克雷伯菌致病因子的研究进展_沈定树
肺炎克雷伯菌对抗生素的耐药性研究
肺炎克雷伯菌对抗生素的耐药性研究肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）是一种常见的病原菌，可引发多种感染，包括呼吸道感染、尿路感染和败血症等。
然而，近年来，肺炎克雷伯菌对抗生素的耐药性不断增强，给临床治疗带来了极大的挑战。
本文将对肺炎克雷伯菌对抗生素耐药性的研究进行探讨。
一、肺炎克雷伯菌对抗生素的耐药机制肺炎克雷伯菌对抗生素的耐药性主要有两种机制：靶标改变和药物耐药基因的表达。
1. 靶标改变肺炎克雷伯菌可以通过改变药物的作用靶点，降低药物对其的效果。
例如，一些菌株可通过改变靶标蛋白的结构或功能，使得抗生素无法有效结合，从而失去了杀菌作用。
这种耐药机制使得肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素（如头孢菌素和氨苄青霉素等）呈现高水平的耐药性。
2. 药物耐药基因的表达肺炎克雷伯菌通过表达一系列耐药基因来降低对抗生素的敏感性。
这些耐药基因可以通过多种方式在菌体内进行水平传递，从而导致多重耐药。
其中最著名的耐药基因包括产β-内酰胺酶和外膜通道蛋白的缺失等。
二、肺炎克雷伯菌耐药性的流行状况肺炎克雷伯菌对抗生素的耐药性在全球范围内普遍存在，且呈逐年增加的趋势。
相关研究表明，耐氨苄青霉素酶型肺炎克雷伯菌是当前医院感染的主要致病菌之一。
此外，某些菌株还表现出对卡那霉素等多种抗生素的耐药性，增加了感染控制的难度。
因此，了解肺炎克雷伯菌耐药性的流行状况对临床治疗和感染预防具有重要意义。
三、抗生素耐药基因的研究进展近年来，对肺炎克雷伯菌抗生素耐药基因的研究取得了一些进展。
通过全基因组测序技术，研究人员发现了大量和抗生素耐药相关的基因，包括β-内酰胺酶基因和多重耐药泵基因等。
此外，一些研究还发现了新型的耐药基因，为进一步解释肺炎克雷伯菌抗生素耐药性的机制提供了新的线索。
此外，肺炎克雷伯菌耐药性的研究还涉及到基因表达调控、质粒传递和细菌遗传背景等方面。
通过深入研究这些机制，可以更好地理解肺炎克雷伯菌对抗生素的耐药性，为临床治疗提供更有效的策略。
肺炎克雷伯菌超广谱β(一)
肺炎克雷伯菌超广谱β(一)作者：程训民，张琪，徐元宏，李敏，朱素珍，沈继录【关键词】,肺炎克雷伯菌Detectionofextendedspectrumbetalactamasesandanalysisofantibioticresistanceinclinicalisolateso fKlebsiellapneumoniae【Abstract】AIM:Tostudythephenotypeandgenotypedistributionofextendedspectrumbetalactamases(ESBLs)pr oducingKlebsiellapneumoniae（K.pneumoniae）anditsdrugresistance.METHODS:SeventysevenstrainsofK.pneumoniaeweredeterminedby1999NC CLsmethodsandthegenotypeofESBLswasamplifiedbypolymerasechainreaction(PCR).Theantibiotics usceptibilityofbacteriawasdeterminedbymicrodilution.RESULTS:Inthe77positiveK.pneumoniaeisol atesoftheinitialscreentest,45strains(58.1%)wereconfirmedbycefotaximeandcefotaximeclavulanica cidbutonly27strainswereconfirmedbyceftazidimeandceftazidimeclavulanicacid.PCRshowedthatTE M,SHV,CTXMorOXAtypeESBLsintheclinicalstrainswere19,8,36,11strainsrespectively.CONCLUSION: K.pneumoniaeisoneofthemostcommonESBLsproducingstrains.TheratesofESBLsproducingK.pneum oniaesignificantlyincreaseinrecentyearsandCTXMismostcommongenotype.Somestrainscarrytwoo rmoregenotypes.Imipenemisthemostsusceptibleantibiotic.【Keywords】Klebsiellapneumoniae;betalactamases;phenotype;genotype;drugresistance；antibiotic【摘要】目的：了解产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及对常用抗生素的耐药情况.方法：用1999年NCCLS推荐的初筛试验从77株肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌，并用确证试验加以确认；用PCR的方法扩增其基因型；用微量液体稀释法做药敏实验.结果：将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法确证，用头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定，77株肺炎克雷伯菌中共检出45株产ESBLs（58.1%）；而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为27株.PCR扩增基因型阳性结果为TEM型19株、SHV型8株、CTXM型36株、OXA型11株.结论：近年来肺炎克雷伯菌产ESBLs率显著升高；基因型以CTXM型为主，有些菌株同时携带多种耐药基因；亚胺培南仍为首选药物,头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦为候选药物.【关键词】肺炎克雷伯菌;β内酰胺酶类;表型;基因型;耐药性;抗菌药物0引言超广谱β内酰胺酶(extendedspectrumbetalactamases,ESBLs）是由质粒介导的能使细菌对三代头孢菌素类、青霉素类及单酰胺类抗生素耐药的一类酶，ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，以肺炎克雷伯菌为代表菌属.近年来，肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株逐年增多，ESBLs在菌株间的转移和传播〔1〕，使其耐药性成为突出问题.我地区产ESBLs肺炎克雷伯菌的检测结果及耐药性分析如下.1材料和方法1.1材料肺炎克雷伯菌77株来自200302/200411淮北市人民医院、淮北矿工总院、濉溪县医院疑为感染患者血液、骨髓、浆膜腔穿刺液、脑脊液、尿液和前列腺液等.质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922,肺炎克雷伯菌ATCC700603，标准产酶Eco菌株TEM1，TEM3，SHV5，CTXM3，CTXM24，TOHO1，OXA1，OXA2和OXA10均由安徽医科大学徐元宏副教授惠赠.药敏试验采用微量液体稀释法,ESBLs检测采用头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟、头孢曲松纸片进行初筛,确证试验采用头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸纸片、药敏培养基（MuellerHinton 琼脂）均购自Oxiod公司.根据GenBank公布的blaTEM，blaSHV，blaCTXM和blaOXA的DNA序列设计合成8对特异性引物，均由上海生物工程公司合成.PCR扩增试剂盒购自大连宝生生物公司.1.2方法选用头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟、头孢曲松药敏纸片，用MH琼脂35℃18h观察结果，按NCCLS标准进行判断〔2〕.凡头孢他啶的抑菌圈直径≤22mm,头孢曲松≤25mm,氨曲南或头孢噻肟≤27mm为可疑ESBLs菌株.每批试验均用大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603做质控.按标准纸片扩散法用CAZ和CAZ/clav，CTX和CTX/clav两组纸片做确证试验，含克拉维酸与其相应不含克拉维酸的纸片抑菌圈直径差值≥5mm，确定为产ESBLs菌株.采用德国Biometra公司DNA扩增仪及大连宝生生物工程公司PCR反应试剂盒进行DNA 扩增.PCR反应体积为50μL含1×PCR缓冲液，3.5mmol/LMg2+，200μmol/LdNTPs，500nmol/L 引物，1UTaq酶，10～50ng待测DNA模板.反应参数为开始5min94℃解链，继以94℃30s 解链，退火温度依据引物不同为56～62℃30s，再以72℃延伸1min，循环35次，最后72℃保温7min.PCR扩增产物用12g/L凝胶（含0.2mg/L溴化乙锭）电泳，在Tanon102凝胶成像系统下分析结果.设EcoATCC25922及空白为阴性对照，标准产酶Eco（TEM1，SHV5，CTXM3，CTXM24，TOHO1，OXA1，OXA2和OXA10）分别为阳性对照.2结果2.1ESBLs表型和基因检测肺炎克雷伯菌77株共检出产ESBLs45株(58.1%).PCR扩增结果显示,TEM型阳性19株,SHV型阳性8株,CTXM型阳性36株(Fig1),OXA型阳性11株.2.2药敏试验产ESBLs肺炎克雷伯菌45株对哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低,亚胺培南也较低.氨曲南、庆大霉素、阿米卡星低于头孢噻肟、头孢哌酮和四代头孢菌素头孢吡肟(Tab1).表1ESBLs阳性肺炎克雷伯菌45株药敏试验（略）3讨论由于第三代头孢菌素的大量使用，肠杆菌科细菌ESBLs的产生率显著增高并广泛传播〔3〕.本结果显示，77株肺炎克雷伯菌共检出45株产ESBLs(58.1%).由于某些ESBLs使细菌对所有β内酰胺类抗生素高水平耐药，但另外一些ESBLs仅使细菌对部分药物选择性低水平耐药，所以检测底物的选择将直接影响ESBLs的检出，本地区头孢噻肟的耐药率高于头孢他啶和氨曲南，可能与本地区大量使用头孢噻肟而较少使用头孢他啶及细菌产CTXM酶有关.本地区检测ESBLs的最佳底物是头孢噻肟.。
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌相关危险因素及防治研究进展
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌相关危险因素及防治研究进展碳青霉烯类药物的不合理使用，导致碳青霉烯类药物耐药的菌株数量激增。
碳青霉烯类耐药菌株中，耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌占据重要比例。
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌自1997年被首次报道后，至今在全球多个国家均有报道，有些地区甚至出现了暴发流行。
对比前几年细菌耐药监测数据，我国耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌的检出率呈不断上升趋势。
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌与碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌相比，具有更高的致死率。
本文就流行病学现状、相关危险因素、防治措施方面对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的研究进展进行综述。
[Abstract] The unreasonable use of carbapenems has led to an explosion in the number of resistant strains of carbapenems. Among carbapenems-resistant strains，carbapenems-resistant Klebsiella pneumoniae accounts for a significant proportion. Carbapenems-resistant Klebsiella pneumoniae has been reported in many countries around the world since it was first reported in 1997. Outbreaks have appeared in some areas even. Compared with the previous years，the data of bacterial resistance surveillance showed that the detection rate of carbapenems-resistant Klebsiella pneumoniae in China was on an upward trend. Carbapenems-resistant Klebsiella pneumoniae has a higher lethality than carbapenems-sensitive Klebsiella pneumoniae. In this paper，the progress of studies on the current status of epidemiology，related risk factors，prevention and treatment measures of carbapenems-resistant Klebsiella pneumoniae are reviewed.[Key words] Klebsiella pneumoniae；Carbapenems-resistant；Risk factors；Prevention and treatment肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，KP）臨床检出排名仅次于大肠埃希菌的革兰阴性菌，是重要的条件致病菌之一。
2023肺炎克雷伯菌多黏菌素耐药机制的研究进展
2023肺炎克雷伯菌多黏菌素耐药机制的研究进展近年来，碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌临床分离率不断增加，导致多黏菌素成为治疗多重耐药肺炎克雷伯菌感染的重要防线，但随着多黏菌素的使用增多，其耐药率也逐渐升高。
肺炎克雷伯菌多黏菌素耐药机制多种多样，以外膜修饰脂多糖为主。
参与这一过程的基因除位于染色体上的双组份系统夕万。
々2、PmrAB、b"18及负性调控跨膜蛋白∕77gM基因外，质粒携带的移动性多黏菌素耐药基因力”也能介导外膜修饰。
其中，mg加基因变异对多黏菌素耐药起关键作用。
本文主要阐述肺炎克雷伯菌多黏菌素耐药机制，以更好遏制肺炎克雷伯菌多黏菌素耐药发生。
肺炎克雷伯菌属肠杆菌目，在人类细菌性感染的病原体中居于前3位【1】。
中国细菌耐药监测网显示2023年1—12月临床分离株中肺炎克雷伯菌对美罗培南及亚胺培南耐药率分别为24.2%和22.6%β碳青霉炸酶，如肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(K1ebsie11apneumoniae Carbapenemase,KPC)、新德里金属B内酰胺酶(NewDe1himeta11o-β-1actamase,NDM)、OXA-48等播散使得碳青霉焙类抗菌药物无法用于治疗碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(Carbapenemresistant K1ebsie11apneumoniae,CRKP)o新型B内酰胺类抑制剂的抗菌药物如头抱他D定/阿维巴坦对于产NDM的CRKP无效,产KPC-2的CRKP感染在使用头抱他咤/阿维巴坦治疗的过程中可因KPC-2变异致治疗失败，多黏菌素可作为治疗CRKP的最后手段【2】,但随着多黏菌素在临床使用增加,耐药率明显升高【21。
2019年一项较为全面的数据统计发现，临床分离肺炎克雷伯菌多黏菌素耐药率分别为4.0%（亚洲）、3.5%（南美洲）、3.2%（欧洲）、2.4%（非洲）、0.8%（北美洲）。
其中，亚洲较2014—2018年有明显的增长趋势［3〕。
2020-2021高毒力肺炎克雷伯菌感染研究进展(完整版)
2020-2021高毒力肺炎克雷伯菌感染研究进展(完整版)高毒力肺炎克雷伯菌（XXX，hvKP）是一种重要的病原体，与经典的肺炎克雷伯菌不同，它多在免疫功能健全宿主中引起感染。
该细菌最常见的感染是肝脓肿，常伴随多器官系统的共感染或血流感染，导致严重致残和致死事件。
高毒力肺克最早于1986年以个案形式报道，而后得到广泛关注。
目前，它已成为全球关注的重要病原体之一。
三、高毒力肺克的流行病学特点高毒力肺克在亚太地区和亚裔人群中高发。
它常引起社区获得性感染，多发生在免疫健全人群中，因其较强的致病力使其致残及致死率更高。
高毒力肺克最易引起肝脓肿，常同时或先后伴有远隔器官的共感染，如内源性眼内炎、血源性肺脓肿或脑脓肿等。
了解高毒力肺克的流行病学特点对于临床正确识别和有效治疗相关疾病具有重要意义。
四、高毒力肺克的发病机制高毒力肺克的发病机制复杂，目前尚未完全清楚。
研究表明，高毒力肺克具有多种毒力因子，如鞭毛、胶囊、外膜蛋白、溶血素等。
其中，胶囊是高毒力肺克最重要的毒力因子之一，它可以帮助细菌逃避宿主的免疫攻击。
此外，高毒力肺克还具有多种代谢途径和耐药机制，这使得它在宿主体内更容易存活和繁殖。
了解高毒力肺克的发病机制对于制定有效的预防和治疗策略具有重要意义。
五、高毒力肺克的临床诊疗高毒力肺克感染的临床表现多样，且常伴有多器官系统的共感染或血流感染。
临床诊断主要依靠细菌培养和分离，以及对患者的临床表现进行综合分析。
治疗方案应根据细菌的药敏试验结果和患者的病情进行个体化制定。
目前，对于高毒力肺克的治疗仍存在许多争议，需要进一步的研究和探索。
总之，了解高毒力肺克的起源、定义、流行病学特点、发病机制以及临床诊疗等方面对于预防和治疗相关疾病具有重要意义。
关于高毒力肺克的定义，目前还没有达成一致的看法。
动物模型是鉴定高毒力肺克菌株的方法之一，通过给小鼠接种不同浓度的肺克，可以发现高毒力肺克由于携带特殊的毒力基因，即使接种低剂量的细菌也会导致较高的致死率。
高毒力肺炎克雷伯菌毒力和耐药机制研究进展
［收稿日期］ ２０２０－０７－１６［基金项目］ 国家自然科学基金（８１７６０７４３）；广西壮族自治区卫生健康委员会自筹经费科研项目（Ｚ２０１９０９４０）［作者简介］ 蒋玉婷（１９９４－），女（汉族），广西壮族自治区贺州市人，硕士研究生，主要从事呼吸系统感染性疾病的研究和治疗。
［通信作者］ 陈一强 Ｅ ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｙｑ０７０８＠１６３．ｃｏｍ犇犗犐：１０．１２１３８／犼．犻狊狊狀．１６７１－９６３８．２０２１７７９９·综述·高毒力肺炎克雷伯菌毒力和耐药机制研究进展蒋玉婷，张 珂，刘唐娟，黄莹莹，温中薇，孔晋亮，陈一强（广西医科大学第一附属医院呼吸与危重症医学科，广西南宁 ５３００２１）［摘 要］ 自２０世纪８０年代中期以来，高毒力肺炎克雷伯菌（ｈｖＫｐ）感染率逐年增加，已引起全球的关注。
ｈｖＫｐ较普通型肺炎克雷伯菌（ｃＫｐ）更具致病性，在健康人群中即可引发侵袭性感染，不仅病死率高（３％～３１％），而且常伴随严重的后遗症，如眼盲或神经系统疾病。
更令人担忧的是，近年来对第三代头孢菌素、碳青霉烯类抗生素和粘菌素耐药的ｈｖＫｐ菌株相继出现，给临床治疗和管理工作带来巨大挑战。
因此，了解ｈｖＫｐ毒力及耐药机制尤为重要，此文就其最新研究进展进行综述。
［关 键 词］ 高毒力；肺炎克雷伯菌；毒力因子；耐药机制［中图分类号］ Ｒ１８１．３＋２犚犲狊犲犪狉犮犺狆狉狅犵狉犲狊狊狅狀狏犻狉狌犾犲狀犮犲犪狀犱犱狉狌犵狉犲狊犻狊狋犪狀犮犲犿犲犮犺犪狀犻狊犿狅犳犺狔狆犲狉狏犻 狉狌犾犲狀狋犓犾犲犫狊犻犲犾犾犪狆狀犲狌犿狅狀犻犪犲犑犐犃犖犌犢狌 狋犻狀犵，犣犎犃犖犌犓犲，犔犐犝犜犪狀犵 犼狌犪狀，犎犝犃犖犌犢犻狀犵 狔犻狀犵，犠犈犖犣犺狅狀犵 狑犲犻，犓犗犖犌犑犻狀 犾犻犪狀犵，犆犎犈犖犢犻 狇犻犪狀犵（犇犲狆犪狉狋犿犲狀狋狅犳犚犲狊狆犻狉犪狋狅狉狔犪狀犱犆狉犻狋犻犮犪犾犆犪狉犲犕犲犱犻犮犻狀犲，犜犺犲犉犻狉狊狋犃犳犳犻犾犻犪狋犲犱犎狅狊狆犻狋犪犾狅犳犌狌犪狀犵狓犻犕犲犱犻犮犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犖犪狀狀犻狀犵５３００２１，犆犺犻狀犪）［犃犫狊狋狉犪犮狋］ Ｓｉｎｃｅｔｈｅｍｉｄ １９８０ｓ，ｉｎｃｉｄｅｎｃｅｏｆｈｙｐｅｒｖｉｒｕｌｅｎｔ犓犾犲犫狊犻犲犾犾犪狆狀犲狌犿狅狀犻犪犲（ｈｖＫｐ）ｈａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｙｅａｒｂｙｙｅａｒ，ｗｈｉｃｈｈａｓａｔｔｒａｃｔｅｄｇｌｏｂａｌａｔｔｅｎｔｉｏｎ．ｈｖＫｐｉｓｍｏｒｅｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｔｈａｎｃｌａｓｓｉｃ犓犾犲犫狊犻犲犾犾犪狆狀犲狌犿狅狀犻犪犲（ｃＫｐ），ｉｔｃａｎｌｅａｄｔｏｉｎｖａｓｉｖｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎｈｅａｌｔｈｙｐｅｏｐｌｅ，ｎｏｔｏｎｌｙｗｉｔｈｈｉｇｈｍｏｒｔａｌｉｔｙ（３％－３１％），ｂｕｔａｌｓｏｏｆｔｅｎａｃｃｏｍｐａ ｎｉｅｄｂｙｓｅｒｉｏｕｓｓｅｑｕｅｌａｅ，ｓｕｃｈａｓｂｌｉｎｄｎｅｓｓｏｒｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｗｈａｔｉｓｍｏｒｅｗｏｒｒｙｉｎｇｉｓｔｈａｔ，ｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ，ｔｈｅｅｍｅｒｇｅｎｃｅｏｆｈｖＫｐｓｔｒａｉｎｓｒｅｓｉｓｔａｎｔｔｏｔｈｅｔｈｉｒｄｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎｓ，ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓａｎｄｃｏｌｉｓｔｉｎｈａｓｂｒｏｕｇｈｔｇｒｅａｔｃｈａｌｌｅｎｇｅｔｏｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔａｎｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｖｉｒｕｌｅｎｃｅａｎｄｄｒｕｇｒｅｓｉｓ ｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｈｖＫｐｉｓｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙｉｍｐｏｒｔａｎｔ，ｔｈｉｓｐａｐｅｒｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｌａｔｅｓｔｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｈｖＫｐ．［犓犲狔狑狅狉犱狊］ ｈｙｐｅｒｖｉｒｕｌｅｎｔ；犓犾犲犫狊犻犲犾犾犪狆狀犲狌犿狅狀犻犪犲；ｖｉｒｕｌｅｎｃｅｆａｃｔｏｒ；ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍ 肺炎克雷伯菌是常见的革兰阴性杆菌，尤其在免疫力低下患者中，是最常见的机会性致病菌之一。
肺炎克雷伯菌耐药性和毒力相关因子研究进展
关键词 ： 肺 炎 克 雷伯 菌 ： 耐 药性 ； 毒 力 中 图分 类 号 ： Ｒ ４ ４ ６ ． ５ 文献标识码 ： Ｂ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ６ — ２ ２ ３ ８ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ５ — ４ ６ ９ — ０ ２
表 明血糖 控 制欠 佳 容 易导致 血 清 型 Ｋ１ ／ Ｋ ２肺 炎 的 发生 ． 病 能增 加 肝脓 肿 与 眼 内炎 的并 发 概 率门 尽 管 目前 我 们 尚未 检测 出 Ｋ１ 血 清 型 中是 否含 有 肺
质粒 常 同 时带有 氨 基糖 苷 的钝 化 酶 、 Ａ ｍｐ ｃ酶及 喹 诺 酮类 药 物等 耐药基 因［ ３ １ 导致 产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌ ｓ的菌株不 但 能 够对 超 广谱 的头孢 菌 素 、 氨 曲南 耐药 ， 并且 具 备 很 高 的多 重 耐药 性 与交 叉耐 药 性 ．能 够 对青 霉 素类 与 头孢 菌 素类 抗 生素 广泛 耐 药 ： 对 喹诺 酮 类 、
炎克 雷 伯 菌 血 清 型 ｍａ ｇ Ａ基 因［ ８ ， ９ １ ． 但 Ｋ ａ ｒ ａ ｍ ａ等 已
从 糖 尿 病伴 眼 内炎 且 继 发肝 脓 肿 患者 的肺 炎 克雷
菌 的检 出率 不 断升 高 ．这 给 临床 治疗 克 雷 伯菌 感
染 带来 了 困难 现 对肺 炎 克雷 伯 菌耐 药 性 与其 毒
力基 因方 面研究 进展 进行 综述
１ 耐药 性 肺 炎 克 雷伯 菌 能 够 对 抗 生 素 产 生 耐药 性 ． 目 前 已出现 严 重 的多 重耐 药性 ＿ １ １ 。其 主 要机 制 是 ： 肺
肺炎克雷伯菌耐药机制和毒力因子研究进展
肺炎克雷伯菌耐药机制和毒力因子研究进展耿响;刘希望;李剑勇【期刊名称】《中兽医医药杂志》【年(卷),期】2024(43)1【摘要】肺炎克雷伯菌是寄生于人和动物的皮肤、呼吸道、肠道等处的机会致病菌,具有较高的致病性,常引起呼吸系统、泌尿系统等感染,甚至出现败血症、脑炎等。
肺炎克雷伯菌可分为经典肺炎克雷伯菌(cKP)与高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP),hvKP能导致更严重、散播性更强的感染。
目前,肺炎克雷伯菌的耐药性增强,耐药菌株的流行呈全球性和多样化的趋势,已引发关注。
除了外排泵,肺炎克雷伯菌对抗菌药产生耐药性的机制有很多种,并且可以随着可移动遗传元件快速传播。
本文详细阐述了肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、替加环素、多黏菌素等抗菌药物的耐药机制。
肺炎克雷伯菌的毒力因子多样,包括荚膜、脂多糖、黏附素、PEG-344、铁载体(肠杆菌素、沙门菌素、耶尔森菌素、气杆菌素)、外膜蛋白等。
目前,对肺炎克雷伯菌的致病性和耐药性的研究越来越深入,在治疗方面也不断推进,主要的策略包括老药新用、纳米化抗菌药、新型抗菌药研发、噬菌体疗法、抗体疗法等。
对肺炎克雷伯菌耐药机制、毒力因子进行详细、全面的综述,可为肺炎克雷伯菌的防控和临床用药提供参考。
肺炎克雷伯菌的生物学特性、精准诊断、与宿主不同组织细胞的互作机制、宿主免疫应答机制等方面仍需深入研究。
【总页数】10页(P29-38)【作者】耿响;刘希望;李剑勇【作者单位】中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室【正文语种】中文【中图分类】S855.1;R378【相关文献】1.肺炎克雷伯菌耐药性和毒力相关因子研究进展2.高毒力肺炎克雷伯菌的毒力因子和耐药机制研究进展3.高毒力肺炎克雷伯菌毒力和耐药机制研究进展4.肺炎克雷伯菌毒力因子及耐药研究进展5.高毒力肺炎克雷伯菌毒力和耐药机制研究进展因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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・综述・克雷伯菌致病因子的研究进展沈定树综述 施致远审校 【摘要】 荚膜是克雷伯菌的重要毒力因子,荚膜中K抗原的毒力程度与其所含的荚膜脂多糖(CPS)中甘露糖的量有关,肺炎克雷伯菌荚膜可以抑制宿主的免疫反应。
克雷伯菌有两种主要的菌毛,均能使细菌与粘膜或泌尿生殖道、呼吸道和肠道的上皮细胞相结合。
克雷伯菌抗血清杀菌活性主要是通过补体介导所形成的连锁反应,在菌体的表面聚集成复合物,在防御机制中具有重要作用。
铁在细菌的生长繁殖中具有重要作用,含铁细胞主要是作为蛋白质的氧化还原催化剂,参与氧和电子的转运过程。
【关键词】 克雷伯菌属; 致病因子 医源性克雷伯菌最常见的感染部位是泌尿道与呼吸道,由于这两个部位的免疫机理有很大的不同,因此引起泌尿道感染(urinary t ract infections,U TI)的克雷伯菌株毒力因子与呼吸道感染所分离出的菌株毒力因子亦不相同。
荚膜抗原克雷伯菌的荚膜成分主要是由复合酸性脂多糖组成,其亚单位含有4～6个糖分子,常见的糖醛酸为负电荷,能分类成77个血清型。
荚膜是克雷伯菌的重要毒力因子,由荚膜形成的纤维结构的厚包裹以多层方式覆盖在菌体的表面,从而保护细菌免受多形核中性粒细胞的吞噬。
荚膜作用的分子机制是抑制补体的活性,特别是补体C3b。
Y okochi等[1]报道,荚膜除了抗吞噬功能外,荚膜多糖还能抑制巨噬细胞的分化及功能。
对鼠的研究表明,注入大剂量克雷伯菌荚膜脂多糖(cap sular polysaccharide,CPS),甚至可以产生免疫力的停顿,使抗特异性荚膜抗体的产生呈现剂量依赖性减少。
不同的荚膜类型其毒力有很大的不同,表达有荚膜抗原K1和K2的菌株在鼠腹膜炎时毒力最强,而分离的其他血清型菌株则很少或没有毒力。
在诱导鼠的皮肤损害时,克雷伯菌血清型K1、K2、K4和K5所表达的毒力比其他荚膜类型更强。
荚膜中K抗原的毒力程度与其所含的荚膜脂多糖(CPS)的甘露糖的量有关,低毒力的荚膜型,如K7或K21a抗原,含有甘露糖2α22/32甘露糖或L2鼠李糖2α22/32L2鼠李糖的重复序列,这种序列通过吞噬细胞表面植物血凝素来识别,植物血凝素介导调理素为依赖性吞噬作用,也称为植物血凝素吞噬作用。
此种作用既可以由细菌表面的植物血凝素介导,也可以是用作受体的吞噬细胞植物血凝素介导。
含有甘露糖2α2 2/32甘露糖2特异植物血凝素或甘露糖受体的巨噬细胞能识别、消化随之破坏含有CPS重复序列甘露糖2α22/3甘露糖或L2鼠李糖2α22/3L2鼠李糖的分子结构。
相反,缺乏这种重复序列的菌株则不被巨噬细胞所识别,因此也不会被吞噬。
可见,不含有甘露糖或鼠李糖序列的血清型菌株与感染性疾病的关系更密切[2]。
荚膜抗原K2血清型在U TI、肺炎或菌血症患者分离出的菌株中是最常见的血清型,也是临床分离株中主要的血清型,但在自然环境中却很难碰到。
有关荚膜甘露糖2α22/32甘露糖序列对清除宿主体内的克雷伯菌的意义,Kabha等[3]观察到,肺表面A蛋白(surfactant protein,SP2A)通过调理素作用和激活肺泡巨噬细胞而增强对克雷伯菌K1型菌株的吞噬作用,但对K2型菌株则不能。
这种反应受甘露聚糖的抑制,因此也受吞噬细胞甘露糖受体的调节。
Ofek 等[4]研究了肺表面蛋白2D(surfactant protein,SP2D)与肺炎克雷伯菌感染的肺泡巨噬细胞之间的关系,表明SP2D与克雷伯菌CPS的相互作用增加了肺泡巨噬细胞的免疫活性,对呼吸道病菌而言,SP2D在介导肺炎克雷伯菌的凝集和/或调理中具有重要作用。
Sahly等[5,6]提出SP2D与O2多糖的相互作用对清除肺部的革兰阴性致病菌有重要作用。
研究表明[7],血清型K21a、K26、K36和K50克雷伯菌株对回盲肠上皮细胞株(HC T28)和膀胱上皮细胞株(T24)的粘附性能比无荚膜的K21a/3、K36/3、K50/3的克雷伯菌变异株要明显降低。
虽然荚膜型菌株在粘附水平上没有差别,但细菌通过膀胱细胞的内化比通过盲肠细胞的内化要明显低下,表明膀胱细胞缺乏对克雷伯菌内化所需的成分。
Y oshida等[8]的动物试验结果提示,肺炎克雷伯菌荚膜可以抑制宿主的免疫反应,有利于细菌的生长,并导致肺炎、败血症乃至死亡。
菌 毛在感染过程中,细菌必须尽可能与宿主黏膜表面 作者单位:317000浙江省台州医院检验科相接近,或吸附到宿主细胞上,这一过程是由不同的纤毛来介导。
纤毛长约10μm,直径为1～11nm,由聚合球蛋白亚单位(菌毛素)组成,相对分子质量为15 000～26000。
菌毛的主要功能是凝集不同动物的红细胞,此种反应受D2甘露糖的抑制,因此有甘露糖敏感血凝素(manno se2sensitive hemagglutinins, MSHA)和耐甘露糖血凝素(mannose2resistant he2 magglutinins,MR HA)之称。
克雷伯菌有以下两种主要的菌毛。
1.Ⅰ型菌毛:Ⅰ型菌毛能凝集豚鼠的红细胞,其粘附蛋白位于菌毛轴上,能与宿主糖蛋白中含甘露糖的三糖结合,因此是MSHA。
有关Ⅰ型菌毛与细菌毒力的关系,菌毛能使细菌与黏膜或泌尿生殖道、呼吸道和肠道的上皮细胞相结合。
虽然Ⅰ型菌毛主要与下部U TI的致病机理有关,但也涉及肾盂肾炎的致病机理。
已经表明,Ⅰ型菌毛能与近曲小管细胞结合,能与尿中可溶性含甘露糖蛋白,如Tamm2Horsf2 all蛋白质结合,由此表明Ⅰ型菌毛介导泌尿生殖道的细菌移植。
Ⅰ型菌毛介导细菌移植,首先与宿主黏膜表面非特异性结合,只有当黏膜上的细菌侵入到深部组织才能发生感染,此后的菌毛便不再发生作用,因为随之启动了调理素依赖性白细胞活性,即调理素吞噬作用。
虽然Ⅰ型菌毛的纤毛在细菌对宿主移植起重要作用,但对移植后所发挥的致病作用还知道得不多。
2.Ⅲ型菌毛:Ⅲ型菌毛只能凝集含有经鞣酸处理过的红细胞,其结合受亚精胺的抑制。
由于耐甘露糖称为MR/K2HA(klebsiella2like hemagglutination,K2 HA)。
早期的研究认为,只有肺炎克雷伯菌才能合成此种菌毛,但后来的研究表明其他肠杆菌属也能合成Ⅲ型菌毛,但其抗原性有很大的差别。
表达有Ⅲ型菌毛的肺炎克雷伯菌株能粘附到内皮细胞和呼吸道、泌尿生殖道的上皮细胞上。
在肾脏Ⅲ型菌毛能介导细菌粘附到肾小管基底膜、Bowman囊和肾小管上。
近来已报道一种新型克雷伯菌粘附素,即肺炎克雷伯菌R2质粒编码CF29K植物血凝素,能介导粘附到人肠细胞株Intestine2407和CaCo22上,此种植物血凝素与人腹泻E.coli菌株的CS312A粘附蛋白相类似,属于K88粘附素系列。
在人肠道还有一种新菌毛移生因子称为KPF228,这种菌毛在产CAZ25/SHV24type 超广谱β2内酰胺酶(extended2spect rumβ2lactamase, ESBL)的肺炎克雷伯菌株中被发现。
迄今,关于这些新型菌毛在菌体中的分布和不同克雷伯菌株中的表达以及在宿主中分离的部位及其致病性尚待研究[9]。
抗血清杀菌活性和脂多糖宿主抵抗侵入微生物的第一道防线除了多形核细胞的吞噬作用外,还包括血清的杀菌作用。
血清杀菌活性主要是通过补体蛋白的介导所形成的连锁反应在菌体表面聚集成复合物,主要是由末端补体蛋白C5b、C9所组成,在革兰阴性菌的外膜中产生一个跨膜孔,导致Na+流入,随后使细菌渗透性溶解。
补体的连锁反应由两种机理来激活:(1)经典补体途径:需要特异抗体激活;(2)选择补体途径:不需要抗体存在即可激活补体,此途径也称为天然免疫的早期防御体系,使宿主在特异抗体形成之前就与侵入的微生物发生反应。
这两种途径均使C3激活,导致调理素C3b的形成,最终形成末端C5b、C9复合物,在防御机制中具有重要作用。
与宿主防御力相对应,病原微生物能产生抗血清杀菌力,多数与人共栖的革兰阴性菌对人血清的杀菌活性敏感,而病原菌常显示出抗血清杀菌活性的性质。
因此临床分离的肠杆菌株常具有抗血清杀菌作用,这种抗血清杀菌特性与感染的发作和症状的严重性有关。
由于血清杀菌活性主要是防止微生物侵入血液,因此血清杀菌活性的敏感性可以决定细菌能否形成感染或感染的时间和程度。
目前关于细菌抗血清杀菌作用的确切机理尚待研究。
除了各种外膜蛋白如Tra T蛋白质外,主要是CPS和O抗原的参与。
对克雷伯菌的这种机理有两种假设:第一,荚膜多糖可以覆盖底层的脂多糖(li2 popolysaccharides,L PS),形成一种不能激活补体的表面结构;第二,L PS的O侧链可以伸出至荚膜层,暴露在荚膜型的外部。
由于L PS能激活补体,使C3b 不断沉积在L PS上面,阻碍了溶解膜复合物的形成,使之不会发生菌膜损害和菌细胞的死亡。
在L PS上沉积的C3b的量决定着血清杀菌活性的程度。
抗血清杀菌活性菌株的平滑L PS只能激活选择性补体途径。
而血清杀菌活性敏感的菌株能激活两种补体途径,导致C3b大量沉积在L PS上面,使细菌损伤或被杀死。
是否抗血清杀菌活性只是由O1抗原介导和克雷伯菌L PS的参与,迄今尚不清楚。
近来对嗜水气单胞菌O∶34血清型在不同渗透条件下对L PS的影响研究表明,在高渗透性培养基中生长的细菌是平滑L PS,而在低渗透性培养基中生长的菌株为粗糙L PS;在高渗透性培养基中培养的细菌对正常人血清杀菌作用有耐受性,而在低渗透性培养基上生长的菌株对血清杀菌作用有敏感性。
因此,同一种菌株在宿主的高渗性部位,如尿道可表现出血清杀菌耐受性;而在低渗透性部位,如呼吸道可表现出对血清杀菌活性的敏感[10～12]。
含铁细胞铁在细菌的生长繁殖中具有重要作用,其功能主要是作为蛋白质的氧化还原催化剂,参与氧和电子的转运过程。
组织本身为细菌提供的游离铁极低,生物所获的游离铁只有10-18M,比正常细菌生长所需的铁量低1000倍。
豚鼠动物试验研究表明,经非肠道给予铁后,对肺炎克雷伯菌感染的敏感性显著增加。
许多细菌都能通过分泌高亲合力、低分子量的螯合物(含铁细胞)来竞争性地获取结合到宿主蛋白质上的铁。
在铁缺乏条件下,肠杆菌能合成两种不同的含铁细胞:一种是酚盐型含铁细胞,另一种是氧肟酸盐型含铁细胞。
酚盐型含铁细胞最为常见,如肠杆菌素含铁细胞,此种含铁细胞是肠杆菌的主要摄铁系统,然而肠杆菌素的致病作用仍不清楚。
在氧肟酸盐型含铁细胞中,起重要作用的有铁色素(只通过真菌合成)、铁草氨菌素。
高铁肠杆菌素的热力稳定系数(KS1052)对Fe(Ⅲ)的亲合力要高于高铁产气杆菌素的热力稳定系数(KS1023)。
肠杆菌属根据其产气杆菌素合成的比率分为两种:一种是产气杆菌素的低比率菌株(<20%),包括沙雷菌属、变形杆菌属、沙门氏菌属;第二种是具有高产气杆菌素合成比率菌株(> 40%)。