超高效液相色谱_电喷雾串联四极杆_省略_法测定尿液中9种_2_受体激动剂_贾晓飞3
超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱法
超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱法超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱（UPLC-ESI-QTOF）作为一种分离分析技术，其良好的分离特性和高灵敏度、高选择度，使其能被广泛应用于药物含量分析，药物分子结构研究，物质成分探测等方面。
UPLC-ESI-QTOF是一种高灵敏度，分离度佳的技术，它能够将沉淀物的体积缩小2-5倍，提供有效的溶液体积。
通过两步模式的离子型和质谱分析，可以获得药物的良好的结构分析、定性和定量信息。
利用电喷雾增强的飞行时间（ESI），可以得到良好的分子结构，能够准确的测得复杂的实验样本中的质量分子。
UPLC-ESI-QTOF系统采用质谱数据对实验样本进行精确分析，最小检测浓度低，可以辨识出各种复杂物质中具有特殊反应性质的物种成分。
通过建立等质谱图，获得样品中所有分子的质量，从而还原药物物质结构。
此外，在UPLC-ESI-QTOF分析过程中，可以得到高灵敏度、高选择度的分析结果，它可检测出极低的药物含量，仅占样品的一百万分之一，显著提高分析结果的准确性和精度。
而且，在这种技术中，可以获得药物物质结构信息，以便能够准确定量分析药物含量，特别是活性物质含量更加精确。
UPLC-ESI-QTOF利用一个复合仪器系统，可以提供准确，可重复性的定量分析，它的优点不仅体现在高灵敏度和快速测定上，而且在质量分子识别上也比其他分析技术更加准确。
因此，UPLC-ESI-QTOF技术已被广泛应用于质谱和海洋毒理学、环境污染物分析、食品检测、药物药效因子等方面,获得了许多领域的广泛认可。
UPLC-ESI-QTOF是一种先进、灵敏、高效的分析技术，它既能提供定量分析结果，又能获得分子结构信息。
因此，它能够识别出药物复杂结构中的活性物质，在药物内容与效果分析、药物合成方面发挥重要作用。
超高效液相色谱－串联质谱法同时测定水产品中10种镇静剂及其代谢物残留
第42 卷第 7 期2023 年7 月Vol.42 No.7833~840分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO（Journal of Instrumental Analysis）超高效液相色谱－串联质谱法同时测定水产品中10种镇静剂及其代谢物残留王旭峰，王强，张英侠，黄珂*（农业农村部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心（广州），中国水产科学研究院南海水产研究所，广东广州510300）摘要：建立了测定水产品中10种镇静剂及其代谢物的通过式固相萃取（SPE）/超高效液相色谱－串联质谱（UPLC－MS/MS）多残留分析方法。
样品经1%氨水－乙酸乙酯提取，KNORTH m-PFC SPE小柱一步式净化。
洗脱液经氮气吹干浓缩，0.5 mL乙腈溶解残渣，采用UPLC－MS/MS测定。
目标物采用JADE－PAK KP－C18（100 mm × 2.1 mm，1.7 μm）色谱柱分离，以0.1%甲酸－乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。
电喷雾电离正离子（ESI+）扫描，多反应监测（MRM）模式下检测，以保留时间和离子丰度比定性，内标法定量。
10种目标物在对应质量浓度范围内呈良好的线性关系，相关系数（r2）大于0.999，检出限和定量下限分别为0.1 ~ 0.15 μg/kg和0.3 ~ 0.5 μg/kg。
在4种水产品基质中进行3个浓度水平的加标实验，平均加标回收率为82.6% ~ 117%，相对标准偏差（RSD，n = 6）为1.5% ~ 9.3%。
该方法灵敏度高、适用性强，适用于不同水产品基质中镇静剂及其代谢物残留的分析。
关键词：镇静剂；代谢物；通过式固相萃取；超高效液相色谱－串联质谱；水产品中图分类号：O657.7；TS207.3文献标识码：A 文章编号：1004-4957（2023）07-0833-08Simultaneous Determination of Ten Tranquilizers and Their Metabo⁃lites in Aquatic Products by Ultra-performance LiquidChromatography－Tandem Mass SpectrometryWANG Xu-feng，WANG Qiang，ZHANG Ying-xia，HUANG Ke*（South China Sea Fisheries Research Institute，Chinese Academy of Fishery Sciences；Fishery Environment and Aquatic Products Quality Inspection & Testing Center of the Ministry of Agriculture andRural Affaires（Guangzhou），Guangzhou 510300，China）Abstract：A multi-residue analytical method was established for the simultaneous determination of ten tranquilizers and their metabolites in aquatic products by pass-through solid phase extraction（SPE）in combination with ultra-performance liquid chromatography－tandem mass spectrometry（UPLC－MS/ MS）．Samples were extracted with 1% ammonium hydroxide－ethyl acetate，followed by one-step clean⁃up based on KNORTH m-PFC SPE cartridge．The purified extractions were blew to dryness under nitro⁃gen gas．The dried residues were dissolved with 0.5 mL acetonitrile and then injected into UPLC－MS/ MS．The chromatographic separation of ten target analytes were conducted on a JADE－PAK KP－C18 column（100 mm × 2.1 mm，1.7 μm） by gradient elution，utilizing 0.1% formic acid－acetonitrile and 0.1% formic acid solution as mobile phases．The targeted analytes were analyzed with positive electro⁃spray ionization under multiple reaction monitoring（MRM） mode，confirmed using ion ratio and retention time，and quantitated by internal standard method．Excellent linearities for ten target analytes were ob⁃tained in the corresponding mass concentration ranges，with correlation coefficients（r2）larger than 0.999．The limits of detection and the limits of quantitation for aquatic product samples were in the range of 0.1－0.15 μg/kg and 0.3－0.5 μg/kg，respectively．The average recoveries for four negative aquat⁃ic product matrixes at three spiked levels ranged from 82.6% to 117%，with relative standard deviations （RSDs，n = 6） of 1.5%－9.3%．The proposed method is sensitive and versatile，and it can be applieddoi：10.19969/j.fxcsxb.23040604收稿日期：2023－04－06；修回日期：2023－05－09基金项目：中国水产科学研究院南海水产研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金（2021SD20）；农业国家标准和行业标准制修订项目（NYB-23110）；广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金（2023KJ151）∗通讯作者：黄珂，副研究员，研究方向：水产品质量安全检测与风险评估，E-mail：xiamike@834分析测试学报第 42 卷to the multi-residue analysis of ten tranquilizers and their metabolites in various aquatic product matrixes.Key words：tranquilizers；metabolite；pass-through solid phase extraction；ultra-performance liq⁃uid chromatography－mass spectrometry；aquatic product镇静剂是一类具有镇定和安眠作用的药物，通过直接抑制中枢神经系统多巴胺活性，从而使动物机能恢复安定，防止狂躁，也能降低动物运输途中死亡率［1］。
超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法检测果汁和葡萄酒中的27种工业染料
纯度 ７ ． ％） 分 散 橙 ３ ｃ。Ｈ ００ 、 ７（ Ｃ ： 纯 度 ＩＮ Ｏ ， ９ ． ％） 分 散 橙 １ Ｃ． 。 Ｏ。 纯 度 ． ％） 酸 ００ 、 ｌ（ Ｎ ， Ｈ。 ３７ 和
性 橙 Ⅱ （ Ｈ。 ａ ， 度 ９ ． ％ ） 购 于 Ｄ ． Ｃ ＮＯＳ纯 Ｎ ４０ 均 ｒ Ｅ ｒｎ ｔｒ ｒＧ Ｈ； 丹 明 Ｂ Ｃ ８ Ｃ Ｎ２ 纯 度 ｈ ｅ ｓｏ ｆ ｍｂ 罗 ｅ （ Ｈ ｌ １ ， ２ ３ Ｏ
１ 实 验 部分
１ １ 仪 器 与 试 剂 ．
色谱 柱 ： Ｃ Ｕ Ｔ Ｐ Ｃ Ｂ Ｈ Ｃ １０ ｍｍ Ａ Ｑ Ｉ Ｙ Ｕ Ｌ Ｅ （ ０
× ． ２ １ｍｍ ，１７ ｍ ） 柱 温 ：０ ｏ 流 动 相 ： 相 为 ． ； ４ Ｃ； Ａ
乙腈 ， Ｂ相 为 ０ １ （ 积分 数 ） ．％ 体 甲酸水 溶 液 ； 速 ： 流
０ ３ｍＬ ｍｉ 梯 度洗 脱程 序 ： ． ／ ｎ； ０～１ ． ｎ， ％Ａ线 ０ ０ｍｉ ５ 性 升至 １０ Ａ， 持 ３ｍｉ 。进 样量 ： Ｌ ０％ 保 ｎ ５ 。
离 子 源 ： 喷 雾 离 子 源 ， 离 子 模 式 （ Ｓ 电 正 ＥＩ
Ａ Ｑ Ｔ 超 高 效 液 相 色 谱 仪 、 ｃｏ ｓ＠ Ｃ ＵＩＹ Ｍｉ ｍａ ｓ ｒ Ｑ ａｔ ｌｍａ” ｔ 重 四极 杆 串联 质谱 仪 （ ｔｒ ｕ ｔ ｏ Ｕｔ Ｐ 三 ｒ ｉ Ｗａｅｓ
９ ． ％） 碱性 橙 （ ． ・ １纯度 ８ ． ％） 间 ９０ 、 Ｃ Ｎ ＨＣ ， Ｈ。 ５０ 和
胺 黄 （ Ｈ Ｃ Ｎ， Ｏ， ， 度 ９ ． ％） 购 于 Ａ ｒ ｓ Ｎａ Ｓ 纯 ８０ 均 ｃｏ 公
司。 乙腈 （ 色谱 纯 ， Ｉ Ｄ ＭＡ公 司 ） 甲酸 （ ８ Ａ ｒ ｓ ； ９ ％， ｃｏ 公 司 ） 氯化 钠 （ 析 纯 ， ； 分 国药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司） 。用 乙睛 配制 质 量浓 度 为 １０ｍｇ Ｌ 按纯 度 标 ０ ／ （ 示 折算 ） 的单 标 准储备 液 。
超高效液相色谱-三重串联四极杆质谱分析β-受体激动剂类兽药残留量检测方法
超高效液相色谱-三重串联四极杆质谱分析β-受体激动剂类兽药残留量检测方法李建中，宋越三重串联四极杆质谱是复杂基质中痕量组分定量分析的重要手段，通过多重反应监控模式（MRM）能够提供高选择性和高灵敏度的检测。
建立在亚二微米粒径填料基础上的超高效快速液相色谱（RRLC）已得到广泛的应用，和QQQ联用能够提供高通量和高灵敏度的分离分析。
本文运用UHPLC-QQQ对动物源性食品中的14种β-受体激动剂进行定量分析，通过对重复性、线形关系和回收率等方法学参数进行考察，所建立的方法能在8.0分钟内对14种目标化合物完成快速、高灵敏度的检测分析，同时采用同位素内标法进行定量测定。
本方法采用Agilent 6460QQQ系统，利用Jet Stream鞘流气技术大大提高了去溶剂效果，同时减少了喷雾造成的离子扩散损失，显著的提高了离子化效率，从而大大提高了灵敏度。
本方法采用Agilent特有动态多反应监测（Dynamic MRM）模式对多残留化合物进行监测，实现了自动最大化分配驻留时间(Dwell time)的功能，兼顾了灵敏度及采样点数，实现了有机完美的统一，有效简化了方法的开发。
本方法完全满足了国内外对β-受体激动剂类药物日益严格的残留限量监测要求。
1 实验部分1.1 仪器与试剂美国安捷伦公司6460 QQQ质谱仪；美国安捷伦公司1260 UHPLC。
1.2 液相和质谱条件液相色谱柱为安捷伦Zobax SB-C18（2.1 x 100mm, 1.8 um）；流动相A为水（含0.1%体积比的甲酸+2mM乙酸铵），B为乙腈（含0.1%体积比的甲酸），梯度（B%/min）：2/0，2/0.5，25/4.0，80/5.0，90/5.5，2/5.7，2/8.0；柱温45o C；进样量5µL，流速为0.4 mL/min。
QQQ质谱参数（ESI+模式）：干燥气温度（Gas Temp）325 o C，干燥气流量（Gas Flow）5mL/min，雾化器压力（Nebulizer）45psi，鞘流气温度（Sheath Gas Temp）400 o C，鞘流气流量（Sheath Gas Flow）12mL/min，毛细管电压（Capillary）3500V，MRM参数见表1，安捷伦MassHunter软件用于定性（Qualitative）和定量（Quantitative）分析。
超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法检测果汁和葡萄酒中的27种工业染料
超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法检测果汁和葡萄酒中的27种工业染料赵珊;张晶;杨奕;邵兵【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2010(028)004【摘要】建立了以超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)检测果汁和葡萄酒中27种工业染料的方法.样品经乙腈振荡提取,在盐析作用下分层,目标化合物转移至乙腈层中.目标化合物在梯度洗脱条件下经C18柱分离后采用多反应监测(MRM)模式进行检测.其中24种工业染料使用正离子模式检测,流动相为乙腈和0.1%的甲酸水溶液;其余3种工业染料则采用负离子模式检测,流动相为乙腈和水.结果表明:果汁中27种工业染料的定量限(LOQ)为0.1～50 μg/kg,回收率为57.0% ～117.7%,相对标准偏差为2.4% ～17.7%.葡萄酒中的LOQ为0.2～50 μg/kg,回收率为40.8% ～109.4%,相对标准偏差为1.6% ～17.9%.该方法操作简单,灵敏度高,实现了不同种类的工业染料的同时提取,适合于软饮料中非法添加工业染料的快速检测.【总页数】7页(P356-362)【作者】赵珊;张晶;杨奕;邵兵【作者单位】北京市疾病预防控制中心,北京,100013;北京市疾病预防控制中心,北京,100013;北京市疾病预防控制中心,北京,100013;北京市疾病预防控制中心,北京,100013【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.高效液相色谱-串联质谱法同时检测辣椒制品中4种工业染料 [J], 李娟;丁晓明;刘丹丹;陈宇;郭飞;刘宏民;张雁冰2.超高效液相色谱-串联四极杆质谱法快速筛查食品中的45种工业染料 [J], 路勇;渠岩;冯楠;赵俊平;金伟伟3.超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定调味品与熟肉制品中6种工业染料[J], 陈勇;花锦;潘亚利;王静慧;刘海峰4.超高效液相色谱电喷雾串联四极杆质谱法检测豆制品中12种禁用工业染料 [J], 赵珊;张晶;丁晓静;杨蕴嘉;邵兵5.超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法检测牛奶中22种喹诺酮类抗菌素 [J], 包晓丽;任一平;张虹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超高效液相色谱-串联质谱法测定猪尿中9种β-受体激动剂残留
Ａｃ ｕｔ Ｌ ｑ ｉ ＵＰ Ｃ超 高效 液相 色谱 仪 ， ｔｒ ｙ Ｗａｅｓ公
司 ； ｉｒ ｍａ ｓＱｕ ｔｒ ｅ ｅ Ｍ ｃｏ ｓ ａ ｔｏ Ｐｒｍｉｒ ＸＥ 三 重 四 级 杆 串
联质 谱仪 配有 电喷雾 离子 源 （ Ｓ ） Ｗａｅｓ 司 ； Ｅ Ｉ ， ｔｒ 公 旋 转浓 缩仪 ， Ｙ Ｌ 公 司 ； １ Ｅ Ｅ Ａ Ｍ．卜Ｑ 超 纯水 设 备 ， 卜 ｌ Ｍｉ ｌ ｏｅ公 司 ； 涡 混 合 器 ，ＫＡ 公 司 ； ＨＡ— 恒 温 ｉ ｒ ｐ 漩 Ｉ Ｓ Ｃ 水浴 振荡器 ， 峰仪器 公 司 ； Ｔ一 ５ 华 Ｃ １ ＲＴ低 温 高速 离
摘要
采 用 超 高 效 液 相 色 谱 一串联 质 谱 （ Ｉ — ／ ） 术 ， 测 了猪 尿 中 ９种 Ｇ 受 体 激 动 剂 的 残 留 。样 ＵＰ ＭＳ ＭＳ 技 Ｃ 检
品加 入 乙酸 铵 溶 液 后 经 ８ 盐 酸 葡 萄糖 醛 苷 酶 ／ 基 硫 酸 酯 酶 酶 解 ， 氢 氧 化 钠 溶 液 调 ｐ 分 别 用 乙 酸 乙 酯 和 甲 基 一 芳 用 Ｈ，
效期 ３个 月） 工作液用 水 由储 备液稀 释 ， ； 现用 现配 。
１ ２ 色 谱 条 件 ．
色谱 一 串联 质谱 法 （ Ｌ — ／ ） 合 电喷雾 离 ＵＰ Ｃ ＭＳ ＭＳ 结
子源 （ Ｓ ＋ ） 超 高 压 液 相 色 谱 柱 Ａｃ ｕｔ ＥＨ Ｅ Ｉ 和 ｑｉ Ｂ ｙ Ｃ８２１ 】（ ． ｍｍ×５ ｍｍ，． ， 时分析 猪 尿 中 ９ ０ １ ７ ｍ） 同 种
３ ６
分 析 仪 器
２１ 年第３ ０２ 期
超 高效 液 相 色谱 一 串联 质谱 法 测 定 猪 尿 中 ９种 Ｉ 受体 激 动 剂 残 留 ３ 一
超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱法快速筛查尿液中58种毒品
基金项目：公安部科技强警基础工作专项项目（No. 2016GABJC50） 第一作者简介：张文竞，女，重庆潼南人，硕士研究生，研究方向为法医毒物分析。邮箱：842964453@ * 通讯作者简介：李虹，女，云南个旧人，学士，主任法医师，研究方向为毒物毒品分析。邮箱：yngalh@
Rapid Screening of 58 Abused Drugs in Urine by UPLC-Q-TOF/MSE
ZHANG Wenjing1, ZHAO Meng2, YANG Jingwei3, WANG Zhaohong2, LI Hong4,*, XU Manman1 (1. School of Forensic Medicine, Kunming Medical University, Kunming 650500, China;
刑事技术 2019 年 第 44 卷 第 3 期
DOI：10.16467/j.1008-3650.2019.03.006
·论 著·
超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱法快速筛查尿液中
58种毒品及滥用药物
张文竞 1，赵 蒙 2，杨景卫 3，王朝虹 2，学院，昆明 650500 ；2. 最高人民检察院检察技术信息研究中心，北京 100040 ；3. 西双版 纳州公安局，云南 景洪 666100 ；4. 毒品分析及禁毒技术公安部重点实验室，昆明 650228）
摘 要：目的 建立超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MSE）快速筛查人体尿液中 58 种毒品及滥用药物的方法。方法 样品经甲醇蛋白沉淀法进行前处理。目标物经 ACQUITY UPLC HSS C18 色谱 柱分离，以 0.1% 甲酸-乙腈溶液及 5mmol/L 甲酸铵-水溶液（pH=3）为流动相进行梯度洗脱，质谱采用电喷 雾电离正离子全扫描模式（MSE）检测。利用 UNIFI 软件建立数据库，并对样品进行筛查分析。结果 人体尿液 中 58 种毒品及滥用药物的检出限（LOD，3S/N）在 0.2~25.0ng/mL 之间，用 UNIFI 软件对尿液样品中添加的 58 种毒品及滥用药物进行快速筛查，通过数据库比对，目标化合物均被检出。结论 方法的准确性高，操作简单、 快速，适用于尿液中毒品及滥用药物的快速筛查。 关键词：法医毒物分析；超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱；毒品；滥用药物；尿液 中图分类号 ：DF795.1 文献标识码 ：A 文章编号 ：1008-3650(2019)03-0219-05
超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法检测牛奶中22种喹诺酮类抗菌素.
第３７卷２００９年３月分析化学（ＦＥＮＸＩＨＵＡＸＵＥ）研究报告ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ第３期３８９—３９４超高效液相色谱一电喷雾串联四极杆质谱法检测牛奶中２２种喹诺酮类抗菌素包晓丽１任一平２张虹“（浙江工商大学食品与生物工程学院，杭州３１００３５）２（浙江省疾病预防控制中心，杭州３１０００９）摘要应用液相色谱一电喷雾串联四极杆质谱仪，检测牛奶中的喹诺酮类（ＱＮｓ）抗菌素。
样品经柠檬酸磷酸盐缓冲液（Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ）超声提取，采用固相萃取（ＳＰＥ）方法净化提取液并对目标物质进行富集，用ＵＰＬＣ．ＭＳ／ＭＳ检测。
实验通过空白基质溶液稀释标准，建立校正的标准曲线，可以降低基质对离子化的干扰。
结果表明：吡哌酸、依诺沙星、两诺沙星、奥索利酸在３—３００ｔ，ｓ／ｋｇ，帕珠沙星在５—５００斗ｇ／ｋｇ，氧氟沙星、加替沙星、司帕沙星在０．５～５０斗ｇ／ｋｇ，其余１４种喹诺酮类化合物在１—１００斗ｇ／ｋｇ的线性范嗣内均具有良好的线性关系，相关系数在０．９８５１—０．９９９７之间，定量限（ＬＯＱ）为０．００８—０．３３９阻ｇ／ｋｇ。
除了氟甲喹、萘啶酸、那氟沙星的回收率小于６０％外，其它喹诺酮的回收率均在６３．１％～９４．６％之间，相对标准偏差为０．８６％一１３．１２％。
关键词超高效液相色谱一串联质谱，喹诺酮类抗菌素，牛奶１引言喹诺酮类（ＱＮｓ）药物是一类抗菌作用强，抗菌谱广的人工合成抗菌药。
近年来，该类药物在牛奶中残留的现象普遍存在，从而危害人类健康。
为了对ＱＮｓ类兽药残留实施监控，许多国家纷纷制定出喹诺酮在动物性食品中的限量。
美国ＦＤＡ规定了家禽肉中的部分ＱＮｓ的限量。
日本批准使用的ＱＮｓ仅有恩诺沙星（ＥＮＲ）、二氟沙星、奥比沙星、达氟沙星、马波沙星、氧氟沙星和恶喹酸。
欧盟在１９９９年３月公布的Ｎｏ．５０８／１９９９号…法规中对牛奶中单诺沙星，氟甲喹，马波沙星，恩诺沙星和环丙沙星（ＣＩＰ）的最高残留限量作了规定。
固相萃取-超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定地表水中9种微囊藻毒素
甲基一 － 天冬氨 酸一— Ａ ｄ — 异 谷 氨 酸－ 甲 Ｄ异 Ｌ Ｒ 一 ｄ ａＤ一 Ⅳ．
基脱 氢 丙 氨 酸 ） 其 中 Ⅳ＿ 基 脱 氢 丙 氨 酸 （ 。 甲 Ⅳ＿
ｍｅｈ ｌｅ ｙ ｒＡ ａ Ｍｄ ａ 为 一 种 特 殊 的 氨 基 酸 ， ｔｙｄ ｈ ｄｏ ｌ ， ｈ ） 含有 Ｏ、 ／ 不饱 和 双键 ；一 ３氨基 一一 ９ 甲氧基一 ， ，－ 甲 ２ ６ ８三 基一０苯 基一 ，一 １一 ４ ６ 二烯 酸 （ 一ｍｉｏ９ ｍｅｈ ｘ 一 ， ，一 ３ａ ｎ 一一 ｔｏ ｙ２ ６ ８
６ Ｄ． ｕ Ｇｌ Ｃ０Ｏ Ｈ
Ｏ
Ｃ ＯＯＨ
Ｄ － － ｅ Ａｓ ８Ｍ － ｐ
３
图 １ 典 型 微 囊 藻 毒 素 的 分 子 结构
Ｆ ｇ Ｍ ｏ ｅ ｕ ａ ｔ ｕ ｔ ｒ ｓ ｏ ｐ ｃ ｌｍｉ ｒ ｃ ｓ ｉ ｓ ｉ ．１ ｌ ｃ ｌｒ ｓｒ ｃ ｕ ｅ ｆｔ ｉａ ｃ ｏ ｙ ｔｎ ｙ
（ 色谱 纯 ， 国 Ｔ ｄａ公 司 ） 其他 试 剂 均 为分 析 纯 。 美 ｅｉ ，
ห้องสมุดไป่ตู้
Ａ Ｑ Ｔ ｌ ａＰ ｒ ｒ ｎ ｅＬ 超高 效液相 Ｃ ＵＩＹ Ｕ ｔ ｅｆ ｍａ ｃ Ｃ 。 ｒ ｏ Ｍ
９种 ＭＣ标准 品购 自 Ａ ｅ ｉ 司 ， 结 构 信 息 和 相 ｌｘｓ公 其
・
５ ２・
色
谱
第３ ０卷
随着 环境 污染 和 富 营 养化 程 度 加剧 ， 水 流 域 淡
康 ，９ ６年 巴西一 透析 中心 因透 析 液 遭 ＭＣ污染 最 １９
中有 害 藻类水 华尤 其 是 蓝 藻水 华 频 繁 发生 ， 已成 现
为 国 内 外 普 遍 关 注 的 环 境 问 题 … 。 微 囊 藻 毒 素
超高效液相色谱_四极杆飞行时间串联质谱法同时分析奶粉中9种雌激素
DOI ：10．3724/SP．J．1096．2011．01323超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法同时分析奶粉中9种雌激素王和兴周颖*姜庆五（上海复旦大学公共卫生学院公共卫生安全教育部重点实验室，上海200032）摘要建立了奶粉中9种雌激素（雌三醇、β-雌二醇、α-雌二醇、马烯雌甾酮、17α-乙炔雌二醇、雌酮、己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚）的超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS ）分析方法。
样品用水溶解，乙腈超声提取雌激素，正己烷除脂，NH 2柱净化，经Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（100mm ˑ2．1mm ˑ1．8!m ）分离，采用电喷雾离子源（ESI ）负离子模式，对9种雌激素进行Q-TOF 分析。
分析时间13min ，线性范围为0．001 0．5mg /L ；检出限（S /N =3）为0．11 0．30!g /kg ，定量限（S /N =10）为0．37 1．0!g /kg 。
考察了对9种雌激素精确质量数的测定能力和用基质内标法定量的回收率和精密度。
9种雌激素的测定质量数与理论值误差在－1．0 0．9mDa 之间。
在添加水平分别为1，2，10和100!g /kg 时，平均回收率为61% 137%，RSD 为1．0% 22．6%。
采用本方法对市售的7种奶粉进行检测，未发现上述9种雌激素。
关键词超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱；QuEchERS 方法；雌激素；奶粉2010-11-29收稿；2011-06-08接受本文系国家“十一五”科技支撑计划（No．2006BAI19B02）和复旦大学09年青年基金（No．EYF201023）资助*E-mail ：yingchou@fudan．edu．cn1引言奶粉是人们生活中重要的食品之一，与人们的健康息息相关。
由于近年来不断发生的奶粉安全事件，因此奶粉安全问题备受关注。
雌激素作为内分泌干扰物之一，有研究表明儿童性早熟，男性前列腺癌，妇女乳腺癌和子宫癌发病率的上升与食品中雌激素的残留有关［1，2］。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
文章编号:1000-8020(2007)04-0489-04#实验研究#超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法测定尿液中9种B 2-受体激动剂贾晓飞 曲建强 孟娟1邵兵1天津大学化学系,天津 300072摘要:目的 研究尿液中9种B 2-受体激动剂残留测定方法。
方法 样品在醋酸钠缓冲条件下(p H512)进行酶解,以高氯酸溶液沉淀蛋白,超声提取,调整提取溶液p H410,用HLB 、MCX 固相萃取柱浓缩和净化,通过Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱分离,以甲醇和含011%甲酸的水溶液为流动相梯度洗脱,采用超高效液相色谱-电喷雾串连四极杆质谱,正离子多反应监测(MRM )模式进行测定。
结果 检出限01002~01025ng P ml,最低定量限为01007~0108ng P ml 。
添加水平为011、015和2ng P ml 时,9种B 2-受体激动剂的加标回收率为7714%~10117%,相对标准偏差为314%~18%。
结论 该法测定尿液中9种B 2-受体激动剂残留物方法准确可靠,灵敏度高。
关键词:超高效液相色谱-串联质谱法 B 2-受体激动剂 固相萃取 尿液 残留测定中图分类号:R155155 文献标识码:BS imultaneous determination of nine B 2-agonists residues inurines by ultra performance liquid chromatography -electrospraytandem mass spectrometryJIA Xiaofei ,QU Jianqiang ,MENG Juan ,SHAO BingChemistry Department of T ianjin University ,T ianjin 300072,ChinaAbstract :Objective To study the determination method of nine B 2-agonists residues in urine.Methods Urine samples were duconjugated with B -glucuronidase P arylsulfatase enzyme in acetate buffer and deproteinized by perchloric acid,and then adjusted pH4101Sample concentration and purification were performed by Oasis HLB,Oasis MCX.The separation was performed on a Waters ACQUITY UPLC TM BEH C18colu mn (100mm @211mm i.d.,117L m)with gradien t elution using methanol and water (containing 011%formic acid)at a flow rate of 013ml P min.Results The limits of detection (LOD)of the method were from 01002to 01025ng P ml and the limi ts of quanti fication (LOQ)ranged from 01007to 0108ng P ml.Average recoveries for nine B 2-agonists at the spiking levels of 011,015and 2ng P ml ranged from 7714%to 10117%with relative standard deviations between 314%and 18%.Conclusion The method can be used to determine the residues of nine B 2-agonists in urines.Key words :ultra performance liquid chromatography -electrospray tandem mass spectrometry,B 2-agonists,solid -phase extraction,urine基金项目:北京市自然科学基金重点资助项目(No.7041004)作者简介:贾晓飞,女,硕士,现工作单位北京市疾病预防控制中心,E -mail:shaobi ngc h@1北京市疾病预防控制中心由于B 2-受体激动剂作用效应较强,并且在动物体内有较长的残留时间和短期内产生较大的残留量,特别是内脏中蓄积残留,通过食物链进入人体,会使一些易感人群产生较明显的中毒症状,严重危害人类健康。
目前,对B 2-受体激动剂的分析方法有气P 质联用分析法(GC P MS)[1,2]、高效液相色谱法(HPLC)[3,4]、酶联免疫法(ELISA)等。
酶联免疫法虽然具有检测灵敏度高、检出限低、快速等特点,但存在假阳性的问题,不能进行定量分析,并不适用所有的B 2-受体激动剂。
GC -MS 虽然灵敏度和特异性都很高,可以满足残留分析的要求,但衍生过程繁琐。
HPLC 虽然能直接分析,但多数检测器灵敏度偏低,并且无法进行确证。
本文采用HLB 和MCX 固相萃取柱浓缩净化,超高效液相色谱-质谱P 质谱(UPLC -MS P MS)检测确证9种B 2-受体激动剂残留的方法。
1 材料和方法111 仪器与试剂11111 仪器 ACQUITY TM 超高效液相色谱仪(Waters 公司)、第36卷 第4期2007年 7月卫 生 研 究JOURNAL OF HYGIE NE RESEARC HVol.36 No.4Jul. 2007489Micromass o R -Quattro Ulti ma TM Pt 质谱仪(Waters 公司),离心机(Allegra TM X -22R 型,Beckman 公司),Oasis HLB 固相萃取(SPE)小柱(6ml,500mg,waters 公司),Oasis MCX 固相萃取(SPE)小柱(3ml,60mg,waters 公司)。
11112 试剂 甲醇、乙酸乙酯(色谱纯,Dima 公司),甲酸(纯度为99%,Ameisensaeure),浓高氯酸(优级纯,北京化工厂),氢氧化钠(优级纯,北京化学试剂公司),B -葡萄糖苷酸酶P 芳基硫酸酯酶,011mol P ml 高氯酸(用浓高氯酸加水稀释配置),浓氨水(优级纯,天津市东方化工厂);实验用水均为超纯水,电阻率为1812M 8#cm (Millipore 公司超纯水器制备)。
9种B 2-受体激动剂试剂:妥布特罗(tulobuterol,Sigma 公司)、特布它林(terbutaline,纯度9915%,Dr.Ehrenstorfer Gmbh)、沙丁醇胺(salbutamol,纯度9915%,Dr.Ehrenstorfer Gmbh)、非诺特罗(fenoterol,Sigma 公司)、福莫特罗(formoterol,纯度>98%HPLC,Sigma 公司)、克伦特罗(clenbuterol,纯度9915%,Dr.Ehrenstorfer Gmbh)、拉贝特罗(labetalol,Sigma 公司)、莱卡多巴胺(ractopamine,Si gma 公司)、异丙喘宁(metaproterenol,Sigma 公司)。
B 2-受体激动剂标准溶液的配制:分别称取1010mg 的标准品,置于10ml 棕色容量瓶中,用甲醇溶解并定容,于4e 条件下保存。
临用时,用甲醇稀释上述标准储备溶液,配制成不同浓度的标准工作液,置于4e 条件下。
112 操作条件11211 超高效液相色谱条件 色谱柱:Waters ACQUITY UPLC T M BE H C18柱(100mm @211mm i.d.,117L m),柱温:40e ,样品温度:10e ,进样体积:5L l;流动相A 为含011%的甲酸水,流动相B 为甲醇,流速为013ml P min,流动相线性梯度洗脱,洗脱程序为:起始流动相为95%A,11100min 内线性降低到40%A,再于011min 内线性升高到95%A ,保持3min,等待下一次进样。
11212 质谱条件 离子源:电喷雾电离[ESI (+)],毛细管电压:313kV,锥孔电压:60V;射频透镜1(RF Lens 1)和射频透镜2(RF Lens 2)电压分别为4010V 和015V;离子源温度:99e ;脱溶剂温度:350e ;脱溶剂气流量:580L P h;碰撞梯度:110。
各种B 2-受体激动剂的质谱采集参数见表1。
表1 9种B 2-受体激动剂的质谱采集参数(1)B 2-受体激动剂保留时间(min)母离子离子迁移碰撞能量Ec P eV妥布特罗61712271922719>15318(1),22719>1711612特布它林21622251822518>16917(1),22518>1511711沙丁醇胺21782391923919>14717(1),23919>1651714非诺特罗315330430410>13418(1),30410>2861015福莫特罗612334534510>14819(1),34510>3271116克伦特罗51952761927619>20217(1),27619>2581912拉贝特罗719032932910>31110(1),32910>206199莱卡多巴胺51253011830118>16317(1),30118>2841013异丙喘宁11772111821118>19317(1),21118>1511710注:(1)下划线的离子迁移用作定量分析113 样品处理准确量取510ml 尿液,置于50ml 离心管中,加入醋酸-醋酸钠缓冲溶液(pH512)10ml,加入5L l B -葡萄糖苷酸酶P 芳基硫酸酯酶,52e 水解2h,加高氯酸溶液调p H110,在80e 超声提取30min,取出冷却至室温在8000r P min 离心10min 。
上清液转移到另一离心管中,用1mol P L NaOH 调pH410,以10000r P min冷冻离心,将上清液全部过HLB 柱富集净化。