可溶性还原糖的鉴定原理
还原糖测定的原理
还原糖测定的原理
还原糖是指具有还原性的糖类物质，如葡萄糖、果糖等。
在还原糖测定中，常用的试剂是费林试剂，它是一种含有铜离子的碱性溶液。
在还原糖的存在下，费林试剂会发生蓝色沉淀的反应，通过测定沉淀的数量来确定样品中还原糖的含量。
还原糖测定的原理可以简单概括为，还原糖与费林试剂发生化学反应，生成蓝色沉淀，通过测定沉淀的数量来确定还原糖的含量。
具体来说，还原糖测定的步骤如下：
首先，将待测样品与费林试剂混合，在碱性条件下进行加热反应。
在反应过程中，还原糖与费林试剂发生氧化还原反应，生成蓝色沉淀。
接着，通过一定的方法将生成的蓝色沉淀沉淀下来，并进行定量分析。
一般常用的方法是通过滤纸或离心等手段将沉淀分离出来，然后对沉淀进行定量测定。
最后，根据生成的蓝色沉淀的数量，结合标准曲线或计算公式，可以准确地计算出样品中还原糖的含量。
通过这样的步骤，就可以完成对样品中还原糖含量的测定。
还原糖测定的原理简单明了，通过与费林试剂的化学反应，生成的蓝色沉淀可以用来定量分析还原糖的含量。
这种方法操作简便，结果准确可靠，因此在食品加工、医学诊断等领域得到了广泛的应用。
总的来说，还原糖测定的原理是基于还原糖与费林试剂的化学反应，通过生成的蓝色沉淀来定量分析还原糖的含量。
这种方法简单易行，结果准确可靠，适用于多种样品的测定。
希望本文对大家了解还原糖测定的原理有所帮助。
高中生物___检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
注意事项：
（1）如果用鸡蛋清作为材料，则必须进行充分稀释，否则反应 后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗 刷干净。 （2）【双缩脲试剂】：A液：0.1g/mL NaOH，B液：0.01g/mL CuSO4。先加A液后加B液，且B不能过量，不需要加热。 （3）过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而 掩盖生成的紫色。 （4）先加入A液2ml，摇匀；再加入B液3-4滴，摇匀。
四﹑实验结果 示例
思考与讨论：
（1）9%Nacl溶液的作用？ 保持空腔上皮细胞的正常形态。 （2） 8%盐酸的作用？ 杀死细胞，改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞； 使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 （3）吡罗红甲基绿染色剂要现用现配。该实验不宜选用绿色 植物叶肉细胞（有颜色）和其他有颜色的细胞（如鸡血细胞） 作为实验材料，因其会干扰颜色观察。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
注意事项；1、甲液乙液等量混合，现用现配。 2、需水浴加热
还原糖的检测结果
斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的 Cu2O沉淀。 -CHO+Cu(OH)2悬浊液 -COOH+Cu2O↓（砖红色）
二、脂肪的检测 （1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。 （2）检测过程：
（4）染色
在载玻片上滴加两滴2滴用吡罗红，甲基绿染色剂，染 色5分钟 吸去多余的染色剂，盖上盖玻片
（5）观察：先低倍镜：选染色均匀，色泽浅的区域，移到视野中央 。后
高倍镜：观察细胞核和细胞质的染色情况。
0.9%生理盐水？
人口腔上皮细胞
取材
8%盐酸？
30℃水浴
高中生物必修一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定-人教版
8、下面是一组探究生物体内主要有机物存在与否的鉴别实验，按表中数字顺序
（2）__用__滴__管__向__试__管__中__滴___加__2_—__3_滴__5_%__的__N_a_O__H_溶__液__，__振__荡__。___ （3）_用__滴__管__向__试__管__中__滴__加__2_—__3_滴__3_%__的__C__u_S_O_4_溶___液__，__振__荡__ （4）结果观察：_静__置__一__会__儿__后__，__观__察__到__红__紫__色__，__说__明__唾液中含有蛋白质
②A组发育正常，B组和C组不正常，但B组比C组发育状况指标好，差异显著。说明“人造蛋白”比缺乏 蛋白质对儿童正常发育更有害（注：其他的合理答案均可）
参考答案：
2． （2） ①选取年龄相当、体重相当、发育良好的大白鼠若干，平均分为三组，标记为A、 B、C。分别饲养 ②每天分别给A、B、C三组大白鼠饲喂等量的真正的纯牛奶、不含任何蛋白质的假 牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶
【实验一】 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
【实验一】生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
【实验原理】
1、可溶性还原糖的鉴定原理 ： （1）生物组织中普遍存在的可溶性还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖， 分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原性糖； （2）用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖的存在与否。斐林试剂由质量浓 度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．05g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二 者混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的 条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀 （3）用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色—棕色—砖红 色（沉淀）。
【课外阅读】可溶性还原糖鉴定的几种方法
可溶性还原糖鉴定的几种方法生物组织中普遍存在着各种糖类，其中葡萄糖、果糖、麦芽糖等分子内含有醛基，醛基具有还原性，可与弱氧化剂反应。
因此凡是与醛基有特定颜色反应的化学试剂都可以用来鉴定可溶性还原糖的存在。
在化学上常用新制的氢氧化铜和银氨溶液来鉴定可溶性还原糖，在生物学上常用斐林试剂、班氏试剂、本尼迪特试剂来鉴定可溶性还原糖。
1．利用银氨溶液（也叫托伦试剂）：银氨溶液是在2％的AgNO3溶液中逐滴滴入2％的稀氨水，至最初产生的沉淀恰好溶解为止，这时得到的溶液就是银氨溶液。
银氨溶液中含有Ag(NH3)2 OH（氢氧化二氨合银），这是一种弱氧化剂，能把可溶性还原糖中的醛基氧化成羧基，同时Ag＋被还原成金属银。
还原生成的银附着在试管壁上，形成银镜。
可见，银镜反应可用于鉴定可溶性还原糖，鉴定的结果是出现银镜。
2．利用新制的氢氧化铜：在试管里加入10％的NaOH溶液2mL，滴入2％的CuSO4溶液4～6滴，振荡后就会生成新制的Cu(OH)2，加入生物组织样液0.5 mL，加热至沸腾，若生物组织样液中含有可溶性还原糖，就会产生砖红色的Cu2O（沉淀）。
3．利用斐林试剂：斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL C uSO4溶液配制而成。
使用时，先将NaOH溶液和CuSO4溶液混合（将4～5滴CuSO4溶液滴入2mL NaOH溶液中），生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀，然后向所要鉴定的生物组织样液加入该混合液进行水浴加热，若溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀），则说明生物组织样液中含有可溶性还原糖。
由于斐林试剂要现配现用，否则实验难以得到满意结果，因为此鉴定方法实际利用的是斐林试剂中的新制Cu(OH)2作为弱氧化剂，与可溶性还原糖的反应，而Cu(OH)2是一种沉淀物质，放置过久沉淀过多则不利于反应，因此人们对斐林试剂进行改良，配制出了班氏试剂和本尼迪特试剂。
4．利用班氏试剂（也叫班氏糖定性试剂）：班氏试剂是斐林溶液的改良试剂，由硫酸铜、柠檬酸钠和无水碳酸钠配制而成。
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1．实验原理可溶性糖中的还原糖（葡萄糖、果糖）与斐林试剂作用生成砖红色沉淀；脂肪被苏丹Ⅲ溶液或苏丹Ⅳ溶液染成橘黄色或红色；蛋白质与双缩脲试剂发生作用，能产生紫色反应。
2．材料用具做可溶性还原糖的鉴定实验，应选择含糖量高，颜色为白色或近于白色的植物组织，以苹果、梨为最好，使实验效果明显；做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪含量高的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3~4 h；做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1~2 d的黄豆种子（或用豆浆），或用蛋清（必须稀释10倍后再使用）。
3．实验试剂由质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液刚配制而成的斐林试剂；苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ溶液；双缩脲试剂。
4．实验过程可溶性糖的鉴定：注意：蛋白质的鉴定在试剂使用上与还原糖鉴定不同的是，先加入质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液，造碱性环境，观察颜色变化后再加入3~4滴质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液，而不是混合使用。
讨论：（1）用斐林试剂鉴定可溶性糖（还原糖）时，溶液的颜色变化为什么是浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）？（提示：棕色为浅蓝色与砖红色的混合色）（2）鉴定可溶性还原糖试验中，苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的颜色反应最明显的是哪一种？（提示：经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜）在［实验1］生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但两者有如下三点不同：（1）溶液浓度不同。
斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05 g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1 g/mL,CuSO4的浓度为0.01 g/mL。
（2）使用原理不同。
斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。
（3）使用方法不同。
还原糖的鉴定(最全版)PTT文档
A液 质量浓度的NaOH溶液
B液 质量浓度的CuSO4溶液 3、苏丹III
苏丹III干粉，溶于100mL体积分数为95%的酒 精中，待全部溶解后再使用。
四、实验步骤 1、可溶性还原糖的鉴定
制备生物组织样液 取材、研磨、过滤 取样
取2ml组织样液注入试管
砖红色沉淀
4、观察。
2、脂肪＋苏丹III A液 质量浓度为的NaOH溶液
A液 质量浓度的NaOH溶液 取2ml组织样液注入试管
橘黄色
脂肪＋苏丹IV
红色
3、蛋白质＋双缩脲试剂
紫色反应
二、实验材料：
鉴定的有机物
滴入3~4滴双缩脲
适宜材料
选用的材料
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
还原糖的鉴定
显微镜的使用
1、安放； 3、调焦；
2、对光； 4、观察。
实验一: 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、 蛋白质的鉴定
一、实验原理：
如用酒精灯直接加热，Cu2O沉淀颗粒较小，呈现黄色。
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化 加热（煮沸2min），观察
可溶性还原糖的鉴定原理： 加热（煮沸2min），观察
花生种子
取一支试管注入
加热（煮沸2min），观察
如用酒精灯直接加热，Cu2O沉淀颗粒较小，呈现黄色。
B液 质量浓度的CuSO4溶液
Байду номын сангаас蛋白质
富含蛋白质的 生物组织
豆浆
• 深入原理
1.可溶性还原糖的鉴定原理：
生物组织中常见的可溶性糖有葡萄糖、果糖、 麦芽糖、蔗糖。前三种糖分子中都含有游离的 具有还原性的半缩醛羟基，因此叫还原性糖， 而蔗糖的分子中没有，因此叫非还原性糖。
高中生物实验 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
实验原理：化学试剂+有机化合物→特定的颜色 还原糖 + 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀 蛋白质 + 双缩脲试剂 →紫色 脂 肪 +苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（红色） 淀 粉 + 碘 →蓝色 还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖
还原糖 + 斐林试剂 加 热→ 砖红色沉淀 先混合再加入糖中 （ NaOH +CuSO4）
• 第二步：分别向3支试管内加入相应的液体。一号加 2mL正常尿液；2号加_2m__l含__有__葡__萄__糖_的__尿_；液3号加 _2_m_l_待__测_尿__液_____________。
• 第三步：向3支试管内分别加入刚配好的斐林试剂1mL, 振荡试管，使溶液混合均匀，并将这3支试管放入盛有 50～60°C温水的大烧杯中，加热约2min。
先加NaOH 液于样液中， 再加CuSO4 液于样液中
蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
二、目的要求 三、材料用具
四、方法步骤
1、可溶性还原糖的鉴定
取材、研磨、过滤
制备生物组织样液
取样 取2mL组织样液
注入试管
注入试剂 向试管注入2mL斐林试剂
加热和观察
注意事项：1、若用斐林试剂要现配现用； 2、对试管加热时，试管口不要朝向实验者； 3、检测还原糖时应水浴50~60度加热。
去浮色 滴1~2滴50%的酒精溶液 制作临时装片
放在显微镜下观察
注意事项：花生种子要提前浸泡3~4小时；
六、探究试验
通常情况下，正常人的尿液中没有葡萄 糖。当一次食用大量糖时，尿液中是否有葡 萄糖存在？试运用对照的方法设计实验方案 进行鉴定。
实验一、生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定·实验指导（攻关不畏难）一．目的要求：1、初步掌握鉴定是生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的基本方法；2、识记鉴定所用材料、试剂、仪器，懂得选材的要求；3、能熟练使用低倍镜，制作徒手切片、临时装片，了解规范使用显微镜的方法；4、理解实验的目的、原理和方法步骤，进一步归纳出生物组织中可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定原理。
二．材料用具1、实验材料：1）做还原糖的鉴定，应该选择含糖量较高、颜色为白色的植物组织，以苹果、梨为最好。
2）做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3—4h。
3）做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1—2d的大豆种子（或用豆浆），或用鸡蛋蛋白。
2、仪器和试剂：1）仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，研钵，石英砂，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。
2）试剂：斐林试剂（主要由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成，）苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂，体积分数为50%的酒精溶液，蒸馏水。
三．实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有机化合物产生特定颜色的反应。
1、可溶性还原糖的鉴定原理：可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖）与斐林试剂发生作用，可以生面碳红色沉淀，斐林试剂实际是Cu2+的碱性溶液，能使具有自由醛基或酮基的糖氧化，Cu2+则被还原成硕红色的Cu2O沉淀，反应式为：CH2OH—（CHOH）4—CHO+2Cu（OH）2CH2OH—（CHOH）4—COOH+Cu2O +2H2O 用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液颜色变化过程为：浅蓝色棕色2、脂肪鉴定原理：脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色），苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大，当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时，酒精中的苏丹Ⅲ生进入脂肪中，将脂肪染成橘黄色。
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《生物组织中还原糖与蛋白质的鉴定》学案
陈臻一、可溶性还原糖的鉴定原理：
生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基，因此叫还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基，因此叫非还原性糖，不具有还原性。
实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。
可溶性还原糖与斐林试剂（质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成）混合后,可以生成砖红色沉淀。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色到棕色再到砖红色
二、蛋白质的鉴定原理：
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。
双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。
在碱性溶液NaOH中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+作用，形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。
题例领悟
例1：用斐林试剂鉴定可溶还原糖时，溶液的颜色变化过程为：
A、浅蓝色棕色砖红色
B、无色浅蓝色棕色
C、砖红色浅蓝色棕色
D、棕色绿色无色
解析：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后，立即生成浅蓝色的Cu（OH）2沉淀。
Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。
因此，答案为A
例2：将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是：
A、碘液、苏丹Ⅲ溶液
B、双缩脲试剂、碘液
C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液
D、碘液、斐林试剂
解析：白浆为淀粉，淀粉遇碘变蓝，黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
因此，答案为B
自我评价
一、选择题：
1、徒手切片时的刀口方向应是（）
A、向前
B、向内
C、向左
D、向右
2、在鉴定蛋白质样品时，加双缩脲试剂的正确操作方法是（）
A、先加A液，混合后再加B液
B、先加B液，混合后再加A液
C、A、B液混合后立即加入
D、上述方法都可以采用
3、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是（）
A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定
B、花生种子含脂肪多且肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料
C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料
D、鸡蛋清蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料
4、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是（）
A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定
B、脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴
C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液
D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用
5、某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞较清晰，另一部分较模糊，这是由于（）
A、反光镜末调好
B、标本切得厚薄不均
C、细准焦螺旋末调好
D、显微镜物镜损坏
6、在可溶性还原糖及蛋白质鉴定时，事先留出一些组织样液的目的是（）
A、与反应后混合液的颜色做对比
B、失败后再重做一次
C、下次实验再用
D、组织样液过多颜色反应不明显。