2019版高考生物一轮复习生物技术实践导学案35无菌操作技术苏教版20
2019版高考生物一轮复习鸭部分生物技术实践学案
第三单元细胞的能量供应和利用
第一讲发酵食品加工的基本方法
(2)据制作果酒和果醋的发酵装置填
空：
①装置中a为充气口，用于向装置内通
气；b为排气口，用于排出
料口，用于取样检测。
(2)判断正误：
①制作腐乳的菌种只有毛霉(×) ②腐乳制作主要利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶(√)
(2)实验流程及影响因素：
命题点1 1．(2017·南通三模)下列有关果酒、果醋、腐乳制作的叙述，正确的是( ) A ．制作果酒、果醋的菌种属于真核生物，制作腐乳的菌种属于原核生物 B ．制作果酒、腐乳在无氧条件下进行，制作果醋需在有氧条件下进行 C ．制作果酒、果醋主要利用的是胞内酶，制作腐乳主要利用的是胞外酶 D ．制作果酒、果醋的过程需保持菌种活性，制作腐乳的过程不需要。
高考生物一轮复习 第1讲 无菌操作技术教学案 苏教版(选修1)-苏教版高三选修1生物教学案
第1讲无菌操作技术[考纲展示] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用考点一| 微生物的分离和培养1．相关技能、技术和方法(1)无菌操作的技能——灭菌①分类：实验室常用高温处理达到灭菌效果，包括干热灭菌和湿热灭菌。
②作用：微生物分离和培养的基础。
③关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)配制培养基①培养基概念：为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养物质。
②分类：按化学性质的不同分为天然培养基和合成培养基。
(3)接种微生物①接种：指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。
②接种方法和常用工具(连线)接种方法常用工具Ⅰ.涂布平板接种a．接种针Ⅱ.穿刺接种 b．接种环Ⅲ.斜面接种 c．玻璃涂布器Ⅳ.平板划线接种答案：Ⅰ－c Ⅱ－a Ⅲ－b Ⅳ－b2．大肠杆菌的接种与分离培养(1)配制牛肉膏蛋白胨培养基其操作步骤：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。
(2)斜面接种和培养大肠杆菌①主要目的：菌种转移、扩大培养和保存纯净菌种等。
②主要步骤：准备接种→接种环灭菌→试管口灭菌→挑取少许菌种→划线接种→在37_℃恒温箱中培养大肠杆菌24 h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4 ℃)保存。
(3)平板划线分离和培养大肠杆菌①平板的作用：培养、分离细菌等微生物。
②平板划线法是指用带有微生物的接种环在平板培养基表面通过分区划线而纯化分离微生物的一种方法。
[思考回答]1．微生物接种的核心是什么？提示：防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
2．如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。
(1)获得图A和图B效果的接种方法分别是什么？提示：图A效果是稀释涂布平板法，图B效果是平板划线法。
(2)某同学在用A方法纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是什么？为了防止杂菌污染，有同学建议加入抗生素，你觉得可以吗？并说明理由。
高考生物一轮复习配套学案：《无菌操作技术实践》
1．涵盖范围本单元包括选修1全部内容——无菌操作技术实践、发酵技术实践、酶的应用技术实践和生物化学与分子生物技术实践。
2．考查内容及形式(1)微生物的培养与应用多以简答题形式考查。
(2)酶的应用，常与必修1中酶的本质、特性等知识有机结合考查。
(3)植物的组织培养技术常与植物有效成分提取相结合考查。
(4)发酵技术实践应用多以简答题形式考查。
(5)酶的应用、生物化学与分子生物学技术多以选择题形式考查。
3．复习指导(1)复习线索①以转基因——微生物培养——酶生产——酶应用为线索，系统复习微生物的分离与培养、酶的应用技术实践。
②以技术手段、技术流程为主线，复习发酵、组织培养、有效成分及DNA、蛋白质等有关知识。
(2)复习方法①列表比较法——DNA、蛋白质的分离。
②实践联系——发酵技术、植物有效成分提取技术。
③实验联系——植物组织培养、微生物培养实验过程。
第40讲无菌操作技术实践[考纲要求] 1.微生物的分离和培养。
2.某种微生物数量的测定。
3.培养基对微生物的选择利用。
4.植物的组织培养。
考点一微生物培养基的配制、无菌操作和接种技术[重要程度：★★☆☆☆]1．培养基的定义及分类(1)概念：为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。
(2)营养成分：碳源、氮源、水、无机盐等。
(3)分类：按所含化学成分，培养基可分为天然培养基和固体培养基。
2．无菌操作与接种技术(1)灭菌和消毒①灭菌是指采用强烈的物理学或化学方法使物体内外所有的微生物永远丧失生长和繁殖能力的方法。
②消毒：用较为温和的物理学方法或化学方法杀灭物体上绝大多数微生物的方法。
(2)灭菌的方法：干热灭菌或湿热灭菌(如高压蒸汽灭菌等)。
(3)无菌操作——微生物接种技术的关键①培养基、试管、培养皿、接种器械在接种前都需要灭菌。
②操作人员及操作环境要求消毒。
(4)3．培养基的配制(1)配制原则：为所培养微生物的生长和繁殖或积累代谢产物提供所需的营养基质。
近年高考生物一轮复习第十二单元生物技术实践第一讲无菌操作技术实践练习苏教版(2021年整理)
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第一讲无菌操作技术实践［课时作业］单独成册1．微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术.以下是人们筛选、纯化和培养该类微生物的实验操作。
请回答下列问题:(1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自__________的土壤。
(2）筛选和纯化该类微生物时，除考虑微生物生长所需的营养外,还要考虑微生物生长所需的温度、________以及是否需要O2等。
倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置,其主要原因是____________________________________________。
(3）在平板划线接种时，为保证每次划线都不能有杂菌污染，则每次划线前都要________________，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线__________。
接种后还应密封培养的原因是__________，培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取__________就可获得可能的高效菌株。
在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在__________条件下进行。
解析：(1)筛选、纯化降解石油的微生物，应取长期被石油污染的土壤.(2）微生物的培养需要满足微生物生长的营养条件以及温度、pH和气体情况等.平板倒置可防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。
高三生物一轮复习课件：无菌操作技术实践苏教版选修
4
避免污染
保持操作手的无菌状态，避免与非无菌物品接触。
5
封闭包装
无菌物品使用完毕后，立即封闭包装，避免二次污染。
无菌室的基本要求
空气净化
无菌室应具备高效过滤和空 气净化系统，保证室内空气 的无菌程度。
人员防护
操作人员需穿戴合适的防护 装备，如实验服、口罩、帽 子和手套。
严格控制进出
无菌室的进出口要设置空气 隔离区，降低外界微生物进 入的风险。
1 保护实验结果可靠性
避免实验中的细菌、病毒等微生物污染，确 保实验结果准确可靠。
2 保护操作者和环境安全
避免微生物传播给操作者和周围环境，保护 人们的健康。
实践中的无菌操作技术步骤
1
准备工作
洗手、穿戴防护服和手套，准备所需的无菌材料。
2
消毒操作区域
对操作台面、器械等进行消毒处理。
3
打开无菌包装
采用正确的方法和工具打开无菌包装，避免污染。
微生物检验和发酵过程控制等。
2 制药工业
药物生产和制剂灌装等。
4 医疗器械消毒
无菌手术和器械灭菌等。
结论和总结
无菌操作技术是实验室和医疗领域中至关重要的技术，通过避免微生物的污 染和传播，保障实验结果的可靠性和人们的健康安全。
常样品均匀涂布在无菌琼脂 培养基上，培养并观察微生物生 长。
注射法
使用无菌注射器将液体培养物转 移至无菌培养器具中，避免细菌 污染。
移液法
使用无菌移液管移取无菌溶液， 进行实验分析和操作。
无菌操作技术的应用领域
1 生物医学研究
细胞培养、细菌感染研究等。
3 食品和饮料工业
高三生物一轮复习课件： 无菌操作技术实践苏教版 选修
2019版高考生物一轮复习 第11单元 生物技术实践 第34讲 微生物的培养和利用学案 苏教版
第34讲微生物的培养和利用考试说明 1.微生物的分离和培养(实验与探究能力)。
2.某种微生物数量的测定(实验与探究能力)。
3.培养基对微生物的选择作用(实验与探究能力)。
4.微生物在其他方面的应用(实验与探究能力)。
点一微生物的实验室培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其生长繁殖的。
(2)营养成分:水、、、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。
(3)类型: 培养基含凝固剂, 培养基不含凝固剂。
2.无菌技术(1)目的:获得。
(2)关键:防止的入侵。
(3)无菌技术的主要方法及适用对象(连线)措施操作对象主要方法a消毒b.灭菌Ⅰ.培养基Ⅱ.接种环Ⅲ.操作者双手Ⅳ.培养皿Ⅴ.无菌室Ⅵ.牛奶①灼烧灭菌②干热灭菌③巴氏消毒④紫外线消毒⑤化学消毒⑥高压蒸汽灭菌3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)步骤:计算→→溶化→→倒平板。
(2)倒平板的过程①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手。
②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过。
③左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻盖上。
④待平板冷却凝固后,将平板放置,使皿盖在下、皿底在上。
4.纯化大肠杆菌(1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。
图11-34-1(2)平板划线法(图11-34-1中):通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(3)稀释涂布平板法(图11-34-1中):将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到的表面,进行培养。
当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的。
5.菌种的保藏(1)对于频繁使用的菌种,可以采用法。
(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用法。
1.消毒和灭菌的区别2.两种纯化细菌的方法的比较3.平板划线操作3个易错点(1)灼烧接种环之后,要冷却后再进行接种,以免温度太高杀死菌种。
高考生物一轮复习第十一单元生物技术实践第讲无菌操作技术实践备考一体学案苏教.doc
第39讲无菌操作技术实践[考纲要求] 1.微生物的分离和培养。
2.某种微生物数量的测定。
3.培养基对微生物的选择作用。
考点一微生物的分离和培养1．相关技能、技术和方法(1)无菌操作的技能①干热灭菌法是指将准备灭菌的物品放在干热灭菌箱内，在160～170 ℃下加热1～2 h以达到灭菌的目的。
②湿热灭菌法常采用高压蒸汽灭菌锅进行，其使用包括加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等步骤。
(2)培养基的配制①培养基的概念：是为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。
②营养组成：一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。
此外，根据拟培养的微生物的不同需要，有时还要加入维生素等特殊的营养物质，并要调节培养基中pH使之满足微生物生长的需要。
③种类：天然培养基和合成培养基，前者的主要优点是取材便利、营养丰富、配制简便，缺点是营养成分难以控制、实验结果的重复性较差；后者的优点是化学成分及其含量明确，实验的可重复性好，缺点是配制繁琐、成本较高。
(3)微生物的接种①接种：是指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。
②常用的工具有玻璃涂布器、接种针、接种环等，在涂布平板接种时要用玻璃涂布器，穿刺接种时要用接种针，在斜面接种或在固体培养基平板上进行划线接种时要用接种环。
2．大肠杆菌的接种与分离培养(1)配制牛肉膏蛋白胨培养基其操作步骤：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。
(2)斜面接种和培养大肠杆菌①主要目的：菌种转移、扩大培养和保存纯净菌种等。
②主要步骤：准备接种→接种环灭菌→试管口灭菌→挑取少许菌种→划线接种→在37 ℃恒温箱中培养大肠杆菌24 h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4 ℃)保存。
(3)平板划线分离和培养大肠杆菌①平板制作的方法及注意事项a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。
b．甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
2024届高考一轮复习生物教案(苏教版)：发酵工程的培养基与无菌技术
第1课时发酵工程的培养基与无菌技术课标要求 1.概述培养基的类型及用途。
2.阐明无菌技术的操作方法。
3.概述利用平板划线法和稀释涂布平板法，进行微生物分离和纯化。
考点一发酵工程的培养基培养基(1)概念：主要是指为人工培养微生物等而制备的，适合微生物等生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。
(2)类型①按成分分类培养基种类成分优点缺点用途天然培养基动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物取材便利、营养丰富、配制简便营养成分难以控制，实验结果的重复性较差工业化生产合成培养基准确称量的高纯度化学试剂加蒸馏水化学成分明确，实验可重复性好配制过程繁琐，成本较高研究与育种②按物理状态分类培养基种类特点用途液体培养基不含凝固剂，呈液体状态工业生产固体培养基或半固体培养基含凝固剂(如琼脂)，呈固体或半固体状态微生物的分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏③按用途分类：基础培养基和特殊培养基特殊培养基种类选择培养基鉴别培养基加富培养基用途将某种或某类微生物从混杂的微生物中分离出来快速分类鉴定不同微生物，也用于分离和筛选产生某种代谢产物的菌种用于培养营养要求比较苛刻的异养微生物。
可增加所需微生物的数量(3)成分成分含义作用来源碳源提供碳元素的物质构成生物体的细胞的物质和一些代谢产物，有些也是异养生物的能源物质无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机碳源：糖类、牛肉膏等氮源提供氮元素的物质合成蛋白质、核酸等物质无机氮源：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机氮源：蛋白胨等无机盐为微生物提供除碳、氮之外的各种重要元素，包括大量元素和微量元素为微生物提供无机营养，调节培养基的pH等无机化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等水生物体含量最高的无机化合物良好的溶剂，参与化学反应等培养基、代谢产物考向培养基配制及其作用1．(多选)现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，假设用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，甲、乙适合分离的微生物是()成分KH2PO4MgSO4·7H2ONaClCaSO4·2H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基0.02% 0.02% 0.02% 0.01% 0.5% 0.5% 2% 乙培养基0.02% 0.02% 0.02% 0.01% 0.5% －－A．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌B．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌C．乙培养基适于分离自养型自生固氮菌D．乙培养基适于分离异养型自生固氮菌答案BC解析甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，可以作为碳源和能源，适用于异养微生物生长，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌，A错误，B正确；乙培养基中不含有机碳源，不含氮源，可用来分离培养自养型的自生固氮菌，C正确，D错误。
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课时分层集训训(三十五)(建议用时：45分钟)A组基础达标1．(2018·广东惠州模拟)日前微博传言手机细菌比马桶多。
如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。
回答下列相关问题：(1)该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、______________。
(2)据图，两电视台均采用____________法接种，该方法需要________(多选)。
A．接种环 B．酒精灯C．移液管D．涂布器E．无菌水(3)通过观察菌落的________，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。
两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：__________________________。
(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10 mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1 mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为________个/平方厘米。
该实验对照组该如何设置______________________。
[解析](1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。
(2)根据图形分析，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。
(3)不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。
两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。
(4)根据提供的数据进行计算，某手机屏幕的细菌数＝(48＋50＋52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)＝2×104(个/平方厘米)。
[答案](1)氮源和无机盐(2)稀释涂布平板BCDE(3)形态、大小手机的取样和马桶的取样都不相同(4)2×104取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养2.如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。
回答下列问题。
(1)在________(填图中编号)区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是________个细菌。
据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是________(用编号表示)。
(2)下表是某微生物培养基成分。
②若要鉴别纤维素分解菌，可用________法，若要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入________。
[解析](1)从图中可知，②号区域出现了单个菌落；1个菌落最初是由1个细菌形成；根据线条数量可判断，划线的顺序依次是①→③→②。
(2)自生固氮菌是异养生物，能自身固氮而获得氮源，但自身无法获得碳源，因而培养基中应添加碳源去掉氮源。
鉴别纤维素分解菌可用刚果红染色法，要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入酚红指示剂。
[答案](1)② 1 ①→③→②(2)①碳源氮源②刚果红染色酚红指示剂3．(2016·四川高考)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。
(1)图中选择培养基应以________为唯一氮源；鉴别培养基还需添加________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成________色。
(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。
该过程采取的接种方法是________，每克土壤样品中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________。
(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。
突变基因转录的mRNA中，终止密码为________，突变基因表达的蛋白含________个氨基酸。
[解析](1)脲酶能够催化尿素水解释放出氨和二氧化碳，因此选择培养基中应以尿素为唯一氮源。
挑取单菌落接种到加有酚红指示剂的鉴别培养基中，培养一段时间后，菌落周围的氨增加，pH升高，酚红指示剂将变红。
(2)该过程采取的接种方法为稀释涂布平板法。
利用稀释涂布平板计数法对细菌进行计数时，应选择菌落数在30～300的平板，因此平板上长出的细菌菌落平均数为(156＋178＋191)÷3＝175个。
每克土壤样品中的细菌数为175÷0.1×105＝1.75×108。
血细胞计数板计数法能将死细胞计算在内，而稀释涂布平板计数法只能计数活细胞(只有活细胞才能在平板上生长)，故一般血细胞计数板计数法要比稀释涂布平板计数法的结果大。
(3)箭头处插入70个核苷酸，箭头后密码子的解读方式为*AG，UGA，GAA……对比3种终止密码可发现，此处的终止密码为UGA。
从起始密码到终止密码之前共有273＋72个碱基，因此突变基因表达的蛋白含115个氨基酸。
[答案](1)尿素酚红红(2)稀释涂布平板法1.75 少(3)UGA 1154．(2018·广西桂林第一次联合调研)有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少品种对人、畜的毒性很强，人误食后如不及时医治就会危及生命，某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。
请回答下列问题：【导学号：41780165】(1)为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及________________等的选择培养基上添加____________________进行选择培养。
(2)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜)，观察实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物________(填“甲”“乙”或“丙”)作为菌种进行后续培养，理由是__________________________________。
(3)制备固体培养基的基本步骤是计算→________→溶化→分装→加棉塞→包扎→________→倒平板。
(4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用____________直接计数，也可选用____________________________法统计活菌数目。
[解析](1)微生物生长所需要的营养一般包括水、无机盐、碳源和氮源。
因筛选能降解有机磷农药的微生物，故培养基中需添加适量的有机磷农药。
(2)从观察实验开始到微生物停止生长；丙所用时间最短，说明其对有机磷农药的降解能力较甲、乙强。
(3)制备固体培养的基本步骤是计算→称量→溶化→分装→加棉塞→包扎→高压蒸汽灭菌→倒平板。
(4)菌体数测定可通过显微镜利用血细胞计数板直接计数，也可以利用稀释涂布平板法统计活菌数量。
[答案](1)水和无机盐有机磷农药(2)丙微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强(3)称量高压蒸汽灭菌(4)血细胞计数板稀释涂布平板5．2016年7月郑州市卫生计生委发布的第3期卫生监测信息显示有15家美容美发场所的毛巾、理发(美容)用具大肠杆菌严重超标。
如图甲为大肠杆菌含量检测操作简图，图乙为伊红美蓝培养基配方。
图甲图乙回答下列相关问题：(1)图甲中滤膜的孔径应________(填“大于”或“小于”)大肠杆菌。
受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？__________________。
(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________(一种营养成分)，以及________。
待各成分都溶化后和分装前，要进行的是________和灭菌，对培养基进行灭菌的常用器具是________________________。
倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是______________________________。
伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于________培养基。
(3)用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线的目的是__________________________________________。
要检测样液中的大肠杆菌含量，取25 cm2毛巾样本，加5 mL蒸馏水，浸润半小时，然后在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL 样液；在37 ℃的培养箱中放置48小时，3个平板上的黑色菌落数分别为49、48和47。
据此可得出25 cm2毛巾样液中的活菌数为________。
[解析](1)图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌，滤膜过滤才能获得大肠杆菌，对不耐高温的试剂除菌时无法用高压蒸汽灭菌法，可以用滤膜过滤达到除菌目的。
(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入氮源以及琼脂。
配制的培养基在溶化后和分装前需要先进行调pH和灭菌。
高压蒸汽灭菌法常用高压蒸汽灭菌锅对培养基等进行灭菌。
倒平板后将平板倒置的主要原因是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。
从功能上划分，伊红美蓝培养基属于鉴别培养基。
(3)接种环灼烧灭菌后，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。
在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，据题意可知，25 cm2毛巾样本中的活菌数为(49＋48＋47)÷3÷0.1×5＝2.4×103。
[答案](1)小于用滤膜过滤除菌(2)氮源琼脂调整pH 高压蒸汽灭菌锅防止培养血盖上的冷凝水落入培养基造成污染鉴别(3)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 2.4×1036．(2018·河南郑州二测)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。
将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。
能”)原因是__________。
(2)通常培养基用__________方法灭菌，培养皿用__________方法灭菌，待培养基冷却到__________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在__________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止______________________，以免造成污染。
(3)要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________就能大约推测出样品中活菌数。