岛津LC-20AT液相色谱操作步骤
岛津LC-20AT操作规程
岛津LC-20AT型高效液相色谱系统标准操作规程一、目的规范岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
二、范围本规程适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
三、职责质检室仪器分析员负责岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的日常使用和维护。
四、操作规程1、流动相的处理1.1 过滤溶剂溶剂在使用定要用0.45μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片本实验室有水溶性和脂溶性两过滤膜供选择（反光面朝上），缓冲盐先用水膜过滤，和有机相混合后再用有机滤膜过滤，滤前先滤少量纯化水清洗滤器。
1.2 保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
1.3保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管道上装沉子沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
过滤器阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。
过滤器应先用水超声，再用甲醇超声处理。
这种情况下，流动相需要重新过滤。
1.4.3 流动相和储液器被污染由于污染，噪音越来越大，检测器基线上升。
污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统，而再以稳定的浓度流出来，所以在色谱图中不出余的峰。
用梯度洗脱时弱流动相可以使污染物聚在柱顶，流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一大的伪峰。
岛津LC-20AT高效液相色谱仪操作规程
1 目的：为了规范LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养，确保测量结果的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 接通电源，开启泵、柱温箱、检测器等辅助设备。
4.1.2 开启计算机，双击打开LC solution窗口，单击分析，进入工作站。
4.1.3 计算机与仪器连接后，把配制好的流动相放入贮液瓶中，然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°，打开冲洗阀，再按Purge键进行排空，检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡，即再按Purge键停止排空此时检查压力显示是否为“0”，若不为“0”，执行以下零压力调整操作：在停泵状态下，按func键多次，直至进入ZERO ADJ项，按Enter键完成初始压力调零，最后顺时针旋紧排空阀。
4.1.4 最大和最小保护压力设定4.1.4.1最大压力限制是流路中的压力所不能超过的值，最大保护压力设置的目的就是保护色谱柱和其他流路部件。
如果压力超过限定值，送液就将自动停止，发出报警声并显示出错信息。
在初始屏幕上按func两次，光标会在MAX字段后闪烁，提示输入新值，然后按Enter键，屏幕上出现新值。
4.1.4.2最小压力限制是防止以下情况发生的压力下降：a) 当流路中发生了漏液；b) 当储液瓶中的流动相流完时，空气将通过流路被抽进来。
如果压力下降至最小压力限制值以下时间超过1分钟，送液也将自动停止，同时发出报警声并显示出错信息。
4.1.5泵启动和停止：按Pump键，泵就开始启动，泵运行指示灯亮。
泵运行后，须注意观察显示面板上工作压力的显示值，确保压力上升并逐渐达到一个稳定值，一般压力波动的上下幅度不应大于0.5MPa。
需要停泵就只要再按Pump键，泵一停，运行指示灯就熄灭。
4.2 方法的建立与调用4.2.1 新建方法点击文件菜单下“新建方法文件”，建立一个空白方法仪器参数视图中的高级选项中设置，数据采集：设置分析时间→LC程序时间：按需要设置时间程序→泵：设置泵的流速，流动相通道、压力上限→检测器：设置氘灯开启、池温度、检测波长→柱温箱：设置柱温。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程岛津LC-20AT型液相色谱仪操作规程1．目的规范岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养，保证测量数据的准确可靠。
2．范围适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养操作。
3．职责岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作人员执行本规程；质量部管理人员监督实施。
4．规程4.1 系统组成：LC-20AT型高压双泵、SIL-20A自动进样阀、SPD-20AT紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站和IBM台式电脑等组成。
4.2 准备4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机4.3.1 接通电源，依次开启不间断电源、B泵、自动进样器、检测器、柱温箱、A泵4.3.2 待泵和检测器自检结束后，打开打开色谱工作站，点击按钮“1”，输入用户名:ADMIN。
4.3.3 当SPD-20A发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，LC窗口打开。
4.4 参数设定4.4.1 设置新的分析参数时，请从通过键盘在LC窗口的“Instrument Parameters View”中输入参数（即A、B泵的流速，波长，柱温；柱在线时流速一般不超过1ml/min）4.4.2 选择File >Save Method File As ，输入方法名称后保存。
4.4.3 点击“Download”键，将保存好的方法下载4.5 更换流动相并排气泡4.5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；4.5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀360°4.5.3 按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，1min再次按A/B 泵的[purge]键4.5.4 顺时针转动A/B泵的排液阀,关闭排液阀4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽4.6 平衡系统4.6.1 更换流动相并排气泡后，在工作站中输入实验信息并设定各项方法参数4.6.2 等度洗脱方式4.6.2.1 点击“Instrument on/off ”按钮，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。
lc20at高效液相色谱仪操作规程
lc20at高效液相色谱仪操作规程
《LC20AT高效液相色谱仪操作规程》
一、设备准备
1. 打开色谱仪电源，确认仪器是否处于正常工作状态。
2. 打开色谱软件，连接色谱仪，确认软件和仪器能够正常通讯。
3. 检查色谱柱是否安装正确，连接管路是否畅通。
二、样品准备
1. 将待测样品溶解于适当的溶剂中，确保样品溶液的浓度适宜且清澈透明。
2. 过滤样品溶液，去除悬浮物和杂质。
三、色谱条件设置
1. 根据实际需要，设置色谱柱类型、流动相和流动相梯度。
2. 设置检测波长和响应时间，根据样品的特性选择合适的波长进行检测。
四、系统平衡
1. 开始启动色谱软件，并依照预设条件进行系统平衡，确保色谱柱内部的平衡和稳定。
2. 检查泵流速、进样器和检测器的工作状态，确认无异常。
五、进样测定
1. 启动自动进样器，进行样品的进样。
2. 根据实验需求，设置进样体积和进样方式，确保样品进样量和方式的准确性。
六、数据处理
1. 实时监控色谱图谱，确保分离效果与预期一致。
2. 根据检测结果，进行数据分析和处理，生成结果报告。
七、仪器关闭
1. 实验结束后，关闭色谱软件，断开色谱仪与电脑之间的连接。
2. 关闭色谱仪电源，清洁仪器表面，确保仪器干净整洁。
八、日常维护
1. 定期检查和清理色谱柱和管路，防止堵塞和杂质积聚。
2. 记录仪器使用情况，定期进行保养和维修，确保仪器的正常运转。
以上即是《LC20AT高效液相色谱仪操作规程》，希望操作人
员严格遵守操作规程，确保实验数据的准确性和仪器的长期稳定运行。
岛津 LC-20AT标准操作规程
岛津LC-20AT标准操作规程题目岛津 LC-20AT标准操作规程第 1 页共 2 页编码SOP-03版次1起草/修订人日期20171218 起草/修订部门治疗药物监测室审核人日期颁发部门药学部批准人日期执行日期分发部门药学部办公室、临床药学变更历史版本号 1 目的：建立岛津 LC-20AT高效液相色谱标准操作规程操作规程,确保检测精确可靠。
范围：治疗药物监测项目责任：治疗药物监测检测员。
内容：1.仪器安装：1.1岛津 LC-20AT高效液相色谱仪为精密仪器，厂家安排工程师安装调试。
2.仪器使用：2.1开机：确保仪器连接电源，依次按下泵、柱温箱、自动进样器、检测器电源键。
检查管路有无气泡，流动相是否足够。
2.2 旋转泵排液阀按钮90-180°，按purge泵运行。
大约2min后完成，关闭排液阀。
2.3 打开电脑，打开Labsolution软件，当听到“滴”的声音表示，仪器与电脑连接成功。
2.4 在Labsolution软件界面下，打开方法文件，若检测样本流动相为盐溶液，需先用5%甲醇水溶液冲洗管路10-20min，然后用流动相冲洗管路40min以平衡色谱柱，如检测样本流动相为有机溶剂，可直接使用流动相平衡。
2.5 平衡色谱柱期间，可处理待测样本。
样品处理完成后，放入自动进样器，若待测样本较少，可在样品管内加内衬管。
2.7 Labsolution软件界面下，设置基线参数，按下基线检查按钮，约15min后基线归零。
编辑批处理文件，仪器按照程序自动进样检测。
2.8 数据处理：待测样本检测完成后，加载相应处理方法，记录数据，并打印报告。
3.仪器维护与保养：3.1 样品检测完成后，若其流动相为盐溶液，需先用5%甲醇水溶液冲洗10-20min，后用甲醇冲洗10-20min，如其流动相为有机溶剂，可直接用甲醇冲洗20-30min。
3.2 若当天待测样品品种较多，需使用不同的流动相和色谱柱，宜对每根色谱柱进行相应的冲洗。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程一、开机前准备1、流动相按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。
无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。
脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。
有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。
将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。
一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B 泵。
注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。
2、色谱柱按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。
色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。
二、开机1、打开Labsolution。
点击自动进样器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。
双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。
标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。
要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。
荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。
2、新建方法文件文件→新建方法文件将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。
设置完成后点击“下载”。
流路排气根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。
以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程一．系统配置系统组成：本系统由DGU-20A3 脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（2个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A 紫外-可见检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等组成。
二．准备工作1．流动相准备：使用前按待检测样品的检验方法准备所需的流动相（水使用蒸馏水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L）用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，水相使用前必须过滤，有机相用肉眼观察有颗粒时必须过滤）。
2．色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流动相流向一致（检查柱上“FLOW”流向）。
3．样品溶液配置：配置样品和标准溶液，用合适0.45μm的样品过滤器过滤后待用。
如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。
严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。
4．检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
三．开机、参数设定及平衡系统1．开机：接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。
2．排气泡或更换流动相的操作方法1）将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2）逆时针转动A/B泵的排液阀180o；3）按A/B泵的【purge】键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4）将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5）如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6）如按以上方法不能排尽气泡，从色谱柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中设流速为5 ml/min冲洗3分钟，停泵后重新接上色谱柱并将流速重新设定为规定值。
3．参数设定1）波长设定：一般设为254nm。
2）流动相设定：流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％冲洗一段时间，等待柱压平稳后可调节到正常流速（调节流速时应该每次增减0.1ml/min，不宜调节过快，柱在线时流速一般不超过1ml/min）。
岛津 LC-20AT标准操作规程
1开机：确保仪器连接电源，依次按下泵、柱温箱、自动进样器、检测器电源键。
检查管路有无气泡，流动相是否足够。
2 旋转泵排液阀按钮90-180°，按purge泵运行。
大约2min后完成，关闭排液阀。
3 打开电脑，打开Labsolution软件，当听到“滴”的声音表示，仪器与电脑连接成功。
4 在Labsolution软件界面下，打开方法文件，若检测样本流动相为盐溶液，需先用5%甲醇水溶液冲洗管路10-20min，然后用流动相冲洗管路40min以平衡色谱柱，如检测样本流动相为有机溶剂，可直接使用流动相平衡。
5 平衡色谱柱期间，可处理待测样本。
样品处理完成后，放入自动进样器，若待测样本较少，可在样品管内加内衬管。
6 Labsolution软件界面下，设置基线参数，按下基线检查按钮，约15min后基线归零。
编辑批处理文件，仪器按照程序自动进样检测。
7 数据处理：待测样本检测完成后，加载相应处理方法，记录数据，并打印报告。
8 样品检测完成后，若其流动相为盐溶液，需先用5%甲醇水溶液冲洗10—20分钟，后用甲醇冲洗10—20分钟，如其流动相为有机溶剂，可直接用甲醇冲洗20—30分钟。
9 若当天待测样品品种较多，需使用不同的流动相和色谱柱，宜对每根色谱柱进行相应的冲洗。
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岛津LC-20AT高效液相色谱操作步骤
1、流动相的处理
◆共有5个流动相储液瓶。
一般RP-HPLC中，A（无机相）、B（有机相）为
分析流动相；C（水）、D（甲醇）用于柱子后处理清洗；50%甲醇-水用于清洗自动进样针
◆流动相体积V A、B=100+总流速×比例系数×分析时间（mL）；V c≥300mL；
V D≈350mL；V50%甲醇≈300mL
◆所有流动相须用0.22um孔径滤膜过滤（根据有机相和无机相选用相应滤膜），
清洗储液瓶，不能在清洗过程中留下污迹，并超声30min，超声完成后禁止剧烈摇晃
2、开机
◆开启插座电源电脑开机
◆打开仪器电源（LC—20AT最后打开，等待数秒后“control”指示灯亮）
◆打开软件（Labsolution 仪器LC—20A），若连接正常则软件
显示LC就绪
3、自动排气
◆将各流动相过滤头缓慢放入流动相中
◆在简单设置界面设置总流速为0.2mL/min；在自动排气界面设置自动排气参
数（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ各流动相≥5min，自动进样器≥25min），不勾选“排气结束后运行控制器”
◆“下载”“执行自动排气”
◆等待排气结束
4、样品处理
◆稀释后的样品（浓度约1mg/mL，不宜过高）用注射器经0.22um过滤器注
入样品瓶
◆样品应≥2/3样品瓶体积（1.5mL样品瓶）
◆按序号依次将样品瓶放入自动进样器的样品架上
◆切记：将样品架推到底！
5、系统平衡及设置分析条件
◆自动排气完成后，设置柱温、检测波长等参数(建议柱温高于环境10℃)，
用梯度洗脱初始流动相平衡柱子（流动相比例与梯度洗脱初始比例一致）
◆“下载”“激活/取消激活仪器”，此时系统显示：等待柱温稳定
◆缓慢增加总流速至样品分析所需流速，V max=1ml/min（每隔1分钟增大
0.2mL/min，注意每次增大都点击“下载”）
◆在时间程序界面设置梯度洗脱条件
◆若要保存方法文件：文件方法文件另存
◆等待基线平稳（留意泵压力是否稳定），待系统显示：LC就绪，右击，进行
基线测试斜率（一般＜3000即可）
◆开始测样
6.“单次分析开始”或“批处理”
6.1单次分析开始
◆依次输入样品名（样品ID可有可无）、样品瓶、瓶架（1）、进样体积等
◆注意数据文件所在文件夹，输入数据文件名打开
◆确定
6.2批处理
◆“向导”
◆“新建”，样品组号（1），选择“未知样品”，依次输入文件名及其他
◆注意批处理文件所在文件夹，勾选“数据文件名自动递增”、不勾选“自动创
建文件名”
◆完成
◆选中全部序列
◆开始批处理
7.柱子后处理：先用易溶解样品的流动相清洗（一般用高比例有机相洗15min），10%甲醇洗30min，再用90%甲醇洗30min；长期不使用保存于纯甲醇中
方法一：
◆在简单设置界面设置：流动相C-90%；流动相D-10% 下载
◆切换柱温箱off
◆30min后设置：流动相C-10%；流动相D-90% 下载
方法二（推荐）：
◆设置洗柱程序
◆“下载”
◆“单次分析开始”样品瓶输入“-1”文件名“洗柱”
◆系统提示“禁用采集”确定
8.数据处理（打开Labsolution 再解析）
8.1标准曲线
◆数据处理打开文件“向导”
◆勾选特征峰、外标法
◆依次输入最大级别数（标曲的点数）、单位、化合物名、浓度等完成◆应用到方法方法另存为
◆主项目批处理打开批处理文件
◆填写表格：首行（标准、初始化标准点），（标准样数与前面的最大级别数相
对应，剩下的为未知）、（文件方法为先前保存的方法，向下填充）、（标准样品级别号分别1.2.3.4.5未知样品0）
◆批处理再解析开始批处理文件另存
◆主项目校准曲线（可找到已做成的标曲）
8.2生成报告
◆打开要生成报告的数据文件
◆视图手动积分栏，处理数据文件
◆生成报告
◆右击“属性”进行调整，预览、打印
8.3检测限、定量限的确定、扣除背景（略）
9.实验结束后，“切换泵ON/OFF ”确认泵泵压力降为零
关软件
10.电脑关机关闭插座电源。
注意事项
LC—20A（G）液相教学视频要在英文目录下才可以播放，不能含中文字
在流速较大时，若发现泵压力接近19MPa尚有上升趋势，必须马上降低流速。