免疫共沉淀原理和注意事项培训课件
《免疫共沉淀》课件
检查所需的仪器设备是否齐全和正常 工作，如离心机、摇床、离心管等。
实验操作流程
抗体与蛋白质样品的结合
将抗体与蛋白质样品混合，确保抗体与目标 蛋白质充分结合。
共沉淀物的分离
通过离心或过滤等方法将共沉淀物与溶液分 离。
清洗非特异性结合
通过洗涤去除未结合的蛋白质和其他杂质。
结果分析方法
统计学分析
采用t检验或方差分析等统计学方法，对实验数据进行处理和分析，以确定共沉淀物之间的相互作用 是否具有统计学显著性。
生物信息学分析
利用在线生物信息学工具对共沉淀物进行功能注释、基因本体论（GO）分类和蛋白质相互作用网络 分析，以深入了解共沉淀物的生物学功能和相互作用关系。
结果解读与讨论
值的实验数据和结论。
未来可以对这些蛋白质复合物的 功能进行深入研究，探讨其在生 物学和医学中的意义和作用机制
。
同时，随着技术的不断进步和应 用领域的拓展，免疫共沉淀技术 还有望在更多领域发挥重要作用
。
未来研究方向与建议
1
进一步优化免疫共沉淀实验条件和方法，提高实 验的特异性和灵敏度，以分离和鉴定更多蛋白质 复合物。
结果解读
根据实验结果，分析共沉淀物的生物学 意义和功能，探讨它们与目标蛋白的相 互作用机制。
VS
结果讨论
结合已有研究，对实验结果进行深入讨论 ，提出可能的生物学模型或假设，为后续 研究提供思路和方向。同时，对实验的局 限性进行说明，并提出改进方向。
05
结论与展望
结论总结
免疫共沉淀技术是研究蛋白质相互作用的经典方法之一，在生物学和医学 研究中具有广泛应用。
பைடு நூலகம்
免疫共沉淀
第十六章蛋白与蛋白相互作用分析第一节免疫共沉淀一．实验原理免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗体和抗原之间的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G"特异性地结合抗体Fc段的现象而开发出来的方法，是研究蛋白质相互作用的经典方法，主要用于确定两种蛋白质在完整细胞内是否存在生理性相互作用。
其原理是：当细胞在非变性条件下裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用可以被保留下来。
如果用蛋白质X的抗体进行免疫沉淀，那么在细胞内与X结合的蛋白质Y也能被沉淀下来。
目前多将精制的protein A/G预先结合固化在agarose beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的protein A就能吸附抗原及其结合蛋白，通过低速离心，可以将目的抗原及其结合蛋白与其它成分分离。
二．主要仪器和试剂1．主要仪器微量高速4°C离心机；vortex震荡器；垂直混和器；Western blot 所需仪器。
2．试剂（1）蛋白定量试剂盒；抗体；PBS；protein A/G agarose beads；（2）Western blot所需试剂（参考本书第十七章免疫印迹）；（3）NP-40蛋白裂解缓冲液（使用前加入蛋白酶抑制剂）：150mM NaCl，0.5% NP-40，50mM Tris-HCl。
配置500mL 需要：5M NaCl 15mL，10% NP-40 25mL，1M Tris-HCl （pH8.0）25mL。
三．实验步骤1.转染24-48 h后，刮取细胞，转移到15mL离心管，1000rpm离心5min，用冰预冷的PBS洗涤细胞一次，细胞沉淀用1mL冰预冷的PBS重悬，移至Eppendorf管，4°C 12000rpm离心1min，弃上清；2.加入适量NP-40细胞裂解缓冲液（用前新鲜加入蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min, 每隔10min Vortex一次(每次大约30sec)，4℃12000rpm离心1 min，上清移至新的Eppendorf管；3.蛋白定量，每组取适量（通常100μg-1mg）蛋白，用细胞裂解液调整体积使每组一致（通常总体积500-1000μL），加入40 μL (50% 悬浮液) Protein A/G琼脂糖珠；4.4°C孵育30min – 2h，以去除蛋白与Protein A/G琼脂糖珠的非特异结合（pre-clear）；5.4°C，2500rpm 离心3 min，上清移至新的Eppendorf管；6.加入第一抗体，4°C旋转孵育过夜；7.次日，每管加入40 μL (50% 悬浮液) Protein A/G琼脂糖珠，4°C缓慢旋转孵育1–3h；8.4°C，2500rpm 离心3 min，小心吸去上清，琼脂糖珠用1mL裂解缓冲液洗3－4次；每次可样品置于4°C缓慢旋转孵育10min；9.最后一次吸干所有液体，加入40μl的1×SDS 上样缓冲液，Vortex，然后用离心机轻甩30sec；10.沸水煮5分钟，12,000rpm离心1min；11.SDS-PAGE并进行Western blot检测。
免疫沉淀试验培训课件
各管抗体量不变
Ab
振摇 混匀、37℃孵育
Ag
沉淀量不同
出现沉淀量最多的管为最免疫适沉比淀试例验管。 1/11/2021
轻摇
10
最适比方阵测定法
抗原稀释度
抗体
稀释度
1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640
对照
1/5
+
++ +++ +++ ++
+
±
—
1/10
+
++
++
1/11/2021
免疫沉淀试验
14
透射比浊试验和散射比浊试验光路
IC
透射比浊试验
I
检测器A
I0
θ
当复合物＜3×106dal，
I≈Iθ;θ＜90°，散射光的
量代表IC的量。
1/11/2021
免疫沉淀试验
Iθ 检测器B
散射比浊试验
15
补充：免疫浊度测定影响因素
（1）抗原抗体的比例：反应体系保持抗体过量
1/11/2021
免疫沉淀试验
18
（2）抗体的质量
•抗体的特异性 •抗体的效价(>1:20) •抗体的亲和力 •R型和H型抗体（R型）
1/11/2021
免疫沉淀试验
19
（3）抗原抗体反应的环境 最适PH为：6.5-8.5 离子强度大，IC形成快 离子种类的影响，常用磷酸盐缓冲液 （4）增浊剂 PEG(6000—8000) 浓度4%吐温-20
24～48h观察沉淀
27
1/11/2021
免疫共沉淀原理及注意事项-PPT精品文档
0.2 mM PMSF, 0.2%Tween 20
2.1免疫沉淀中抗体的选择
注意的问题：2.2抗体
使用对照抗体：（阴性和阳性） 阴性：单克隆抗体：同一种属的IgG 兔多克隆抗体：正常兔IgG 阳性：细胞内某种蛋白的抗体（做膜蛋白A， 用膜蛋白B）
未检测到目得蛋白或蛋白很少
注意的问题：1.裂解液
细胞裂解采用温和的裂解条件，不能破坏细胞 内存在的所有蛋白质－蛋白质相互作用，多采用 非离子变性剂（NP40或Triton X-100)。每种细胞
的裂解条件是不一样的，通过经验确定。
。 不能用高浓度的变性剂（0.2％SDS)，细胞裂解
液中要加各种酶抑制剂，如商品化的cocktailer
可能原因 上操作并防止冻融 2.抗体浓度太低：调整抗体浓度，必要时设立浓度梯度，摸索最佳浓 度 3.抗抗体亲合力太低： 选用适合于IP和/或IB的相应抗体 4.IP抗体未与agarose珠子结合： 选用适合于IP的相应珠子，正确保 存防止变质或干燥 5.Tag未暴露在融合蛋白构象的表面：改变tag融合表达部位 6.裂解液严谨度太高： 改用低严谨度裂解液 处理方法 1.样品被蛋白酶降解： 添加蛋白酶抑制剂；所有操作保持4℃以下冰
proteinA/G-琼脂糖珠复合物
Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，能特异
性地与人和哺乳动物抗体（主要是IgG）的Fc区结合。 目前多用protein A/G预先结合在argarose beads上。
ProteinA/G的作用及具体原理
“捕获”抗体，形成复合物，
抗体-目的蛋白-ProteinA/G beads ProteinA/G-garose beads 非共价健结合 共价结合
免疫共沉淀
原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。
是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。
如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
目前多用精制的protein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的protein A就能吸附抗原达到精制的目的。
这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
二、准备工作：预冷PBS，RIPA Buffer，细胞刮子(用保鲜膜包好后，埋冰下)，离心机1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次，最后一次吸干PBS;2. 加入预冷的200ul RIPA Buffer (10cm培养皿)3. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下，把悬液转到2.0 EP 管中，4℃，缓慢晃动15min(EP管插冰上，置水平摇床上)4. 4℃，14000g离心15min，立即将上清转移到一个新的离心管中5. 准备Protein A agarose，用PBS 洗两遍珠子，然后用PBS配制成50%浓度，建议减掉枪尖部分，避免在涉及琼脂糖珠的操作中破坏琼脂糖珠6. 取30μl protein A 琼脂糖珠，用冷PBS洗3 次，每次3,000 rpm离心3 min;7. 将预处理过的30μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°C缓慢摇晃孵育过夜，使抗体与protein A琼脂糖珠偶连;8. 免疫沉淀反应后，在4°C 以3,000 rpm 速度离心3 min，将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去，琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入的5×上样缓冲液，沸水煮10分钟;9. Western blotting实验第一步验证nemo与pidd的相互作用关系：（1）5个10cm培养皿培养BV-2细胞（2）每个皿加入200ul的中等强度的RIPA裂解液，裂解细胞a Input组b IgG组c pidd抗体protein A 琼脂糖珠组孵育过夜加入5×上样缓冲液煮10分钟a、b、c组孵育nemo抗体，来证明nemo可以拉出pidda Input组b IgG组c nemo抗体protein A 琼脂糖珠组孵育过夜加入5×上样缓冲液煮10分钟a、b、c组孵育pidd抗体，来证明pidd可以拉出nemo实验第二步分别转染带flag-空载体与flag-pidd-cflag-空载体按上述提取细胞分两组，分别加入flag抗体与protein A 琼脂糖珠孵育过夜，分别用flag抗体与nemo抗体flag-pidd-c按上述提取细胞分两组，分别加入flag抗体与protein A 琼脂糖珠孵育过夜，分别加入flag抗体与nemo抗体实验第三步分别转染带flag-空载体与flag-pidd-ccflag-空载体按上述提取细胞分两组，分别加入flag抗体与protein A 琼脂糖珠孵育过夜，分别用flag抗体与nemo抗体flag-pidd-cc按上述提取细胞分两组，分别加入flag抗体与protein A 琼脂糖珠孵育过夜，分别加入flag抗体与nemo抗体。
免疫共沉淀原理图解
免疫共沉淀原理图解免疫共沉淀（immunoprecipitation，IP）是一种用于分离和富集特定蛋白质的技术。
基于特异性抗体与目标蛋白质的结合，IP可以用于检测蛋白质-蛋白质和蛋白质-核酸相互作用、蛋白质修饰和定位等方面的研究。
下面将介绍免疫共沉淀的原理和流程。
原理：免疫共沉淀是通过特异性抗体与目标蛋白质的结合，来沉淀出目标蛋白质及其相关蛋白质、DNA或RNA等分子的方法。
具体来说，IP通过以下步骤实现：1. 将细胞裂解，使蛋白质溶于缓冲液中。
2. 加入特异性抗体，并使其与目标蛋白质结合。
3. 加入亲和素（一种与抗体结合的蛋白质），再将亲和素固定在磁珠上。
4. 加入磁珠后，亲和素与抗体结合，并沉淀下含有目标蛋白质及其相关分子的复合物。
5. 用洗涤缓冲液洗涤磁珠，并用洗涤液去除非特异性结合的蛋白质。
6. 用洗涤缓冲液或热水溶液将目标蛋白质及其相关分子从磁珠上去除。
7. 最后，用Western blot或其他方法检测目标蛋白质及其相关分子。
流程：IP的具体实验流程如下：1. 细胞溶解：将含有目标蛋白质的细胞或组织裂解并使蛋白质溶于缓冲液中。
2. 抗体结合：加入经过验证的特异性抗体，使其与目标蛋白质结合。
3. 亲和素结合：加入亲和素，使其与抗体结合，并将其固定到具有磁性的磁珠上。
4. 免疫共沉淀：将磁珠加入到蛋白质混合物中，使亲和素与抗体结合并沉淀出目标蛋白质及其相关分子。
5. 洗涤：用洗涤缓冲液将非特异性结合的蛋白质去除，保留目标蛋白质及其相关分子。
6. 去除磁性珠：用洗涤缓冲液或热水溶液将目标蛋白质及其相关分子从磁珠上去除。
7. 分析：用Western blot、质谱等多种技术检测目标蛋白质及其相关分子。
总结：免疫共沉淀是一种非常有用的技术，可以帮助研究者了解蛋白质相互作用、蛋白质修饰及其定位等方面的信息。
虽然技术流程复杂，但只要按照正确的方法进行操作，就能够产生非常有意义的结果。
免疫共沉淀Co详细步骤教程.pptx
10.加入一定体积的兔抗到 500μl 总蛋白中，抗体的稀释比例因兴趣蛋白在不同 细胞系中的多少而异
11.4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温 2h，激酶或磷酸酯酶活性分析建议 用 2 h 室温孵育
学海无涯
免疫共沉淀(Co-IP)详细步骤教程
一、原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一 性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整 细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时， 完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白 质 X 的抗体免疫沉淀 X，那么与 X 在体内结合的蛋白质 Y 也能沉淀下来。目前 多用精制的 prorein A 预先合固化在 argarose 的 beads 上，使之与含有抗原 的溶液及抗体反应后，beads 上的 prorein A 就能吸附抗原达到精制的目的。这 种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白 质的新的作用搭档。
RIPA Buffer 配制：
基础成分：
Tris-HCl（缓冲液成分，防止蛋白变性）
NaCl（盐份，防止非特异蛋白聚集）
NP-40（非离子去污剂，提取蛋白；用 H2O 配制成 10%储存液）
去氧胆酸钠（离子去污剂，提取蛋白；用 H2O 配制成 10%储存液；避光保存）
注意：准备激酶（致活酶）实验时，不要加去氧胆酸钠，因为离子型去污剂能 够 使酶变性，导致活性丧失。
12.加入 100μl Protein A 琼脂糖珠来捕捉抗原抗体复合物，4℃缓慢摇动抗原抗 体混合物过夜或室温 1h，如果所用抗体为鼠抗或鸡抗，建议加 2 μl"过渡抗体" （兔抗鼠 IgG，兔抗鸡 IgG）
免疫共沉淀原理和注意事项培训ppt课件
免疫共沉淀原理和注意事项
8
三 实验流程
提取细胞总蛋白
↓
↓
离心，上清电泳(抗原抗体)
准备PA珠子， PBS洗3遍
↓
PA珠子加入蛋白裂解液 (去除非特异性蛋白背景)
↓
离心去PA珠子，取上清
↓
测蛋白浓度 (BCA法)
↓
加一抗反应(4℃过夜)
↓
加PA珠子捕捉复合物 (室温1h或4℃过夜)
↓
离心，收集沉淀，预冷RIPA Buffer洗3遍
2. RIPA裂解液中蛋白样品含有较高浓度的去垢剂，不能用 Bradford法但可用BCA法或改良Lowry法测定蛋白浓度
免疫共沉淀原理和注意事项
16
裂解液成分
国内博士：
细胞裂解液： 50mM Tris-HC (lpH7.5)，
150 mM NaCl, 0.5%NP-40,
1mM EDTA 使用前加入PMSF至终浓度1mM、 proteinase inhibitor cocktail (混合物)。
ECL 试剂 +
一抗
一抗
二 抗 ( 辣 根 酶 标 记 的 羊 抗 兔 IgG)
一抗(兔抗Actin)
曝光后的蛋白条带
含有转印蛋白的PVDF膜
转印膜上蛋白检测示意图
免疫共沉淀原理和注意事项
X光片曝光显影
ECL
12
CO-IP与质谱分析流程
免疫共沉淀原理和注意事项
13
三 实验的关键
v 1. 实验最需要注意点就是抗体的性质。特别是多抗的特异性是问题。 v 2. 为防止蛋白的分解、修饰，溶解抗原的缓冲液必须加蛋白酶抑制
剂，低温下进行实验。
v 3. 考虑抗体/缓冲液的比例。抗体过少就不能检出抗原，过多则就不 能沉降在beads上，残存在上清。缓冲剂太少则不能溶解抗原，过多 则抗原被稀释。
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含有转印蛋白的PVDF膜
转印膜上蛋白检测示意图
免疫共沉淀原理和注意事项
X光片曝光显影
ECL
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CO-IP与质谱分析流程
免疫共沉淀原理和注意事 项
13
三 实验的关键
❖ 1. 实验最需要注意点就是抗体的性质。特别是多抗的特异性是问题 。
❖ 2. 为防止蛋白的分解、修饰，溶解抗原的缓冲液必须加蛋白酶抑制 剂，低温下进行实验。
❖ 3. 考虑抗体/缓冲液的比例。抗体过少就不能检出抗原，过多则就不 能沉降在beads上，残存在上清。缓冲剂太少则不能溶解抗原，过多 则抗原被稀释。
❖ 4. 确定蛋白间的相互作用是发生在细胞中，而不是由于细胞的溶解 才发生的，这需要进行蛋白质的定位来确定。？？
免疫共沉淀原理和注意事 项
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注意的问题：1.裂解液
Bradford法但可用BCA法或改良Lowry法测定蛋白浓度
免疫共沉淀原理和注意事 项
16
裂解液成分
国内博士：
细胞裂解液：
50mM Tris-HC（lpH7.5），
150 mM NaCl,
0.5%NP-40,
1mM EDTA 使用前加入PMSF至终浓度1mM、
proteinase inhibitor cocktail（混合物）。
免疫共沉淀原理和注意事 项
6
二 CO-IP特征
优点
（1 相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于 天然状态
（2 蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以 避免人为的影响
（3 可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物
免疫共沉淀原理和注意事 项
7
二 CO-IP特征
局限性
（1 可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白 质相互作用
刘岩
BC300 buffer
20 mM Tris-Cl, pH 8.0,
300mM NaCl,
0.2 mM EDTA,
10% glycerol（甘油）,
0.2 mM PMSF,
0.2%Tween 20 免疫共沉淀原理和注意事 项
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2.1免疫沉淀中抗体的选择
免疫共沉淀原理和注意事 项
18
注意的问题：2.2抗体
溴 酚 蓝 区 带 中 心 距 加 样 端 距 离 （ c m ）
以每个蛋白标准的分子量对 数对它的相对迁移率作图得标 准曲线，量出未知蛋白的迁移 率即可测出其分于量。
标难曲线只对同
一块凝胶上的样品
的分子量测定才具
有可靠性。
免疫共沉淀原理和注意事项
11
WB结果分析
ECL 试剂 ++
一抗 一抗
二抗 (辣根酶标记的羊抗兔IgG) 一抗(兔抗Actin)
免疫共沉淀原理和注意事 项
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ProteinA/G的作用及具体原理
❖ “捕获”抗体，形成复合物，
抗体-目的蛋白-ProteinA/G beads 非共价健结合
ProteinA/G-garose beads
共价结合
❖ 加样缓冲液-煮沸变性-离心
Protein A/G beads↓
❖ EP管（抗体-目的蛋白-少量非特异性吸附蛋白）。
免疫共沉淀原理和注意事 项
CO-IP应用与IP区别
❖ 测定两种目标蛋白质是否在体内结合 ❖ 确定一种特定蛋白质的新的作用搭档
CO-IP与IP只取决于检测焦点是初级靶分子（抗 原）还是次级靶分子（相互作用蛋白）
免疫共沉淀原理和注意事 项
2
实验基本原理
❖ 1.提取蛋白 ❖ 2.在细胞裂解液中加入抗X的抗体 ❖ 3.孵育后再加入Protein A或G(于
❖ 细胞裂解采用温和的裂解条件，不能破坏细胞 内存在的所有蛋白质－蛋白质相互作用，多采用 非离子变性剂（NP40或Triton X-100)。每种细胞 的裂解条件是不一样的，通过经验确定。
❖ 不能用高浓度的变性剂（0.2％SDS)，细胞裂解 液中要加各种酶抑制剂，如商品化的cocktailer 。
免疫共沉淀原理和注意事 项
Agarose bead上) 若细胞中有与兴趣蛋白结合的目
的蛋白，就可以形成复合物： “Y—X—抗X抗体—Protein A或 G" ❖ 3.经变性、聚丙烯酰胺凝胶电泳， 复合物又被分开。（xy抗原、x抗 体）
agarose bead 琼脂糖珠
proteinA/G有一个很重要的特性就是能与抗体的Fc段结合
↓
离心去PA珠子，取上清
↓
测蛋白浓度 (BCA法)
↓
加一抗反应(4℃过夜)
↓
加PA珠子捕捉复合物 (室温1h或4℃过夜)
↓
离心，收集沉淀，预冷RIPA Buffer洗3遍
↓
上样缓冲液悬浮沉淀，加热游离抗原、抗体、珠子
↓
↓
免疫共沉淀原理和注意事 项
9
SDS-PAGE结果分析
蛋 白 样 品 距 加 样 端 迁 移 距 离 （ c m ） 相 对 迁 移 率 =
❖ 使用对照抗体：（阴性和阳性） 阴性：单克隆抗体：同一种属的IgG 兔多克隆抗体：正常兔IgG 阳性：细胞内某种蛋白的抗体（做膜蛋白A，
用膜蛋白B）
免疫共沉淀原理和注意事 项
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未检测到目得蛋白或蛋白很少
可能原因
处理方法
❖ 1.样品被蛋白酶降解： 添加蛋白酶抑制剂；所有操作保持4℃以下冰 上操作并防止冻融
（2 两种蛋白质的结合可能不是直接结合，有第三 者在中间起桥梁作用；
（3 必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最 后检测的抗体，若预测不正确，实验就得不到结 果。
免疫共沉淀原理和注意事 项
8
三 实验流程
提取细胞总蛋白
↓
↓
离心，上清电泳(抗原抗体)
准备PA珠子，PBS洗3遍
↓
PA珠子加入蛋白裂解液（去除非特异性蛋白背景)
15
RIPA裂解液--普利莱基因技术有限公司
❖ 100ml RIPA Buffer： 50 mM Tris-HCl (pH 7.4), 150 mM NaCl, 1% NP-40, 0.1% SDS.（100元）
说明： 1. 裂解液临用前可新鲜加入最终浓度为1mM的PMSF或其它蛋
白酶抑制剂。 2. RIPA裂解液中蛋白样品含有较高浓度的去垢剂，不能用
❖ 2.抗体浓度太低：调整抗体浓度，必要时设立浓度梯度，摸索最佳浓 度
免疫共沉淀原理和注意事 项
3
CO-IP原理图解
免疫共沉淀原理和注意事 项
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proteinA/G-琼脂糖珠复合物
❖ Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，能特异 性地与人和哺乳动物抗体（主要是IgG）的Fc区结合。
❖ 目前多用protein A/G预先结合在argarose beads上。