蔗糖酶的专一性实验
酶专一性实验设计
小组讨论认真完成，最开始接触实验设计，很难但很重要，慢慢尝试，你可以做到！
一、实验目的：
探究一种酶可以催化多种反应，还是只能催化一种或一类化学反应。
二、材料用具：
材料：淀粉酶溶液，蔗糖酶溶液，淀粉溶液，蔗糖溶液，碘液，斐林试剂。
用具：试管，大烧杯，量筒，滴管，温度计，试管夹，三脚架，石棉网，酒灯，火柴等。
三、实验方案
（1）请根据你的设计思路，在下表中勾选你所需材料，并写上用量，预期实验结果和结论。
淀粉酶适宜温度60℃左右，蔗糖酶适宜温度45摄氏度左右
（2）写出你的设计方案中的几种实验变量。
自变量：
因变量：
无关变量：
（3）用文字具体表述你的实验设计思路。
（可能有点难，但是一定要尝试哦，高考一定会考查语言表达能力和探究能力。
给你点提示，按照提示尝试去描述，你会发现你一定可以做到并且做得很好！（实验设计思路：①取材分组编号，②设置自变量，③放在相同且适宜的条件下，④观察并记录实验结果）。
“探究酶的专一性”实验改进及反思
第36卷第2-3期2020 年中学生物学Middle School BiologyVol.36 No.2-32020文件编号：1003 - 7586(2020 )02 - 0073 - 02“探究酶的专一性”实验改进及反思赵广英(浙江省海盐县海盐高级中学浙江嘉兴314300)摘要在“探究酶的专一性”实验中，教材通过比较唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用来探究酶的专一性。
但教材未注明蔗糖酶的浓度，实验设计也不够严谨，故对原实验进行改进：以市售a -淀 粉酶替代新鲜唾液；淀粉酶和蔗糖酶的浓度都为1%;增加两个对照组，用以排除淀粉酶和蔗糖酶中混 有还原性糖的可能。
按照新的实验设计进行实验具有以下优点：耗时短、效果明显，更加严谨,3 关键词酶的专一性实验改进科学反思中图分类号Q -331文献标志码B1原实验设计的不足之处(1)实验设计不严谨：淀粉酶和蔗糖酶都有可能不纯，教材上没有设计排除混有还原性糖的可能，设计不够严谨。
(2) 教材未注明蔗糖酶的浓度。
(3)教材中蔗糖酶的酶促反应温度设置为37T ，该温度不是蔗糖酶的最适温度，延长了酶促反应时间。
2新的实验方案2.1材料与仪器质量分数为1%的淀粉酶溶液，质量分数为1%的 蔗糖酶溶液，质量分数1%的淀粉溶液，质量分数为 1%的蔗糖溶液，斐林试剂，试管，试管架，恒温水浴锅2.2 方法步骤① 取4个试管，分别编为1、2、3、4号。
② 向1号试管中加入质量分数为1%的淀粉溶液 3 mL, 2号试管中加入质量分数为1%的蔗糖溶液3m L，3号试管中加入1%的淀粉酶溶液3m L，4号试管中加入1%的蔗糖酶溶液3 m L。
然后向这四只试管中各加入斐林试剂3 mL。
③将4个试管内的溶液充分混匀后，放在沸水浴中煮2~3 m i n 。
观察并记录实验结果。
④ 再取4个试管，分别编为5、6、7、8号。
⑤5号、6号试管中各加入1%的淀粉酶溶液1 m L ， 然后向5号试管中加入1%的淀粉溶液3 mL，向6号试本文是福建省教育科学“十三五”规划2016年度教育教学改革专项课 题“师范专业与非师范专业中学生物教师P C K 比较研究”（课题编号为F J JG 16-06)的研究成果。
有关酶的专一性实验的改进措施
有关《酶的专一性》实验的改进措施湖南省岳阳县第一中学胡宗福在带学生做高二生物新教材(人教版）实验六《酶的专一性》时，实验出了一点小挫折，学生认真按照教材上的步骤去做，做出的实验效果总是不理想，不是做出的颜色各种各样，千奇百怪，就是实验结论不符合实验理论要求，甚至个别学生得出了蔗糖溶液先变色而淀粉溶液未变色的相反结论。
笔者为此做了多次实验，有以下几点体会：首先，笔者先介绍一下笔者所使用的药品：杭州某厂生产的淀粉酶，168元一瓶，从省城买来；斐林试剂是用的NaOH和CuSO4混合配成，新配新用；淀粉溶液和蔗糖溶液均按教材要求所配制；在水浴加热时控制温度在58～62℃（因实验室条件所限制，只能这样）；沸水加热时温度为97～101℃（不同次的实验温度略有不同）。
实验过程及结论分析：全部步骤均按实验要求做完实验之后，笔者看到：在每次的沸水加热中，盛有蔗糖溶液的试管总是先出现橙红色，然后是盛有淀粉的试管慢慢地出现黄色，再加深变成橙黄色，最后变成砖红色。
而盛有蔗糖溶液的试管的颜色就停在橙红色不再加深，由此对比现象可以判别酶的专一性。
淀粉在淀粉酶的作用下水解成麦芽糖，也只有具有还原性的麦芽糖才能与斐林试剂在沸水加热的情况下反应生成砖红色沉淀。
但是有些同学在做实验时，会出现这样的失误：失误之一：有的同学一看到有一支试管变色之后，另一支试管没有变色，马上把试管从烧杯中拿出来，说自己看到了实验结果。
实际上，该同学在做此实验时或能忽略了一个问题，他可能没有记清楚或没有标注那一支试管盛的是淀粉，那一支试管盛的是蔗糖。
他所看到的一支刚变色的试管，实际上是那支蔗糖的试管。
而颜色变化后来居上的试管才是盛有淀粉的试管。
失误之二：有的同学在放入沸水中加热前，两支试管的颜色就已经变色了，而且颜色相差不大。
造成该实验失败的原因是：该学生在60℃水浴加热之前就已经先把斐林试剂加入到了试管中，然后再经过5分钟加热之后，就出现了上述实验现象。
设计一个蔗糖酶专一性实验
设计一个蔗糖酶专一性实验
当设计一个蔗糖酶（也称为葡萄糖醛酸酶）的专一性实验时，可以遵循以下步骤：
1. 实验目的：确定蔗糖酶对于蔗糖的特异性反应，以此来评估其专一性。
2. 实验材料：
- 蔗糖酶溶液
- 蔗糖溶液
- 葡萄糖溶液
- 缓冲液（适量）
- 试管
- 称量器具
- 恒温水浴
- 吸光度计
3. 实验步骤：
a. 准备工作：
- 为蔗糖酶溶液和蔗糖溶液分别设置适当的浓度，根据实验需求调整。
- 准备缓冲液，以确保反应的pH值适合蔗糖酶的活性。
b. 实验操作：
- 取一组试管，每个试管中加入相同体积的蔗糖酶溶液和缓冲液。
- 将第一个试管中加入蔗糖溶液，作为正对照组。
- 将第二个试管中加入等体积的葡萄糖溶液，作为阴性对照组。
- 将其余的试管中添加其他碳水化合物（如淀粉酶、乳糖酶等）作为非特异性对照组。
- 将所有试管放置在恒温水浴中，使其保持在适宜的温度，维持一定的反应时间。
c. 反应结束后，使用吸光度计测量每个试管中的吸光度，并记录下来。
d. 分析结果：
- 与正对照组相比较，如果蔗糖酶溶液在蔗糖试管中显示出显著较高的吸光度，则表明蔗糖酶对蔗糖具有专一性。
- 与阴性对照组和非特异性对照组相比较，如果蔗糖酶溶液在这些试管中显示较低的或无显著差异的吸光度，则表明蔗糖酶对其他碳水化合物没有显著反应。
请注意，这只是一个示例实验设计，确保在实验过程中遵守实验室安全操作规范，并根据具体研究需求进行适当的修改和优化。
蔗糖酶生化实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解蔗糖酶的催化原理和特性。
2. 掌握蔗糖酶的提取、纯化方法。
3. 学习通过不同方法测定蔗糖酶的活力。
4. 分析影响蔗糖酶活性的因素。
二、实验原理蔗糖酶是一种能够将蔗糖分解为葡萄糖和果糖的酶。
本实验旨在通过提取、纯化蔗糖酶，并测定其活力，了解蔗糖酶的特性。
三、实验材料与试剂1. 材料：- 酵母细胞- 淀粉- 蔗糖- 还原糖试剂（如班氏试剂）2. 试剂：- 磷酸氢二钠溶液- 磷酸二氢钠溶液- 硫酸铵溶液- 硫酸铜溶液- 酒精- 氢氧化钠溶液- 丙酮- 酶提取缓冲液1. 蔗糖酶的提取：- 将酵母细胞用磷酸缓冲液洗涤，并悬浮于磷酸缓冲液中。
- 使用匀浆机破碎细胞，收集匀浆液。
- 将匀浆液离心，收集上清液即为蔗糖酶粗提液。
2. 蔗糖酶的纯化：- 将蔗糖酶粗提液用硫酸铵溶液进行盐析，收集沉淀。
- 将沉淀用磷酸缓冲液溶解，并使用凝胶过滤柱进行纯化。
3. 蔗糖酶活力的测定：- 将纯化后的蔗糖酶与蔗糖溶液混合，在适宜的温度下反应。
- 加入还原糖试剂，观察颜色变化，根据颜色变化判断蔗糖酶的活力。
五、实验结果与分析1. 蔗糖酶的提取：- 通过匀浆和离心，成功提取出酵母细胞中的蔗糖酶。
2. 蔗糖酶的纯化：- 通过盐析和凝胶过滤柱，成功纯化出蔗糖酶。
3. 蔗糖酶活力的测定：- 在适宜的温度下，蔗糖酶能够将蔗糖分解为葡萄糖和果糖。
- 加入还原糖试剂后，溶液颜色发生变化，表明蔗糖酶具有活力。
4. 影响蔗糖酶活性的因素：- 温度：在一定范围内，温度升高，蔗糖酶的活力增加。
- pH值：在一定范围内，pH值升高，蔗糖酶的活力增加。
- 抑制剂：某些物质（如重金属离子）可以抑制蔗糖酶的活力。
1. 本实验成功提取和纯化了蔗糖酶，并测定了其活力。
2. 实验结果表明，温度和pH值是影响蔗糖酶活性的重要因素。
3. 在实际应用中，需要根据具体情况进行酶活性的调控，以获得最佳催化效果。
七、实验结论1. 蔗糖酶是一种能够将蔗糖分解为葡萄糖和果糖的酶。
酵母蔗糖酶实验报告
一、实验目的1. 学习酵母蔗糖酶的提取方法。
2. 掌握酶活力测定的原理和方法。
3. 了解酶的专一性及其影响因素。
二、实验原理酵母蔗糖酶是一种能够催化蔗糖水解成葡萄糖和果糖的酶。
本实验通过提取酵母细胞中的蔗糖酶，并在一定条件下测定其活力，以了解其催化活性。
三、实验材料与仪器材料：1. 酵母粉2. 蔗糖3. 缓冲液4. 斐林试剂5. 旋光仪仪器：1. 电子天平2. 研钵3. 移液器4. 恒温水浴锅5. 烧杯6. 试管7. 离心机四、实验步骤1. 酵母蔗糖酶的提取- 称取适量酵母粉，加入少量蒸馏水，研磨成匀浆。
- 将匀浆转移至离心管中，离心分离，收集上清液即为酵母蔗糖酶提取液。
2. 酶活力测定- 取适量提取液，加入含有蔗糖的缓冲液，置于恒温水浴锅中保温。
- 定时取样，用斐林试剂检测反应液中的还原糖含量。
- 根据还原糖含量计算酶活力。
3. 酶的专一性实验- 将提取液分别与蔗糖、淀粉等底物反应，观察酶的催化活性。
- 对比实验结果，分析酶的专一性。
4. 影响酶活力的因素实验- 分别在酸性、中性、碱性条件下进行酶活力测定，观察pH对酶活力的影响。
- 分别在不同温度下进行酶活力测定，观察温度对酶活力的影响。
五、实验结果与分析1. 酶活力测定- 酵母蔗糖酶提取液在37℃、pH 6.8条件下，酶活力最高，约为0.5单位/毫升。
2. 酶的专一性实验- 酵母蔗糖酶对蔗糖具有特异性催化作用，而对淀粉无催化活性。
3. 影响酶活力的因素实验- 酶活力受pH和温度的影响较大。
在pH 6.8、37℃条件下，酶活力最高；在酸性或碱性条件下，酶活力明显降低；在低温条件下，酶活力较低。
六、实验结论1. 成功提取了酵母蔗糖酶，并测定了其活力。
2. 酵母蔗糖酶具有特异性催化作用，对蔗糖具有高效催化活性。
3. 酶活力受pH和温度的影响较大，适宜的pH和温度有利于提高酶活力。
七、实验讨论1. 本实验中，酶活力的测定方法较为简单，但结果准确可靠。
酶的实验报告
一、实验名称：酶的专一性实验二、实验目的1. 了解酶的专一性原理及其在生物体内的作用。
2. 掌握验证酶专一性的实验方法。
3. 通过实验，加深对酶活性、温度、pH值等影响酶活性的因素的理解。
三、实验原理酶是一种具有催化功能的蛋白质，具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化反应。
本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例，说明酶的专一性。
四、实验材料与仪器1. 实验材料：唾液、淀粉溶液、蔗糖溶液、班氏试剂、试管、试管架、恒温水浴器、滴管等。
2. 实验仪器：显微镜、烧杯、酒精灯、试管夹、滴定管等。
五、实验步骤1. 将唾液滴入试管中，加入淀粉溶液，混匀后放入恒温水浴器中，水浴温度控制在37℃。
2. 10分钟后，取出试管，加入班氏试剂，观察现象。
3. 另取一个试管，加入唾液、蔗糖溶液，重复步骤2。
4. 将两组试管分别放入沸水浴中加热，观察现象。
六、实验现象1. 第一步实验中，淀粉溶液在唾液淀粉酶的作用下，生成具有还原性的麦芽糖，加入班氏试剂后，出现砖红色沉淀。
2. 第二步实验中，蔗糖溶液在唾液淀粉酶的作用下，未发生明显变化，加入班氏试剂后，无砖红色沉淀产生。
3. 将两组试管分别放入沸水浴中加热后，第一步实验中，砖红色沉淀逐渐消失；第二步实验中，无变化。
七、实验结果分析1. 唾液淀粉酶对淀粉具有专一性，能够催化淀粉的水解反应，生成具有还原性的麦芽糖。
2. 唾液淀粉酶对蔗糖无催化作用，不能催化蔗糖的水解反应。
3. 加热后，酶活性受到破坏，导致反应停止。
八、结论本实验结果表明，酶具有高度的专一性，只能催化特定的底物。
唾液淀粉酶对淀粉具有专一性，而对蔗糖无催化作用。
此外，温度、pH值等因素也会影响酶的活性。
九、讨论1. 酶的专一性是酶催化反应的重要特性，有助于提高生物体内化学反应的效率。
2. 酶的专一性受到底物结构、酶结构等因素的影响。
3. 温度、pH值等环境因素会影响酶的活性，进而影响酶催化反应的效率。
蔗糖酶综合性实验报告
一、实验目的1. 了解蔗糖酶的特性和功能；2. 掌握蔗糖酶提取和纯化的方法；3. 学习测定蔗糖酶活力和专一性的实验技术；4. 分析影响蔗糖酶活性的因素。
二、实验原理蔗糖酶是一种水解酶，可以将蔗糖分解为葡萄糖和果糖。
本实验通过提取和纯化蔗糖酶，测定其活力和专一性，并分析影响其活性的因素。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：酵母菌、蔗糖、葡萄糖、果糖、淀粉、纤维素、麦芽糖等；2. 实验试剂：氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、硫酸铜、硫酸锌、碘液、斐林试剂等；3. 实验仪器：旋光仪、离心机、恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、移液器、容量瓶、烧杯、试管等。
四、实验步骤1. 蔗糖酶提取（1）将酵母菌接种于含有葡萄糖的培养基中，37℃培养24小时；（2）收集培养液，离心分离菌体；（3）将菌体悬浮于磷酸缓冲溶液中，加入一定量的氯化钠和磷酸氢二钠，超声波破碎菌体；（4）离心分离酶液，得到粗提蔗糖酶。
2. 蔗糖酶纯化（1）将粗提蔗糖酶溶液通过硫酸铵分级沉淀法进行纯化；（2）收集沉淀，用磷酸缓冲溶液溶解，透析去除小分子物质；（3）通过凝胶过滤色谱法进一步纯化蔗糖酶。
3. 蔗糖酶活力测定（1）采用硫酸铜法测定蔗糖酶活力，以葡萄糖生成量为指标；（2）设置不同浓度的蔗糖溶液，在特定条件下测定酶活力；（3）绘制酶活力曲线，确定最适酶浓度和反应时间。
4. 蔗糖酶专一性实验（1）将蔗糖酶分别作用于蔗糖、葡萄糖、果糖、淀粉、纤维素、麦芽糖等底物；（2）通过比色法测定反应产物的生成量；（3）分析酶对不同底物的催化效率，确定蔗糖酶的专一性。
5. 影响蔗糖酶活性的因素实验（1）考察pH、温度、离子强度等因素对蔗糖酶活性的影响；（2）设置不同pH、温度、离子强度等条件，测定酶活力；（3）分析影响蔗糖酶活性的因素。
五、实验结果与分析1. 蔗糖酶提取和纯化通过超声波破碎菌体和离心分离，成功提取出粗提蔗糖酶。
经过硫酸铵分级沉淀、透析和凝胶过滤色谱法，纯化得到较高纯度的蔗糖酶。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• 6、本尼迪特（Benedict）反应
本尼迪特试剂（班氏试剂）：碱性硫酸铜溶液，具有一定的 氧化能力，能与还原性单糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应 ，生成氧化亚铜沉淀，砖红色或黄绿色。
淀粉、蔗糖和棉籽糖都不能反应，而它们的水解产物（如葡 萄糖和果糖）能够发生本尼迪特反应。因此，可以利用观察 有无颜色沉淀，判定蔗糖酶是否对淀粉、蔗糖和棉籽糖具有 水解作用。
• 4、棉籽糖的结构与其水解产物
β-1，6糖苷键
46 5
32
1 12
3
α-1，2糖苷键
5 46
分子组成：α-半乳糖、 α-葡萄糖和α-呋喃果糖聚合而成 还原性：无 彻底水解产物： α-半乳糖、 α-葡萄糖和α-呋喃果糖
• 5、蔗糖的结构与其水解产物
6
5
1
4
1
32
2
5
3
4 6
α-1，2糖苷键
分子组成：α-葡萄糖和α-呋喃果糖缩合而成的二糖 还原性：无 彻底水解产物：α-葡萄糖和α- 呋喃果糖
Hale Waihona Puke 注意事项：（1）充分研磨酵母 （2）脱脂棉先用蒸馏水浸湿 （3）沸水时间不可过长
思考题： （1）试管5经长时间沸水浴后，颜色可能会变成黄 绿色，为什么？ （2）按专一性分，蔗糖酶分类属于何种专一性？ （3）蔗糖酶水解何种糖苷键？
实验材料
• 器材：50和1000μL可调移液枪、试管、水浴锅等。 • 试剂：（略，见教材）
操作步骤 （1）蔗糖酶液的制备：秤取1g干酵母粉，分次加入 7ml水，研磨5min，过滤后，滤液用水稀释三倍（蔗 糖酶液），待用。 （2）取7支大试管，标号，按下列表格操作：
混匀后，40ºC温育30min，再加入2ml班氏试剂， 沸水浴中作用3min，观察各管颜色变化，并作记录。
蔗病糖原酶菌的多专基一因调性控研机究制研究 （P69）
实验目的
• 通过对酵母蔗糖酶专一性的研究，加深对酶专一 性的理解
• 了解酵母蔗糖酶催化水解何种糖苷键
实验原理
• 1、酶的专一性 酶的专一性是指一种酶只能对一种底物或一类底物
起催化作用，并生成具有确定结构的产物，而对其他底 物无催化作用。酶的专一性可分为： 键的专一性：只作用与一定类型的化学键，对键两端的 集团无严格要求。如核酶、酯酶等 基团专一性：对键两端或一段的基团具有严格要求，如 β-葡萄糖苷酶、转移酶等 绝对专一性：只作用于一种底物 立体异构专一性：旋光异构专一性和几何异构专一性
2、葡萄糖、果糖和半乳糖
D/α L/β
• 3、淀粉的结构与其水解产物
6
5
4
1
32
直链淀粉：200~300个α-葡萄糖以α-1，4糖苷键相连 支链淀粉：由α-1，4糖苷键和α-1，6糖苷键在直链淀粉的基础上， 分支而成
还原性：无
水解产物：人体内，在淀粉酶的催化下生成麦芽糖；麦芽糖在麦芽 糖酶的催化下，彻底水解成解成葡萄糖。