安捷伦1260高效液相色谱仪日常维护要点探讨
安捷伦1260高效液相色谱仪的日常维护与期间核查
∑( ) RSD ＝
6
2
xi − x
i =1
× 1 ×100%
6−1 x
（1）
式中： RSD——定性（定量）测量重复性相对标准偏差％； xi——第 i 次测得的保留时间或峰面积；
高效液相色谱法（HPLC）是当前应用最多的色谱 分析方法，广泛应用于食品、药品、环境等领域的分 析检验 [1]。具有高效、高灵敏度、色谱柱可以反复使 用等优点，因此做好仪器日常维护，养成良好的使用 习惯，能够提高工作效率，降低维修成本。为了保持 设备的可信度，在两次检定之间，核查验证设备是否 保持校准时的状态，确保检验结果的准确性和有效性。
实验室应配备有色谱纯的异丙醇作为过渡溶剂，或用 于清洗备件。
由 于 日 常 分 析 检 测 的 样 品 多 为 复 杂 的 混 合 物， 而色谱柱的填料和内腔容积是非常小的，为了延长色 谱柱的寿命，一般柱前使用保护柱，样品都需要经过 0.45 μm 的滤膜，定期更换保护柱芯。做完样品后要 把柱子跟流路冲洗干净。首先把检测器的灯关了，这 样是为了节约光源，延长灯的使用寿命。然后用 95% 的水、5% 甲醇冲洗流路中的盐，然后用 95% 的甲醇、5% 的水继续冲洗，充满整个系统。色谱柱先用 50% 的乙 腈水洗去残留物，再用纯乙睛充满柱子。
102 / 现代食品 XIANDAISHIPIN
Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
Modern Food 工程技术
④清洗更换溶剂入口过滤头，如果是玻璃材质的，不能 用超声清洗，只能用 30% 的硝酸溶液浸泡，定期更换。
Agilent+1260+高效液相色谱仪使用维护保养操作规则
优胜美特制药有限公司&浙江巨泰药业有限公司--------药物研究所--------变更内容及定期审核一、目的制定Agilent 1260型高效液相色谱仪操作维护规程，使操作维护规范化，保证检测结果准确可靠。
二、适用范围本规程适用于Agilent 1260型高效液相色谱仪的操作维护。
三、职责QC对本规程的实施负责，项目主管、研发总监对本规程实施进行监督。
四、程序内容仪器配置本仪器由梯度泵，自动进样器，柱温箱，VWD检测器或DAD检测器和操作软件工作站组成。
操作前的准备流动相的制备用色谱纯的试剂配制流动相，必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查，应符合要求；水为新鲜制备的重蒸馏水。
对规定pH值的流动相，应使用精密pH计进行调节，配制好的流动相应通过μm以下的滤膜滤过，用前脱气，应配制足量的流动相。
供试溶液的配制供试品用规定溶剂配成供试溶液。
定量测定时，对照品溶液和样品供试溶液均应分别配制2份。
供试溶液在注入色谱仪前，一般应经μm以下的滤膜滤过，必要时，在配制供试溶液前，样品需经提取净化，以免对色谱系统产生污染。
检查上次使用记录和仪器状态，检查色谱柱是否适用于本次试验，色谱柱进出口位置是否与流动相的流向一致，原保存溶剂与现用流动相能否互溶，流动相的pH值与该色谱柱是否相适应，仪器是否完好，仪器的各开关位置是否处于关断的位置。
仪器的操作接通电源，打开计算机及工作站其他各部件开关，约30秒后，各部件进入待机状态，指示灯为橘黄色，启动完成。
用鼠标双击企业仪器启动程序界面上的Agilent1260仪器图标进入Agilent1260 LC在线色谱工作站，该页面主要由以下几个部分组成：最上方为命令栏，依次为文件,控制,方法，分析，序列，数据等；命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、新建方法序列、单个样品分析、调用文件、保存文件等；左部有五栏从上到下依次为方法，序列，报告，控制，视图五栏。
用鼠标单击【方法】栏进入仪器方法界面，有仪器设置、积分事件、前处理、手动积分修正、平铺显示等。
1260lnfinityII型安捷伦高效液相色谱仪使用及维护保养操作规程
1260lnfinityII型安捷伦高效液相色谱仪使用及维护保养操作规程1 目的规范安捷伦高效液相色谱仪及安捷伦Openlab 2.X 工作站的使用和维护。
2 适用范围本规程适用于1260 lnfinity II 型安捷伦高效液相色谱仪及安捷伦Openlab 2.X 工作站的使用和维护。
3 编写依据1260 lnfinity II 安捷伦高效液相色谱仪及安捷伦Openlab 2.X 工作站（安捷伦科技(中国)有限公司）使用说明书。
4 职责4.1 仪器设备负责人负责对本标准操作规程的监督执行。
4.2 实验操作人员负责对本标准操作规程的具体执行。
5 内容5.1 使用OpenLAB 控制面板设置和配置：5.1.1首次使用，以管理员权限账户登录控制面板：点击桌面图标，输入管理员账号与密码登录。
5.1.2在控制面板导航窗格，选中管理，可根据实际需要：创建/编辑“角色”，创建不同权限“用户”，编辑“安全策略”等。
5.1.3 OpenLAB 2.X 是基于项目为主导的使用，须先创建“项目”：（1）导航窗格选中项目，创建“项目”；（2）在“CDS 设置”，可根据需要做必要设置（如开启审计跟踪等）：提示：“结果”的审计跟踪是默认开启的；（3）创建在桌面创建项目分析（数据处理）的快捷方式：点击菜单栏，5.1.4创建仪器并配置：(1) 导航窗格选中仪器，创建“仪器”(2) 配置仪器：通过仪器IP地址或主机名配置仪器：(3)添加或移除使用这个仪器的用户：点击编辑权限点击添加或移除用户、组。
（4）设置LC自动关闭检测器：可通过管理/仪器选项，设置关闭检测器的时间：（可先编好一冲柱方法和停泵方法（流速设为0ml/min），加在序列表最后，即可实现自动冲柱、停泵和关闭氘灯）5.2联机操作、运行样品：5.2.1 LC开机：开启LC各模块；5.2.2开电脑，点击后桌面快捷图标，进入仪器控制界面（或从控制面板启动），在功能区/状态，仪器状态版面，点击总启动按钮启动仪器。
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪（HPLC）是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析仪器，其保养和维护对于保证仪器的正常运行和有效使用具有重要意义。
本文将从日常保养、常见故障及其维修等方面进行浅谈，以提供一些有关HPLC的保养与维护的基本知识。
日常保养是HPLC仪器保持良好工作状态的基础。
在使用过程中，应注意检查液相系统的泵、进样器、柱温箱、检测器等部件是否正常工作，是否有漏液、松动等情况。
应检查液相系统的连接管路是否有积液或气泡，如果发现问题应及时清理或更换。
定期检查液相系统的密封件和O型圈是否损坏，如果发现有磨损或老化，应及时更换以防止漏液。
液相色谱柱也是HPLC仪器中需要重点关注的部件之一。
在使用过程中，应定期检查柱的状态，如果发现柱端出现松动、变形等情况，应进行相应的调整和修复。
定期清洗柱的超声波浴和使用适当的洗柱剂进行柱的彻底清洗，可以延长柱的使用寿命，并确保分离效果的稳定性。
HPLC仪器的检测器也需要定期保养和校准。
在日常使用中，应注意检查检测器的灵敏度，如果发现灵敏度下降，可以尝试清洗光栅和调整灵敏度设置。
还需要定期校准检测器的基线信号和峰面积的刻度，以确保测定结果的准确性和可靠性。
保持仪器的干燥和清洁也是保养HPLC仪器的重要环节。
在使用过程中，应定期清理仪器表面的污渍和灰尘，确保仪器的外观干净整洁。
为了防止仪器内部潮湿和生锈，应经常开启柱温箱、检测器等部件进行通风和干燥。
当HPLC仪器出现故障时，需要及时进行维修和保养。
在发现仪器故障时，应首先检查仪器的电源、线路、液相系统等是否正常工作，如果确认仪器无法正常运行，可以联系专业的维修人员进行维修和保养。
在维修过程中，需要仔细记录故障现象和维修过程，以便于以后及时解决类似的问题。
对于HPLC仪器的保养与维护，需要注意日常保养、定期检查和清洁、注意液相柱和检测器的维护以及及时处理故障等方面。
只有保持仪器良好的工作状态，才能确保HPLC仪器的准确分析和可靠使用。
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪是一种常见的分离和分析仪器，广泛应用于化学、药学、生物、环境等领域。
为了保证其正常运行和延长使用寿命，对高效液相色谱仪的保养与维护非常重要。
以下是对高效液相色谱仪的保养与维护的一些浅谈。
高效液相色谱仪在使用前需要进行正常的启动和预热操作。
启动时需检查各部件是否完好，液体供应是否正常，仪器连接是否稳固，如有异常及时排除。
预热仪器可以提高分离效果和仪器稳定性。
保持色谱柱的清洁和正常运行。
高效液相色谱柱常需使用一段时间后进行清洗以去除残留物，清洗时可使用适当的溶剂进行反向冲洗，然后再用正向流动相进行平衡。
使用过程中应注意保持色谱柱的恒温，防止出现温差引起的色谱峰形变或漏色。
注意避免出现过大的流量或压力，以免对色谱柱造成损伤。
保持进样器的清洁和稳定。
进样器是色谱仪中的关键部位之一，需要保持干净和通畅。
平时应经常检查进样器中的样品残留物或杂质，必要时进行清洗。
进样器的密封性也需要经常检查，确保进样过程中不发生泄漏。
第四，及时更换和维护检测器。
高效液相色谱仪的检测器常常需要进行定期维护和更换。
紫外检测器中的灯管需要定期更换以保持灯管寿命和信号稳定性。
使用前应经过相应的校准和检验，确保其灵敏度和准确性。
第五，保持色谱仪的稳定电源和恒温条件。
正常使用高效液相色谱仪需要稳定的电源和恒温条件。
要确保仪器的电源质量稳定，并设置适当的温度控制系统，保持恒定的温度条件。
定期进行整机维护和保养。
尽量按照仪器制造商的要求进行整机维护，包括更换液泵、换向阀、微量泵等易损件，进行系统压力和流量的校准等。
定期对主要部件进行保养和清洁，确保仪器的正常运行和使用寿命。
高效液相色谱仪的保养与维护是确保其正常运行和延长使用寿命的重要措施。
定期进行各部件的清洁、修理和更换，保持恒定的电源和温度条件，定期进行整机维护等，都能有效提高仪器的稳定性和分析效果，为科研工作者提供准确可靠的实验数据。
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种分析仪器，广泛应用于化学、生物、医药、环境等领域。
为了保证仪器的正常运行和准确分析结果，对HPLC仪器进行定期的保养和维护是非常重要的。
本文将从以下几个方面进行讨论：清洁、校准、替换零部件、处理故障等。
首先是清洁的问题。
在使用过程中，样品和溶剂的残留会堵塞柱路、检测器等部件，影响分析结果。
应定期对仪器进行清洁。
一般来说，每天使用完毕后要清洗柱路，以去除残留物；每周应当清洗检测器；每月要进行一次全面的清洁，包括仪器表面和连接部件。
还要定期更换管道和密封件，防止漏气和交叉污染。
其次是校准的问题。
HPLC仪器在使用过程中需要进行校准，以保证分析结果的准确性。
校准包括流速的校准、检测器的波长校准、标准品的浓度校准等。
流速的校准一般通过称重法或比色法进行，检测器的波长校准则需要使用标准样品进行。
还需要定期维护和校准柱温控制系统，保证柱温的稳定性和准确性。
接着是零部件的替换。
HPLC仪器中的一些关键部件，如针头、柱塞、承载阀等，需要定期检查和更换。
针头是进样系统中的核心部件，容易受到污染和磨损，应定期更换，以保证准确的进样量；柱塞则需要根据使用情况定期更换，避免柱塞失灵导致的问题；承载阀是控制流动方向的关键部件，需要检查和更换密封圈，以保证系统的密封性。
最后是处理故障的问题。
在使用HPLC仪器过程中，可能会遇到一些故障。
一般的故障有柱塞失灵、进样量不稳定、峰形不对称等。
当遇到故障时，首先要查明故障的原因，有针对性地进行排查和处理。
对于一些常见的故障，可以通过更换零部件、调整操作参数等方式进行解决。
如果遇到复杂的故障，建议联系仪器厂家的售后服务进行维修。
对HPLC仪器进行定期的保养和维护非常重要，可以保证仪器的正常运行和分析结果的准确性。
在进行保养和维护时，要注意清洁、校准、替换零部件、处理故障等方面的工作，以提高仪器的使用寿命和分析效果。
安捷伦高效液相色谱仪(HPLC)的日常维护
安捷伦高效液相色谱仪（HPLC）的日常维护1、为什么溶剂和样品要过滤? 溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。
色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。
仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。
样品过滤头的类型： 30mm内径：适用于大进样量的过滤，由0.2μm和 0.45μm两种规格,材料有纤维素,醋酸纤维,聚四氟乙烯。
处理样品体积少于50μl。
13mm内径：适用于范围广的过滤，由0.2μm和0.45μm 两种规格,材料为纤维素。
3mm内径：适用于小进样量的过滤，由0.2μm和 0.45μm两种规格。
处理样品体积为7μl。
滤膜类型：聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和滤膜类型盐，并无任何可溶物。
醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶液，推荐用于蛋白质和其相关样品。
尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可用于强酸，70%乙醇、二氯甲烷、不适用于二甲基甲酰胺。
再生纤维素滤膜：具有蛋白吸收低，同样适用水溶性样品和有机溶剂。
2、为什么HPLC用缓冲盐时要加在线Seal-wash选项？ HPLC用缓冲盐时,由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞杆的往复运动,容易产生划痕, 并磨损密封垫,造成漏液等故障现象。
在线Seal-wash 选项能有效的带走可能存在的缓冲盐结晶。
缓冲盐的浓度在0.1mol 或大于0.1mol时,必须使用该在线冲洗选项。
清洗液配制: 90%水+10%异丙醇.该混合液可抑制菌类生长和减小水的表面张力。
以2-3滴/min 的速度虹吸流下，不能干涸。
For personal use only in study and research; not for comm ercial use3、为什么Agilent 1200LC的流动相管路非常细、为什么的流动相管路非常细? 的流动相管路非常细在使用HPLC时,应特别注意”柱外效应”对分析结果的影响，由于样品分子在液体流动相中的扩散系数比在气体中小4～5个数量级，液体流动相的流速也比 1-2 气相慢1 -2个数量级。
安捷伦1260-HPLC日常维护
紧固所有接头；更换破裂的毛细管；更换流通元件
《嵌入式技术基础与实践》
五、检测器日常维护及可能故障诊断
2、UV灯点不亮 在点亮紫外灯的一段时间里处理机会持续监测紫外灯的电流，如
果在2~5s内UV灯电流低于电流下限，则会出现故障提示。 可能原因：
UV灯电源没有接好；UV灯换了；电路或主板故障 建议采取措施：
一、在线脱气机日常维护及可能故障 诊断
溶剂过滤头的清洗方法： 取下过滤头，用纯水冲去残留溶剂后放入35%浓硝酸中浸泡1h；
用二次蒸馏水冲洗干净，玻璃滤头不可使用超声冲洗（易碎易损坏）； 建议定期清洗过滤头及溶剂瓶，至少3个月清洗一次
《嵌入式技术基础与实践》
二、四元泵日常维护及可能故障诊断
出口阀阀芯
《嵌入式技术基础与实践》
五、检测器日常维护及可能故障诊断
《嵌入式技术基础与实践》
五、检测器日常维护及可能故障诊断
1、检测器泄漏 检漏系统是利用两个传感器（泄漏传感器和温度补偿传感器）
进行泄漏运算，以此发出的信号来判断是否存在泄漏。当出现泄漏 时，泄漏传感器会被溶剂冷却，因而改变传感器的电阻，其信号被 主板上的的泄漏传感器电路获得。 泄漏的可能原因：
《嵌入式技术基础与实践》
二、四元泵日常维护及可能故障诊断
1、如何判断比例阀是否内漏？ 设定泵使用单通道（A），打开purge阀，流速为5mL/min,提起其他溶
剂瓶中的过滤头使之离开液面，观察（B/C/D）管路中的溶剂是否流动，正 常时均应不流动 2、何时应该更换purge阀内的过滤白头?
拧开排液阀，以水为流动相，流速为5ml/min,若压力大于10bar，建议 更换。 3、泵压不正常的可能原因?
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
安捷伦1260高效液相色谱仪日常维护要点探讨摘要：高效液相色谱仪是一种高精密的仪器，其对于日常维护有很高的要求。
为做好高效液相色谱仪的日常维护，我们以安捷伦1260高效液相色谱仪为例从仪器运行环境、开机维护、柱前维护、关机维护四个环节来分析。
关键词：安捷伦1260；高效液相色谱仪；日常维护；维护环节中图分类号：o657.7+2 文献标识码：a
高效液相色谱仪（hplc），它具有高分辨率、高灵敏度、速度高效、色谱柱可以多次反复利用、流出组很容易收集等优良性能，是我国实验室中使用频率很高的分析型仪器。
现今已经被大量使用到生物医药研究、大气环境分析、农业食品检测、无机分析等诸多领域。
安捷伦1260大大提高了hplc 的压力上限。
等度泵、四元泵和二元泵系统压力上限可以高达600bar，其最高流速可以达到每分钟5ml。
而等度泵和四元泵系统达压力上限200 bar时，流速可以实现10ml/min，另外再加之80 hz的检测速率和提高了10倍左右的高灵敏度，使安捷伦1260通用性达到了新的很高的水平，安捷伦1260并可实现更高的分离度和更快的分离速度。
安捷伦1260是一种高精密的仪器，其对日常维护有很高的要求：
1 安捷伦1260高效液相色谱仪的运行环境
为了仪器的正常合理运转及其保养，应该将仪器放置在平稳固
定的台面上，要求台面无振动，周围无辐射和磁场。
“要保持干净无灰尘，仪器工作的温度大致范围要求是在15～30℃，周边空气的相对湿度在30%～80%之间”[1]。
另外，因为流动相大多数是有机溶剂，我们还要保持室内有一些排风扇等通风换气的设施设备。
2 安捷伦1260高效液相色谱仪的开机维护
首先检查检测使用的流动相以及色谱柱是否准确无误，然后再打开仪器的稳压电源，而后再开输液泵、柱箱。
设置好色谱柱的最大保护柱压，进行排气工作，并要确保流路时不会有气泡。
这是因为气泡会扩大基线的噪声率，造成安捷伦1260高效液相色谱仪灵敏度不断下降，如果有气泡，气泡里的氧气还会氧化仪器组件，影响机器的性能指标。
而关于流速切不可操之过急，我们应该从小到大一点点地加速，这样是为了更好地保护色谱柱。
与此同时，还要注意仔细观察，观察柱压与流速能否保持相对应的平稳和合理增加，待到流速已经达到所需要的流速并最终让柱压稳定之后，然后再让检测器工作，这样有利于延长检测器的使用寿命。
3 安捷伦1260高效液相色谱仪柱前维护
由于临床上的样本多为较为复杂的混合物，而这些填料都是很细小的，并且色谱柱的内腔容积非常小，这就会导致堵塞现象。
同样，溶液里的细小微粒也会加大进样阀、泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的堵塞和磨损概率。
安捷伦1260高效液相色谱仪用缓冲盐的时候，缓冲盐溶液会产生高压析盐情况，会产生一些小的盐粒，这
些盐粒会附着在活塞杆上，并会随着活塞杆运动，这就很容易使仪器产生划痕现象，磨损仪器中的密封垫，从而产生漏液等问题。
在使用中应当注意，过滤是非常重要的环节，有效过滤才能够有效保护色谱柱、仪器。
为了避免这种情况，不能使用已经存放日期过长的蒸馏水及磷酸盐溶液，如果条件许可的话，可以采用“在溶液中加入0.0001-0.001m的叠氮化钠”[2]的方法来处理解决。
也可以在溶剂瓶内溶剂的上方不断地吹入比较稳定的氩气从而实
现隔绝空气的目的。
还要注意不要把溶剂瓶放在光线强烈的地方，这样会导致溶液失效，为了缓解阳光的失效作用，尽量使用琥珀色的溶剂瓶放置。
还可以在色谱柱前加上保护柱，从而避免色谱柱的污染，进而延长柱子的使用寿命。
同时要定期用水冲洗所有的通道，从而有效除去阀口上可能出现的盐沉淀。
使用梯度比例阀时，当盐溶液与有机溶剂溶液混合时，盐溶液能够实现与有机溶液有效重新融合并不会出现沉淀现象。
假如在比例阀的混合点上，由于重力的因素使盐颗粒慢慢沉淀下来，通常阀a接水相盐溶液，d接有机溶剂，此连接法可有效使盐回落到盐溶液中并被溶解。
但是，假若把这个连接法颠倒过来，这些盐可能落在有机溶剂之中，从而容易出现问题。
因此，当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时，建议要将缓冲盐的通道接在a通道上，而将有机溶液的通道直接接在d通道上。
4 安捷伦1260高效液相色谱仪关机维护
实验完成后，要把色谱柱冲洗干净。
首先要去完成的就是关掉检测器，之所以要这样做是为了节约光源，保证仪器灯的有效使用年限。
另外，还要切断色谱柱与检测器的连接程序，之所以这样是为了防止污染检测池。
用流动相冲洗流路30多min，然后再用15%的甲醇水洗10min左右，最后再用纯甲醇冲30min左右，并用一些纯化水同时冲外流路等地方。
输液泵的流速应慢速减小到0时，才可关闭泵和稳压器。
“反相系统用90%～95%有机相+10%～5%水相封存反相色谱柱”[3]，两端封死。
如长时间存放可将柱子完全浸泡在有机相内，以防用纯有机相封存反相色谱柱，如果长期保存有机相会挥发。
参考文献
[1] 黄大炜.高效液相色谱仪在使用中的几个问题[j].中国药事，2010（3）：26.
[2] 丰昌云.高效液相色谱仪的故障对策[j].精细化工中间体，2011（7）：54-55.
[3] 何晓书.色谱仪色谱柱的保养[j].成都军区医院学报，2004（2）：66.
作者简介：张秀英（1979-），女，农艺师，主要从事农、畜、水产品检测工作。