色谱分析习题及答案(绝对精华)

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整理色谱分析习题与答案(绝对精华)

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色谱分析习题与答案绝对精华习题解答(7)某工厂在未来三种状态s1,s2,s3下有三种生产方案a1,a2,a3,且a1在三种状态下生产费用分别为32万元,40万元,29万元;a2在三种状态下生产费用分别为21万元,28万元,45万元;a3在三种状态下生产费用分别为38万元,42万元,27万元。

试用下列五种准则选择最优方案:(1)悲观准则;(2)乐观准则;(3)适度乐观准则(α=0.8);(4)后悔值准则;(5)等可能准则。

解:该问题的收益矩阵为s1s2s3Q=a1a2a3[−32−40−29−21−28−45−38−42−27].于是(1)据悲观准则,令d i=minj{q ij},则d1=min{−32,−40,−29}=−40,d2=min{−21,−28,−45}=−45,d3=min{−38,−42,−27}=−42,d1=max{d1,d2,d3}=−40.故应选择的最优方案为a1.(2)据乐观准则,令d i=maxj{q ij},则d1=max{−32,−40,−29}=−29,d2=max{−21,−28,−45}=−21,d3=max{−38,−42,−27}=−27,d2=max{d1,d2,d3}=−21.故应选择的最优方案为a2.(3)据适度乐观准则,α=0.8,令d i1=maxj {q ij},d i2=minj{q ij}.则d11=max{−32,−40,−29}=−29,d12=min{−32,−40,−29}=−40, d21=max{−21,−28,−45}=−21,d22=min{−21,−28,−45}=−45,d31=max{−38,−42,−27}=−27,d32=min{−38,−42,−27}=−42.又令d i=αd i1+(1−α)d i2.则d1=0.8×(−29)+0.2×(−40)=−31.2,d2=0.8×(−21)+0.2×(−45)=−25.8,d3=0.8×(−27)+0.2×(−42)=−30,d2=max{d1,d2,d3}=−25.8.故选择的最优方案为a2.(4)据后悔值准则,令b ij=maxi{q ij}−q ij,表示在s j 状态下,采用方案a i 的后悔值。

色谱分析试题及答案

色谱分析试题及答案

色谱分析试题及答案公司内部档案编码:[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]色谱试题及答案一、填空(每题2分)1气相色谱分析是一种分离分析方法,它的特点是适合于多组分混合物的定性和定量分析。

2气相色谱定性法:是利用同一种物质在相同条件之下,在一根色谱柱上保留时间相同。

3在实验条件恒定时,峰面积或峰高与组分的含量成正比,因此可以利用峰面积或峰高来进行定量。

4色谱柱是气相色谱法的核心部分,许多组成复杂的样品,其分离过程都是在色谱柱内进行的,色谱柱分为两类:填充柱和毛细管柱。

5色谱柱老化的方法由固定液的性质而定,老化的最高温度应低于固定液的最高使用温度20~30℃,但要高于实际工作温度。

6装柱老化时,应将柱的入口端与色谱仪的气化室相连接(柱不能接反,否则固定相将在柱中移动,使柱效发生变化)。

开始老化时出口不得接检测器,以免流出物沾污检测器。

7 色谱分析各组分保留时间变短和分离变坏,说明柱子失效,原因来自样品和载气的污染。

活化的方法是提高柱温,增加载气流速,让色谱柱内污染物流出。

8 载气纯度不符合要求时,会使基线不稳,噪声大。

9 氢气表和氢气钢瓶嘴是反扣螺纹,逆时针方向松开;而氮气表和氮气瓶嘴及其他气体的瓶嘴都是正扣螺纹。

10气相色谱定量方法有归一化法、内标法、外标法等方法。

二、判断(每题2分)1 色谱柱没装上色谱仪之前,两端必须封口,防止和空气接触。

柱子存放期间,应避免剧烈振动、碰撞或弯曲。

2 气相色谱仪使用的各种气体压力为~。

因此需要通过减压表使钢瓶气源的输出压力下降。

3 减压表一般分为氢气表和氮气表(氧气表)两种。

氮气表可以安装在除了氢、乙炔和其他燃气瓶以外的各种气瓶上。

4 使用钢瓶气时,打开钢瓶阀,再把T形阀杆从全开调到需要的压力。

5 气相色谱仪的气路要认真仔细检漏。

用氢气作载气时,氢气若从接口漏进柱恒温箱,可能发生爆炸事故。

最常用的检漏方法是皂膜检漏法6 色谱仪开机:打开主机电源,接通载气,开电脑,设置仪器参数。

色谱分析复习题及参考答案

色谱分析复习题及参考答案

色谱分析综合体一.选择题1.在色谱分析中,用于定量的参数是( B )A 保留时间B 调整保留值C 峰面积D 半峰宽2.塔板理论不能用于( D )A 塔板数计算B 塔板高度计算C 解释色谱流出曲线的形状D 解释色谱流出曲线的宽度与哪些因素有关3.在气-固色谱分析中,色谱柱内装入的固定相为( D )A 普通固体物质B 载体C 载体+固定液D固体吸附剂4.当载气线速越小,范式方程中,份子扩散项B越大,所以应选下列气体中哪一种作载气最有利?( D )A H2B He C Ar D N25.试指出下述说法中,哪一种是错误的? ( C )A 根据色谱峰的保留时间可以进行定性分析B 根据色谱峰的面积可以进行定量分析C 色谱图上峰的个数一定等于试样中的组分数D 色谱峰的区域宽度体现了组分在柱中的运动情况6.为测定某组分的保留指数,气相色谱法普通采取的基准物是:( C )A 苯B 正庚烷C 正构烷烃D 正丁烷和丁二烯7.试指出下列说法中,哪一个不正确?气相色谱法常用的载气是( C )A N2B H2C O2D He8.试指出下列说法中,哪一个是错误的? ( A )A 固定液是气相色谱法固定相B N2、H2等是气相色谱流动相C 气相色谱法主要用来分离沸点低,热稳定性好的物质D 气相色谱法是一个分离效能高,分析速度快的分析方法9. 在气-液色谱法中, 首先流出色谱柱的组分是 ( A )A 溶解能力小B 吸附能力小C 溶解能力大D 吸附能力大10.根据范第姆特议程式,指出下面哪种说法是正确的? ( A )A 最佳流速时,塔板高度最小B 最佳流速时,塔板高度最大C 最佳塔板高度时,流速最小D 最佳塔板高度时,流速最大二.填空题1.按流动相的物态可将色谱法分为 气相色谱法 和 液相色谱法 。

前者的流动相的 气体 ,后者的流动相为 液体 。

2.气相色谱法多用 高 沸点的 有机 化合物涂渍在惰性载体上作为固定相,普通只要在 450 ℃以下,有 1.5 至 10 Kp a 的蒸气压且 稳定 性好的 有机和 无机 化合物都可用气相色谱法进行分离。

色谱分析法习题及答案

色谱分析法习题及答案

色谱分析法习题及答案1.在液相色谱法中,液固色谱法属于吸附色谱法。

2.在高效液相色谱流程中,试样混合物在色谱柱中被分离。

3.液相色谱流动相过滤必须使用0.45μm的过滤膜。

4.在液相色谱中,为了改变色谱柱的选择性,可以进行改变流动相的种类或柱子、改变固定相的种类或柱长、改变固定相的种类和流动相的种类、改变填料的粒度和柱长的操作。

5.一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为正庚烷/异丙醇(93/7)。

6.蒸发光散射检测器不能使用梯度洗脱。

7.在高效液相色谱中,色谱柱的长度一般在10~30cm的范围内。

8.在液相色谱中,某组分的保留值大小实际反映了组分与固定相的分子间作用力。

9.在液相色谱中,为了改变柱子的选择性,可以进行改变流动相或固定相种类的操作。

10.紫外吸收检测器是液相色谱中通用型检测器。

11.在环保分析中,常常要监测水中多环芳烃,如用高效液相色谱分析,应选用荧光检测器。

12.在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是减小填料粒度。

13.在液相色谱中,改变流动相流速不会显著影响分离效果。

14.红外检测器不是高液相色谱仪中的检测器。

15.高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了液相系统和样品前处理的步骤。

16.在高效液相色谱仪中,保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是输液泵。

17.高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用国标规定的一级、二级去离子水。

18.高效液相色谱仪与普通紫外-可见分光光度计完全不同的部件是流通池。

19.高效液相色谱仪的通用检测器是紫外检测器。

20.高效液相色谱仪中高压输液系统不包括梯度洗脱装置。

21.在气相色谱分析中,用于定性分析的参数是保留值。

22.在气相色谱分析中,用于定量分析的参数是峰面积。

23.良好的气-液色谱固定液为蒸气压低、稳定性好、溶解度大,对相邻两组分有一定的分离能力。

24.使用热导池检测器时,应选用氢气作载气,其效果最好。

25.下列说法中,不正确的是气相色谱法常用的载气是氧气。

色谱分析试题及答案

色谱分析试题及答案

色谱试题及答案一、填空(每题2分)1气相色谱分析是一种分离分析方法,它的特点是适合于多组分混合物的定性和定量分析。

2气相色谱定性法:是利用同一种物质在相同条件之下,在一根色谱柱上保留时间相同。

3在实验条件恒定时,峰面积或峰高与组分的含量成正比,因此可以利用峰面积或峰高来进行定量。

4色谱柱是气相色谱法的核心部分,许多组成复杂的样品,其分离过程都是在色谱柱内进行的,色谱柱分为两类:填充柱和毛细管柱。

5色谱柱老化的方法由固定液的性质而定,老化的最高温度应低于固定液的最高使用温度20~30℃,但要高于实际工作温度。

6装柱老化时,应将柱的入口端与色谱仪的气化室相连接(柱不能接反,否则固定相将在柱中移动,使柱效发生变化)。

开始老化时出口不得接检测器,以免流出物沾污检测器。

7 色谱分析各组分保留时间变短和分离变坏,说明柱子失效,原因来自样品和载气的污染。

活化的方法是提高柱温,增加载气流速,让色谱柱内污染物流出。

8 载气纯度不符合要求时,会使基线不稳,噪声大。

9 氢气表和氢气钢瓶嘴是反扣螺纹,逆时针方向松开;而氮气表和氮气瓶嘴及其他气体的瓶嘴都是正扣螺纹。

10气相色谱定量方法有归一化法、内标法、外标法等方法。

二、判断(每题2分)1 色谱柱没装上色谱仪之前,两端必须封口,防止和空气接触。

柱子存放期间,应避免剧烈振动、碰撞或弯曲。

2 气相色谱仪使用的各种气体压力为0.2~0.5Mpa。

因此需要通过减压表使钢瓶气源的输出压力下降。

3 减压表一般分为氢气表和氮气表(氧气表)两种。

氮气表可以安装在除了氢、乙炔和其他燃气瓶以外的各种气瓶上。

4 使用钢瓶气时,打开钢瓶阀,再把T形阀杆从全开调到需要的压力。

5 气相色谱仪的气路要认真仔细检漏。

用氢气作载气时,氢气若从接口漏进柱恒温箱,可能发生爆炸事故。

最常用的检漏方法是皂膜检漏法6 色谱仪开机:打开主机电源,接通载气,开电脑,设置仪器参数。

7 设置所需柱箱温度、进样口温度和检测器温度(FID),检测器的温度应高于150℃,否则点火后造成检测器内积水而影响基线的稳定性)。

色谱分析法试题及答案

色谱分析法试题及答案

色谱分析法试题及答案解析一、选择题(18分)1.两组分在同一固定相上分离的可能性与哪个因素无关? ( )A、检测器灵敏度的高低B、选择性的大小C、分配次数的多少D、分配系数之差的大小2.在其它色谱条件不变时,若使理论塔板数增加3倍,对两个十分接近峰的分离度是 ( )A、增加1倍B、增加3倍C、增加4倍D、增加1.7倍3.如果试样中各组分无法全部出峰或只要定量测定试样中某几个组分,那么应采用下列定量分析方法中哪一种为宜? ( )A、归一化法B、外标法C、内标法D、标准工作曲线法4.在液相色谱中,在以下条件中,提高柱效最有效的途径是 ( )A、减小填料粒度B、适当升高柱温C、降低流动相的流速D、降低流动相的粘度5.气-液色谱中,对溶质的保留体积几乎没有影响的因素是 ( )A、改变载气流速B、增加柱温C、改变固定液的化学性质D、增加固定液的量,从5%到10%6.在柱温一定时,要使相对保留值增加,可以采取 ( )A、更细的载体B、最佳线速C、高选择性固定相D、增加柱长7.当载气流速远大于最佳流速时,为了提高柱效,合适的载气为 ( )A、摩尔质量大的气体B、摩尔质量小的气体C、中等摩尔质量的气体D、任何气体均可8.在气相色谱分析中,为了测定农作物中含硫农药的残留量,应选用下述哪种检测器? ( )A、热导池B、氢火焰离子化C、电子捕获D、火焰光度9.GC的分离原理是基于分配系数K的大小,对于气-固色谱法而言,各组分之间的分离是依据于 ( )A、溶解能力大小B、沸点的高低C、熔点的高低D、吸附能力大小10.相对响应值s'或校正因子f'与下列哪个因素无关? ( )A、基准物B、检测器类型C、被测试样D、载气流速11.气相色谱的分离原理是利用不同组分在两相间具有不同的 ( )A、保留值B、柱效C、分配系数D、分离度12.在气相色谱分析中,为了测定微量含磷农药的含量, 最合适的检测器为: ( )A、热导池B、氢火焰离子化C、电子捕获D、火焰光度13.空心毛细管柱的涡流扩散项等于 ( )A、AB、2λd pC、B/uD、014.在气-液色谱分析中,良好的载体为 ( )A、粒度适宜、均匀,表面积大B、表面没有吸附中心和催化中心C、化学惰性、热稳定性好, 有一定的机械强度D、均可能15.将纯苯与组分i配成混合液,进行气相色谱分析,测得当纯苯注入量为0.435μg时的峰面积为4.00cm2,组分i注入量为0.653μg时的峰面积为6.50cm2,当组分i以纯苯为标准时,相对定量校正因子是( )A、2.44B、1.08C、0.924D、0.46216.组分与固定液分子之间的作用力主要有 ( )A、静电力和诱导力B、色散力C、氢键力D、均可能17.在气-液色谱分析中,组分与固定相间的相互作用主要表现为下述哪种过程? ()A、吸附-脱附B、溶解-挥发C、离子交换D、空间排阻18.空间排斥色谱法的分离原理是()A、分配平衡B、吸附平衡C、离子交换平衡D、渗透平衡二、填空题(27分)1.测定矿泉水中F-、I-、NO3-和SO42-含量时,一般用_______________色谱法。

色谱分析习题及答案(绝对精华)

色谱分析习题及答案(绝对精华)

填充柱色谱:气固(液固)色谱和气液(液液)色谱,两者的分离机理不同。

气固(液固)色谱的固定相: 多孔性的固体吸附剂颗粒。

固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。

气液(液液)色谱的固定相: 由担体和固定液所组成。

固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。

气固色谱的分离机理:吸附与脱附的不断重复过程;气液色谱的分离机理:气液(液液)两相间的反复多次分气相色谱仪主要部件1. 载气系统:包括气源、净化干燥管和载气流速控制;常用的载气有:氢气、氮气、氦气;净化干燥管:去除载气中的水、有机物等杂质(依次通过分子筛、活性炭等);载气流速控制:压力表、流量计、针形稳压阀,控制载气流速恒定。

2. 进样装置:进样装置:进样器+气化室;气体进样器(六通阀):推拉式和旋转式两种。

试样首先充满定量管,切入后,载气携带定量管中的试样气体进入分离柱;气化室:将液体试样瞬间气化的装置。

无催化作用。

3. 色谱柱(分离柱):色谱柱:色谱仪的核心部件。

柱材质:不锈钢管或玻璃管,内径3-6毫米。

长度可根据需要确定。

柱填料:粒度为60-80或80-100目的色谱固定相。

液-固色谱:固体吸附剂液-液色谱:担体+固定液。

柱制备对柱效有较大影响,填料装填太紧,柱前压力大,流速慢或将柱堵死,反之空隙体积大,柱效低。

4. 检测系统:色谱仪的眼睛,通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成;被色谱柱分离后的组分依次进入检测器,按其浓度或质量随时间的变化,转化成相应电信号,经放大后记录和显示,给出色谱图;检测器:通用型——对所有物质均有响应;专属型——对特定物质有高灵敏响应;常用的检测器:热导检测器、氢火焰离子化检测器;5. 温度控制系统:温度是色谱分离条件的重要选择参数;气化室、分离室、检测器三部分在色谱仪操作时均需控制温度;气化室:保证液体试样瞬间气化;检测器:保证被分离后的组分通过时不在此冷凝;分离室:准确控制分离需要的温度。

当试样复杂时,分离室温度需要按一定程序控制温度变化,各组分在最佳温度下分离;气固色谱固定相:1. 种类(1)活性炭 (2)活性氧化铝 (3)硅胶(4)分子筛(5)高分子多孔微球(GDX系列)气固色谱固定相的特点(1)性能与制备和活化条件有很大关系;(2)同一种固定相,不同厂家或不同活化条件,分离效果差异较大;(3)种类有限,能分离的对象不多;(4)使用方便。

色谱分析期末考试题库及答案

色谱分析期末考试题库及答案

色谱分析期末考试题库及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 色谱分析中,下列哪项不是色谱的基本参数?A. 保留时间B. 死时间C. 色谱峰宽D. 样品浓度2. 色谱图上,色谱峰的面积与下列哪项成正比?A. 样品浓度B. 样品质量C. 样品体积D. 色谱柱长度3. 高效液相色谱(HPLC)与薄层色谱(TLC)的主要区别是什么?A. 分离效率B. 样品类型C. 检测灵敏度D. 操作复杂性4. 色谱分析中,色谱峰的宽度与下列哪项有关?A. 色谱柱的直径B. 样品的注入量C. 色谱柱的长度D. 流动相的流速5. 色谱分析中,提高柱效的方法不包括以下哪项?A. 减小色谱柱的直径B. 减小色谱柱的颗粒度C. 增加色谱柱的长度D. 增加样品的注入量二、填空题(每空2分,共20分)6. 色谱分析中的分离过程是基于样品中各组分在_______和_______之间分配系数的差异。

7. 色谱峰的对称性可以通过_______来衡量,它是色谱峰半高宽与基线宽度的比值。

8. 色谱分析中的分辨率(R)可以通过公式R=_______来计算。

9. 在气相色谱中,固定相通常是_______,而在液相色谱中,固定相可以是_______。

10. 色谱分析中,样品的检测可以通过_______、_______、_______等多种方式进行。

三、简答题(每题10分,共30分)11. 简述色谱分析中正相色谱与反相色谱的区别。

12. 解释色谱分析中的“死时间”和“保留时间”的含义,并说明它们之间的关系。

13. 描述色谱分析中常用的几种检测器的工作原理及其应用范围。

四、计算题(每题15分,共30分)14. 假设在一次色谱分析实验中,某组分的保留时间为5分钟,死时间为2分钟,色谱峰宽为1.5分钟。

请计算该组分的相对保留因子(Rf)和塔板高度(H)。

15. 在一次高效液相色谱实验中,色谱柱的总长度为250mm,流动相的流速为1ml/min。

如果某组分的保留时间是10分钟,请计算该组分在色谱柱中的迁移速度。

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色谱分析综合体填空:1. 氢火焰离子化检测器和热导池检测器分别属于_质量型__和___温度__型检测器。

气相色谱仪的心脏是_色谱柱___。

2. 固定液一般是按照__相似相溶___原理选择;在用极性固定液分离极性组分时,分子间作用力主要是__诱导力____,极性愈大,保留时间就愈___长__。

3. 固定液通常是高沸点的有机化合物,这主要是为了保证固定液在使用温度下有____较好的热稳定性____,防止___发生不可逆的化学反应____。

5. 与填充柱相比,毛细管色谱柱的相比β较大,有利于实现快速分析。

但其柱容量_较小_。

6. 在HPLC仪中,为了克服流动相流经色谱柱时受到的阻力,要安装_耐高压的六通阀___。

7. 气相色谱分析中,载气仅起输送作用;而液相色谱分析中,流动相还要直接参加__实际的分配过程__,要想提高高效液相色谱的柱效,最有效的途径是__使用小粒径填料_。

8. 欲分离位置异构体化合物,宜采用的高效液相色谱的分离模式是__梯度洗脱___。

9、色谱法中,将填入玻璃管内静止不动的一相称为固定相,自上而下运动的一相称为流动相,装有固定相的柱子称为色谱柱。

10、液相色谱检测器一般可用紫外可见分光光度检测器,荧光检测器;气相色谱检测器可用热导检测器,氢火焰离子检测器,电子俘获检测器等。

色谱学分析基础:1、色谱塔板理论的假设?答、(1) 在每一个平衡过程间隔内,平衡可以迅速达到;(2) 将载气看作成脉动(间歇)过程;(3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略;(4) 每次分配的分配系数相同。

(5)所有的物质在开始时全部进入零号塔板2、色谱定性的方法都有哪些?答、(1) 用保留时间定性(2) 用相对值保留定性(3) 用保留指数定性(4)用化学反应配合色谱定性 (5)用不同类型的检测器定性⑹色谱和各种光谱或波谱联用3、内标法定量分析时,内标物选择应满足那些条件?答:①试样中不含有该物质②与被测组分性质比较接近③不与试样发生化学反应④出峰位置应位于被测组分接近,且无组分峰影响4、色谱分析中,固定相的选择原则是什么?固定相的选择:气-液色谱,应根据“相似相溶”的原则5、色谱定量分析中为什么要用校正因子?在什么情况下可以不用?答:各种化合物在不同的检测器上都有不同的应答值,所以尽管往色谱仪中注入相同质量的物质,但得到峰面积却不一样,因此峰面积定量时就必须把由色谱仪上得到的峰面积乘上一个系数,得到此成分的质量,在实际分析中,常用某物质做标准,得到一个相对的校正系数,就叫‘相对校正因子’试样中不是所有组分6、总结色谱法的优点。

答:色谱法特点(1)分离效率高(2)灵敏度高(3)分析速度快(4)应用范围广⑸样品用量少⑹分离和测定一次完成⑺易于自动化,可在工业流程中使用7、色谱流出曲线可解决的问题有哪些?气相色谱1. 气相色谱的基本设备包括那几部分,各有什么作用?载气系统去除载气中的水、有机物等杂质进样装置:色谱柱:色谱仪的核心部件检测系统2.试以塔极高度H做指标讨论气相色谱操作条件的选择。

3. 试述速率方程式中A、B、C三项的物理意义。

答:A、涡流扩散项B、纵向扩散项C、传质阻力项4. 为什么可用分辨率R作为色谱柱的总分离效能指标。

5. 能否根据理论塔板数来判断分离的可能性?为什么?6. 对载体和固定液的要求分别是什么?答:载体要求:①具有化学惰性②好的热稳定性③有一定的机械强度④有适当的比表面,表面无深沟,以便是固定液成为均匀的薄膜,要有较大的空隙率,以便减小柱压降。

对固定液的要求:应对被分离试样中的各组分具有不同的溶解能力,较好的热稳定性,并且不与被分离组分发生不可逆的化学反应。

7. 试比较红色担体和白色担体的性能,它们各使用在哪些方面?答;红色担体适宜分析非极性化合物;白色单体适宜分析极性化合物;8. 固定液可分为哪几类?为什么这样划分?如何选择固定液。

答:固定液按分子作用力分为①不易极化非极性固定液②易极化非极性固定液③难成氢键的极性固定液④受质子的极性固定液按极性分类用典型化合物在固定液上的保留性能来表征固定液的选择原则:①“相似相容”原则,②固定液和被分离物分子之间的特殊作用力,③利用混合物固定液④利用协同效应选择固定液9. 色谱定性的依据是什么,主要有哪些定性方法。

答;依据:保留时间定性方法:①用保留时间定性②用相对保留值定性③用保留指数定性④用化学反应配合色谱定性⑤用不同类型的检测器定性⑥色谱和各种光谱或波谱联用10.假设一个未知油剂样品,请设计一种气象色谱分析方法,并概述分析过程。

液相色谱:11、正相HPLC 与反相HPLC 的主要不同之处什么?各适合分离什么物质?答:正相HPLC 是指以亲水性的填料做固定相,以疏水性溶剂或混合物做流动相的液相色谱,主要用于分离 醇类,类脂代化合物、磷脂类化合物,脂肪酸以及其他化合物。

反相HPLC 是指以强疏水性的填料作固定相,以可以和水混合的有机溶剂做流动相的液相色谱,主要用于分离生物大分子、卤化物和肽及蛋白质,含卢芳烃,小分子的核酸、核苷酸、多环芳烃等;12、何为梯度洗脱?什么情况下采用梯度洗脱?答:梯度洗脱就是有两种(或两种以上)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定程度连续的改变,以改变流动相的配比和极性。

适合:①具有较宽K 范围的样品,及所有的组分的色谱峰的K 值不能在0.5-20之间②大分子样品,相对分子质量大于1000的,尤其是生物样品③样品中含有高保留时间的干扰成分,在一次分析中如不把他洗脱出去,就会污染色谱柱,并影响下一次分析。

④即使在使用等度时也可以使用梯度洗脱选择流动相的比例。

3、液相色谱中最常用的检测器是什么检测器,它适合那些物质的检测?答:最常用的是紫外可见分光光度检测器,适合在可见或紫外光区有吸收物质的检测;4、某组分在ODS 柱上,以80%甲醇作流动相时的保留时间为10min,如果用60%甲醇作流动相,组分的保留时间是增加,还是减小?如果将80%甲醇换成80%异丙醇后,又会怎样变化呢?并请作出解释。

5、高效液相色谱法的特点 答:特点在于高分离性能、高灵敏度、高分析速度、可以自动化运行6、在一定条件下,两个组分的保留时间分别为12.2s 和12.8s ,计算分离度。

要达到完全分离,即R=1.5,所需要的柱长。

(已知n=3600) 解:分离度:7、在一定条件下,两个组分的调整保留时间分别为85秒和100秒,要达到完全分离,即R =1.5 。

计算需要多少块有效塔板。

若填充柱的塔板高度为0.1 cm ,柱长是多少?解: r 21= 100 / 85 = 1.18n 有效 = 16R 2 [r 21 / (r 21 —1) ]2 = 16×1.52 ×(1.18 / 0.18 ) 2= 1547(块)L 有效 = n 有效·H 有效 = 1547×0.1 = 155 cm即柱长为1.55米时,两组分可以得到完全分离。

色谱法是一种分离技术,试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。

其中的一相固定不动,称为固定相;另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相。

色谱法:当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。

由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。

2、色谱法分类 色 谱:气相色谱GC 、液相色谱LC 、超临界流体色谱 SFC2.色谱法分类(1)气相色谱:流动相为气体(称为载气)。

按分离柱不同可分为:填充柱色谱和毛细管柱色谱;按固定相的不同又分为:气固色谱和气液色谱(2)液相色谱:流动相为液体(也称为淋洗液)。

按固定相的不同分为:液固色谱和液液色谱。

离子色谱:液相色谱的一种,以特制的离子交换树脂为固定相,不同pH 值的水溶液为流动相。

(3)其他色谱方法薄层色谱和纸色谱:比较简单的色谱方法凝胶色谱法:测聚合物分子量分布。

超临界色谱: CO2流动相。

3.色谱法的特点(1)分离效率高复杂混合物,有机同系物、异构体。

手性异构体。

(2) 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。

(3) 分析速度快一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。

(4) 应用范围广 气相色谱:沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。

液相色谱:高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。

不足之处:被分离组分的定性较为困难。

二、色谱分离过程色谱分离过程是在色谱柱内完成的。

8533.036008.12448133.036002.12442211=⨯===⨯==n t W n t W R b R b 72.08133.08533.0)2.128.12(2=+-⨯=R m L R R L 34.4172.05.1212122=⨯⎪⎪⎭⎫ ⎝⎛=⨯⎪⎪⎭⎫ ⎝⎛=填充柱色谱:气固(液固)色谱和气液(液液)色谱,两者的分离机理不同。

气固(液固)色谱的固定相: 多孔性的固体吸附剂颗粒。

固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。

气液(液液)色谱的固定相: 由担体和固定液所组成。

固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。

气固色谱的分离机理:吸附与脱附的不断重复过程;气液色谱的分离机理:气液(液液)两相间的反复多次分气相色谱仪主要部件1. 载气系统:包括气源、净化干燥管和载气流速控制;常用的载气有:氢气、氮气、氦气;净化干燥管:去除载气中的水、有机物等杂质(依次通过分子筛、活性炭等);载气流速控制:压力表、流量计、针形稳压阀,控制载气流速恒定。

2. 进样装置:进样装置:进样器+气化室;气体进样器(六通阀):推拉式和旋转式两种。

试样首先充满定量管,切入后,载气携带定量管中的试样气体进入分离柱;气化室:将液体试样瞬间气化的装置。

无催化作用。

3. 色谱柱(分离柱):色谱柱:色谱仪的核心部件。

柱材质:不锈钢管或玻璃管,内径3-6毫米。

长度可根据需要确定。

柱填料:粒度为60-80或80-100目的色谱固定相。

液-固色谱:固体吸附剂液-液色谱:担体+固定液。

柱制备对柱效有较大影响,填料装填太紧,柱前压力大,流速慢或将柱堵死,反之空隙体积大,柱效低。

4. 检测系统:色谱仪的眼睛,通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成;被色谱柱分离后的组分依次进入检测器,按其浓度或质量随时间的变化,转化成相应电信号,经放大后记录和显示,给出色谱图;检测器:通用型——对所有物质均有响应;专属型——对特定物质有高灵敏响应;常用的检测器:热导检测器、氢火焰离子化检测器;5. 温度控制系统:温度是色谱分离条件的重要选择参数;气化室、分离室、检测器三部分在色谱仪操作时均需控制温度;气化室:保证液体试样瞬间气化;检测器:保证被分离后的组分通过时不在此冷凝;分离室:准确控制分离需要的温度。

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