心肌缺血动物模型制备方法
冠脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型
冠脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型1.1实验材料1.1.1实验动物清洁级Wistar近交系大鼠100只(购自中国科学院上海实验动物中心)，均为雄性，体重245～320g(平均278.2±22.2g)，饲养环境为清洁级。
1.1.2试剂3%戊巴比妥钠，1%肝素钠，Evans蓝和N-BT磷酸缓冲液(Sigma公司)。
1.1.3实验仪器心电图机，动物呼吸机(浙江医科大学医疗仪器设备厂，DH150型动物呼吸机)，Buxco系统(Buxco公司)。
1.2模型制作1.2.1动物分组根据研究目的，实验动物共分六组；其中五个组需手术制作模型，合称手术组，另一个组为假手术组。
为满足每组12只的要求，先后有100只动物随机进入手术组(85只)与假手术组(15只)。
1.2.2制作方法1.2.2.1手术组用3%戊巴比妥钠(30mg/kg)行腹腔注射麻醉，麻醉满意后置于手术台，四肢及头部仰卧固定于手术台上，四肢皮下连接心电图电极，记录标准Ⅱ导联心电图，颈部皮肤备皮消毒，胸骨上窝上正中切开皮肤0.5cm，向上钝性分离推开下颌下腺，剪除气管前肌肉，使气管在没有任何拉钩牵引的情况下能充分显露，彻底止血后于第2～3气管环间行气管横行切开，注意不要切断气管软骨环，切口长度不超过气管周径的1/3，擦干其内分泌物后插入气管插管(用小儿吸痰管自制)，深度为0.5～1cm。
连接空气呼吸机进行人工控制呼吸，呼吸频率90次/分，潮气量10～12ml，吸呼比设为1﹕1。
左前胸去毛，消毒铺巾，顺肋间隙方向于胸骨左旁第3～4肋间切开皮肤，长约1cm，逐层分离皮下组织、肌肉，于2～3肋骨间撑开进胸，向右上方推开胸腺，可暴露心脏及大血管根部，切开心包，轻挤大鼠胸廓，将心脏挤出，有部分动物在左心耳下缘与肺动脉圆锥间可以看见左冠脉前降支起始部，用6-0Prolene线缝针，进针深度控制在0.1cm，宽度为0.1～0.2cm(图1)；回纳心脏入胸廓，待动物的数十次心动周期后，收线打结；观察数分钟后，彻底止血后逐层关胸。
心肌缺血模型的制作方法研究进展
心肌缺血模型的制作方法研究进展心肌缺血是一种常见的心血管疾病，研究其发病机制和治疗方法具有重要意义。
而制作心肌缺血模型是研究该疾病的重要手段之一。
本文将围绕心肌缺血模型的制作方法及其研究进展展开讨论。
心肌缺血模型制作方法概述心肌缺血模型的制作方法主要包括动物模型制作和人工心脏瓣膜等。
动物模型制作是研究心肌缺血最常用的方法之一，其优点在于能够模拟人体生理条件下的心肌缺血情况，从而更好地研究心肌缺血的发病机制和治疗方法。
在制作动物模型时，通常采用大鼠、小鼠或兔等小型哺乳动物，通过手术等方法阻塞冠状动脉，以模拟心肌缺血的状态。
还可以采用心梗模型等，通过注射药物等方法造成心肌损伤，以模拟心肌缺血的过程。
人工心脏瓣膜是另一种常用的心肌缺血模型制作方法。
该方法通过在人工心脏瓣膜上设置狭窄或闭塞的血管，以模拟心肌缺血的状态。
其优点在于能够很好地控制实验条件，如血管狭窄程度、缺血时间和再灌注时间等。
同时，可以通过改变实验条件来研究不同因素对心肌缺血的影响。
但是，人工心脏瓣膜制作方法也存在一定的局限性，如不能完全模拟人体内的生理环境，且制作成本较高。
干细胞模型制作近年来，干细胞模型制作方法逐渐被应用于心肌缺血的研究中。
干细胞具有自我更新和多向分化的能力，可以分化为心肌细胞、内皮细胞等多种细胞类型。
在干细胞模型制作中，通常采用心脏成纤维细胞或胚胎干细胞等，通过体外培养和分化，再将其植入到生物材料中制作成生物瓣膜，最后将其植入到动物体内来模拟心肌缺血的状态。
干细胞模型制作方法具有很好的应用前景，可以克服人工心脏瓣膜制作方法中的局限性，更好地模拟人体内的生理环境。
但是，干细胞模型制作方法也存在一定的难度和成本，需要进一步完善和优化。
新型制作方法除了上述制作方法外，市场上还出现了一些新型制作方法，如干细胞移植模型、3D打印技术等。
干细胞移植模型是通过将干细胞移植到心肌梗死患者的梗死灶周围，以促进心肌再生和功能恢复的一种方法。
一种大鼠心肌缺血模型的制作方法
一种大鼠心肌缺血模型的制作方法目的：建立一种大鼠心肌缺血模型制作方法，保证模型制作的准确程度与术后大鼠存活率。
方法：大鼠麻醉后，先行明视经口气管插管，呼吸机供给氧气；次行开胸结扎冠状动脉左前降支术；再行肺复张术；另术前及术后三天予以抗生素注射与体温支持等措施。
结果：经过改进，造模准确率达到100%，术后四周存活率达到80%。
结论：控制结扎位置可提高模型准确率，术中供给氧气可提高大鼠存活率。
标签：心肌缺血；动物模型；大鼠；氧气；冠状动脉左前降支在心肌缺血（MI）动物模型制作中，SD大鼠是常用动物[1]，行结扎冠状动脉左前降支（LAD）手术是传统造模方法。
如何准确客观模拟心肌缺血的病理改变且提高大鼠术后存活率是模型制作的关键。
本研究课题组立足于本实验室实际并参考众多研究者经验[2、3]，建立了一种大鼠心肌缺血模型的制作方法，以期达到保证模型成功率与大鼠术后存活率的目的。
1实验材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物SD大鼠，20只，雌雄各半，2～4 月龄，体重250±30g，由四川省人民医院实验动物研究所中心提供（许可证号：SCXK（川）2013-15）。
动物在手术操作前适应饲养一周，饲养环境为自然光暗周期，温度23～26℃、相对湿度40%～70%，雌雄分开，5只/笼，自由饮水进食。
1.1.2手术器械及耗材显微持针钳，开睑器，7-0显微带线缝合针，4-0缝合线，○ 1/2 4×12医用逢合针，24G静脉留置针，铁丝，常规手术器械与耗材。
1.1.3药物水合氯醛、0.9%氯化钠注射液，注射用青霉素钠，碘伏、75%乙醇，PBS磷酸盐缓冲液、TTC染色液。
1.1.4仪器设备肯特Kent PhysioSuite （Monitor for Mice and Rats），氧气袋，CMA/450动物恒温控制器，BL-420S生物机能实验系统，自制鼠台，强光手电筒。
1.2实验方法1.2.1麻醉7%水合氯醛氯化钠溶液以280mg/kg（0.4ml/100g）比例对大鼠进行腹腔注射麻醉，再腹腔注射青霉素8万U预防感染，然后将其仰卧位固定于鼠台上，前胸部备皮，碘伏消毒。
心肌缺血模型制备的实验方案
心肌缺血模型制备的实验方案
心肌缺血是指心肌组织血液供应不足，通常由于冠状动脉狭窄或阻塞引起。
为了模拟心肌缺血的病理生理过程，通常采用离体心脏或动物模型进行实验研究。
下面是一种常见的实验方案，仅供参考：
材料：
体外或动物模型（例如，离体心脏、大鼠或小鼠）
模拟心肌缺血的缺氧/低氧环境
组织染色剂（如TTC染色剂）
生理盐水或PBS缓冲液
透明贴膜
步骤：
制备缺氧/低氧环境。
可采用以下方法之一：
体外模型：将心脏取出后置于含有缺氧/低氧气氛的培养皿中。
动物模型：通过冠状动脉结扎、氧气供应中断等方式诱导心肌缺血。
确认心肌缺血程度。
使用心肌缺血标志物（如心肌细胞色素C释放）或可视化方法（如TTC染色）确定心肌缺血的程度。
对缺血心肌进行处理。
可以使用药物或其他治疗手段（如再灌注）来减轻心肌缺血造成的伤害。
分析结果。
通过对处理后的心肌组织进行染色或其他实验方法来评估心肌缺血的程度、处理方法的有效性以及可能的作用机制。
需要注意的是，心肌缺血模型制备的实验方案因具体实验目的和条件而异。
在进行实验之前，应根据实验目的、研究问题和实验条件等因素制定合适的实验方案。
此外，需要遵守实验室安全操作规程，并严格按照动物伦理审批程序进行动物实验。
家兔心肌缺血模型制备方法
家兔心肌缺血模型制备方法
家兔心肌缺血模型的制备方法有多种，其中一种常用的是冠状动脉结扎法。
具体步骤如下：
1.麻醉动物并实施气管插管，连接呼吸机以辅助呼吸。
2.根据动物解剖学结构，实施肋间开胸手术，暴露心脏。
3.将冠状动脉左前降支置于视线下，分离或者直接穿线结扎前降支，以造成
结扎部位以下部分心肌缺血性梗死。
4.通过心电图监测，观察到S-T段明显上抬，结扎线以下心肌颜色变暗，表示
结扎成功。
该方法的优点在于能造成心肌局部缺血甚至心肌坏死，制作出与临床上心肌梗死相似的动物模型。
Removed_大鼠急性心肌缺血模型制备详细图解
模型的背景，心肌缺血模型分全心缺血和左心室缺血两种，全心缺血主要靠注射药物（如异丙肾上腺素等），左心室缺血主要靠手术对动物的冠状动脉左降支进行紧扎实现。
由于左心室缺血对临床的意义更大，所以研究心肌缺血药物时这个模型是必须的。
（1）术前12小时给动物禁食（2）将动物注射10%水合氯醛（0.4mL/100g）麻醉后固定在手术台上（3）用笔型静脉置留针进行气管插管，插好后可用手术刀柄靠近气管，如果见气雾，就证明成功，连接动物呼吸机，参数为：呼吸频率85；呼吸比1：1；潮气量为18ml（4）胸部被毛、酒精棉消毒，在胸部左侧3~4肋间剪开皮肤，如图1（5）分离肌肉露出肋骨，切口位置有两块肌肉，胸浅肌和胸深肌，注意按照肌肉的纹路分离可以避免将肌肉扯烂，如图2（6）在第三根肋骨下用止血钳将肌肉分离开，然后左手用止血钳挑住肋骨，右手持剪刀剪开第三根肋骨，如图3（7）用止血钳将剪断的肋骨夹住掰开，放入开睑器，用止血钳剥离心包膜，如图4（8）用止血钳将胸腺（心脏上面白的像脂肪一样的东西）夹住拉出，如图5（9）在左心耳与肺动脉圆锥间穿6~0号线，拉紧丝线，形成心肌缺血，观察线扎紧的部位上下大约2mm范围的心肌是发白色的，如图6（10）闭合胸腔，注意将胸腔内的空气挤出（这点非常关键，这个模型最容易失败导致大鼠死亡的就是这个地方），对肌肉和皮进行缝合，挤空气的手法如图7（11）结扎术后6小时可进行TTC染色：将大鼠脱颈处死，打开胸腔，将心脏剪下，用生理盐水将心脏清洗干净并排出心脏内的淤血，沿冠状沟将心房切除留下心室，用刀片将心脏切成1mm厚的切片，放入0.1%的TTC磷酸盐缓冲液（pH 7.4）37℃水浴7~10分钟，取出切片用生理盐水冲洗数次，观察结果。
非梗死区因脱氢酶还原TTC而呈红色，梗死区因脱氢酶流失而呈白色，将梗死区和非梗死区分离并分别称重，梗死范围以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。
下图是染色的结果，图8结扎位置，梗死的地方其实肉眼大致能看出，和其他地方相比发白，图9：下面再发正常大鼠和梗死大鼠的心电图区别，是用的PowerLab做的，正常的如下22小时后的心电。
心肌缺血模型制备的实验方案
心肌缺血模型制备的实验方案
本实验方案旨在制备动物心肌缺血模型，以模拟心肌缺血病理过程，为心血管疾病的研究提供实验基础。
材料：
1. 成年健康雄性Sprague Dawley大鼠，体重250-300g；
2. 呋塞米（Furosemide）、异丙肾上腺素（Isoproterenol）；
3. 注射用生理盐水、丙酮酸盐缓冲液、冷却盐水；
4. 心电图记录仪、心电图导联电极、心电图监测软件；
5. 细针、刮刀、显微镜、离心机等实验常用设备。
方法：
1. 实验前准备
（1）清洁和消毒实验设备和工具；
（2）将大鼠随机分组，分别为对照组和实验组；
（3）禁食12小时，但可自由饮水；
（4）按照动物实验伦理规范，对大鼠进行麻醉。
2. 心肌缺血模型制备
（1）对于对照组，将大鼠背部皮肤切开并缝合；
（2）对于实验组，通过细针刺激大鼠左前降支冠状动脉，同时注射呋塞米和异丙肾上腺素，导致心肌缺血；
（3）在注射后5分钟内监测心电图，记录下ST段的改变和T波倒置等心电图异常；
（4）标本采集：在缝合后24小时，剖开大鼠胸腔，取出心脏，
通过离心机等方法获取心肌缺血区域的标本，进行组织学和分子学检测。
3. 数据分析
对实验结果进行统计学分析，比较对照组和实验组之间的差异，评估实验结果的可靠性和可重复性。
结论：
本实验方案制备的心肌缺血模型具有较好的稳定性和重现性，可用于心血管药物的筛选和临床前研究。
心肌缺血动物模型制备方法
于是 离 体 实 验 ，所 得 的结 果 和 在 有 整 体 调 节 的情 况 下 不 同 ，
这 是 该 类 模 型 的 局 限 之处 Ｉ 。 ｌ ７ １
常 用 的 心 肌 缺血 动 物 实 验 模 型 的制 作 方 法 和 研 究 进 展 。
１ 急性 心肌 缺 血 动 物 模 型 急 性 模 型是 指 短 期 实 验 模 型 ， 据 模 型 的 特 点 分 为 以下 根
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综述 ・
心肌缺血动物模型制备方法
吴 涛
心 血管 疾 病 是 当今 威 胁 人 类 生 命 健 康 的 重 大 疾病 ， 心 而 肌 缺 血性 疾 病 又 是 心 血 管疾 病 中的 焦 点 。心 血 管疾 病 康 复 机 制 研 究 的关 键 技 术 之 一 是 复制 心肌 缺 血 动 物 模 型 。本 文 综 述 谢 的影 响 ， 较 确 切 地 得 出 心 肌 氧 耗 ， 且 可 以控 制 所 给 药 比 并 物 浓 度 ， 此 比较适 合研 究 心 肌 缺 血 过 程 中 的 代 谢 变 化 。 由 因
２１１ Ａ ｒｉ 缩 环 法 ： ｍ ｒｉ 内 垫 有 亲 水 性 物 质 ， ． ｍｅ ｄ收 ． ｏ Ａ ｅｏ ｄ环 可 以 直 接 套 在 冠 状 动 脉 上 ，在 ２ ３周 内逐 渐 使 管 腔 狭 窄 （ — ＞
７ ％ ） 至 闭 塞［ ２。 目前 Ａ ｒｉ 缩 窄 器 有 标 准 型 、 料 型 ５ 直 ２ ＯＩ － ｍｅｏ ｄ 塑 和 钛合 金 型 。 后 者属 于改 进 型 ， 行 多 种 特 殊 检 查 。徐 国会 可 等 在 猪 左 旋 支 发 出第 一 分 支 前 卡 上 Ａ ｅｏ ｍ ｒｉ 窄 器 ， 中 ｄ缩 术 放 弃 了 既 往从 胸 骨 左 缘 第４ ５肋 间进 ห้องสมุดไป่ตู้法 ，改 从 胸 骨 正 中入 、
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心肌缺血动物模型制备方法
心肌缺血动物模型是研究心血管疾病，如心肌梗死、心绞痛等的常用方法。
本文将介绍制备心肌缺血动物模型的具体步骤。
材料与仪器
1. 大鼠或小鼠
2. 氧气和二氧化碳混合气体
3. 麻醉仪
4. 灭菌扫描仪
5. 心电图仪
6. 鼠标心脏解剖仪
7. 组织染色和电镜检查仪
8. 淬灭钳和缝合针
9. 氧气麻醉设备
10. 细胞色素标记试剂盒
方法
1. 麻醉动物：选择体重在200-300g的大鼠或小鼠，放入麻醉仪中，将氧气和二氧化碳混合气体注入到呼吸气道，使动物处于深度麻醉状态。
2. 在鼠胸部上方剃毛并用消毒酒精擦拭，再使用灭菌扫描仪对鼠胸部进行消毒处理。
3. 开始进行手术：使用淬灭钳，穿刺胸骨左侧的第三根肋骨，插入心包中，直到感觉到心脏跳动。
4. 使用鼠标心脏解剖仪，在心脏上滑动，找到左前降支冠状动脉并用缝合针把它们包扎。
包扎的宽度应约为1毫米。
5. 撤回钳子，使心脏恢复跳动，观察心电图，以确认心肌缺血
已有效制备。
6. 等待适当的时间进行操作，最好在10-30分钟内制备完毕心
肌缺血。
7. 消毒手术部位，关闭氧气和二氧化碳混合气体，将动物放回代表室，进行观察。
8. 24小时后，给予动物一次肟酸钾（16mg/kg）注射治疗。
分析
心肌缺血动物模型制备完成后，需要进行心脏和组织染色检查，以及电镜检查。
在实验中，可以使用细胞色素标记试剂盒来检测细胞色素C的排放情况，以评估心肌细胞受损程度。
另外，观察动物濒临死亡时的行为变化，可以对模型的制备成立发挥较为重要的作用。
使用心肌缺血动物模型，以生成动物模型来模拟心肌缺血的病理过程，进行心血管系统方面的研究，对制定相应治疗措施有重要意义。