血浆游离血红蛋白检测操作规程
血液功能检查的操作流程及评分标准
血液功能检查的操作流程及评分标准摘要本文旨在介绍血液功能检查的操作流程及评分标准，以帮助医务人员正确执行该检查并准确评估患者的血液功能状态。
1. 引言血液功能检查是一种常用的医学检查方法，用于评估患者的血液相关功能，包括血细胞计数、凝血功能、血红蛋白含量等。
本文将介绍血液功能检查的操作流程及评分标准。
2. 操作流程血液功能检查的操作流程包括以下步骤：步骤一：准备工作1. 确保检查设备完好并处于正常工作状态。
2. 根据需要准备相关试剂和标本。
3. 获取患者的个人信息和病史。
步骤二：准备患者1. 向患者解释检查目的和过程，并征得其同意。
2. 让患者坐或卧于检查位置，以便进行检查。
步骤三：采样1. 使用无菌技术采集患者的血液样本。
2. 根据需要采集全血、血浆或血清样本。
步骤四：检测1. 将采集的血液样本送至实验室进行检测。
2. 根据需要，使用自动化检测设备或手动操作进行相关检测。
步骤五：记录结果1. 将检测结果记录在患者的病历中。
2. 根据需要，进行数据分析和结果解释。
3. 评分标准血液功能检查的评分标准用于评估患者的血液功能状态，常见的评分标准包括以下几个方面：血细胞计数根据血细胞计数结果来评估患者的血细胞数量是否正常，常用的评分标准有正常、偏低和偏高三个等级。
凝血功能根据凝血功能检查结果来评估患者的凝血能力，常用的评分标准有正常、延长和缩短三个等级。
血红蛋白含量根据血红蛋白含量检查结果来评估患者的贫血程度，常用的评分标准有正常、轻度贫血、中度贫血和重度贫血四个等级。
4. 结论血液功能检查是一项重要的医学检查方法，本文介绍了其操作流程及评分标准。
医务人员应根据操作流程规范执行该检查，并根据评分标准准确评估患者的血液功能状态。
血液检验操作规程有哪些
血液检验操作规程有哪些血液检验操作规程血液检验是临床诊断和治疗过程中必不可少的一环，合理的操作规程是确保结果准确性和患者安全性的关键。
下面是对血液检验操作规程的详细介绍，包括样本采集、标本处理、仪器操作、结果判读等方面。
一、样本采集1.准备工作：清洁工作台，确保无杂物，清洁抽屉中备有所需常用耗材和试剂。
2.选择合适的采血部位：通常使用的部位有指腹、耳垂、前臂等，根据检验项目选择合适的采血部位。
3.消毒：采用75％酒精和碘伏等消毒剂进行消毒，保持清洁。
4.采血：使用适量的血管针或浅表血管封闭器，按照技术要求进行采集，避免污染或改变血液成分。
5.采集管选择：根据检验项目选择合适的采集管，保证标本的安全和准确性。
6.采集量：根据实际需要及检验项目的要求采用适量的标本，保证结果的准确性。
7.采集后处理：密封采集管，轻轻摇匀，以充分混合抗凝剂或促凝剂等。
二、标本处理1.离心：对于全血样本，需离心分离血浆和红细胞，避免含有红细胞的血浆影响结果。
2.标本保存：按照项目要求及标本特性选择合适的保存方式，例如冷藏、冷冻或常温保存，注意避免污染或变质。
3.标本传递：严格按照标本保存和转运的规范进行传递，保证标本的安全性和可追溯性。
4.标本处理记录：记录标本的接收、固定、采集时间等信息，便于追溯和结果解读。
三、仪器操作1.仪器准备：根据需要进行仪器的开机、预热、校准、质控等准备工作，确保仪器处于正常工作状态。
2.样品装载：按照仪器要求，将标本放入仪器中进行测试，注意避免杂质或污染对结果的干扰。
3.仪器操作：根据仪器的操作流程和技术要求进行正确操作，确保测试结果的准确性。
4.质控处理：每天开始使用仪器前进行质控检测，校正仪器误差，保证结果的准确性。
5.仪器维护：定期进行仪器的维护和保养工作，确保仪器的长期稳定性和准确性。
四、结果判读1.结果记录：仪器出结果后及时记录，注意标注检测项目、日期和患者信息等，便于结果的快速、准确解读和追溯。
血浆游离血红蛋白检说明书
血浆游离血红蛋白测定试剂盒说明书(Trinder 法）【产品名称】血浆游离血红蛋白测定试剂盒 【包装规格】R1 100m l ×1 R2 100m l ×1 R3 10m l ×1 血红蛋白标准液 2.00ml ×1 【预期用途】本试剂用于体外在生化分析仪或分光光度计上测定血浆中游离血红蛋白。
【检测原理】血管内溶血时，血浆游离血红蛋白浓度增高。
血红蛋白中亚铁血红素有类似过氧化酶的作用，过氧化氢经过血红蛋白中亚铁血红素催化TBHBA 与4-氨基安替比林生成红色醌亚胺色素，吸收峰为505nm 。
根据显色深度，可测出血浆游离血红蛋白的含量。
【主要组成成份】 R1 TBHBA 稳定剂 R2 4-氨基安替比林 R3 过氧化氢血红蛋白标准液 100 mg/L 【储存条件及有效期】 1. 储存条件 试剂在2-8℃保存 2. 有效期 自生产日期起有效期6个月 【适用仪器】生化分析仪：F-6124；4040； 5010, 分光光度计 【样本要求】血浆 应注意采样及分离血浆过程不得发生溶血 【检验方法 (按表操作) 】 表 操作步骤测定管 标准管 空白管 血浆 (ml) 0.10 - - Hb 标准液 (ml) - 0.10 - 生理盐水 (ml) - - 0.10 R1 (ml) 1.00 1.00 1.00 R2 (ml) 1.00 1.00 1.00 R3 (ml)0.100.100.10混匀，37℃反应20分钟，于生化分析仪或分光光度计上测定，光径10mm ，波长505nm ，空白管调零比色。
计算：标准管吸光度测定管吸光度×100=血浆游离血红蛋白 ( mg/L)【参考值范围】 小于 40 mg/L 【检验结果的解释】血浆游离血红蛋白增加是血管内溶血白的指标，当血管溶血释放的血红蛋白量超过结合珠蛋白所能结合的量时，血浆中游离血红蛋白升高。
多见于较严重的血管内溶血，如阵发性睡眠性血红蛋白尿溶血性输血反应，阵发性寒冷性血红蛋白尿，行军性血红蛋白尿，运动性血红蛋白尿以及各种微血管病性溶血性贫血和一些机械损伤，如体外循环血管内溶血时血浆游离血红蛋白的浓度可达60mg/L ，阵发睡眠性血红蛋白尿可达200-2500mg/L ，血型不合输血可达150-5000mg/L 。
血浆游离血红蛋白测定
血浆游离血红蛋白测定[原理]血红蛋白中亚铁血红素具有类似过氧化物酶的作用，使联苯胺(或邻甲苯胺)氧化，在醋酸溶液中变成绿色、黄色，紫红色。
当血管内溶血时，血浆游离血红蛋白可明显增高。
[试剂](1)联苯胺(或邻甲苯胺)0．1g，加冰醋酸2ml，加蒸馏水3ml，溶解后加95％乙醇至10ml置于4℃冰箱内保存可用1-2周。
(2)取30％H2O2 0．5ml，加蒸馏水14．5ml(新鲜配制)。
(3)10％(v／v)醋酸溶液。
(4)Hb标准液，即用HiCN法精确测得Hb含量，然后配成100mg/L的Hb水溶液.[操作]取大试管(容量为30—50m1)3、支，依次加入下列各液见表(1—3—5)。
表1-3-5 血浆游离血红蛋白测定用波长515nm比色，以空白调零，读取各管吸光度。
[计算]游离血红蛋白(mg／L)＝测定管吸光度／标准管吸光度×100。
[参考值]正常人血浆游离血红蛋白＜100mg/L(10mg／dl)。
换算系数：mg／L=mg／d1×10编写：孙利制定日期：2011.12.1[临床意义]血管内溶血性贫血、PNH及输不合型的血液后均明显增高，尤其后者可高达5000mg／L以上。
[附注](1)本法系测定细胞溶解，抽血后分离过程应特别注意红细胞破坏而导致结果升高。
(2)显色受温度干扰，要严格遵守测定条件，注意标准管与测定管的比色时间。
(3)由于灵敏度较高，当肉眼见到溶血现象时，标本就应稀释，必要时同时应作1管稀释5倍标本。
(4)因联苯胺具有毒性；测定时可用邻甲苯胶或四甲基联苯胺替代。
(5)纯品联苯胺为无色结晶，纯度不好但可提纯。
联苯胺10g溶于 lmol儿HCl 200ml中，加活性炭1—2g，用力振摇(可稍加热)后过滤，滤液一般无色，否则继续再振摇1—2分钟后，向滤液中加入浓HCl 30ml，混匀置于冰箱过夜即可见大量白色结晶析出，用滤纸过滤后，再用乙醇—乙醚等量混合液洗涤结晶数次，最后用乙醚洗2次即可。
人游离血红蛋白(F-Hb)说明书
人游离血红蛋白(F-Hb)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人全血样本中游离血红蛋白(F-Hb)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人游离血红蛋白(F-Hb)水平。
用纯化的人游离血红蛋白(F-Hb)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入游离血红蛋白(F-Hb)，再与HRP标记的游离血红蛋白(F-Hb)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的游离血红蛋白(F-Hb)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人游离血红蛋白(F-Hb)浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：540μg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
游离血红蛋白检测方法
游离血红蛋白检测方法游离血红蛋白（free hemoglobin）指的是血浆中存在的不与红细胞结合的血红蛋白。
正常情况下，游离血红蛋白的浓度很低，但在一些疾病状态下，如贫血、溶血等，会导致血浆中游离血红蛋白的浓度增加。
因此，对游离血红蛋白进行检测对于评估一些疾病的严重程度和治疗方案的制定具有重要意义。
以下是一些常用的游离血红蛋白检测方法：1.光学法检测：光学法是一种简单但有效的游离血红蛋白检测方法。
该方法根据游离血红蛋白具有的特殊吸收光谱特性来测定其浓度。
通过测量在550至600纳米范围内的吸光度，可以推断游离血红蛋白的浓度。
2.分光光度法：分光光度法是一种利用分光光度计来测量游离血红蛋白浓度的方法。
它利用游离血红蛋白在450至700纳米波长范围内的吸收特性，通过测量吸光度来确定其浓度。
3.糖基化血红蛋白方法：糖基化血红蛋白是由于高血糖状态导致血红蛋白分子上发生糖化反应而形成的一种血红蛋白变异物。
检测糖基化血红蛋白可以间接评估血浆中游离血红蛋白的浓度。
目前，一些商业化的糖基化血红蛋白检测试剂盒已经上市，可以通过测量糖基化血红蛋白的浓度来推测游离血红蛋白的水平。
4.凝胶电泳法：凝胶电泳法可以通过将血浆样品电泳分离来检测游离血红蛋白。
在凝胶电泳过程中，血浆样品中的游离血红蛋白会沿电泳槽向阳极迁移，然后通过染色剂染色后可观察到游离血红蛋白的带状图案。
5.高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种高灵敏度的游离血红蛋白检测方法。
该方法利用高效液相色谱仪的柱分离功能，根据游离血红蛋白与固定相之间的亲和作用，将游离血红蛋白从血浆样品中分离出来，并通过检测峰面积或峰高来测定其浓度。
除了上述方法，还有一些新兴的游离血红蛋白检测技术正在研究中。
例如，传感器技术结合了生物传感器和游离血红蛋白的特异性反应，可用于快速和准确地检测游离血红蛋白。
此外，质谱分析技术也被用于游离血红蛋白的检测，通过比较样品与标准的质谱图谱来确定游离血红蛋白的浓度。
溶血性贫血的实验室检测
四、珠蛋白生成异常的检测
（二）胎儿血红蛋白酸洗脱试验
1.原理 HbF抗酸能力较HbA强。把经固定后的血涂片置酸性缓冲液中保湿一定时间，只有含HbF 的红细胞不被洗脱，再用伊红染色而呈鲜红色。 2.临床意义 （1）脐带血、新生儿、婴儿阳性，成人小于1% （2）地中海贫血病人轻型者（杂合子）仅少数红细胞呈阳性，重型者阳性红细胞明显增多
二、红细胞膜缺陷的检测
（三）自身溶血试验及纠正试验
1.原理 红细胞内酶缺陷，葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP，以维持红细胞内的钠泵作 用。病人红细胞无菌条件下在自身血浆中温育48小时，使ATP储备减少，钠泵作用减弱，导 致溶血增强。在孵育过程中，分别加入葡萄糖和ATP作为纠正物，并以氯化钠溶液为对照， 观察溶血是否能被纠正。 2.参考值 ➢ 正常人红细胞经孵育48小时后，仅轻微溶血、溶血度<3.5% ➢ 加葡萄糖和加ATP孵育，溶血明显纠正，溶血度均<1%
溶血性贫血的实验室检测
一、溶血性贫血的筛查检测
（一）血浆游离血红蛋白测定
1.参考值 <50mg/L（1～5mg/dl） 2.临床意义 （1）血管内溶血时血浆游离血红蛋白明显增高； （2）血管外溶血时血浆游离血红蛋白不增高； （3）自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血可轻度增高。
一、溶血性贫血的筛查检测
二、红细胞膜缺陷的检测
（二）红细胞孵育渗透脆性试验
1.原理 红细胞孵育过程中，葡萄糖的消耗增加，贮备的ATP减少，导致红细胞膜对阳离子 的主动传递受阻，钠离子在红细胞内集聚，细胞膨胀，渗透脆性增加。 2.参考值 未孵育：50%溶血为4.00～4.45g/L NaCl 37℃孵育24h：50%溶血为4.65～5.9g/L NaCl 3.临床意义 （1）脆性增加：遗传性球形细胞增多症、遗传性椭圆形细胞增多症、遗传性非球形细胞溶 血性贫血等； （2）脆性减低：珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血、镰形细胞贫血等。
血液检验操作规程
血液检验操作规程血液检验是一种常见的医学检验方法，通过对血液样本的分析可以了解患者的身体健康状况。
为了确保检验结果的准确性和安全性，进行血液检验时需要遵循一定的操作规程。
以下是血液检验的操作规程，供参考：一、术前准备1.检查器材准备：准备好使用的血液采样管、一次性采血针、无菌棉球、酒精棉球、标本袋、标签等。
2.个人准备：佩戴好手套，保持双手清洁。
3.工作环境准备：保持工作环境的整洁与干净，确保充足的通风。
4.患者准备：告知患者检验的目的和操作过程，取得患者的配合和同意。
二、采集血液样本1.选择采样部位：一般采用手心或者肘部内侧的静脉进行采样。
2.消毒操作：使用75%酒精棉球对采样部位进行消毒，注意消毒时间至少要十五秒。
3.穿刺操作：将一次性采血针插入采样部位的静脉中，注意角度和深浅的控制。
4.填充采血管：将采血管连接到采血针上，成功进入静脉后，血液自动流入采血管中。
5.采集足够血量：根据检验项目的要求，采集足够的血液样本，一般为静脉血5-10ml。
三、标本处理1.标本编号：在标本管上使用无菌笔或标签贴上标本编号，确保标本的唯一性与追溯性。
2.标本保存：轻轻翻转标本管，使血液与抗凝剂充分混合，避免凝结。
有特殊要求的项目（如血细胞分类计数、凝血功能等）需按照相关规定进行标本处理。
3.标本保存温度：按照检验项目的要求，将标本保存在相应的温度下，如室温保存、冷藏或冷冻保存。
四、记录与传送1.记录标本信息：在病人申请单上填写清楚标本信息，包括患者的基本信息、采样时间等。
2.记录操作过程：记录血液检验的操作过程、采血量、抗凝剂类型等信息。
3.传送标本：按照规定的方式将标本送往检验科室，遇到需要特殊处理或迅速检测的标本，及时与检验科协调处理。
五、操作注意事项1.严格遵守无菌操作规范，避免污染标本。
2.穿刺时注意穿刺角度和深度，避免伤及神经、动脉等重要结构。
3.采血过程中尽量减少患者的疼痛和不适感。
4.在操作过程中确保采样集中，避免因各种原因导致标本的浓度变化。
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血浆游离血红蛋白检测操作规程
1. 目的
确保血浆游离血红蛋白检测实验过程准确、规范。
2．适用范围
适用于全血及红细胞类血液制品储存末期溶血率的抽样检测过程控制。
3．职责
全血及成分血抽样检测岗负责血液制品血浆游离血红蛋白的抽样检测工作。
4. 原理
检测原理详见《紫外可见分光光度计操作规程》.
5.设备、材料与试剂
5.1仪器：紫外可见分光光度计、微量移液器、37℃恒温水浴箱、台式离心机。
5.2材料: 洁净试管、试管架、一次性吸头、一次性手套。
5.3试剂：血浆游离血红蛋白检测试剂盒（R1、R2、R3、标准液）。
6．检测环境条件
实验室温度18～27℃、湿度30～70%
7．步骤与方法
7.1 检测前准备
７.１.1 仪器设备准备：执行《紫外可见分光光度计操作规程》。
７.１.2 试剂准备：检查试剂盒内试剂瓶是否完好、有无渗漏，瓶内试剂有无浑浊、沉淀、变色及异物，容量是否满足工作需要。
查看批号和有效期，确保在有
效期内使用。
７.１.３其他物品准备：检查EP管、一次性吸管、硬塑试管无破损、变形及污染，整齐摆放于实验台上；用记号笔在3支硬塑试管壁上分别标识“测试管”和“标准管”、“空白管”。
7.2 标本处理
打开离心机，将容量相近标本试管对称放入离心机转子内，3000r/min，离心5分钟，吸取上层血浆，将获得的血浆再次离心，吸取不含红细胞的血浆待用。
7.3 检测
7.3.1加样
7.3.1.1用微量移液器按照表21-1所示步骤，将试剂和标本分别加入对应的硬塑试管内。
表21-1 血浆游离血红蛋白检测加样步骤
测试管标准管空白管
1．血浆（μl）100 －－
2．Hb标准液（μl）－100 －
3．生理盐水（μl）－－100
4．R1（μl）1000 1000 1000
5．R2（μl）1000 1000 1000
6．R3（μl）100 100 100
7.3.1.2加样完毕，取三支试管帽，将3支试管盖上，手持试管两端，来回颠倒3～5次，混匀，放于试管架上；打开37℃恒温水浴箱，将试管连同试管架一起放入水浴箱中，孵育20分钟。
水浴箱内水位应高于试管内液面高度，但不得超过试管管口。
7.3.2 检测
从水浴箱中取出试管及试管架。
将“空白管”、“标准管”、“测试管”中的反应液倒入预先准备好的比色皿中，倒入量以稍超过比色皿体积的2/3为宜。
在505nm波长处进行比色。
打开样品槽，放入“空白管”比色皿调零。
然后依次放入“标准管”、“测试管”进行比色，读取各管吸光度。
检测剩余标本进行后续实验，如时间不允许，将标本连同试管架一起暂放入标本冰箱保存。
7.3.3计算
利用所测得的数据计算每袋全血或红细胞类血液制品的游离血红蛋白含量及
溶血率，计算公式如下：
（1）血浆/上清液游离血红蛋白浓度计算公式：
游离血红蛋白浓度(mg/L)=
100
⨯标准管吸光度
测定管吸光度
（2）每袋血液中血浆/上清液游离血红蛋白含量计算公式：
游离血红蛋白含量（mg ）=游离血红蛋白浓度(mg/L)×血液制品容量（ml ）/1000 （3）溶血率计算公式：
溶血率（%）=
容量
血红蛋白浓度
蛋白浓度
血浆或悬浮液游离血红
容量红细胞比容
⨯⨯⨯-)1(
8．结果的判定
储存末期溶血率＜红细胞总量的０.８％；游离血红蛋白含量≤１ｇ／Ｌ。
抽样检测合格率应≥75%。
9．分析和报告
将检测结果记录于《血液质量检测记录》中，分析血液制品血浆/悬浮液中游离血红蛋白含量或储存末期溶血率是否符合全血及成分血质量标准。
打印《血液质量检测报告》。
出现不符合全血及成分血质量标准的结果，质量控制部门进行原因调查分析，提出纠正、预防措施，通知相关科室实施改进，并将结果报告质量管理部门及站领导。
10．质量控制
仪器使用前应对其状态进行确认,项目检测严格执行标准操作规程 11. 相关文件
《血液常规抽检控制程序》 《紫外可见分光光度计操作规程》 12. 相关记录
《血液质量检测记录》 《血液质量检测报告》。