(即，许多纯合的人不出现该疾病)。
2型遗传性血色病2型遗传性血色病(青少年血色病)是一种罕见的由HJV基因或HAMP基因突变引起的常染色体隐性遗传疾病，HJV基因可影响转录蛋白铁调素调节蛋白，HAMP基因则直接编码铁调素。
其常出现在青少年中。
3型遗传性血色病转铁蛋白受体2(TFR2)是一种调节转铁蛋白饱和度的蛋白，它的突变可导致一种罕见的常染色体隐性遗传的血色病。
4型遗传性血色病4型遗传性血色病(铁转运蛋白病)大多发生于南欧血统的人群中。
它由常染色体显性基因SLC40A1突变所引起，并影响膜铁转运蛋白结合铁调素的能力。
转铁蛋白和铜蓝蛋白缺乏在转铁蛋白缺乏时(低转铁蛋白血症或无转铁蛋白血症)，被吸收的铁进入门静脉系统不与转铁蛋白结合而沉积于肝脏中。
遗传性血色病1例报告
￣ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ； 血清铁 ４ ４ ． ０ ０￣ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ， 总铁结合力 ３ １ ． ８ ０
￣ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ； 铁 蛋 白测定 回示 ： 血 清铁蛋 白２ ８ ６ ３ ． ０ ０ ｇ ／ Ｌ； 凝 血测 定 功 能示 ： 凝血酶原活动度 ７ ２ ％； 甲、 乙、
中图分类号 ： Ｒ ５ ８ ９ ． ９
文献标 志码 ： Ｂ
文章编号 ： １ ０ ０ ２ － ２ ６ ６ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） ３ ８ ￣０ ９ １ － ０ ２
遗传 性血 色病 （ Ｈ ＨＣ ） 是指 先 天 性铁 代 谢 障 碍 ，
体 内过多 的铁 在肝 脏 、 胰腺、 心脏 、 皮肤 等器 官 、 组 织
明显增 大 ， 增厚 ， 约 达 ９个 肋 单元 ， 未见 明显 异 常密
度影 ， 脾 门区及脾 脏前 方各 见一 小 圆形 结节 影 ， 边 界 清 晰光整 ， 增强 扫描 与脾脏 同步 强化 。ＭＲ Ｉ 示： 肝 脏 体积增 大 ， 肝脏 实 质 信 号 在 Ｔ １ ＷＩ ／ Ｔ ２ ＷＩ 均 匀 减低 ， 呈极低 信号 ， 肝 内未 见 明确 占位 性病 灶 。脾 脏 体 积 增大 ， Ｔ １ ＷＩ ／ Ｔ ２ ＷＩ 信号亦均匀减低 ， 水 脂 反 相 位见 点状信 号影 。脾 静脉 迂 曲 ， 扩张 ， 门静 脉及左 右分 支 明显 扩张 ， 门静 脉 内径 约 １ ６ ｍ ｍ： 肝 内外 胆管 未见 扩 张， 胆总管显示纤细 ， 肝 脾 周 围未 见 积 液 。ＭＲ Ｉ 诊
谷氨酰基 转 移 酶 （ ｒ — Ｇ Ｇ Ｔ ） ６ ７ Ｕ ／ Ｌ ； 血 常 规 ：ＷＢ Ｃ
３ ． ７ ２× １ ０ ／ Ｌ ，Ｐ Ｉ １ ７ ２ ×１ ０ ／ Ｌ ； 血肌酐 （ Ｃ ｒ ）７ ８
遗传性血色病的诊断及治疗-2022年学习资料
ALT and AST-■-65%的患者轻度升高-■升高程度与肝脏的炎症与肝细胞的坏死无-关-与血清铁或转 蛋自饱和度相关的AST and-ALT的显著升高，可能不单是HH,更可能-伴有其他炎症性病变-27
肝活检-曾是诊断HH的金标准-·目前用于评估确诊为HH患者的预后-28
肝活检的用途-·评价肝纤维化的程度-·对铁沉积进行定量或定性检测-29
血色病-广义的血色病Hemochromatosis,HC-是指铁过量沉积于肝脏、胰腺、心脏及其-他实质器官 并对这些器官的结构和功能-造成损害的疾病状态。-遗传性血色病Hereditary-hemochromato is HH-是由于先天-性铁代谢异常造成上述结果的遗传性疾病。-继发性血色病是由于其他疾病或治疗措施-所导 体内铁过度沉积。-5
■Perls'蓝染色-HIC肝铁浓度-<1800μg/g干重-■H肝铁指数-铁沉积速率的指标->1.9 m l/g/y是HH发生的强有力证据-30
预测价值-HIC水平不超过14,000μg/g干重的患者不-会进展到肝纤维化-Sallie RW,et a .Gut 1991:32:207-210.-·40岁以前不会发生肝纤维化-Bacon BR,et al.A n Int Med 1999;130:953-962.-31
血清铁蛋白-铁贮存的一种形式-√贮存于肝脏，脾，网状内皮系统-可被再利用-也是一种急性时相蛋白-√缺乏敏感 -22
血清铁蛋白升高的原因-HH:确诊的HH患者中，>1O00ug/L是肝纤维化-肝硬化程度的较为准确的预测因子 慢性肝病-酒精性肝病-组织细胞病：>100000ugL见于恶性组织细胞病-肝癌-甲亢-成人Stis病-慢性 症-23
遗传性血色病的诊断及治疗
血色病诊断标准
血色病诊断标准血色病是一种罕见的遗传性疾病，主要表现为患者皮肤和眼球的色素沉着增加，导致皮肤和眼球呈现出深红色或棕褐色。
这种疾病对患者的生活和健康造成了严重影响，因此对血色病的诊断非常重要。
以下是血色病的诊断标准，供医生和患者参考。
一、临床表现。
1. 皮肤色素沉着增加，呈现出深红色或棕褐色。
2. 眼球色素沉着增加，眼白呈现出深红色或棕褐色。
3. 皮肤和眼球的色素沉着呈进行性增加趋势。
二、实验室检查。
1. 皮肤组织活检，镜下观察可见黑色素细胞数目明显增多，且色素颗粒呈现出深红色或棕褐色。
2. 血液检查，血清黑色素含量显著增加。
3. 基因检测，通过基因检测可发现相关基因发生突变。
三、影像学检查。
1. 皮肤超声，可见皮肤下黑色素沉着增加。
2. 眼科检查，眼底检查可见眼球黑色素沉着增加。
四、诊断标准。
根据患者的临床表现、实验室检查和影像学检查结果，结合家族史和遗传学检测，可以进行血色病的诊断。
五、鉴别诊断。
1. 霍奇金淋巴瘤，需通过淋巴组织活检和淋巴细胞免疫表型鉴别。
2. 黑色素瘤，需通过皮肤组织活检和黑色素瘤特异抗原鉴别。
六、治疗。
目前尚无特效治疗方法，对症治疗和遗传咨询是目前的主要治疗手段。
七、预后。
血色病是一种进行性疾病，预后较差，患者的生活质量受到严重影响。
八、结语。
血色病是一种罕见的遗传性疾病，对患者的生活和健康造成了严重影响。
准确的诊断对于指导治疗和遗传咨询非常重要，希望医生和患者能够加强对血色病的认识，早日找到有效的治疗方法，提高患者的生活质量。
遗传性出血病的临床检测和基因诊断(王鸿利)
2001;39(12):1204~1208 )
血友病A间接连锁分析
LOGO
DXS15 • 联合9个多态性位点及性别
DXS9901 DXS52
基因位点，累积识别能力
G6PD DXS1073
99.6%
F8Civs13
F8C
F8Civs22 BclI
突变基因功能研究
LOGO
构建突变基因cDNA的表达载体
转染真核细胞
活性与抗 原检测
生物代谢 标记
免疫荧 光染色
定量 PCR
Western 印迹
国际首报14种突变基因致病的分子基础
LOGO
血友病携带者和产前诊断
LOGO
传统方法 采集羊水
血友病携带者和产前诊断
LOGO
外周血DNA抽提（携带者） 羊水DNA抽提（胎儿）
5 8.2
34.1%
IVS1+5 G>T 10961T> G
剪接位点 Peyvandi
F
His348Gl 催化区 [2000]
n
Akira K. [2000]
国际首次报道的基因突变
LOGO
vWF基因大片段缺失致病的分子基础 LOGO
63kb/PCR
5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
遗传性出血病临床检测和基因诊断
上海交通大学医学院附属瑞金医院 王鸿利 2007.4
研究对象
表1 遗传性出血病的研究
LOGO
技术平台LOGO来自建立技术平台临床表现→家系调查 表型检测 基因诊断
突变基因的功能研究 携带者和产前诊断
血色病(陆道培)
血色病(陆道培）血色病(hematochromatosis)又称遗传性血色病，它是由于第6号染色体存在两个血色病突变基因而导致的铁代谢异常。
过去有许多名称，如色素性肝硬化、古铜色糖尿病等。
到1889年von Reckling-hausen对这类病例仔细观察发现患者体内大部分器官有铁色素沉着，这些铁色素来源自红细胞中的血红蛋白，而称之为血色病，这个名称一直沿用至今。
血色病描述血色病(hematochromatosis)又称遗传性血色病，它是由于第6号染色体存在两个血色病突变基因而导致的铁代谢异常。
过去有许多名称，如色素性肝硬化、古铜色糖尿病等。
到1889年vonReckling-hausen对这类病例仔细观察发现患者体内大部分器官有铁色素沉着，这些铁色素来源自红细胞中的血红蛋白，而称之为血色病，这个名称一直沿用至今。
现认为这是一种铁代谢紊乱，导致不相宜的自饮食中铁吸收增多，与人类白细胞抗原(HLA)相关的常染色体隐性遗传的铁负荷过多性疾病。
它与继发性铁负荷过多不同，后者是有一定原因导致铁负荷过多，而血色病的原因不明，故称之为原发性铁负荷过多，而大多血色病病例有遗传因素，故称为遗传性血色病。
血色病是因组织中铁的沉积过多而发生的全身性疾病。
血色病分原发性和继发性两类。
原发性血色病是一种隐性遗传性疾病，男性多见。
继发性血色病主要由于严重的慢性贫血(重型β海洋性贫血和再生障碍性贫血)长期大量输血(一般在输血100次以上)以后，造成体内铁贮积过多所致，也有少数病例因多年摄入大量药物性铁或饮食中的铁后发生。
相当多的患者嗜酒，某些酒中铁含量较高，酒精又能刺激铁的吸收，长期纵酒者肝功能损害也能增加铁的吸收。
由于病人体内许多组织中铁的沉积过多，加上纤维组织增生，以至损害脏器的功能。
临床表现为皮肤色素沉着、肥大性肝硬变和肝功能不正常、糖尿病、心功能紊乱和男性性功能不全等。
由于约有50%～90%病人黑色素沉着，皮肤呈青铜色，而且常有糖尿病的表现，所以又有人称它为“青铜色糖尿病”。
遗传性血色病的实验室诊断
遗传性血色病的实验室诊断遗传性血色病是一种常见的遗传性血液疾病，主要表现为红细胞数量减少和红细胞形态异常，导致贫血、黄疸和脾脏肿大等症状。
在实验室诊断中，需要进行一系列的检查来确定诊断和评估疾病的严重程度。
1. 血常规检查：血常规检查是最常用的实验室诊断方法之一，可以观察患者的红细胞数量、血红蛋白水平和红细胞形态。
遗传性血色病患者通常会表现为贫血和红细胞形态异常，如红细胞变形、大小不规则等。
2. 血涂片检查：血涂片检查是观察患者的血液形态学的重要方法，可以直接观察红细胞的形态，并可以发现红细胞的变形、溶解和沉积情况。
这种检查有助于快速发现遗传性血色病患者的红细胞形态异常。
3. 血红蛋白电泳：血红蛋白电泳是一种常用的实验室诊断方法，可以分离红细胞内的各种血红蛋白，并检测其含量和性质。
对于遗传性血色病患者来说，血红蛋白电泳可以帮助确定患者的血红蛋白类型和含量，进一步确认诊断。
4. 血清铁蛋白测定：血清铁蛋白测定是检测患者体内铁代谢情况的重要方法，可以帮助评估患者的贫血程度和铁代谢的异常情况。
对于遗传性血色病患者来说，血清铁蛋白测定可以帮助评估患者的贫血程度和确定可能存在的铁代谢异常。
5. 红细胞变形指数测定：红细胞变形指数测定是一种通过测定红细胞形态学指数来评估红细胞形态的变形情况的方法。
对于遗传性血色病患者来说，红细胞变形指数测定可以直观地评估红细胞的形态变化，进一步辅助诊断。
6. 骨髓穿刺检查：对于一些不典型的遗传性血色病患者，骨髓穿刺检查是必要的实验室诊断方法之一。
通过骨髓穿刺可以观察患者骨髓内红细胞的形态和数量，进一步确认诊断。
在实验室诊断遗传性血色病时，需要结合临床症状和其他辅助检查结果，综合分析患者的血液学指标，最终确定诊断和制定治疗方案。
需要注意排除其他原因引起的贫血，如营养不良、慢性病和某些药物的影响等，以避免误诊。
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基础研究遗传性血色病的实验室诊断郑林文福州总医院第二附属医院检验科 福建省宁德市 352100【摘 要】目的：探讨遗传性血色病的临床特点，评价血清铁指标、MRI、肝穿病理学检查在遗传性血色病诊断中的作用，并对遗传性血色病的相关疾病基因HFE进行突变分析。
方法：患者，女。
因肝功异常就诊，进行临床、血清铁指标、胸腹部MRI、病理组织学和特殊染色的观察，并通过PCR及DNA序列测定等方法对与该病相关的HFE基因进行分析。
结果：转铁蛋白饱和度、铁蛋白异常；肝穿病理检查，肝铁沉积过多；胸腹部MRI显示肝脏有金属沉积；该病相关的HFE基因突变位点有待进一步查找。
结论：遗传性血色病患者在我国较少见，临床特点不明显，诊断困难，尤其是遗传性血色病早期患者更难诊断，通过分子生物学方法诊断该病将变得更为重要。
以上探讨为该病的进一步研究奠定了基础。
【关键词】遗传性血色病；HFE基因；MRI；肝脏；诊断遗传性血色病最先在1935年由Sheldon系统描述，其症状常在成年后才表现出来，且无特异性，诊断较困难。
其诊断方法仍然主要依赖患者的临床表现，包括临床起病特点、多实质脏器功能损害的临床表现等以及家族史、有无近亲婚配史、遗传方式、影像学检查和机体铁负荷程度检测(尤其是血清转铁蛋白饱和度、铁蛋白水平和肝铁含量测定)。
Feder等[1] (1996)把遗传性血色病基因限定在多态性位点D6S2238和D6S2241之间的240kb的范围内，并在该区域内克隆了遗传性血色病基因全长CDNA，鉴于遗传性血色病基因与HLA家族基因具有较高的同源性，故把遗传性血色病基因命名为HLA—H基因，且发现遗传性血色病基因突变是本病患者发病的分子遗传学基础。
患者通过临床诊断为遗传性血色病，为了找到该病的基因突变为点，根据文献报道和研究发现HFE 基因变异是遗传性血色病的主要发病原因，故从HFE基因入手进行筛查。
1 资料与方法1.1 一般资料患者，女，22岁，有一妹17岁患糖尿病夭折，因肝功异常就诊。
从患者的临床表现、影像学检查、机体铁负荷程度检测(尤其是血清转铁蛋白饱和度、铁蛋白水平和肝铁含量测定)等各方面进行诊断。
其皮肤黏膜色素有沉着，经铁生化指标检测、MRI及肝穿诊断为遗传性血色病。
遗传性血色病的诊断标准：（1）排除引起继发性血色病(溶血性贫血、多次大量输血、慢性肝病等)的疾病；（2）参照美国肝病学会关于遗传性血色病诊治指南的建议：存在遗传性血色病的症状或体征，和(或)铁生化指标异常；肝穿病理学检查证实铁的沉积或腹部磁共振(MRI)证实肝脏大量铁沉积；（3）结合遗传病学家系调查。
1.2 方法（1）患者检查血清铁(SI)、血清铁蛋白(SF)、转铁蛋白饱和度(TS)、血常规、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶（AST）、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)和血糖。
行肝穿病理学检查，肝组织行HE染色，并做了腹部MRI、CT和彩色B超。
（2）采用碘化钾法提取外周静脉血白细胞DNA。
设计6对PCR引物（上海生工公司合成），扩增HFE基因6个外显子，PCR反应条件：94℃预变性5min，94℃，30s；55℃，30s；72℃，30s；共35个循环，最后一个循环结束后继续在72℃延伸5min。
取PCR产物5µl在2%的琼脂糖凝胶上进行电泳，100伏电压下电泳40分钟后，用Fluor-S凝胶成像系统进行照相，看电泳条带是否与预期大小相符。
PCR产物按常规在1.5%的琼脂糖凝胶上进行电泳，此时应保证电泳缓冲液为新鲜配置的，100伏电压下电泳40分钟后，在紫外灯下切下含预期区带的凝胶块，用上海生工公司的胶回收试剂盒回收DNA。
PCR产物纯化后，以相应引物，委托上海生工公司在ABI PRISM 3730上进行DNA序列测定。
2 结果（1）患者血清铁(SI)、血清铁蛋白(SF)、转铁蛋白饱和度(TS)均偏高。
（2）肝脏穿刺术，肝脏病理回报：肝小叶结构局灶存在，局灶紊乱，肝细胞内可见大量大小不等的高密度脂褐素沉积，其中可见细小颗粒状物质，有的颗粒弥漫分布，有的聚集成堆，有时可见单位膜包绕，脂褐素主要集中在毛细胆管附近，部分肝细胞脂滴存在，肝细胞核及其他细胞器无明显异常窦间隙内及小叶间纤维组织增生无炎症细胞浸润。
送检的组织中间2个汇管区明显增大，纤维组织增生，弓形纤维形成，少许炎症细胞浸润。
结合临床及电镜超微结构特点诊断血色病伴肝纤维化。
（3）腹部MRI和彩色超声诊断。
超声所见：肝脏形态正常，左肝大小10.24×3.64cm，右肝肋间厚约11.56cm，实质回声，肝门处探及多个实性偏低回声区，较大约1.53×1.20cm，边界清，胆囊，胰腺，脾脏正常。
超声诊断：肝门处多发实性肿块，考虑肿大淋巴结，肝、胆、胰、脾未见异常。
磁共振：（上腹部）肝脏大小形态正常，左右肝比例正常，边沿光整，肝内信号普遍下降，于T1WI及T2WI上均呈低信号尚均匀，增强扫描普遍无强化，肝门区有轻度片状强化（此两处强化可能为正常的肝岛），提示有重金属类沉积。
（4）腹部CT显示肝脏有高密度物质沉积。
（5）琼脂糖凝胶电泳分析片断大小。
PCR产物经2%的琼脂糖凝胶电泳时，出现特异性区带分别为：E1:300bp；E2:396bp；E3:500bp；E4:390bp；E5:348bp；E6: 220bp，与预期大小相符（6）序列比对分析结果。
应用PCR及测序方法对一例遗传性血色病家系先证<<下转55页542019.04基础研究血浆D-二聚体与同型半胱氨酸联合检测的效果评价乔莉芳甘肃省甘南州人民医院 甘肃省甘南州 747000【摘 要】目的：研究在尿常规临床检验中使用血浆D-二聚体联合同型半胱氨酸检测对检验结果的影响作用。
方法：本文涉及的入组资料为2017年9月至2018年9月期间参与诊治的80例本院接受的住院患者，遵守是否发生下肢深静脉血栓分为参照组与实验组，每组入组患者即为40例，实验组为下肢深静脉血栓患者，参照组为不发生下肢深静脉血栓患者，均开展D-二聚体联合同型半胱氨酸检测，对比参照组与实验组本院接受的住院患者凝血功能指标（APTT、PT）、血浆D-二聚体水平、同型半胱氨酸水平。
结果：和实验组相关数据比较，参照组本院接受的住院患者APTT、PT、血浆D-二聚体水平、同型半胱氨酸水平得到显著变化，P<0.05，组间指标数据展现本次的统计学意义。
结论：将血浆D-二聚体联合同型半胱氨酸检测应用在尿常规临床检验中获得更好的检验结果。
【关键词】血浆D-二聚体；同型半胱氨酸；早期下肢深静脉血栓下肢深静脉血栓（DVT）形成属于潜在的一种静脉回流障碍性疾病，下肢深静脉血栓早期的临床症状并不明显，很难察觉，进而增加临床诊断难度，如不能予以患者及时治疗，容易发生肺栓塞等情况，严重的可能发生昏迷，但在尚未产生下肢深静脉血栓前予以患者使用抗凝药物，可能将出血风险增加，因此，临床早期诊断下肢深静脉血栓中主要应用下肢深静脉血栓造影，且是判断的金标准，但因属于侵入性操作，存在较高成本，不能全面的推广[1]。
本文评估了血浆D-二聚体联合同型者的HFE基因进行突变分析，在其HFE 基因全长编码区均未发现突变位点3 讨论遗传性血色病在西方国家常见，近年来，随着HFE基因、HJV基因、转铁蛋白受体2（TfR2）、膜铁转运蛋白（FPI）和铁调素的相继发现，遗传性血色病的相关研究获得突破性进展。
遗传性血色病可能在白种人中是最常见的常染色体隐性遗传性疾病。
以上资料结果显示，该名患者应考虑遗传性血色病的可能，一旦遗传性血色病诊断明确，应详细询问家族史，及时行家系筛查，并争取早发现、早诊断、早治疗。
遗传性血色病采用的放血治疗，并不为早期患者所接受。
铁螯合剂疗效有限，毒性较大，价格贵。
随着人们对铁代谢生理机制认识的深人。
新型祛铁药物将会更好地为HHC患者服务。
分子诊断不仅可以确定患者的基因突变位点、突变类型、氨基酸改变情况和患半胱氨酸检测使用在2017年9月至2018年9月期间参与诊治的80例本院接受的住院患者中的临床价值。
1 资料与方法1.1 基础资料以本院2017年9月至2018年9月期间参与诊治的80例本院接受的住院患者作为入组研究资料，依据是否发生下肢深静脉血栓区分为两组。
参照组收入40例，女性患者21例，者家系其他成员的基因型，还可以为遗传咨询、产前诊断提供依据。
本研究从基因组DNA途径入手，应用PCR及测序方法对一例遗传性血色病家系先证者的HFE基因进行突变分析，在其HFE基因全长编码区均未发现突变位点。
进一步验证了TsuiWM[2]和Koyama C[3]等人的观点。
根据国内外研究资料，还需要从其他的遗传性血色病相关基因上去寻找突变位点。
一定规模的HHC相关基因的调节也是迫切需要尽早开展的。
这样的研究可以使我们能较为清晰地了解我国HHC疾病的发生率及相关基因突变类型，有利于开展更为深入的治疗学研究。
参考文献[1]Feder JN, Gnirke A, Thomas W,et a1. A novel MHC class I likegene is mutated in patients withhereditary hemochromatosis[J].男性患者19例，年龄数值上限是70岁，年龄数值下限是33岁，中位年龄数值（51.55±4.54）岁；实验组收入40例，女性患者20例，男性患者20例，年龄数值上限是71岁，年龄数值下限是35岁，中位年龄数值（52.55±5.34）岁。
对两组基础资料实施统计学比较，P>0.05，无数据之间分析意义。
纳入标准：实验组即为符合下肢深静脉血栓早期判断标准，两组患者均表示自愿签订本院给出的知晓同意书，且对本医Nature Genet, 1996,13(4):399-408.[2]Tsui WM, Lam PW, Lee KC, et a1.The C282Y mutation of the HFEgene is not found in Chineseh e m o c h r o m a t o s i s p a t i e n t s:m u l t i c e n t r e r e t r o s p e c t i v es t u d y[J].H o n g K o n g M e d,2000,6:153-158.[3]Koyama C, Wakusawa S, Hayashi H,et a1. A Japanese family withferroprive disease caused by anovel mutation of SLC40A1 gene:hyper ferilinemia associated witha relatively low transferringsaturation of iron[J]. Intern Med,2005,44:990-993.作者简介郑林文，男，大学本科学历，现有职称：主管技师。