凝集实验报告
凝集实验实验报告

一、实验目的1. 了解凝集实验的基本原理和操作方法;2. 掌握凝集实验在抗原抗体检测中的应用;3. 通过实验,提高实验操作技能和观察分析能力。
二、实验原理凝集实验是一种基于抗原抗体特异性结合的实验方法。
当抗原与相应抗体相遇时,二者结合形成抗原抗体复合物,导致颗粒性抗原凝集。
凝集实验分为直接凝集反应和间接凝集反应。
直接凝集反应:颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体在体外直接结合而出现的凝集反应,称为直接凝集反应。
如玻片凝集反应和试管凝集反应。
间接凝集反应:将可溶性抗原预先吸附于一种与免疫无关的颗粒性载体表面,然后与相应的抗体结合,出现凝集现象,称为间接凝集反应。
如RF因子检测。
三、实验材料1. 试剂:抗原、抗体、缓冲液、生理盐水、0.85%NaCl、洗涤剂等;2. 仪器:玻片、试管、移液器、显微镜、培养箱等;3. 实验动物:实验所需动物。
四、实验方法1. 玻片凝集实验:(1)将抗原和抗体分别滴加于玻片上,形成抗原抗体混合液;(2)观察抗原抗体混合液是否出现凝集现象。
2. 试管凝集实验:(1)将抗原和抗体分别加入试管中,加入缓冲液;(2)观察试管内液体是否出现凝集现象。
3. 间接凝集实验:(1)将抗原吸附于颗粒性载体上;(2)将抗体加入含有抗原载体的混合液中;(3)观察混合液是否出现凝集现象。
五、实验结果1. 玻片凝集实验:观察抗原抗体混合液是否出现凝集现象,记录实验结果。
2. 试管凝集实验:观察试管内液体是否出现凝集现象,记录实验结果。
3. 间接凝集实验:观察混合液是否出现凝集现象,记录实验结果。
六、实验结论通过实验,观察到抗原抗体混合液出现凝集现象,说明抗原与抗体发生了特异性结合,实验结果符合预期。
七、实验讨论1. 实验过程中,应注意抗原抗体比例的调节,以保证实验结果的准确性。
2. 实验操作过程中,应严格控制实验条件,如温度、pH值等,以确保实验结果的可靠性。
3. 凝集实验在临床诊断、疾病监测等方面具有广泛应用,实验结果对疾病诊断具有重要意义。
凝集实验报告结果分析

一、实验目的本实验旨在通过凝集实验,了解凝集现象的产生原理,掌握凝集实验的操作方法,并通过分析实验结果,加深对凝集原理的理解。
二、实验原理凝集现象是指当抗原与相应抗体在适当条件下结合时,可形成肉眼可见的凝集现象。
本实验采用间接凝集试验,即先将抗原吸附于载体颗粒表面,然后加入抗体,若两者结合,则颗粒表面出现凝集现象。
三、实验材料1. 抗体:羊抗兔IgG抗体2. 抗原:兔抗羊IgG3. 载体颗粒:牛血清白蛋白(BSA)包被的羊红细胞4. 洗涤液:磷酸盐缓冲盐溶液(PBS)5. 封闭液:1% BSA-PBS6. 显微镜及配套设备四、实验步骤1. 将羊抗兔IgG抗体用PBS稀释至适当浓度,备用。
2. 将兔抗羊IgG用PBS稀释至适当浓度,备用。
3. 将BSA包被的羊红细胞用PBS洗涤2次,去除未吸附的BSA。
4. 将洗涤后的羊红细胞加入抗体稀释液,混匀,37℃孵育30分钟。
5. 用PBS洗涤2次,去除未结合的抗体。
6. 加入兔抗羊IgG稀释液,混匀,37℃孵育30分钟。
7. 用PBS洗涤2次,去除未结合的抗体。
8. 加入封闭液,室温封闭30分钟。
9. 在显微镜下观察羊红细胞是否出现凝集现象。
五、实验结果与分析实验结果显示,羊红细胞在加入兔抗羊IgG抗体后,出现明显的凝集现象。
这说明抗原与抗体结合后,载体颗粒表面形成了可见的凝集物。
1. 凝集现象的产生原理凝集现象的产生是由于抗原与抗体之间的特异性结合。
在本实验中,兔抗羊IgG抗体作为抗原,羊抗兔IgG抗体作为抗体,两者结合后,载体颗粒表面形成了可见的凝集物。
这是由于抗体分子上的Fab段与抗原决定簇结合,而Fc段则与载体颗粒表面的抗体分子相互作用,使得颗粒表面形成较大的复合物,从而产生凝集现象。
2. 影响凝集现象的因素(1)抗体与抗原的浓度:抗体与抗原的浓度过高或过低都会影响凝集现象的产生。
本实验中,抗体与抗原的浓度经过优化,使得凝集现象明显。
(2)pH值:pH值对凝集现象有影响。
凝集实验_吞噬实验报告

一、实验目的1. 掌握凝集实验的基本原理和方法,了解其应用领域。
2. 学习吞噬实验的操作步骤,观察吞噬细胞的功能。
二、实验原理1. 凝集实验:凝集实验是利用抗原与抗体特异性结合,形成大分子复合物,从而引起颗粒性抗原聚集的现象。
凝集反应分为直接凝集反应和间接凝集反应。
直接凝集反应是指颗粒性抗原与相应抗体直接结合而出现的凝集现象;间接凝集反应是指将可溶性抗原预先吸附于一种与免疫无关的颗粒性载体表面,然后与相应的抗体结合,出现凝集现象。
2. 吞噬实验:吞噬实验是研究吞噬细胞吞噬作用的一种方法。
吞噬细胞受抗原刺激后活化,可使吞噬功能明显增强。
实验中,通过观察吞噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,可以判断吞噬细胞的杀伤能力,间接测定机体的非特异性免疫水平。
三、实验材料1. 实验仪器:显微镜、载玻片、滴管、离心机等。
2. 实验试剂:鸡红细胞、鸡血清、抗体、生理盐水、0.85%NaCl溶液、玻片凝集试剂等。
四、实验方法1. 凝集实验:(1)将鸡红细胞用生理盐水洗涤三次,去除杂质。
(2)将洗涤后的鸡红细胞加入抗体中,充分混合。
(3)观察鸡红细胞是否出现凝集现象。
2. 吞噬实验:(1)实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
(2)实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使其在腹腔中分布均匀,利于吞噬。
(3)30分钟后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管。
(4)用载玻片轻擦腹腔,使腹腔液均匀涂于载玻片上。
(5)滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液,盖上盖玻片。
(6)高倍镜下进行观察,计数吞噬红细胞的百分数,及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目。
五、实验结果与分析1. 凝集实验结果:鸡红细胞与抗体结合后,出现明显的凝集现象。
2. 吞噬实验结果:(1)在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象。
(2)计算吞噬红细胞的百分数和吞噬指数。
(3)分析吞噬细胞的功能及其与机体非特异性免疫水平的关系。
六、实验结论1. 凝集实验结果表明,鸡红细胞与抗体结合后,出现明显的凝集现象,验证了凝集实验的基本原理。
凝集反应实验报告

凝集反应实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过观察凝集反应的过程和结果,了解凝集反应的基本原理和特点,掌握凝集反应的实验方法和技巧。
二、实验原理。
凝集反应是指在特定条件下,抗原与抗体结合形成凝集物质的现象。
凝集反应的原理是抗原与抗体结合后形成免疫复合物,使得溶液中的颗粒物质凝聚成大颗粒,从而导致溶液浑浊或沉淀。
凝集反应是免疫学中常用的实验方法,也是许多免疫学检测方法的基础。
三、实验材料和方法。
1. 实验材料,抗原溶液、抗体溶液、生理盐水、试管、移液器、离心管等。
2. 实验方法:(1)取一定量的抗原溶液和抗体溶液分别加入不同的试管中;(2)将试管摇匀,使抗原和抗体充分混合;(3)观察试管中是否出现凝集物质,并记录下实验结果。
四、实验结果与分析。
经过实验观察,我们发现在抗原与抗体混合后,部分试管中出现了凝集物质,而另一部分试管中则未出现凝集物质。
这说明凝集反应的产生是由于抗原与抗体之间的特异性结合所致。
当抗原与抗体结合后,免疫复合物的形成导致了溶液中颗粒物质的凝聚,从而产生了凝集反应。
五、实验总结。
通过本次实验,我们对凝集反应的原理和特点有了更深入的了解。
凝集反应是一种重要的免疫学现象,它在许多免疫学检测方法中起着关键作用。
掌握凝集反应的实验方法和技巧,对于进一步开展免疫学研究具有重要意义。
六、实验注意事项。
1. 实验操作时要注意实验材料的保存和使用方法,避免污染和损坏;2. 实验过程中要严格按照实验方法进行操作,避免实验结果的偏差;3. 实验后要及时清洗和消毒实验器具,保持实验环境的整洁和卫生。
七、参考文献。
1. 张三,李四. 免疫学实验技术. 北京,科学出版社,2005.2. 王五,赵六. 免疫学实验指南. 上海,上海科学技术出版社,2008.以上就是本次凝集反应实验的实验报告,希望能对大家有所帮助。
直接试管凝集实验报告(3篇)

第1篇实验名称直接试管凝集实验实验目的1. 了解直接试管凝集试验的基本原理和方法。
2. 掌握试管凝集试验的操作技能。
3. 通过实验学会如何判断抗原与抗体之间的特异性结合。
实验原理直接试管凝集试验是一种用于检测血清中抗体及其效价的实验方法。
其原理是利用颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体直接结合,在适量电解质(通常是0.85%NaCl)存在的条件下,出现肉眼可见的凝集现象。
实验材料1. 抗原:已知颗粒性抗原(如肺炎球菌、溶血性链球菌等)。
2. 抗体:相应的抗体(如肺炎球菌抗体、溶血性链球菌抗体等)。
3. 试管:10mL试管若干。
4. 生理盐水:0.85%NaCl溶液。
5. 移液器:1mL、5mL各一只。
6. 移液管:1mL、5mL各一只。
7. 计时器。
8. 玻璃棒。
实验步骤1. 准备工作- 将抗原和抗体分别用生理盐水稀释至适宜浓度。
- 将试管编号,分别加入0.1mL的抗原和抗体溶液。
2. 加入生理盐水- 用移液器取0.1mL生理盐水加入每支试管中。
3. 混合- 用玻璃棒轻轻搅拌,使抗原、抗体和生理盐水充分混合。
4. 观察- 在混合均匀后,观察试管中的溶液是否出现凝集现象。
5. 记录结果- 若出现凝集现象,记录凝集程度和所需时间。
- 若未出现凝集现象,记录观察时间。
6. 重复实验- 重复上述步骤,进行多次实验,确保结果的准确性。
实验结果与分析1. 凝集现象- 在实验过程中,部分试管出现凝集现象,部分试管未出现凝集现象。
- 出现凝集现象的试管中,凝集程度不同,所需时间也不同。
2. 分析- 凝集现象的出现说明抗原与抗体之间发生了特异性结合。
- 凝集程度越高,说明抗体浓度越高;所需时间越短,说明抗原与抗体之间的亲和力越强。
结论通过直接试管凝集实验,我们成功掌握了试管凝集试验的基本原理和操作技能。
实验结果表明,抗原与抗体之间可以发生特异性结合,从而出现凝集现象。
该实验为检测血清中抗体及其效价提供了一种有效的方法。
凝集实验的实验报告

一、实验目的1. 掌握凝集实验的基本原理和方法;2. 熟悉凝集实验的操作步骤;3. 通过实验,了解凝集反应在临床诊断中的应用。
二、实验原理凝集实验是一种基于抗原与抗体特异性结合的免疫学检测方法。
当抗原与相应抗体在适当条件下结合时,可形成肉眼可见的凝集现象。
凝集反应分为直接凝集反应和间接凝集反应两种。
直接凝集反应是指颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体在体外直接结合而出现的凝集反应。
间接凝集反应是指将可溶性抗原预先吸附于一种与免疫无关的颗粒性载体表面,然后与相应的抗体结合,出现凝集现象。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:显微镜、玻片、试管、移液器、离心机、恒温水浴箱等;2. 试剂:抗原、抗体、生理盐水、0.85%NaCl溶液、抗凝剂、玻片洗涤液等。
四、实验步骤1. 直接凝集实验(1)取清洁玻片,用生理盐水滴加在玻片上;(2)用移液器取抗原,滴加在生理盐水滴中,混合均匀;(3)用移液器取抗体,滴加在抗原滴中,混合均匀;(4)观察凝集现象,记录结果。
2. 间接凝集实验(1)取清洁试管,加入适量的抗凝剂;(2)加入已知浓度的抗原,混匀;(3)用移液器取抗体,滴加在抗原溶液中,混匀;(4)加入与抗体结合的颗粒性载体,混匀;(5)观察凝集现象,记录结果。
五、实验结果与分析1. 直接凝集实验结果:观察到的凝集现象为红细胞或细菌在玻片上形成明显的团块。
2. 间接凝集实验结果:观察到的凝集现象为颗粒性载体在试管中形成明显的团块。
六、实验总结本次实验通过直接凝集和间接凝集实验,验证了凝集反应在免疫学检测中的应用。
实验结果表明,凝集反应可以有效地检测抗原与抗体之间的特异性结合。
在实际应用中,凝集实验可以用于病原微生物的鉴定、血型鉴定、血清学诊断等领域。
七、注意事项1. 实验过程中,注意操作规范,避免交叉污染;2. 实验试剂和仪器需保持清洁,避免污染;3. 观察凝集现象时,注意光线、角度等因素的影响;4. 实验结果记录准确,便于分析。
细胞反应凝集实验报告

一、实验目的1. 了解细胞凝集反应的基本原理。
2. 掌握细胞凝集反应的实验操作方法。
3. 观察和分析细胞凝集现象。
二、实验原理细胞凝集反应是指细胞在特定条件下,由于细胞膜表面分子间的相互作用,导致细胞相互聚集的现象。
凝集反应在医学、生物学等领域具有重要的应用价值,如血型鉴定、病原体检测等。
本实验采用凝集素作为凝集剂,通过观察红细胞凝集现象,了解细胞凝集反应的基本原理。
三、实验材料与用品1. 试剂:红细胞悬液、PBS缓冲溶液、0.9%氯化钠溶液、不同浓度的凝集素溶液、蒸馏水。
2. 仪器:离心机、移液器、试管、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备红细胞悬液:将一定量的红细胞加入适量的生理盐水中,混匀后离心,弃去上清液,加入适量PBS缓冲溶液重悬细胞。
2. 设置实验组:取3支试管,分别加入等量的红细胞悬液。
3. 加入凝集素:在第一支试管中加入一定量的低浓度凝集素溶液,第二支试管中加入等量的中浓度凝集素溶液,第三支试管中加入等量的高浓度凝集素溶液。
4. 观察细胞凝集现象:静置一段时间后,观察各试管中红细胞的凝集情况,记录结果。
5. 加入蒸馏水:取3支新的试管,分别加入等量的红细胞悬液。
6. 加入凝集素与抑制剂:在第一支试管中加入一定量的凝集素溶液和适量的抑制剂,第二支试管中加入等量的凝集素溶液和双倍量的抑制剂,第三支试管中加入等量的凝集素溶液和三倍量的抑制剂。
7. 观察细胞凝集现象:静置一段时间后,观察各试管中红细胞的凝集情况,记录结果。
五、实验结果与分析1. 实验组:随着凝集素浓度的增加,红细胞凝集现象逐渐明显。
低浓度凝集素溶液中红细胞凝集较少,中浓度凝集素溶液中红细胞凝集较多,高浓度凝集素溶液中红细胞几乎全部凝集。
2. 抑制剂组:在加入抑制剂后,红细胞凝集现象明显减弱。
当抑制剂浓度为凝集素浓度的1倍时,红细胞凝集现象减弱;当抑制剂浓度为凝集素浓度的2倍时,红细胞凝集现象进一步减弱;当抑制剂浓度为凝集素浓度的3倍时,红细胞几乎不发生凝集。
直接凝集试验实验报告

一、实验目的1. 理解直接凝集试验的原理和应用。
2. 掌握直接凝集试验的操作步骤。
3. 通过实验验证不同抗原与抗体之间的凝集反应。
二、实验原理直接凝集试验是一种免疫学检测方法,主要用于检测血清或血浆中的抗体含量。
其基本原理是:颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与相应的抗体结合,在适量电解质(通常是0.85%NaCl)存在的条件下出现凝集现象。
直接凝集试验分为玻片凝集试验和试管凝集试验两种,本实验采用玻片凝集试验。
三、实验材料1. 实验动物:小鼠2. 抗原:细菌、红细胞等3. 抗体:相应的抗体4. 生理盐水5. 玻片6. 移液器7. 显微镜四、实验步骤1. 准备样品:取小鼠血液,分离血清,并按实验设计要求加入相应的抗体。
2. 滴加抗原:在玻片上滴加适量抗原,并用移液器将血清与抗原充分混合。
3. 观察凝集现象:静置一段时间后,用显微镜观察玻片上的凝集现象。
4. 记录结果:根据凝集程度记录实验结果。
五、实验结果1. A组实验:小鼠血清中加入A抗原,观察到的凝集现象为阳性。
2. B组实验:小鼠血清中加入B抗原,观察到的凝集现象为阴性。
3. C组实验:小鼠血清中加入C抗原,观察到的凝集现象为阳性。
六、实验讨论1. 直接凝集试验是一种简单、快速、灵敏的免疫学检测方法,广泛应用于病原微生物、红细胞血型鉴定等领域。
2. 本实验结果表明,小鼠血清中存在针对A抗原和C抗原的抗体,但不存在针对B抗原的抗体。
3. 在进行直接凝集试验时,应注意抗原与抗体的比例、电解质浓度等因素,以确保实验结果的准确性。
七、实验结论1. 直接凝集试验是一种有效的免疫学检测方法,可用于检测血清或血浆中的抗体含量。
2. 本实验成功验证了小鼠血清中存在针对A抗原和C抗原的抗体,但不存在针对B抗原的抗体。
八、实验拓展1. 研究不同抗原与抗体之间的凝集反应动力学。
2. 探讨直接凝集试验在病原微生物检测、血型鉴定等领域的应用前景。
3. 优化直接凝集试验的操作步骤,提高实验结果的准确性和灵敏度。
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凝集实验报告篇一:细胞凝集反应实验报告细胞生物学实验报告一.二.实验名称:细胞凝集反应实验原理:细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。
目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。
凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,因其能凝集红血球(含血型物质),故名凝集素。
常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA),通常以其被提取的植物命名,如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等,凝集素是它们的总称。
凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,它们具有的某些“亲合”特性,能被免疫细胞化学技术方法所应用。
血型鉴别实验,也是凝集反应的一种。
三.实验用品:土豆块茎显微镜,粗天平,载玻片,滴管2支,离心管2支PBS缓冲液:称取NaCl7.2g,Na2HPO41.48g,KH2PO40.43g,加蒸馏水,定容至1000ml,调pH值到7.2.4.2%的红细胞四.实验步骤:1. 称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
2. 以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),加生理盐水3ml,在1000r/min,离心5min,重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。
3. 分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充分混匀。
4. 同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴,置双凹片右孔内,充分混匀,做对照实验。
5. 摇晃5—10min后,观察有无发生细胞凝集并置显微镜下观察。
图左为PBS缓冲液对照图右为土豆凝集素图一图二土豆凝集素(*4)图一中为在振荡了11min后,细胞凝集的现象,中间凝结成血块,周围叫澄清,边缘为干涸的红细胞凝结成的颗粒附着在玻片上。
在低倍镜(*4)下观察,可以看到红细胞凝结成块状,周围液体近乎透明,说明红细胞发生了凝集。
图三图四 PBS缓冲液(*4)图三中为在振荡了之后,红细胞并没有聚集成颗粒状,只是由于向心力左右而聚拢在一起呈透明凝胶状。
在低倍镜(*4)下观察可见到均匀的透明液体,没有红细胞凝结而成的颗粒。
六.实验分析:实验所得结果可见,红细胞并没有如预期那般在中央凝结成大血块,而周围近乎透明,分析其原因可能为:(1)在滴加土豆凝集素时,没有加入半滴,而是加入了一滴,反而导致了细胞凝集效果下降。
(2)在晃动过程中,速度过慢,且晃晃停停,导致红细胞凝结成的颗粒状在玻片上凝固。
(3)血浆浓度的影响,血浆浓度不合适导致细胞凝集作用减弱。
篇二:直接凝集反应实验报告免疫学·直接凝集反应实验报告实验一:玻片凝集实验1.实验原理:颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应的抗体结合,在适量电解质(通常是0.85%NaCl)存在的条件下出现凝集现象,称为凝集反应。
凝集反应的方法有两种:①直接法;②间接法。
颗粒性抗原(如完整的细菌或细胞)与相应抗体在体外直接结合而出现的凝集反应,称为直接凝集反应。
如玻片凝集反应和试管凝集反应。
将可溶性抗原预先吸附于一种与免疫无关的颗粒性载体表面,然后与相应的抗体结合,出现凝集现象,称为间接凝集反应。
如RF因子检测玻片凝集试验是使用已知抗体与未知颗粒性抗原在玻片上直接结合而出现的凝集反应。
此类反应较简单迅速,常用于抗原或抗体的定性检测。
本次实验使用玻片凝集试验的原理进行人类ABO血型的鉴定。
ABO血型系统是按照血液中红细胞表面的抗原分子来命名的。
人类ABO血型抗原有两种:A抗原和B抗原。
A型血红细胞表面具有A型抗原,血液中具有抗B抗体;B型血红细胞表面具有B型抗原,血液中具有抗A抗体;AB型血红细胞表面具有A抗原和B抗原,血液中不具有抗A、B抗体;O型血红细胞表面不具有A、B抗体,但血液中含有抗A、B抗体。
若用已知的抗A血清和抗B血清与受试者红细胞上的相应抗原结合,即可引起红细胞凝集,根据凝集反应结果便可判断出受试者的血型。
2.实验方法:(1)取洁净载玻片一张,用马克笔分为两格并注明A、B分区。
(2)倒置标准抗血清试剂瓶,悬空轻挤出抗A血清一滴,滴在A区内;同法在B区内滴加抗B血清一滴。
(3)使用消毒液对左手无名指进行消毒,待消毒液自然干燥后,使用无菌三棱采血针快速刺破手指。
(4)用木棒的两端取血,分别在抗A血清和抗B血清中搅拌均匀。
(5)用无菌棉棒压迫手指止血。
(6)静置玻片数分钟后,观察红细胞凝集反应结果。
3.实验结果:4.结果分析:实验二:试管凝集实验1.实验原理:试管凝集反应是在试管内将待检血清对倍稀释后,加入等量的已知颗粒性抗原与待检血清混合,然后观察试管内有无凝集快出现。
如出现凝集块者为阳性反应。
混合后仍均匀浑浊,无凝集块出现者为阴性反应。
根据血清凝集效价判定待检血清中相应抗体的含量。
即在试管内用已知颗粒性抗原检测未知抗体的相对含量的半定量试验。
本次实验是以定量的伤寒杆菌为抗原,根据是否发生凝集反应来检测血清中是否含有对应的抗体;根据各试管凝集程度的不同,来判断抗体的效价。
2.实验方法:(1)取试管6支,用马克笔进行标记,依次放入试管架中。
(2)在第一支试管中加入生理盐水0.9ml,其余各管加生理盐水0.5ml。
然后在第一只试管中加入伤寒免疫血清0.1ml,用吸管将它与生理盐水吹打混匀后,取出0.5ml加入第二支试管中;再将第二只试管的液体吹打混匀,取出0.5ml 加入到第三支试管中,其余各管依次按照上述步骤将血清对倍稀释。
至第五支试管时,将试剂混匀后,取出0.5ml弃之不用。
是第六支试管不含伤寒免疫血清,作为实验的阴性对照管。
最后在各管中都加入0.5ml伤寒杆菌菌液。
(3)轻摇试管架,混匀试管内液体,56℃水浴1小时后,观察实验结果。
3.实验结果:(1)对照组:即第六支试管,上清液浑浊,管底可有沉淀的细菌,轻摇后分散呈均匀浑浊。
(2)实验组:按1-5管依次观察。
阳性者管底出现不规则凝集物,较松散。
阴性者与对照组相同。
(3)凝集程度:++++:液体澄清透明,细菌全部凝集于管底,轻摇可见大的凝集块。
+++:液体稍浑,细菌大多数凝集于管底,摇动后凝块较前者小。
++:液体中等混浊,液体中有明显的凝集物,凝集块较小。
+:液体混浊,仔细观察可以看见液体中有很小的凝集颗粒。
-:与对照管相同。
(4)凝集效价:出现明显可见凝集物(++)时的血清最高稀释度为血清效价。
篇三:细胞凝集反应实验报告姓名班级13级生命基地班学号同组者:科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应【实验题目】细胞凝集反应【实验目的】1、了解细胞的表面结构。
2、掌握细胞凝集的原理。
3、掌握细胞凝集实验的操作方法。
【实验材料与用品】1. 试剂:PBS缓冲溶液、0.9%的氯化钠溶液(生理盐水)2. 器具:酒精棉球、双凹片、载玻片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管3. 材料:兔子静脉血【实验原理】1. 凝集素凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
目前已发现近千种植物中含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物、人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。
常用的为植物凝集素,通常以其被提取的植物命名,凝集素为它们的总称。
在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(糖萼)。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
2. 细胞凝集细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团,目前认为,细胞间的联系、细胞的生长和分化、肿瘤的发生与免疫反应都与细胞表面的分枝状糖分子有关。
3. 细胞凝集的反应技术姓名班级13级生命基地班学号同组者:科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应(1)直接凝集反应技术颗粒性抗原与相应的抗体血清混合后,在电解质的参与下,经过一定时间,抗原抗体凝集成肉眼可见的凝集块,这种现象称为凝集反应。
血清中的抗体称为凝集素。
抗原称为凝集原。
细菌或其他凝集原都带有相同的电荷(阴电荷),在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状态。
抗原和抗体相遇后,由于抗原和抗体分子表面存在相互对应的化学基团,因而发生特异性结合,称为抗原抗体复合物,由于抗体与抗原结合,降低了抗原分子间的排斥力,抗原表面的亲水基团减少,此时已有凝集趋势,在电解质参与下,中和了抗原抗体复合物的大部分电荷,使之失去了经典排斥力,分子间相互吸引,凝集成较大颗粒。
出现了肉眼可见的凝集反应。
(2)间接凝集反应技术可溶性抗原(或抗体)吸附于免疫学反应无关的颗粒表面上,当这些致敏的颗粒与相应的抗体(或抗原)相遇时,就会产生特异性的结合,在电解质的参与下,这些颗粒就会发生凝集现象。
这种借助于载体的抗原抗体凝集现象就叫做间接凝集反应技术。
4. 载体具有吸附抗原(抗体)的载体很多,如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物的红血球、某些细菌等。
良好的载体有以下几点基本要求:(1)在生理盐水或缓冲液中无自凝现象;(2)大小均匀;(3)比重与介质相似,短时间内不沉淀;(4)无化学或血清学活性;(5)吸附抗原(或抗体)后,不影响其活性;目前使用最广泛的是人的O型红血球和绵羊红血球。
后者使用更广,因其来源方便,另外绵羊红血球的表面有大量的糖蛋白受体,极易吸附某些抗原物质,吸附性能好,且大小均匀一致。
姓名班级13级生命基地班学号同组者:科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应【实验步骤】一、大体流程取兔子静脉血配置1%红细胞悬液二、具体操作1、称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓冲液,浸泡24小时,浸出的粗提液中即含有可溶性土豆凝集素。
(老师已做好)2、抽取兔子静脉血液(加抗凝剂)1ml,加生理盐水3ml,在1000r/min条件下,离心5min,显微镜下观察摇晃5-10min 观察土豆凝集素+红细胞悬液混合 PBS+红细胞悬液混合(对照)姓名班级13级生命基地班学号同组者:科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞悬液。
3、分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞悬液各一滴,置双凹片左孔内,充分混匀。