冠心病患者外周血循环内皮微粒水平检测及意义

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血小板减少及血液中微粒检验的研究进展

血小板减少及血液中微粒检验的研究进展

血小板减少及血液中微粒检验的研究进展摘要:血液中一个最小的成分细胞就是血小板,其可起到凝血和止血的作用,在当下医疗技术飞速发展的新形势下,人们逐步发现血栓的发生与血液中的微粒之间存在密切的关联。

所以,为了使血栓性疾病得到更好的诊治,达到更好的止血效果,对血液中微粒及血小板进行准确的检验就显得尤为重要。

本文对近年来国内外与血液中微粒和血小板减少临床检验相关的研究进行了综述,同时认真分析了血液中微粒和血小板减少的临床检验结果,可供参考。

关键词:血小板;微粒;检验血栓性疾病是临床上一种比较常见的疾病,随着近些年人们生活水平的不断提升,血栓性疾病的发病率也呈逐年上程式趋势,但目前尚不明确血栓性疾病的发病机理和发病原因,曾有研究指出,血栓性疾病与血小板微柆之间存在着一定的关联。

因此,为了更好的防治血栓性疾病,非常有必要对血小板减少及血液中微粒检验的研究进展进行探讨。

1.血小板减少的检验状况1.1血小板计数的对比曾有学者将白血病患者与正常人群选取为研究对象,对二者的血小板计数进行比较,把正常人群的血样的血小板计数稀释到3.0×1010/L-5.0×1010/L范围内,并采集血小板计数少于3.0×1010/L白血病患者的血样,再采用4种原理不同的血细胞分析仪来检测血样中的血小板计数,主要采用的是光散射法、二维光散射法、阻抗法和阻抗法联合鞘流法[1]。

结果发现,每种仪器在检难正常人群血样方面的准确度均较高,CV值最大为9.5%,最小为4.6%,检验结果与草酸铵参考办法高度一致。

然而,在检验血小板减少的白血病患者血样方面,采取阻抗法和光散射法所测得的结果存在明显偏差,仅二维光散射法的血小板计数检测结果与草酸铵参考办法高度一致。

由此可见,血小板减少症患者的血样存在异质性。

二维光散射法的精准度明显高于传统的一维系统,可更好的鉴别血液中的非血小板粒。

还有学者利用阻抗法、光散射法和阻抗法联合鞘流等原理的血细胞分析仪来检测血小板计数,结果发现采用一维系统检测血小板计数,其检验结果会明显偏高,这主要是因为血样中存在非血小板微粒。

血管内皮功能的评价及其临床价值

血管内皮功能的评价及其临床价值

血管内皮功能的评价及其临床价值刘欢;刘润冬【摘要】内皮功能障碍是动脉粥样硬化的始动环节,并参与动脉粥样硬化的进展,还可增加心脑血管疾病风险导致心血管事件,并且相对于传统的危险因素,其对于未来心血管事件具有附加的预测价值.此外,内皮功能参与动脉粥样硬化的各个阶段,从起始到动脉粥样硬化血栓形成的并发症都起关键作用,并且在各个阶段都具有可逆性,内皮功能检查可揭示动脉粥样硬化的最早改变之一,其指导的治疗在心血管疾病的临床实践中有效可行,将内皮功能检查引入临床实践能够创新个体化心血管医疗.因此,应用确定有效的方法来评估内皮功能以监测血管健康及评估预后疗效具有重要的临床意义.目前许多方法用于评估内皮功能障碍的程度,应用药理学和/或生理刺激一氧化氮和其他来自于血管内皮细胞的血管活性物质的释放,包括有创性的检查比如冠状动脉内注入乙酰胆碱、无创性的检查比如血流介导的血管舒张功能和外周动脉张力检测以及生物标志物检查.【期刊名称】《心血管病学进展》【年(卷),期】2016(037)004【总页数】5页(P426-430)【关键词】血管内皮功能;动脉粥样硬化;血流介导的血管舒张功能;外周动脉张力检测;生物标志物【作者】刘欢;刘润冬【作者单位】北京大学首钢医院血管医学中心,北京100144;北京大学人民医院,北京100044【正文语种】中文【中图分类】R543血管内皮细胞是一种高度活跃的单层细胞,如果人体全身的内皮细胞可收集,那么它的总体质量与肝脏一样,它的总长度为100 000 km[1]。

一个健康的血管内皮细胞通过调节血管舒张和收缩、生长抑制和生长促进、抗炎和促炎以及抗氧化和促氧化之间的平衡来维持血管的张力和结构。

血管内皮功能障碍是一种病理状态,主要是以血管舒张物质和血管收缩物质不平衡为特点[2],最常见的是以一氧化氮(NO)生物利用度受损为特点,由NO合酶导致的NO产生减少或活性氧导致的NO降解增加或者二者都有。

正常情况下,NO释放到血管平滑肌细胞,激活鸟苷酸环化酶,导致环鸟苷酸介导的血管舒张[3]。

冠心病患者细胞因子测定的临床意义

冠心病患者细胞因子测定的临床意义

冠心病患者细胞因子测定的临床意义吴兆增;骆美瑛;李梅;仇为民;史宝强;杨庆祥【期刊名称】《放射免疫学杂志》【年(卷),期】2006(19)4【摘要】目的:探讨了冠心病患者血清IL-6、IL-10、IL-18和TNF-α检测的临床意义.方法:分别应用放射免疫分析和酶联免疫法对71例冠心病患者进行了血清IL-6、IL-10、IL-18和TNF-α水平检测(其中稳定性心绞痛35例、不稳定心绞痛21例、急性心肌梗死15例),并与35名正常健康人作比较.结果:冠心病患者血清IL-6、IL-10、IL-18和TNF-α水平均非常显著地高于正常人组(P<0.01),急性心肌梗死组和不稳定心绞痛组又高于稳定型心绞痛组(P<0.05).结论:检测冠心病患者血清中IL-6、IL-10、IL-18和TNF-α水平对疾病的预后观察具有重要的临床价值.【总页数】3页(P293-295)【作者】吴兆增;骆美瑛;李梅;仇为民;史宝强;杨庆祥【作者单位】江苏省连云港市东方医院,222042;扬州市宝应县妇幼保健所;江苏省连云港市东方医院,222042;江苏省连云港市东方医院,222042;江苏省连云港市东方医院,222042;江苏省连云港市东方医院,222042【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.冠心病患者外周血内皮细胞膜微粒、辅助性T细胞细胞因子水平变化及临床意义[J], 张文;陈文强;朱斌;潘晓燕;赵立娜2.冠心病患者血浆相关细胞因子检测及临床意义 [J], 吴艾霖;熊怡淞3.冠心病患者细胞因子信号转导抑制剂1基因多态性的临床意义 [J], 谷高玲;赵国安;孙海燕;李波;王显良;杨萌;武慧敏4.合并MS冠心病患者细胞因子表达及临床意义 [J], 谢瑾; 李红; 罗浩5.冠心病患者血清脂肪细胞因子Visfatin、A—FABP水平变化及其临床意义 [J], 苑聪;姜志胜;吴洁;文格波;邹瑾;李剑;张晶晶;谢楠;赵君璧因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

冠状动脉病变患者IR、hs—CRP水平检测及意义

冠状动脉病变患者IR、hs—CRP水平检测及意义
缓慢 、 轻微 地启 动 机体 的免 疫 系统 ;R产 生 的 某 些 I
两 组 I I h. R R 及 sC P水 平 比较见 表 1 。
表 1 两 组 I I及 h- R R sC P水 平 比较 ( ± )
细胞 因子 亦可直 接作 用于 免疫 系统 , 而诱发 持续 、 从
取 及利 用方 面受 损 。临床研 究 证 实 ,R是 冠 心病 的 I 独 立 危 险 因 素 。其 引 起 冠 心 病 的 确 切 原 因 可 能
状动 脉病 变患 者胰 岛素抵抗 指数 (R ) h—R II及 sC P水
平变化 , 旨在 探讨 两者 与冠 状动 脉病 变 的相关 性 。
为 : 导致 冠状 动脉 内皮 细胞 功 能失 调 。I ① R可激
活胰 岛素 的丝 裂 原激 活 蛋 白质 激 酶信 号 途 径 , 致 导 冠 状动 脉 内皮 细胞 功 能 受 损 ; 可 激 活 内皮 细胞 蛋 还
白激酶 C信 号 转 导 途 径 参 与粥 样 硬 化 的形 成 。②
13 统 计 学 方 法 .
采 用 S S 3 0统计 软 件 。计 P S1.
量 资料 以 士s 示 , 用 t 验 , 数 资 料 应 用 表 应 检 计
检 验 。检验 水准 仪= . 5 00。
2 结果
合成 , 可在动 脉 粥样 硬 化 斑 块 中 的部 分 细 胞 内合 亦 成, I R时 C P升 高 的机制 可 能 为 : 正 常 情 况 下胰 R ① 岛素可抑 制肝脏 合成 C P, I 态时其 抑 制作用 R 而 R状 减弱 ; R时机体 处 于亚临 床 、 程度 应 激 状态 , ②I 低 可
1 资料 与 方法
11 临床 资料 .

绝经后女性冠心病患者性激素、血脂变化及意义

绝经后女性冠心病患者性激素、血脂变化及意义
1 8 : 7 9 84 .
[] 关 红琼 . 7 生殖道沙 眼衣原体感染 与妊娠[ . J 中国优生 ] 与遗传 杂志 ,2 0 ,1 2) 2 — 3 . 0 3 1( :1 9 10
【] 王治鸿, 6 赵晋华, 明. 张翠 支原体与衣原体感染 引起 流
( 收稿 日期:2 - —1 0l 01 0 5)
产 的临床 观察[ . J 山西医科大学学报 , 0 7 3 ( ] 2 0 ,8 5
43 9.
( 任 校对 :谢丹 ) 责
绝 经后 女性 冠 心病 患者 性激 素 、血脂 变化 及 意 义
周 超 杰
【 摘要 】 目的 探讨绝 经后 女性性激素水平 、血脂 变化 与冠心病 ( oo ag erdsae c rn r at i s , h e
DO 03 6 /ma .s.0 7 2 52 1.00 7 h 1 .7 0c .i n10 -14 .0 01 . js 0
1 资 料 与 方法
作 者单 位 :5 6 0 广 东省海 丰县 彭湃纪 念医 院 内科 140
11 一般 资料 观察组人 选标准 :① 绝经 1 以 . 年
数 、体重指数 (MI 比较均 差异无显著性 ( 0 B ) 等 尸> . 与 国 内文 献报 道相似 13 2] -。 雌激 素 对 心 血管 系统 的保 护 作 用 己 为许 多 0) 5 ,具有可 比性 。
1 方法 . 2
基础 和临床研究所 证实 ,其 作用机 制包括l I①
c r n r e r ds a e Z U C a 1i. e at n f  ̄'n , e g) Me r l s i l f o o ayh a t i s HO h o e D p r e me t Me e e P nt i moi Hop t o i a a ao

内皮细胞微粒与冠心病关系的研究进展

内皮细胞微粒与冠心病关系的研究进展
鸟 苷酸 三磷酸 酶 ( R h o G T e ) 又称 小 G蛋 白 , 对 机动 蛋 白细胞骨 架有 特异 的生 物学效应 , 也 参与 控制 细胞 形 态、 细胞 移动 和平滑 肌收 缩 。半 胱氨 酸天 冬氨 酸蛋 白 酶( c a s p a s e ) 是 细 胞 凋 亡 过 程 中一 种 关 键 酶 , 主要 参 与坏细胞骨架 , 细 胞 凋 亡 时 主要 通 过 激 活 c a s p a s e 一 3 来 发挥效 应 。R h o 相 关 卷 曲螺 旋 形 成 蛋 白激 酶 ( R h o a s s o c i a t e d c o i l e d — c o i l f o r m i n g p r o t e i n k i n a s e , R o c k ) 是 种丝 氨酸/ 苏氨 酸 蛋 白激 酶 , 有 R o c k l和 R o c k 2两 种亚 型 。R o c k l蛋 白被 R h o 蛋 白激 活 , 作 用 于 肌球 蛋 白, 导致 细 胞 收缩 出 芽 生 成 E MP s 。另外 , 被 激 活 的 c a s p a s e - 3也可水 解 R o c k l 酶使 之激 活 。 由于细 胞 活 化 和凋 亡 的机 制 不 同 , 所 以 释 放 的 E M P s 其组成 及 生理功 能方 面也有 所不 同。 1 . 2 E M P s的组 成 E M P s膜 由脂 质 双 层 和 蛋 白质 组成 , 其 内包含 一些 细胞 质和一 些核 碎片 。正 常细 胞 膜 的磷脂 呈不 对称分 布 , 磷脂 酰胆碱 和鞘 磷脂位 于外 层, 磷脂 酰 乙醇胺 和磷 脂 酰 丝 氨 酸位 于 内层 , 这 种 不 对 称需要 消 耗 能 量 来 维 持 。 由于 E MP s膜 上 的 磷 脂 不 对称 分布性 消失 , 导致 大量带 负 电荷磷 脂酰 乙醇 胺 和磷 脂 酰丝氨 酸 分 布 于膜 的外 层 。磷 脂 酰丝 氨 酸 的 暴 露能 够结合 凝血 因子 Ⅱ、 Va 、 Xa等 , 使E MP s 具 有 促凝 血 活性 。E MP s 膜 表 面保 留一 些 内皮细 胞 的表面 蛋 白抗 原 , 如黏 附 分 子 C D 5 4 、 C D 3 1 、 C D 6 2 E、 C D 6 2 P 、 C D1 0 5 、 C D 1 4 4 等 。 不 同原 因 刺 激 下 产 生 的E M P s 表 面抗原 不 同 , 如由 T N F — O t 诱导 内皮 细胞 活 化 时产 生 的 E M P s 表 面高 表达 C D 5 4 和 C D 6 2 E ; 内 皮细胞凋亡时产生 的 E M F s表 面 表 达 C D 3 1 和 C D 1 0 5 增 加 ¨ 。另 外 , E MP s 表 面 表 达 的 蛋 白抗 原 还 与 内皮细胞 当时所处 的功 状 态有关 。

冠状动脉综合征患者内皮细胞微粒与冠状动脉病变狭窄严重程度的关系

冠状动脉综合征患者内皮细胞微粒与冠状动脉病变狭窄严重程度的关系
·论 著·
JMedRes,May2019,Vol.48No.5
冠状动脉综合征患者内皮细胞微粒与 冠状动脉病变狭窄严重程度的关系
帕提古丽·喀迪尔江 穆叶赛·尼加提
摘 要 目的 分析内皮细 胞 微 粒 (EMPs)水 平 与 急 性 冠 状 动 脉 综 合 征 (ACS)患 者 冠 状 动 脉 狭 窄 程 度 的 相 关 性。 方 法 纳入在笔者医院心内科住院并行冠状动脉造影术的患者 120例作为研究对象,分为 ACS组 90例,非冠心病组 30例,根据 冠 状 动 脉造影结果,ACS组分为单支病变组 13例,双支病变组 14例,3支病变组 30例,多支病变组 33例。每个研究对象在 冠 状 动 脉 造 影前晨起空腹抽取外周静脉血,分析血脂、血糖、生化指标等,并采用流式细胞术 检 测 血 浆 EMPs水 平,并 依 据 冠 状 动 脉 造 影 结 果 计算 Gensini积分,比较单支病变组、双支病变组、3支病变组 及 多 支 病 变 组 间 EMPs水 平 与 Gensini积 分 的 关 系。 结 果 非 冠 心 病组与 ACS组比较,ACS组 EMPs水平、年龄、性别、糖尿病、吸烟、超敏 C反应蛋白、LVEF等均明显高于对照组,差异有统计学意 义(P<0.05)。EMPs水平与 Gensini积分呈正相关,单支病变组、双支 病 变 组、3支 病 变 组 及 多 支 病 变 组 采 用 方 差 分 析 并 进 行 组 间比较,显示多支病变组 EMPs水平明显高 于 单 支 病 变 组 及 双 支 病 变 组,其 中 单 支 病 变 组 内 皮 细 胞 微 粒 水 平 最 低。 结 论 ACS 组患者的血浆 EMPs水平显著高于非冠心病组,EMPs水平与冠 状 动 脉 病 变 严 重 程 度 密 切 相 关,EMPs水 平 对 冠 状 动 脉 病 变 严 重 程度具有较可靠的预测价值。

冠心病的血液生化指标分析与临床意义

冠心病的血液生化指标分析与临床意义

冠心病的血液生化指标分析与临床意义冠心病,是指冠状动脉供血不足或堵塞所导致的心肌缺血和缺氧的疾病。

随着冠心病发病率的不断上升,早期诊断和有效治疗已经成为改善患者预后的重要环节。

血液生化指标作为临床上常用的诊断和监测指标,对冠心病的早期诊断、疾病评估和治疗方案的选择具有重要的意义。

本文将就冠心病的血液生化指标进行分析,并探讨其在临床上的意义。

一、血脂及脂蛋白指标的分析与临床意义1. 总胆固醇(TC):冠心病患者的血浆TC水平常常升高,是导致冠状动脉粥样硬化形成的重要因素之一。

因此,检测血浆TC水平可以帮助早期诊断冠心病,评估患者的疾病风险。

2. 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C):LDL-C是冠心病的主要病理生物学指标,其在动脉内的过度沉积会导致斑块的形成和动脉狭窄,进而影响心肌供血。

监测血浆LDL-C水平可以评估患者的冠心病风险以及治疗效果。

3. 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C):HDL-C对冠心病具有保护作用,它可以通过清除动脉内的胆固醇,并促进胆固醇的外排。

血浆HDL-C水平的降低往往与冠心病的发生和发展密切相关。

二、炎症指标的分析与临床意义1. C-反应蛋白(CRP):CRP是一种非特异性炎症指标,其水平在冠心病患者中常常升高。

高敏感性CRP(hs-CRP)的检测可以帮助了解患者的炎症状态,并对冠心病的发生和预后进行评估。

2. 血小板计数及血小板-淋巴细胞比值(PLR):冠心病的发展与炎症反应密切相关,血小板在炎症过程中起到重要作用。

监测血小板计数以及计算PLR可以帮助评估患者的炎症和血液凝固状态。

三、肌肉及心肌损伤指标的分析与临床意义1. 肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB):CK及其同工酶是心肌损伤的重要指标,特别适用于冠心病患者的急性心肌梗死的早期诊断。

监测其水平可以及早发现心肌损伤,制定合理的治疗方案。

2. 肌钙蛋白T(cTnT)和肌钙蛋白I(cTnI):cTnT和cTnI是目前识别心肌损伤的最敏感和最特异的指标。

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冠心病患者外周血循环内皮微粒水平检测及意义李南;王小敏;钟昌宝;龙邦盛;张美萃【摘要】目的检测冠心病患者(CHD)外周血循环内皮微粒(EMPs)的水平及分析其临床意义.方法选择CHD患者120例,按世界卫生组织分类标准分为:稳定性心绞痛43例(SA),不稳定心绞痛35例(UA)和急性心肌梗死42例(AMI),以20例健康人作为对照组.收集健康人和CHD患者外周血,并检测EMPs水平、凝血状态、C反应蛋白(CRP)和肌酸激酶(CK)水平,并分析EMPs水平与凝血状态和CRP和CK之前的相关性.结果 CHD患者循环EMPs水平明显高于健康人,CHD患者循环EMPs与CHD患者的高凝状态和上调的CRP和CK含量密切相关.结论 CHD患者循环EMPs可能参与调节CHD患者的凝血状态和CRP以及CK含量.【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2018(034)023【总页数】7页(P3979-3985)【关键词】冠心病;循环内皮微粒;凝血状态;药物治疗【作者】李南;王小敏;钟昌宝;龙邦盛;张美萃【作者单位】海口市中医医院检验科海口570216;海口市中医医院检验科海口570216;海口市中医医院检验科海口570216;海口市中医医院重症医学科海口570216;海口市中医医院肺病心病科海口570216【正文语种】中文冠状动脉粥样硬化性心脏病简称冠心病(coronary heart disease,CHD),是冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变而引起血管腔狭窄或阻塞,造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病[1-2]。

CHD及其心血管后遗症仍然是全世界死亡的首要原因,且CHD发生率与死亡率呈现逐年上升的趋势[3]。

因此研究CHD发病机制、早期诊断和治疗具有重要的显示意义。

内皮细胞源性微粒(endothelial cell-derived microparticles,EMPs)是内皮细胞在激活、损伤或凋亡时经出芽方式释放的一类直径介于100~1 000 nm的膜性囊泡[4-5]。

本研研究主要检测CHD患者外周血中循环EMPs水平和分析EMPs与CHD患者凝血状态之间的关系。

1 材料与方法1.1 一般资料本研究选取2015年2月1日至2017年8月1日海口市中医医院CHD患者120例。

所有患者均经冠状动脉造影、心电图等检测确诊。

男性85例,女性35例,年龄45~79岁,平均(59±8.1)岁。

120例患者按世界卫生组织分类标准分为:稳定性心绞痛(SA)43例,男32例,女11例,平均(55±5.4)岁;不稳定心绞痛(UA)35例,男22例,女14例,平均(58±7.3)岁和急性心肌梗死(AMI)42例,男31例,女11例,平均(57± 6.8)岁。

所有纳入研究的患者均为非血缘关系个体,并排除其他系统疾病,如急性/慢性炎症、创伤、脑梗、周围血管栓塞、恶性肿瘤及严重肝肾疾病等。

排除陈旧性心肌梗死(病程6个月以上)。

同期体检健康患者20例纳入对照组,其中男12例,女8例,年龄44~76岁,平均(56±6.3)岁。

1.2 仪器及设备台式离心机(Centrifuge 5810R,Eppendorf,德国);流式细胞仪(FACS AriaⅢ,BD,美国);CD31(1∶200)和Annexin V(1∶200)单克隆抗体购自武汉博士德(武汉),标注珠(碧云天,上海),生化分析仪(日本东芝生化分析仪,南京)。

1.3 方法1.3.1 循环微粒的收集(1)用含EDTA-K2抗凝剂的真空采血管收集CHD患者5 mL静脉血样品;(2)将样品转移至离心管中,4℃条件下,1 550 g离心20 min,取上清;(3)重复步骤(2),取上清,加入上清体积3倍的微粒提取液(锐博生物,广州),充分混匀;(4)4 ℃条件下10 000 g离心10 min,以无菌PBS重悬管底沉淀;(5)重复步骤(4),以150 μL无菌PBS重悬沉淀,即获得CHD患者循环微囊泡。

1.3.2 流式细胞术(1)收集循环微粒:自外周血中收集的微粒垂悬于适量PBS中;(2)向微粒垂悬液中加入CD31(1∶200)和CD41(1∶200)单克隆抗体,室温孵育30 min;(3)离心去除多余抗体后以PBS垂悬微粒;(4)加入荧光标记二抗(1∶200),37℃孵育30 min,PBS洗涤5 min×2次;(5)以400 μL PBS重悬微粒,流式细胞仪检测。

1.3.3 总胆固醇(TCHO)、低脂密度脂蛋白(LDL)血脂、血糖、肌酸激酶(CK)和C反应蛋白(CRP)检测采集受试者外周血5 mL,分别检测TCHO、LDL、血脂、血糖、CK和CRP检测等指标检测。

1.4 统计学方法应用SPSS 20.0统计软件,计量资料采用均数±标准差表示,采用t检验分析,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果2.1 冠心病患者基本资料纳入研究的120例CHD患者和20名健康人一般情况见表1。

各组患者TCHO、LDL和血糖分析结果显示,健康人、SA、UA、AMI组之间差异无统计学意义。

检测正常人和CHD患者外周血CK和CRP的水平后发现,SA、UA和AMI组患者CK和CRP水平明显高于正常人,差异具有统计学意义(P<0.05)(图1A、1B)。

表1 纳入研究的健康人和CHD患者一般情况Tab.1 General condition of healthy subjects and CHD patients ± s注:与健康人比较,*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001组别健康人SA UA AMI例数20 43 35 42年龄(岁)56±6.3 55±5.4 58±7.3 57±6.8男性[例(%)]12(60.0)32(74.4)22(62.9)31(73.8)TCHO(mmoL)5.2±0.5 5.3±0.3 5.6±0.8 5.7±0.7 LDL (mmoL)2.2±0.5 2.5±±0.7 2.6±0.4 2.7±0.9血糖(mmoL)5.3±0.6 5.8±0.6 5.7±0.5 5.5±0.4图1 正常人和CHD患者外周血CRP和CK水平检测Fig.1 The levels of CRP and CK in normal subjects and CHD patients2.2 循环微粒分离与鉴定收集健康人和CHD患者外周血,以试剂盒结合离心法分离外周血中总的循环微粒。

向分离所得的微粒悬液中加入直径为1 μm标准珠,流式细胞术分析结果显示,微粒粒径与标准珠接近(图2A),与文献报道的微粒分布范围(100 nm~1 μm)相吻合[6-7]。

随后,我们检测了微粒表面特征性分子,如Annexin V和磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)[8]。

结果发现,分离所得的微粒表面高表达上述两种标志分子(图2B)。

以上结果证明,本研究成功的从健康人和CHD外周血中分离得到了循环微粒。

图2 循环微粒分离与鉴定Fig.2 The isolation and identification of circulation MPs2.3 冠心病患者循环EMPs水平及临床意义利用流式细胞仪检测了健康人和CHD 患者循环EMPs的水平。

本研究采用CD31和Annexin V作为内皮微粒的标志分子。

结果发现健康人外周血循环微粒中EMP所占比例为70.02%,而SA、UA和AMI型CHD患者外周血中EMPs比例分别为78.25%、84.57%和95.36%,明显高于健康人,差异具有统计学意义(P<0.05)(图3A、3B)。

进一步分析健康人和CHD患者外周血中EMPs浓度后发现,SA、UA和AMI型CHD患者EMPs浓度明显高于健康人,差异具有统计学意义(P<0.05,图3C)。

为了探究CHD患者外周血中升高的EMPs水平与同样异常的CK和CRP之间的关系,进行了相关性分析。

如图3D和3E所示,SA、UA和AMI型CHD患外周血CK和CRP浓度与EMPs水平具有显著的相关性(P<0.01),证明CHD患者外周血EMPs水平的升高与提高的CK和CRP浓度具有密切的关系。

2.4 冠心病患者外周血EMPs水平与凝血状态之间的关系冠状动脉内血栓是急性冠脉综合症发生的主要原因,而凝血和纤溶功能的异常是促进血栓形成的重要原因[9]。

已有文献报道,CHD患者的血液处于高凝状态。

因此检测了CHD患者纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)和活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)以验证CHD患者的凝血状态。

如图4A所示,SA、UA和AMI型CHD患者FIB较正常人明显提高,而PT和APTT明显低于正常人,差异具有统计学意义(P<0.05)。

为了研究CHD患者外周血EMPs与血液高凝状态之间的关系,将二者进行相关性分析。

结果如图4B所示,SA、UA和AMI型CHD患者EMPs浓度与FIB呈显著正相关(P<0.01),而与PT和APTT呈显著负相关(P<0.01)。

以上结果证明,CHD患者外周血中升高的EMPs可能参与CHD患者血液高凝状态的形成。

2.5 药物治疗降低CHD患者循环EMPs水平所有患者均接受阿司匹林联合阿托伐他汀钙片的常规药物治疗方案。

药物治疗2周后收集患者外周血,分离循环微粒,流式细胞术检测CHD患者循环EMPs水平。

结果发现,SA、UA和AMI型CHD 患者外周血中EMPs比例分别为75.35%、78.57%和81.23%,低于治疗前的EMPs水平,差异具有统计学意义(P<0.01)(图5A、5B)。

进一步分析CHD 患者外周血中EMPs浓度后发现,药物治疗后,SA、UA和AMI型CHD患者EMPs浓度明显低于治疗前EMPs浓度,差异具有统计学意义(P<0.05,图5C)。

前面的结果提示,EMPs与凝血状态密切相关。

因此推测药物治疗后,患者循环EMPs水平降低,必然伴随着凝血状态的改变。

本研究收集药物治疗后的CHD患者血液,检测凝血状态。

结果发现,SA、UA和AMI型CHD患者FIB较治疗前有明显的下降,而PT和APTT较治疗前明显升,差异具有统计学意义(P<0.05,图5D)。

为了进一步验证循环EMPs与CRP和CK之间的关系,检测了药物治疗后的CHD 患者血液中的CRP和CK含量。

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