蛋白质的研究方法与原理【实用参考】
蛋白质组学研究方法与实验方案
蛋白质组学研究方法与实验方案1. 什么是蛋白质组学？好吧，咱们先聊聊什么是蛋白质组学。
想象一下，咱们的身体就像一个精密的机器，每个部件都有它的角色，而这些部件就是蛋白质。
蛋白质组学，简单来说，就是研究这些蛋白质的科学。
通过它，我们能够了解它们的结构、功能，以及它们在身体里是如何相互作用的。
就像侦探破案一样，蛋白质组学帮我们解开生命的奥秘。
真是既神秘又有趣，尤其是当你发现一些小细节时，那种“啊哈！”的感觉，简直让人兴奋得想跳起来！2. 蛋白质组学的研究方法2.1 样本准备首先，样本准备可是一门艺术。
你不能随便拿个东西就往实验室一扔，这样可不行哦！一般来说，样本可能是血液、细胞或者组织。
准备这些样本时，注意卫生和安全，搞得像开派对一样，干净利索才行。
样本收集后，我们需要把它们冷藏，保持它们的新鲜度，毕竟没人想要一份过期的蛋白质套餐，对吧？2.2 蛋白质提取接下来，我们进入蛋白质提取的阶段。
想象一下，像是在厨房里做大餐，首先要把食材准备好。
提取蛋白质就像把牛肉从牛排里切下来，一刀切下去，油油的鲜香就出来了。
我们用各种化学试剂，像是盐酸、乙醇这些，来分离出蛋白质，得小心别让它们变成一团糟。
处理得当，才能确保后面的分析顺利进行。
3. 蛋白质分析3.1 质谱分析然后就是蛋白质分析环节。
这时候，质谱仪就像一位高级侦探，能够识别出蛋白质的身份。
你可以把质谱想象成一个超级厉害的放大镜，它能让我们看到蛋白质的分子量和结构。
分析结果能告诉我们这些蛋白质的种类、数量，甚至还可以了解它们的相互作用。
哇哦，真的是一门高科技的艺术呢！3.2 数据解读最后，我们得对数据进行解读。
就像读一本悬疑小说，刚开始可能没看懂，但越往后看越有趣。
这个过程需要耐心和细心，数据可能会让你感到困惑，但一旦你理解了其中的奥妙，简直就像解开了一个千古之谜。
通过这些数据，我们能够找到疾病的潜在标志物，或者探索新药物的目标，真是让人感到自豪的工作！4. 实验方案小贴士当然啦，在整个实验过程中，有几个小贴士可以帮助你事半功倍。
蛋白质的鉴定原理
蛋白质的鉴定原理蛋白质的鉴定原理可以通过多种方法进行，其中包括物理方法、化学方法和生物学方法。
下面将详细介绍蛋白质鉴定的各种方法及其原理。
1. 物理方法：物理方法主要是通过蛋白质的物理特性进行鉴定。
包括分子量的测定、蛋白质的电泳、质谱等方法。
(1) 分子量的测定：分子量是蛋白质的一个重要特性，可以通过凝胶过滤、凝胶电泳、超高速离心等方法来测定。
其中，凝胶电泳是一种常用的分析方法，通过将蛋白质样品加入聚丙烯酰胺凝胶中，经过电泳后蛋白质在凝胶上的迁移距离与分子量呈正相关，可根据分子量标准曲线来确定待测蛋白质的分子量。
(2) 蛋白质的电泳：电泳是通过蛋白质在电场中的迁移来进行分离和鉴定的方法。
主要有聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚丙烯酰胺SDS凝胶电泳以及等电点电泳等。
其中，SDS-PAGE是最为常用的蛋白质电泳方法，它通过在样品中加入吸附剂SDS 来赋予蛋白质带电性，使得蛋白质在电场中按照大小分子量移动，从而实现分离和鉴定。
(3) 质谱法：质谱法是利用蛋白质的质量-电荷比进行分析的方法。
常用的质谱方法有飞行时间质谱、质量分析检测和质谱成像等。
质谱法可以测定分子量、氨基酸序列、修饰位点等信息，是蛋白质结构鉴定的重要手段。
2. 化学方法：化学方法主要是通过蛋白质的化学性质进行鉴定。
包括氨基酸分析、肽链测序等方法。
(1) 氨基酸分析：氨基酸分析是确定蛋白质的氨基酸组成和含量的方法。
常用的方法包括离子交换色谱、氨基酸自动分析仪等。
通过将蛋白质样品水解，分离出各种氨基酸，再经过定量分析得到各个氨基酸的含量，从而鉴定蛋白质的氨基酸组成。
(2) 肽链测序：肽链测序是通过逐步水解肽链中的氨基酸，利用一系列化学反应和质谱分析方法来确定蛋白质的氨基酸序列。
常用的方法包括肽质谱法、域内肽定位法等。
通过测定每个氨基酸的位置和序列，可以确定蛋白质的完整序列，从而进行鉴定。
3. 生物学方法：生物学方法主要是通过蛋白质的生物学特性进行鉴定。
简述几种测定蛋白质方法及原理
简述几种测定蛋白质方法及原理蛋白质是生物体内最重要的分子之一，其功能多种多样，涉及到生命的方方面面。
了解蛋白质的性质、结构和功能非常重要。
为了实现这一目标，科学家们开发了多种方法来测定蛋白质的存在和浓度，以及研究其结构和功能。
在本文中，我们将简要介绍几种常见的测定蛋白质方法及其原理。
一、低丰度蛋白质检测方法在复杂样品中，许多蛋白质的浓度很低，因此需要采用高灵敏度的方法进行检测。
以下是两种常见的低丰度蛋白质检测方法。
1. Western blotting方法Western blotting方法是一种常用的蛋白质检测方法，通过将蛋白质转移到固体支持体上，然后使用特异性抗体来探测目标蛋白质的存在。
这个方法的原理是在电泳分离后，将蛋白质转移到聚丙烯腈膜或硝酸纤维素膜上。
样品经过特异性抗体结合，最后通过酶标记二抗或荧光二抗来使目标蛋白质可见。
2. 质谱法质谱法是一种利用质谱仪测定蛋白质质量的方法。
这种方法的原理是将蛋白质分解成肽段，然后通过质谱仪测定这些肽段的物质质量。
质谱法可以提供非常准确和高灵敏度的蛋白质测定结果，适用于分析复杂样本中的低丰度蛋白质。
二、蛋白质浓度测定方法蛋白质的浓度是研究蛋白质的基础，因此准确测定蛋白质浓度非常重要。
以下是两种常见的蛋白质浓度测定方法。
1. 比色法比色法是一种通过测量某种化学试剂与蛋白质之间的化学反应来测定蛋白质浓度的方法。
布拉德福德比色法使用染料染色蛋白质产生吸光度，再根据标准曲线定量测定蛋白质浓度。
这种方法简单、快速且灵敏度较高，适用于大多数蛋白质样品。
2. BCA法BCA法是一种利用受体配合反应来测定蛋白质浓度的方法。
在这种方法中，受体配体（biotin-avidin 或biotin-streptavidin）与蛋白质中的特定残基（如组氨酸等）结合生成复合物，然后通过比色反应测定复合物的吸光度。
BCA法具有高灵敏度和较低的非特异性反应。
三、蛋白质结构分析方法蛋白质的结构直接影响其功能和性质，因此了解蛋白质的结构是非常重要的。
蛋白测定原理
蛋白测定原理蛋白质是生物体内的重要组成部分，对于生命活动具有重要的作用。
因此，蛋白质的测定对于许多科研和临床诊断具有重要意义。
蛋白质测定的原理主要包括比色法、免疫法和生物化学法等多种方法。
比色法是一种常用的蛋白质测定方法，其原理是利用蛋白质与某些特定试剂发生化学反应后产生颜色，通过比色计或光度计测定其吸光度，从而推算出蛋白质的含量。
常用的比色试剂包括布拉德福试剂和派克试剂等，它们与蛋白质反应后形成的颜色与蛋白质的含量成正比。
比色法简单、快速，适用于大批量样品的测定，但对于某些特定蛋白质可能会出现干扰，因此在实际应用中需要注意选择合适的试剂和条件。
免疫法是利用抗体与特定蛋白质结合的原理进行测定的方法。
常见的免疫法包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）和免疫印迹法（Western blot）等。
这些方法通过将特定抗体与蛋白质结合后，再通过酶标记或荧光标记等方法进行检测，从而实现对蛋白质的定量测定。
免疫法具有高灵敏度和高特异性的特点，可以用于检测低浓度的蛋白质，但需要较长的操作时间和复杂的实验步骤。
生物化学法是利用蛋白质与特定底物发生反应的原理进行测定的方法。
常见的生物化学法包括蛋白质电泳法和蛋白质结合法等。
蛋白质电泳法通过在电场中将蛋白质分离，再通过染色或免疫检测进行定量测定。
蛋白质结合法则是利用蛋白质与特定配体结合的原理进行测定，如双光子吸收法和核磁共振法等。
这些方法具有高分辨率和高灵敏度的特点，可以用于分析复杂混合物中的蛋白质，但需要较长的操作时间和较高的技术要求。
总之，蛋白质测定的原理涉及到多种方法，每种方法都有其特定的优缺点和适用范围。
在实际应用中，需要根据样品的特性和实验的要求选择合适的测定方法，并注意控制实验条件，以确保获得准确可靠的测定结果。
同时，随着科学技术的不断发展，蛋白质测定方法也在不断更新和完善，相信在未来会有更多更好的方法用于蛋白质的测定和分析。
蛋白质含量的测定方法及原理
蛋白质含量的测定方法及原理蛋白质是生物体内重要的基础结构和功能分子，其含量的测定对于生物学和医学研究具有重要意义。
目前常用的蛋白质含量测定方法主要包括生物化学法、生物物理法和免疫学法等。
下面将对这几种方法的原理进行详细介绍。
1. 生物化学法：生物化学法通过酶促反应或化学反应，将蛋白质转化成可以测定的可溶物或在一定条件下呈现特定吸光度的产物，从而测定蛋白质的含量。
常用的生物化学法有Lowry法、Bradford法和BCA法。
(1) Lowry法：Lowry法是1969年由Lowry等人开发的一种蛋白质定量方法。
该方法利用蛋白质与Folin-Ciocalteu试剂在碱性条件下发生氧化反应，生成具有最大吸收峰的蓝色产物，通过测定产物的光密度与一系列标准溶液进行比较，来确定蛋白质的含量。
(2) Bradford法：Bradford法是Bradford于1976年提出的一种测定蛋白质含量的方法。
该方法基于蛋白质与染料(Coomassie Brilliant Blue G-250)之间的特异结合，蛋白质和染料形成一个蛋白质-染料复合物，该复合物的吸光度变化与蛋白质的浓度呈正相关。
通过测定复合物的光密度与一系列标准溶液进行比较，来确定蛋白质的含量。
(3) BCA法：BCA法是一种在碱性条件下，将蛋白质还原成具有强吸收的蓝色离子的方法。
BCA试剂(含有琥珀酸铜II配合物和增强剂)能与蛋白质中的酸性氨基酸残基(尤其是含有两个以上连续胺基的肽键)发生氧化还原反应，生成具有强吸收的蓝色离子。
利用光密度测定产生的蓝色离子与一系列标准溶液进行比较，即可确定蛋白质的含量。
2. 生物物理法：生物物理法是通过光学原理，利用蛋白质溶液对光的吸收、散射或旋光等性质进行测定，来间接推算蛋白质的含量。
常用的生物物理法有紫外吸收光谱法、比色法和荧光法等。
(1) 紫外吸收光谱法：紫外吸收光谱法是通过蛋白质在紫外光区域的吸收特性来测定蛋白质的含量。
蛋白质测定方法及原理
蛋白质测定方法及原理蛋白质是生物体内组成和调节生命活动的重要基质，因此对蛋白质浓度进行准确的测定具有重要意义。
目前常用的蛋白质测定方法主要有生物学法、光学法和化学方法等。
生物学法是一种常用的蛋白质测定方法，通过测定蛋白质与其他生物体成分之间的相互作用来间接推断蛋白质的浓度。
常见的生物学法包括胱氨酸法、比色法和酶标记法等。
胱氨酸法是一种通过测定蛋白质中胱氨酸的含量来推断蛋白质浓度的方法。
胱氨酸是蛋白质的主要成分之一，它的浓度与蛋白质的浓度呈正相关关系。
因此，可以通过测量胱氨酸的含量来推断蛋白质的浓度。
胱氨酸法的原理是将待测蛋白质与胱氨酸反应生成蛋白胱氨酸络合物，然后用氧化剂将络合物氧化为带有色度的化合物。
根据带色化合物的吸光度，可以推算蛋白质的浓度。
比色法是一种通过测量溶液中蛋白质与试剂之间的染色反应来推测蛋白质浓度的方法。
常见的比色试剂有布拉德福德试剂、联苯胺蓝试剂和阿氏试剂等。
比色试剂与蛋白质之间发生染色反应后，可以测量溶液的吸光度，并通过标准曲线法来推算蛋白质的浓度。
酶标记法是一种通过酶标记的反应来测定蛋白质浓度的方法。
其原理是将酶与蛋白质反应生成酶标记的复合物，然后用底物与酶反应，使酶催化底物生成可检测的产物。
通过测量产物的光吸光度或荧光强度，可以推断蛋白质的浓度。
光学法是一种通过测量蛋白质溶液对光的吸收或散射来推断蛋白质浓度的方法。
其中，紫外可见光吸收法是一种常用的光学法。
蛋白质溶液对特定波长的光具有吸收作用，且吸收作用与蛋白质浓度成正比。
因此，通过测量蛋白质溶液对光的吸收，可以推算蛋白质的浓度。
化学方法是一种通过化学反应来测定蛋白质浓度的方法。
常用的化学方法包括低里氏法、尿素硝酮反应法和近红外光谱法等。
这些方法通过测量蛋白质与特定试剂之间的化学反应产物的吸光度、荧光强度或反应物质的浓度，来推断蛋白质的浓度。
总之，蛋白质的测定方法多种多样，根据具体的实验要求和条件选择合适的方法是准确测定蛋白质浓度的关键。
蛋白质结构及其功能的研究方法
蛋白质结构及其功能的研究方法随着生物学研究的不断深入，蛋白质作为生命的基本分子，已经成为热门的研究领域。
研究蛋白质结构及其功能不仅有助于理解生命现象，还有助于开发新的药物和治疗方法。
本文将介绍蛋白质结构及其功能的研究方法。
一、X射线晶体学X射线晶体学是目前最常用的研究蛋白质结构的方法。
其基本原理是通过制备蛋白质结晶，并将其暴露在X射线下进行扫描。
X射线与电子云相互作用，会产生衍射，通过解析衍射图谱，可以重建蛋白质的三维结构。
这种方法已经被广泛用于大部分蛋白质的结构解析。
但是，制备蛋白质结晶是一个及其困难和复杂的过程，这也是目前蛋白质晶体学研究的主要瓶颈。
二、核磁共振核磁共振是一种通过探测蛋白质分子核自旋的方法，从而了解蛋白质结构和动态行为的研究方法。
其基本原理是将蛋白质溶解在磁场中，并在其周围施加高频辐射。
蛋白质分子核自旋的能量差距因此被更改，通过对其进行分析，可以解析出蛋白质的核磁共振谱。
这种方法可用于研究蛋白质的构象和动态行为，但是其分辨率相对于X射线晶体学要低。
三、电子显微电子显微是一种用电子束照射蛋白质溶液，并通过电子透射图谱来重建蛋白质结构的方法。
这种方法可以直接观察生物大分子的分子结构，且分辨率较高。
但由于其要求的样品制备和成像条件较为苛刻，因此这种方法应用仍非常有限。
四、质谱质谱是一种通过测量分子的相对质量和相对丰度的方法，以了解蛋白质组分和复杂度的研究方法。
其基本原理是根据电荷-质量比测量分析样品中所存在的离子。
这种方法能够识别蛋白质的氨基酸序列、翻译后修饰，以及蛋白质与其他分子间的相互作用。
综上所述，随着生物学和生物技术的发展，蛋白质结构和功能的研究方法也不断更新与改进。
除了以上介绍的几种方法之外，还有许多其他的方法，例如超分辨率显微、单分子荧光显微等。
这些研究方法的发展和应用，不仅推动了生命科学领域的事业，同时也带动了现代医药和生物工程的发展。
蛋白质组学研究方法与实验方案
蛋白质组学研究方法与实验方案1. 蛋白质组学的神奇世界大家好，今天我们要聊聊蛋白质组学。
这是什么呢？简单来说，就是研究蛋白质这个小家伙的学问。
想象一下，蛋白质就像是一群勤奋的工人在身体里干活儿，它们负责各种任务，比如修复受伤的细胞、传递信息等。
了解这些“工人”的工作方式、合作模式，可以帮助我们更好地理解健康和疾病。
这就像揭开了一本厚重的百科全书的封面，里面充满了惊喜和知识的宝藏。
接下来，我们就来看看，怎么才能深入了解这些小家伙们呢？1.1 蛋白质组学的基本概念首先，我们得知道蛋白质组学是什么。
它是一门研究蛋白质全貌的学问。
也就是，不仅仅看单个蛋白质，而是把所有蛋白质都放在一个“大杂烩”里研究。
想象一下，你在一家大餐厅里，看到了一整桌丰盛的菜肴，这就是蛋白质组学的“全景图”。
我们不仅要知道每道菜是什么，还得了解这些菜肴如何搭配，如何一起让你胃口大开。
通过蛋白质组学，我们可以发现哪些蛋白质在特定的疾病中“捣乱”，哪些在健康状态下“勤勤恳恳”。
这就好比你在看一部精彩的电视剧，不只是盯着主角，而是要了解所有配角、剧情的每个细节。
1.2 蛋白质组学的研究方法那么，如何进行这些研究呢？首先，科学家们会用一种叫做“质谱分析”的技术。
这就像是给蛋白质做个超级详细的X光检查，能够精确地知道每个蛋白质的“身份信息”。
其次，还有一种叫做“二向色谱”的技术，它能帮忙把混乱的蛋白质样本整理成条理清晰的“小档案”。
这些技术就像是给你提供了一本超级强大的工具书，让你能一目了然地看到每个蛋白质的真实面貌。
2. 实验方案的细节了解了基本概念和方法，我们再来说说实验方案。
做蛋白质组学实验，就像是调制一道复杂的美食，需要准备许多食材，还要按照步骤来操作。
首先，你得从样本中提取蛋白质。
这一步就像是把食材从冰箱里拿出来，准备好各种配料。
接着，把这些蛋白质进行分离和鉴定。
这时，实验室里就变成了一个“厨房”，各种仪器和试剂就像是厨具和调料，为你制作出最精美的“蛋白质大餐”。
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高效液相层析法（High Performance Liquid Chromatography ，HPLC）
又称“高压液相色谱，是色谱法的一个重要分支，以 液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性 的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相 泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后， 进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
蛋白质的研究方法与原理
（一）盐析法
概念：将中性盐加入蛋白质溶液，破坏水化膜和 电荷而使蛋白质沉淀，叫盐析。各种蛋白质盐析 所需的盐浓度及PH不同，加入不同浓度的中性盐 可使各种蛋白质依次分别沉淀出来。
优点：操作简便 对易变性的蛋白质有一定的保护作用， 适用范围十分广泛。
缺点：分辨能力差，纯化倍数低
蛋白质的研究方法与原理
（3）蛋白质浓度 [Pr]较高，在较低无机盐浓度时,蛋白质便开 始析出，盐析界限比较宽。 [Pr]较低，需要无机盐的浓度也高，即盐析 界限变窄。
蛋白质的研究方法与原理
（二）有机溶剂沉淀法
分辨力比盐析方法高，提纯效果好
1.基本原理
（1）在PI附近，Pr主要以中性离子形式存在。此时若添加 有机溶剂，由于有机溶剂可使溶液电离常数减小，增强了 中性离子间静电引力，从而使分集合而沉淀出来。
蛋白质的研究方法与原理
亲和层析法
原理：利用生物高分子具有能和某些相对应的专一
分子可逆结合的特性。 如，酶的活性部位能和底物\抑制剂\辅助因子专
一性地结合,改变条件又能使这种结合解除. [酶的变构中心与变构因子（或称效应物）之 间、抗体与抗原之间、激素与受体之间，结 合蛋白与结合物之间]。 这些被作用的对象物质称之为配基（ligand) 。
蛋白质的研究方法与原理
（1）盐的种类 对同一种Pr而言，价数愈高的盐离子，盐析能力 也愈强:
PO3-4＞SO42-＞C2O42-＞（CHOHCOO-）2＞ AC－＞CL－＞NO3-＞Br -＞I-＞CNS-
K+＞Rb+＞Na+＞Cs+＞Li+＞NH4+ 常用的中性盐有如硫酸盐、磷酸盐等。
蛋白质的研究方法与原理
第十章 蛋白质的研究方法与原理
蛋白质的研究方法与原理
第一节 概 述
蛋白质的研究方法与原理
直接从生物组织中提纯蛋白——
蛋白质的分离纯化包括以下过程：
1.破碎生物组织，并用适当的缓冲液将蛋白质抽提出来； 2.将有关的蛋白质分级沉淀下来; （盐析法或有机溶剂法） 3.应用层析法或电泳法使它们各自分开； 4.蛋白质结晶； 5.蛋白质纯度鉴定和含量测定。
（2）有机溶剂本身的水合作用会破坏Pr表面的水合层，也 促使Pr变得不稳定而聚集析出.
常用的有机溶剂：乙醇和丙酮 蛋白质的研究方法与原理
（三）选择性沉淀法
选择一定的条件使其它蛋白质变性沉淀而不影响目标 蛋白质的分离方法。例如，将提取液加热至一定温度 并维持一段时间，是某些不耐热的蛋白质变性沉淀等。 应用选择星辰殿，徐实现对系统中需除去的及欲提纯 的蛋白质的理化性质均有较全面的了解。
蛋白质的研究方法与原理
四、电泳技术分离蛋白质
电泳（electrophoresis）是指带电粒子在电场 中向着与其所带电荷相反方向电极移动的现象。
硫酸铵（常用盐析剂）
优点：盐析能力较强 具有较高的溶解度 较低的溶解度温度系数 价格低廉 不产生副作用。
缺点：缓冲能力较差 PH难控制
蛋白质的研究方法与原理
（2）PH和温度 S。代表蛋白质在无机盐溶液中的溶解度
除取决于Pr的种类，还受PH及温度影响: • PH=PI时，S。的数值极小 • S。随温度增加而减低。 盐析过程中，若增高温度，有助于Pr的析出。
蛋白质的研究方法与原理
制备过程中注意事项：
要求自始至终保持在天然状态
1. 避免一切过激因素--如过酸或过碱，高温， 重金属等的影响。
2. 通常都在低温条件下操作。 3. 尽可能使样品中蛋白质的浓度维持在较高
水平。
蛋白质的研究方法与原理
第二节 蛋白质的分离与纯化技术
蛋白质的研究方法与原理
一、蛋白质沉淀与结晶
蛋白质的研究方法与原理
（四）蛋白质结晶
蛋白质结晶即是溶液中的蛋白质由随机状态转变为有 规则排列状态的固体，常用语分析研究其结构。 蛋白质结晶是一个有序化过程，当蛋白质溶液达到过 饱和状态，能够形成一定大小的晶核，溶液中的分子 失去自由运动的能量，不断地结合到形成的晶核上， 长成适合于X线衍射分析的晶体。
最基本的特征： 固定相 流动相
各种物质得以分离的最基本原因：就在于它们在这 两个相之间具有不同的分配系数.两相作相对运动时， 这些物质在两相间进行多次的分配，即使它们的分 配系数只有微小的差异，通过这个过程也能得到最 大的分离效果。
蛋白质的研究方法与原理
层析技术的种类
气相层析
按两相状态来分 液相层析
蛋白质的研究方法与原理
二、离心技术分离蛋白质
离心技术是利用物体 告诉旋转时产生强大的离 心力，使置于旋转体中的 悬浮颗粒发生沉降或漂浮， 从而使某些颗粒达到浓缩 或与其它颗粒分离之目的。
蛋白质的研究方法与原理
三、层析技术分离纯化蛋白质
层析技术（chromatography）又称色谱技术，是利 用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。
吸附层析 分配层析 离子交换层析 按层析机理来分 凝胶排阻层析 亲和层析 柱层析
按操作方式来分 薄层层析
纸层析 蛋白质的研究方法与原理
（一）凝胶过滤层析
又称分子筛或凝胶过滤（gel filtration）
原理：载体为有一定孔径的多孔性亲水性凝胶。当分 子大小不同的混合物通过这种凝胶柱时，直径大于孔 径的分子将不能进入凝胶内部，便直接沿胶粒间隙流 出（全排出）。较小的分子进入能容纳它的孔穴，绕 道而行，在柱内保留时间就比较长。这样，较大的分 子被先洗脱下来，而较小的分子后被洗脱下来，从而 达到相互分离的目的。
蛋白质的研理：阴（阳）离子交换树脂颗粒（作为固定相）
填充在层析柱内，由于阴（阳）离子交换树 脂颗粒上带正（负）电荷，能吸引溶液中的 阴（阳）离子。然后再用含阴（阳）离子的 溶液洗柱。含负电量小的蛋白质首先被洗脱 下来，增加阴离子浓度，含负电量多的蛋白 质也被洗脱下来，于是两种蛋白质被分开。