HPLC法测定艾司唑仑血药浓度的方法验证.

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艾司唑仑片说明书

艾司唑仑片【艾司唑仑片】拼音名：Aisizuolun Pian英文名：Estazolam Tablets书页号：2000年版二部－91本品含艾司唑仑(C16H11ClN4)应为标示量的90.0％～110.0 ％。

【性状】本品为白色片。

【鉴别】取本品的细粉适量（约相当于艾司唑仑10mg）加乙醇10ml，振摇使艾司唑仑溶解，滤过，滤液蒸干，残渣照艾司唑仑项下的鉴别(1)、(2)项试验，显相同的反应。

【检查】含量均匀度取本品1 片，置100ml(1mg规格)或200ml(2mg 规格)量瓶中，加盐酸溶液(9→1000) 适量，充分振摇，使艾司唑仑溶解，加盐酸溶液(9→1000) 稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液，照含量测定项下的方法测定含量，应符合规定（附录Ⅹ E）。

溶出度取本品，照溶出度测定法（附录Ⅹ C第三法），以盐酸溶液(9→1000)100ml （1mg规格）或200ml（2mg规格）为溶剂，转速为每分钟100转，依法操作，经30分钟时，取溶液10ml，滤过，取续滤液，照分光光度法（附录Ⅳ A），在268nm±2nm的波长处测定吸收度，按C16H11ClN4的吸收系数（E1％1cm）为352计算出每片的溶出量。

限度为标示量的80％，应符合规定。

其他应符合片剂项下有关的各项规定（附录Ⅰ A）。

【含量测定】取本品30片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于艾司唑仑10mg），置100ml 量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)60ml ，充分振摇使艾司唑仑溶解，用盐酸溶液(9→1000) 稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml ，置50ml量瓶中，用盐酸溶液(9→1000) 稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录Ⅳ A），在268±2nm 的波长处测定吸收度，按C16H11ClN4的吸收系数（Ｅ1％ 1cm）为352 计算，即得。

【类别】同艾司唑仑。

【规格】 (1) 1mg (2) 2mg【贮藏】遮光，密封保存。

RP-HPLC法测定血浆中奥卡西平及其活性代谢物浓度

2021年第10期广东化工第48卷总第444期·231·RP-HPLC法测定血浆中奥卡西平及其活性代谢物浓度刘东平，谢海燕(南京鼓楼医院集团安庆市石化医院药剂科，安徽安庆246001)Determination of the Concentration of Oxcarbazepine andIts Active Metabolites in Human Plasma by RP-HPLCLiu Dongping,Xie Haiyan(Pharmacy Department,Anqing Shihua Hospital of Nanjing Drum Tower Hospital Group,Anqing246001,China) Abstract:Objective:To establish a method for determining the concentration of Oxcarbazepine(OXC)and its active metabolite10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamzepine(MHD)in human plasma.Methods:We used Alprzolam as the internal standard,Plasma samples were detected by RP-HPLC after being processed by Methyl t-Butyl Ether,using a mobile phase of CH3CN-H2O(45︰55,v/v)at the flow rate of1.0mL/min.The temperature was40℃,detection wavelength was220 nm and sensitivity was0.01AUFS.Results:There was a good linear relationship in the concentration of OXC respectively in the range of0.28~4.48µg/mL and MHD respectively in the range of2.40~38.40µg/mL,the lowest limit of detection was0.35µg/mL and1.20µg/mL.The relative average recoveries of low,middle and high concentration were respectively83.23%~103.17%and87.99%~116.07%;the RSD of intra-day(n=3)and inter-day(n=5)variation were less than10%. Conclusions:The method is sensitive,accurate,easy and quick.That can be used for therapeutic drug monitoring(TDM)and pharmacokinetics studies.Keywords:OXC；MHD；therapeutic drug monitoring(TDM)；RP-HPLC奥卡西平(Oxcarbazepine,OXC)是卡马西平的10－酮基结构类似物，为前体药，在体内迅速被代谢为有药理活性的10-羟基代谢物(10-monohydroxy metaboliute，MHD)[1]，即10,11-二氢-10-羟基卡马西平(10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine)。

HPLC法测定人血浆中的拉莫三嗪

HPLC法测定人血浆中的拉莫三嗪李琪;雷力力;张志国;汪凤山【摘要】目的:建立以艾司唑仑为内标的高效液相色谱法测定人血浆中拉莫三嗪浓度的方法.方法:色谱柱为HypersilODS2,流动相为乙腈:0.05％磷酸=36:64；流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃,检测波长为240nm,进样量为20μL.结果:拉莫三嗪血药浓度在0.95～38μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991)；方法回收率为99.77％～104.32％；日内、日间RSD分别为1.35％～2.07％、3.04％～6.82％.结论:本方法操作简便、快速、灵敏、重复性好、回收率及精密度高,可用于拉莫三嗪的治疗药物监测.【期刊名称】《黑龙江医药科学》【年(卷),期】2011(034)006【总页数】2页(P39-40)【关键词】拉莫三嗪;反相高效液相色谱法;血药浓度【作者】李琪;雷力力;张志国;汪凤山【作者单位】佳木斯大学附属第一医院药剂科,黑龙江佳木斯154003;佳木斯大学附属第一医院药剂科,黑龙江佳木斯154003;佳木斯大学附属第一医院药剂科,黑龙江佳木斯154003;佳木斯大学附属第一医院药剂科,黑龙江佳木斯154003【正文语种】中文【中图分类】R927.1拉莫三嗪(lamotrigine,LTG)为苯三嗪类的新一代广谱抗癫痫药。

2005年在我国上市,拉莫三嗪(LTG)主要经过肝脏代谢,LTG血药浓度＞15mg/L时,毒性反应的几率会增加;治疗难治性癫痫时,有效浓度在3～ 14mg/L;5～ 13mg/L时,出现副反应缓慢;13～ 14mg/L时副反应发生几率剧增。

肝酶诱导剂如卡马西平、苯妥英钠可加速拉莫三嗪的代谢;肝酶抑制剂如丙戊酸钠(V PA)可减缓拉莫三嗪的代谢。

由于该药与其它抗癫痫药在药动学上存在的这种相互作用,导致了个体间的血药浓度差异较大[1],因此在临床中有必要对拉莫三嗪进行血药浓度监测[2～4],本文采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定血浆中拉莫三嗪药物浓度,以艾司唑仑为内标溶液,乙腈-磷酸缓冲液为流动相,酸性条件下用乙酸乙酯作萃取剂,测定拉莫三嗪的血药浓度,结果表明该方法简便、灵敏、准确、重现性好,可用于拉莫三嗪的血药浓度监测。

反相高效液相色谱法测定血浆中卡马西平浓度

反相高效液相色谱法测定血浆中卡马西平浓度摘要】目的建立血浆中卡马西平浓度的测定方法。

方法采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法，以艾司唑仑为内标，测定血浆中卡马西平浓度。

色谱柱：Shimadzu Shimpack VP-ODS 4.6mm×150mm，加保护柱，流动相为A：B=55:45（V/V，其中A相为甲醇：乙腈=1:1；B相为蒸馏水：四甲基二乙胺：冰醋酸=500:10:8），检测波长243mm；AUFS0.04；流速0.8ml/min；温度为室温。

结果卡马西平在3.46-24.22mg.L-1浓度范围内线性良好， r=0.99938（n=7）。

卡马西平高、中、低3种浓度的平均回收率分别为 100.3%，97.3%，89.5%；RSD分别为4.0%，7.2%，7.5%（n=3）。

结论该方法准确、快速、简便，可作为卡马西平血药浓度常规监测方法。

【关键词】卡马西平高效液相色谱法药代动力学血药浓度卡马西平（Carbamazepine,CBZ）是单纯及复杂部分性癫痫发作的首选药，对复杂部分性发作疗效优于其他抗癫痫药，本品口服吸收缓慢且不规律，个体差异大[1]，口服4-8小时血药浓度达峰值，血药峰浓度为8-10ug/ml，有效血药浓度为4-12ug/ml[2]。

由于本品的自我诱导作用（autoinduction），于治疗一阶段后可能需要增大剂量才能维持原来的血药浓度和发作控制水平，因此一般需要用药期间监测卡马西平血药浓度。

CBZ血药浓度监测方法主要有荧光偏振免疫(FPIA) 法、高效液相色谱(HPLC)法、紫外分光光度(UV)法、酶联免疫法(EMIT)等，这4种方法各有优缺点，如FPIA法具有高度自动化、取血量小，操作简便、快速、准确、灵敏度高的优点，但成本高且依赖于试剂盒而使测定种类受限。

UV法在样品处理时易挥发而使得结果不可靠；EMIT法则需要专业仪器和特殊药品，成本高，不常用于临床监测；而HPLC法具有干扰少、分离度好、分析周期短、操作简便等优点，适合临床监测要求。

镇静安神类中成药及保健食品中非法添加艾司唑仑的GC—MS／MS检测方法研究

镇静安神类中成药及保健食品中非法添加艾司唑仑的GC—MS／MS检测方法研究目的建立镇静安神类中成药及保健食品中非法添加艾司唑仑的GC-MS/MS检测方法。

方法样品经甲醇提取，采用全扫描一级质谱，并结合谱库检索进行定性鉴别；采用二级选择反应检测（MRM）方式进行定量分析。

结果全扫描一级质谱检测限为2 ng，艾司唑仑在1～100 μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系。

结论本方法快速、灵敏、准确，可用于中成药及保健食品中非法添加艾司唑仑的检测方法。

标签：镇静安神；艾司唑仑；GC-MS/MS；中成药艾司唑仑为苯二氮卓类新型抗焦虑药，具有较强的镇静催眠作用，目前存在将其添加到镇静安神类中成药及保健食品中的现象，普通患者在不知情的情况下服用此类非法添加产品，易造成重复用药，过量用药，对人体健康造成危害，严重时甚至引发死亡[1-3]。

目前对于镇静安神类中成药及保健食品中非法添加艾司唑仑的检测方法主要是薄层色谱法、液相色谱法、液质联用法等[4-8]，本实验建立了以气相色谱-质谱联用仪全扫描一级质谱，并结合谱库检索进行定性分析，以二级选择反应检测（MRM）进行定量分析的检测方法，可充分发挥气相色谱-质谱联用仪强大的数据库检索功能，及选择反应检测（MRM）灵敏、准确的优势，实现筛查、验证与定量三者的统一，可为药监部门“打假”提供可靠的技术保障。

1 仪器与试药1.1 仪器Agilent 7890/7000-GC/QQQ气相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦公司）、NIST MS Search 2.0谱库。

1.2 试药艾司唑仑对照品购自中国药品生物制品检定所（批号：171219-201003）；甲醇等试剂为分析纯；标称具有镇静安神作用的保健食品为药监部门市场监管抽查样品。

2 方法与结果2.1 定性方法2.1.1 对照品储备溶液精密称取艾司唑仑对照品适量，加甲醇溶解并稀释，制成浓度为每毫升含100 μg的溶液，即得。

2.1.2 对照品溶液A 取艾司唑仑对照品储备溶液适量，加甲醇稀释，制成浓度为每毫升含50 μg的溶液，即得。

高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、卡马西平、艾司唑仑、阿普唑仑、氯硝西泮、奥沙西泮的血药浓度

国
稽ｋ２畅２标准储备液的配制分
Ｏ
别精密称取ＰＢＢ、ＣＢＭ、ＥＴＺ、ＡＰＺ、ＣＺＰ、ＯＺＰ对照品
· 临床药学·
高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、卡马西平、艾司唑仑、阿普唑仑、氯硝西泮、奥沙西泮的血药浓度
徐晖（福建省卫生职业技术学院附属省级机关医院药剂科福州３５０００３）
摘要：目的建立高效液相色谱法同时测定苯巴比妥（ＰｈｅｎｏｂａｒｂｉｔｏｎｅＰＢＢ）、卡马西平（ＣａｒｂａｍａｚｅｐｉｎｅＣＢＭ）、艾司唑仑（ＥｓｔａｚｏｌａｍＥＴＺ）、阿普唑仑（ＡｌｐｒａｚｏｌａｍＡＰＺ）、氯硝西泮（ＣｌｏｎａｚｅｐａｍＣＺＰ）、奥沙西泮（ＯｘａｚｅｐａｍＯＺＰ）等血药浓度。方法取血浆样品在ｐＨ＝８畅０磷酸盐缓冲液条件下
ＸＵＨｕｉ（ＰｈａｒｍａｃｙｏｆＦｕｊｉａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＡｕｔｈｏｒｉｔｉｅｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｆｕｚｈｏｕ３５０００１，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥＴｏｄｅｖｅｌｏｐａＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｐｈｅｎｏｂａｒｂｉｔｏｎｅ（ＰＢＢ），ｃａｒｂａｍａｚｅｐｉｎｅ（ＣＢＭ），ｅｓｔａｚｏｌａｍ（ＥＴＺ），ａｌｐｒａｚｏｌａｍ（ＡＰＺ），Ｃｌｏｎａｚｅｐａｍ（ＣＡＰ）ａｎｄｏｘａｚｅ－ｐａｍ（ＯＺＰ）畅ＭＥＴＨＯＤＳＵｎｄｅｒｔｈｅｃｉｒｃｕｍｓｔａｎｃｅｏｆＰＢ，ｐＨ＝８畅０，ｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙａｃｅｔｉｄｉｎａｎｄｌｉｇ－ｒｏｉｎ，ａｎｄｄｒｉｅｄｉｎｔｈｅｎｉｔｒｏｇｅｎｂａｔｈｏｆ５５℃ ｗａｔｅｒ，ｔｈｅｎｔｈｅｙｗｅｒｅｄｉｓｓｏｌｖｅｄｂｙｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ（５５∶４５）ａｎｄａｎａｌｙｚｅｄｂｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ：Ｃ１８；ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ：ｍｅｔｈａｎｏｌ：ＰＢ（ｐＨ＝３畅０）（５５∶４５）；ｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：３１℃；ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ：２３０ｎｍ；ｆｌｏｗｉｎｇｒａｔｅ：０畅９ｍＬ· ｍｉｎ－１畅ＲＥＳＵＬＴＳＴｈｅｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｏｆＰＢＢ，ＣＢＭｗｅｒｅｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０畅５～１００μｇ· ｍＬ－１、０畅２～４０μｇ· ｍＬ－１，ｔｈｅｏｔｈｅｒｗｅｒｅｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０畅０２～４畅０μｇ· ｍＬ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ－ｌｙ，ｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｗｅｒｅａｌｌａｂｏｖｅ０畅９９９畅Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｏｆｗｉｔｈｉｎ－ｄａｙａｎｄｂｅｔｗｅｅｎ－ｄａｙｓａｓｓａｙｓｗｅｒｅ

用高效液相色谱法同时测定阿普唑仑和多虑平血药浓度

表２－Ｐ３ＮＡ染毒大鼠大脑皮层中ＡＰ等的含量（ｍｌ湿重，＝５Ｔｏ／ｎ）
（精密度三）
配制三个浓度的八种标准品混合标准液，同一天每一浓度各测定三次，连续测定六天，得到各个化合物在三种浓度下的变异系数（算成合并变异系计
ｌｏｉｅｄｓｅａｏｉｓＣｅｅｒｍｆａＵｓｅｔａＩＭｔｂｌｅｉｄｎｔｔｎｒｂｕｏＲｔ－
标准品对照，计算ＡｐＤｘ的绝对回收率分别为ｌ和ｏ８．８０５％和８．４５９％。
（血药浓度的测定三）１标准液的配制用甲醇配制浓度分别为１ｇ．／ｍ和５／ｌｌｌ０ｇｍ的Ａｐ和Ｄｘ工作液。ｏ
２样品预处理．１先用２ｌ）ｍ甲醇活化ＳｐＰｋｅ－ａＣ８柱，用２ｌ８１小再ｍ％甲醇水溶液冲洗。）过２通
Ｕｌａｐｅｅ－１ｃｌａ２４ｍｓａｌｈｄｔｓｈｒＣ８ｍｎ５ｎｗｅｔｉｅｒｏｕｔａｓｂｓ
ｔｓｄｔｃａｇｏｅｅｙｔｂｌｅｉｃｅｏｙｈｎｅｎｒｍｅｏｉｓｅ－ｔｕｈｅｆｇａｔｎｒｂｕｏｒｔｉｔｉｔｗｔ３ｎｒｐｏｉｉａｉｒｍａｓｏｃｅｉ－ｔｒｐｎｃ．ｆｎｘａｄｈｉｏｏｃｄＴｅｂｅａｅｉ１．ｇ４２ＯｄｓｌｄｈｍｉｐｓＡ１５ＮＨＰ４ｏｖｏｌｈｓＨｉｅｓｉ１０ｍｄｔｌｗｔ．ｈｍｏｉｐａｅｏ－ｎ０ｌｉｅａｒＴｅｂｅｓＢｎ０ｉｌｄｅｓｌｈｃｌｔｏ１．ｇ４２４２０ｍｔａｏｄ－ｉｅｆ５ＮＨＰａｄｍｌｈｎｌｓｄ１ＨＯｎ０ｅｉｓ

高效液相色谱法测定艾司唑仑的物质

高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析方法，可以用于测定艾司唑仑的物质。

以下是测定步骤：
1. 准备试剂：流动相（乙腈：水，50：50），艾司唑仑标准品，色谱纯有机溶剂（如甲醇或乙腈），去离子水，色谱柱（C18柱）。

2. 配置标准溶液：将艾司唑仑标准品用流动相溶解，制备成一定浓度的标准溶液。

3. 进行色谱分析：将标准溶液注入液相色谱仪，以一定流速通过色谱柱，分离出艾司唑仑。

4. 检测：使用紫外检测器（UV detector）对艾司唑仑进行检测。

检测波长通常为229nm。

5. 记录色谱图：记录艾司唑仑的色谱峰及峰面积。

6. 进行定量分析：将标准溶液的浓度与对应的峰面积绘制成标准曲线。

通过待测样品中艾司唑仑的峰面积，根据标准曲线计算其浓度。

7. 进行定性分析：根据艾司唑仑的保留时间进行定性分析。

在相同条件下，待测样品中艾司唑仑的保留时间应与标准品的保留时间一致。

需要注意的是，在实验过程中要注意实验室环境的控制，避免交叉污染。

此外，实验过程中应严格遵守实验室安全规范，确保人员和设备的安全。

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mV 3216003
21
mV 32160
691215min 03691215min
A B
图1高效液相色谱图
A.血浆样品+内标；B.空白血浆；1.艾司唑仑；2.地西泮
Fig 1HPLC Chromatograms
A. plasma+internalstandard；B. blank plasma；1. estazolam；2. diazepam
按“2. 4”项下方法，分别配制含艾司唑仑0. 3968、0. 2480、
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0. 0992μg ·mL高、中、低3种浓度的样品各5份，按“2. 1”项色谱条件进样检测，以内标法计算回收率；同法制备含艾司唑仑高、中、低3种浓度样品各1份，分别在同日不同时间进样5次，以及在3d内进样5次，以样品及内标峰面积比值计算日内及日间精密度。精密度及回收率试验结果见表2。
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ODS 2C 18为色谱柱，甲醇-乙腈-水（28∶28∶54）为流动相，1. 0mL ·min为流速，35℃为柱温，230nm为检测波长，地西泮为内标，考察服用艾司唑仑片患者血浆、碱化血浆、血清浓度并对选定的标本及提取方法进行验证。结果：艾司唑仑血浆浓度明显高于碱化血浆及血清浓度，经成对双侧t检验，艾司唑仑血浆浓度与碱化血浆及血清浓度比较（P分别为0. 01130、0. 01817），有显著性差异。艾司唑仑血药浓度在0. 0494～1. 2896μg ·mL－1范围内线性关系良好（r＝0. 9918），定量下限为0. 0494μg ·mL－1；平均日内、日间RSD均＜10％，平均回收率为99. 95％～100. 79％。结论：采用患者血浆作为标本进行艾司唑仑血药浓度监测和药物中毒的定量分析可行，本方法简便、准确。关键词艾司唑仑；血浆；碱化血浆；血清；高效液相色谱法；血药浓度
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于10mL玻璃试管内，加入0. 02mg ·mL地西泮内标溶液25µL，加入0. 01mol ·L－1氢氧化钠0. 25mL碱化，涡旋混匀，加入乙酸乙酯5mL，涡旋震荡3min，3500r ·min－1离心10min，分离乙酸乙酯于10mL试管内，45℃下N 2气流吹干，甲醇100µL溶解，作为碱化血浆样品溶液。（3）精密取患者血清1mL，置于
Method Validation of Plasma Concentration Determination of Estazolam by HPLC HOU Da-ping，ZHANG Zhi-guo，GUO Yu-zhi，LEI Li-li，HUANG Zhan（The First Affiliated Hospital of Jiamusi University，Jiamusi 154002，China）
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相：甲醇-乙腈-水（28∶28∶44）；流速：1. 0mL ·min；检测波长：230nm；柱温：35℃；进样量：20µL。2. 2标准溶液的制备
2. 2. 1艾司唑仑标准溶液：准确称取艾司唑仑标准品24. 80mg，置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液5mL，置于50mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得浓度为0. 0248mg ·mL－1的艾司唑仑标准溶液。2. 2. 2内标溶液：准确称取地西泮标准品5. 00mg，置于25mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液[5]
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10mL玻璃试管内，加入0. 02mg ·mL地西泮内标溶液25µL，涡旋混匀，加入乙酸乙酯5mL，旋涡震荡3min，3500r ·min－1离心10min，分离乙酸乙酯于10mL试管内，45℃下N 2气流吹干，甲醇溶解100µL，作为血清样品溶液。2. 3. 3血样测定：分别取血浆样品、碱化血浆样品和血清样品，按“2. 1”项色谱条件进样检测，以内标法计算含量，结果如表1。
高瑞林，李华，杨辉，等.静脉注射a 12b干扰素治疗
婴幼儿病毒性肺炎疗效分析[J].中国综合临床，2001，17（7）：560.
＊主任药师。研究方向：临床药学。电话：0454-8623360
#通讯作者：主任药师。研究方向：药物分析与药动学。电话：China Pharmacy 2011V ol. 22No. 140454-8623372。E-mail：zzg-0000@ ·1280·
HPLC法测定艾司唑力力，黄展（佳木斯大学附属第一医院，佳木斯市154002）
中图分类号
R 969. 1；R 971+. 3
文献标识码
A
文章编号
1001-0408（2011）14-1280-03
摘要目的：建立测定艾司唑仑血药浓度的方法，以确定较好的检测条件。方法：采用高效液相色谱法，以依利特Hypersil
艾司唑仑含量/μg·mL -1
碱化血浆0. 079120. 054420. 083290. 028100. 055280. 070650. 062970. 056490. 046120. 171820. 07113
血清0. 081800. 053190. 080270. 029240. 058520. 075340. 063100. 055460. 047860. 169820. 07146
[1][2][3]
血浆、碱化血浆和血清作为标本检测，为确定一种较好的方法，本文对使用标本、提取方法进行了初选，结果使用血浆作为标本，艾司唑仑检出率较高。以此为基础，对HPLC法检测血浆艾司唑仑血浆药物浓度方法进行了验证，结果证明此法简便、准确。
艾司唑仑标准品（中国药品生物制品检定所，批号：
1219-0102）；内标：地西泮标准品（中国药品生物制品检定所，批号：171225-200302）；甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2
2. 1
方法与结果
1
1. 1
材料
仪器
P 230Ⅱ高效液相色谱仪（大连伊利特分析仪器有限公司）；XW-80涡旋混合器（上海精科实业有限公司）；AUW 220D十万分之一分析天平（日本岛津公司）。1. 2试药
科杂志，1994，9（6）：343.
色谱条件
色谱柱：Hypersil ODS 2C 18（250mm×4. 6mm，5µm）；流动
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the method for plasma concentration determination of estazolam，and to confirm optimal determination conditions. METHODS：HPLC method was adopted. The determination was performed on Elite Hypersil ODS 2C 18column with methanol-acetonitrile-water（28∶28∶54）as mobile phase at flow rate of 1. 0mL ·min－1. The column temperature was set at 35℃and detection wavelength was 230nm. Diazepam was used as the internal standard. The concentrations of estazolam in plasma，alkalinized plasma and serum in patients receiving estazolam were determined. Selected samples and extraction method were verified. RESULTS：Plasma concentration of estazolam was significantly higher than those in alkalinized plasma and serum. In bilateral paired t test，the concentration of estazolam in plasma was significantly different from that in alkalinized plasma and serum（P＝0. 01130and P＝0. 01817）. The linear range of estazolam was 0. 0494～1. 2896μg ·mL－1（r＝0. 9918）. The minimum quanti-tation limit was 0. 0494μg ·mL－1. The average recovery rate was 99. 95％～100. 79％. The RSD of intra-day and inter-day were less than 10％. CONCLUSION：It is feasible to collect plasma sample of patients for plasma concentration monitoring of estazolam and quantitation analysis of drug poisoning. The method is simple，accurate. KEY WORDS Estazolam；Plasma；Alkalinized plasma；Serum；HPLC；Plasma concentration艾司唑仑为临床常用的镇静催眠药，也可用于抗焦虑、抗癫痫治疗，大剂量可引起外周神经肌肉阻滞、兴奋不安等不良反应，严重的可导致死亡。鉴于其临床应用广泛，监测其血药浓度对临床治疗和中毒抢救均有重要意义。然而，在高效液相色谱（HPLC）法测定艾司唑仑血药浓度时，文献报道有使用
2. 5
标准曲线的制备
精密取健康人血浆1mL，置于10mL玻璃试管内，加入0. 02mg ·mL－1地西泮内标溶液25µL，加入0. 0248mg ·mL－1艾司唑仑标准液分别为2、6、10、14、18、22、26、52µL，涡旋混匀，加乙酸乙酯5mL，涡旋震荡3min，3500r ·min－1离心10min，分离乙酸乙酯于10mL试管内，45℃下N 2气流吹干，甲醇100µL溶解，按“2. 1”项色谱条件进样，记录色谱。将艾司唑仑的标准浓度（X）对其峰面积与内标峰面积比值（Y）进行线性回归，得艾司唑仑回归方程为Y＝1. 3183X +0. 0656（r＝0. 9918），结果表明，艾司唑仑血药浓度在0. 0494～1. 2896μg ·mL－1范围内线性关系良好，定量下限为0. 0494μg ·mL－1。2. 6加样回收率及精密度试验