病理科免疫组化及特殊染色工作制度
免疫组化之组织处理、切片和染色实验技术步骤

免疫组化之组织处理、切片和染色实验技术步骤1.组织处理恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素,在组织细胞材料准备的过程中,不仅要求保持组织细胞形态完整,更要保持组织细胞的抗原性不受损或弥漫,防止组织自溶。
如果出现自溶坏死的组织,抗原已经丢失,即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术,也很难检出所需的抗原,反而往往由于组织的坏死或制片时的刀痕挤压,在上述区域易出现假阳性结果。
1) 组织及时取材和固定组织标本及时的取材和固定是做好免疫组化染色的关键第一步,是有效防止组织自溶坏死,抗原丢失的开始,离体组织应尽快的进行取材,最好2h内,取材时所用的刀应锐利,要一刀下去切开组织,不可反复切拉组织,造成组织的挤压,组织块大小要适中,一般在2.5cm×2.5cm× 0.2cm,切记取材时组织块宁可面积大,千万不能厚的原则,(也就是说组织块的面积可以大到3cm×5cm,但组织块的厚度千万不能超过0.2cm,否则将不利于组织的均匀固定)。
固定液快速渗透到组织内部使组织蛋白能在一定时间内迅速凝固。
从而完好的保存抗原和组织细胞形态。
对于固定液的选择,原则上讲,应根据抗原的耐受性来选择相应的固定液,但除非是专项科研项目,在病理常规工作很难做到这一点,因为病理的诊断和鉴别诊断都是在常规HE病理诊断的基础上决定是否进行免疫组化的染色,而HE染色的常规组织处理是采用10%的中性缓冲福尔马林或4%缓冲多聚甲醛4倍于组织体积进行组织固定,利用其渗透性强,对组织的作用均匀进行固定,但组织固定时间最好在l2h 内,一般固定时间不应超过24小时。
随着固定时间的延长对组织抗原的检出强度将逐渐降低。
2) 组织脱水、透明、浸蜡组织经固定后进行脱水、透明、浸蜡和包埋。
掌握的原则是脱水透明要充分但不能过,浸蜡时间要够,温度不能高,否则造成组织的硬脆使组织切片困难,即使能切片,由于组织的硬脆,也使切片不能完好平整,染色过程中极易脱片,对免疫组化染色抗原的定位及背景都不利,所以无水酒精脱水和二甲苯透明的时间不宜过长,正常大小的组织无水酒精脱水lh×3次,二甲苯透明lh×2次即可,浸蜡及包埋石蜡温度不要超过65℃。
病理科免疫组化技术规范制度及流程

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【2020实用】医院制度-病理科免疫组化室工作制度

病理科免疫组化室工作制度1。
制片过程中应保持科学的工作态度和严谨的工作作风。
如条件允许,应尽量使用阳(阴)性对照,严格控制抗体作用时间。
2。
抗体的滴加量应适中,在取得最佳染色结果的前提下,应尽量节约抗体。
3。
各种免疫组化染色方法,参照病理科免疫组化操作常规严格进行。
4。
免疫组化染色种类由主检医师根据临床或病理诊断的需要提出申请,并按要求开出医嘱并计费。
5。
申请免疫组化染色项目应参照《病理科常用免疫组化抗体一览表》上的抗体种类范围申请,申请时应尽量考虑周全,避免重复切片。
6。
技术组负责找出蜡块,制片室在每天上午09:00以前所登记的免疫组化染色项目进行切片,并根据免疫组化染色的种类和数量在蜡片切(需要微波修复的抗原,应多切出1~2切片)出后2~3日完成染色。
7。
操作者应了解和熟悉各种免疫组化试剂在冰箱中存放的位置,工作中应尽量减少开启冰箱门的次数和时间。
8。
免疫组化染色方法,按《病理科免疫组化操作常规》进行。
9。
在染色过程应保持科学的工作态度和严谨的工作作风,熟悉病理科常用免疫组化试剂的种类和处理方法。
10。
染色完成后的切片,贴好标签,放入特染/免疫组化切片盒中,并由执行人记录完成的时间、签字,由主检医师自行取走。
11。
染色完毕,操作者应将所用的容器按病理科《各类容器的清洁标准》进行处理,并放回原处,以便下次使用。
12。
负责抗体、试剂的使用保管。
染色中遇试剂缺乏或不足时,应及时补充。
13。
如遇脱片等特殊情况需重新染色的,应及时告知经检医师。
14。
诊断组需增加新的免疫组化抗体时,可在每月22日前向技术组长提出,由技术组长统一做计划定购。
15。
免疫组化试剂购进时,应登记该抗体的购进日期、保存方法和有效期。
对超过有效期的抗体应及时更换,以免影响常规染色的结果。
16。
负责微波仪、烤箱、恒温箱的使用保管。
17。
免疫组化染色技术员由科主任和技术人员专人负责。
实用医院制度加强制度完善,冲刺等级评审以病人为中心,提高医疗水平齐心协力、鼓足干劲、全力迎接“三甲”医院复审。
医院病理科免疫组化操作规范

医院病理科免疫组化操作规范
1、设置单独的实验室。
2、必须有专用的冰箱,天平和pH计。
3、实验用玻片,器皿必须清洁。
4、试剂必须放入4度冰箱内,并注明有效期。
5、专用的脱蜡,脱水流程。
6、设立阳性和阴性对照。
7、按各种抗体要求进行修复。
8、新抗体必须摸索出最佳稀释度。
9、孵育时间,温度根据各种抗体的具体要求操作。
10、DAB显色必须在镜下观察。
11、复染后经酒精充分脱水,二甲苯透明,湿封。
12、封片时不得有气泡,不得有树胶外溢。
13、标签必须贴于玻片左侧,编号字迹必须清楚。
14、制片工作一般应在24—48小时内完成。
15、切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点。
病理科工作制度汇总

病理科工作制度汇总一、前言病理科是医院重要的医技部门,主要负责对临床送检的病理标本进行诊断和鉴别诊断,为临床治疗提供重要的依据。
为了确保病理诊断的准确性和安全性,提高病理科工作质量,根据国家中医药管理局《中医病证诊断疗效标准》和《医疗机构病理科建设与管理规范》,结合我国实际情况,制定本工作制度。
二、人员管理1.1 人员准入制度病理科工作人员应具备相应的学历、专业资格和临床经验。
新入职人员需经过专业培训、考核合格后方可上岗。
1.2 员工健康管理制度病理科工作人员应定期进行健康检查,患有传染性疾病、皮肤病等影响工作的疾病者,不得从事相关工作。
1.3 医师人才培养计划病理科应制定医师人才培养计划,鼓励 staffpathologists参加各类专业培训、学术交流和学术研究,提高专业水平和业务能力。
1.4 医师专业水平定期考核制度病理科应定期对医师进行专业水平考核,对考核不合格者,应暂停其工作,督促其参加培训和提高。
1.5 进修、实习人员管理制度病理科应制定进修、实习人员管理制度,明确进修、实习人员的职责、权益和培训要求。
1.6 人员档案管理制度病理科应建立完善的人员档案管理制度,及时更新人员信息,确保人员档案的准确性和完整性。
1.7 值班制度病理科应制定值班制度,确保24小时为临床提供及时、准确的服务。
值班人员应具备较高的业务水平和责任心。
三、设施与设备管理2.1 设备管理制度病理科应建立设备管理制度,对设备进行定期检查、维护和更新,确保设备性能稳定。
2.2 实验室设备检测、维护制度病理科应制定实验室设备检测、维护制度,确保设备处于良好的工作状态。
2.3 办公用品、耗材及试剂管理制度病理科应制定办公用品、耗材及试剂管理制度,合理配置资源,确保工作正常进行。
四、标本管理3.1 病理项目种类病理科应根据临床需求,开展相应的病理项目,确保项目种类齐全。
3.2 标本运送制度病理科应制定标本运送制度,确保标本在运输过程中的安全、及时和准确。
病理染色室工作制度

病理染色室工作制度病理染色室是医院病理科的重要组成部分,其主要职责是对临床送检的病理组织切片进行染色、镜检和诊断。
为了确保病理染色室工作的顺利进行,提高诊断准确率,保障患者利益,制定一套完善的工作制度至关重要。
本文从病理染色室的工作特点和实际需求出发,就病理染色室的工作制度进行探讨。
一、工作原则1. 严格执行国家法律法规和相关标准,确保病理染色室工作的合法性、合规性。
2. 遵循医学伦理,尊重患者隐私,确保病理染色室工作符合职业道德要求。
3. 坚持科学、严谨、高效的工作态度,提高病理染色室诊断质量。
4. 注重团队合作,强化岗位职责,确保病理染色室工作有序进行。
二、人员配备与培训1. 病理染色室应配备具有相关专业背景和资质的工作人员,包括病理医师、技术人员等。
2. 定期对病理染色室工作人员进行专业培训,提高业务水平和综合素质。
3. 加强人员考核,确保病理染色室工作人员具备较强的责任心和敬业精神。
三、工作流程与操作规范1. 接收临床送检的组织标本,做好标识和登记,确保标本来源清晰可追溯。
2. 按照标准化操作流程,对组织标本进行固定、脱水、透明化、浸透、包埋、切片等处理。
3. 严格执行染色操作规程,确保染色效果符合诊断要求。
4. 病理医师对切片进行镜检,作出准确诊断,并将诊断结果及时反馈给临床。
5. 做好病理染色室的安全防护工作,防止交叉感染和事故发生。
四、质量控制与质保体系1. 建立病理染色室质量控制制度,包括室内质控和室间质控。
2. 定期进行质量评估,对存在的问题及时进行整改。
3. 加强病理染色室设备的维护和保养,确保设备正常运行。
4. 病理染色室应建立健全档案管理制度,保存病理资料和记录。
五、安全管理与环境保护1. 病理染色室应遵守消防安全规定,配备必要的消防设施和器材。
2. 加强危险化学品的管理,建立清单,定期检查,确保安全。
3. 病理染色室应遵循环境保护原则,加强废弃物处理,降低对环境的影响。
免疫组化操作规程

免疫组化操作规程免疫组化是一种常用的实验技术,用于检测和定位特定蛋白质、抗原或标记物在细胞或组织中的表达和分布情况。
它被广泛应用于病理学、生物学和医学研究中。
以下是一份免疫组化操作规程的示例,供参考。
一、实验前准备1.准备所需材料:组织切片、抗体、缓冲液等。
2.检查试剂和设备是否正常,确保实验所需材料的质量和有效性。
3.清洗工作台和实验器具,确保无细菌和异物。
4.根据实验需要,制定实验计划和操作流程,合理安排实验时间。
二、标本处理1.取出组织切片,将其置于洗涤缓冲液中浸泡,去除可能存在的阻碍抗体结合的物质。
2.如果组织切片需要去除蜡质包埋,可在60°C恒温水浴中使其溶解。
3.将样本置于蛋白酶解液中,进行抗原修复,以使抗原暴露。
三、抗体操作1.根据实验目的和样本特性选择合适的一抗和二抗。
2.确定一抗和二抗的工作浓度,一般根据厂家推荐进行稀释。
3. 将抗体加入到含有牛血清白蛋白和Triton X-100的缓冲液中,制成一抗溶液。
4.将一抗溶液加入组织切片上,使其充分覆盖,孵育时间根据抗体性质而定。
5.用洗涤缓冲液进行洗涤,去除未结合的抗体。
6.加入二抗,孵育一段时间以进行特异性结合。
7.再次用洗涤缓冲液进行洗涤。
四、染色和显微镜观察1.加入显色底物,使目标分子显示出颜色或荧光。
2.使用显微镜观察样本,以获得目标蛋白质的表达和分布信息。
3.根据需要进行图像获取和数据分析。
五、清洗和保存1.清洗实验用具和工作台,防止污染和交叉污染。
2.保存样本和显微镜图像的数据,方便后续分析和检索。
3.处理和处置废弃物,遵循相关安全和环保规定。
注意事项:1.实验操作时应穿戴实验服和手套,采取必要的安全措施,尽量避免直接接触有害试剂。
2.操作过程中严格按照冷链保存抗体,并避免其受到高温和臭氧等破坏因素。
3.各操作步骤中的温度、时间等参数应根据具体实验需要进行优化调整。
4.实验结果的解释需要结合正常组织和阴性对照进行比较和分析。
10 免疫组化工作制度

免疫组化工作制度免疫组化染色已经成为现代病理学中不可或缺的重要工具,准确的免疫组化染色极大地帮助病理诊断,或提供准确的分子治疗靶标;而不准确的免疫组化染色反而产生误导,造成误诊。
因此必须对影响免疫组化染色的各个环节进行严格的质控,对技术人员和病理医师进行培训,保证准确的染色结果和正确的结果判读。
一、免疫组化染色相关操作人员必须经过专门的培训和授权。
二、每一批次的免疫组化染色必须设阳性和阴性对照,可利用组织中的内对照。
三、免疫组化染色方法,按《病理科免疫组化操作常规》严格进行。
必须建立本实验室免疫组化染色的操作规程,并根据染色效果及时更新。
四、更换抗体或试剂后,需要用阳性和阴性组织对新试剂进行有效性验证,并有相应的文字记录和染色切片档案,相关档案保留2年。
五、免疫组化染色过程中产生的有毒液体(如DAB)应存放于指定容器中,专门回收处理,严禁随处倾倒。
六、病理医师必须熟悉各种抗体的染色结果,阳性信号表达部位、其诊断应用范围,以期做到正确的结果判读。
七、免疫组化染色结果必须由病理医师结合形态学综合判断,并将染色结果写到病理报告中。
八、免疫组化染色种类由诊断医师根据临床或病理诊断的需要,参照《病理科常用免疫组化抗体一览表》上的抗体种类范围提出申请,申请时应尽量考虑周全,避免重复切片。
九、技术组负责找出蜡块,根据登记的免疫组化染色项目进行切片,并根据免疫组化染色的种类和数量在蜡片(需要微波修复的抗原,应多切出1-2切片)切出后2-3日完成染色。
十、在染色过程应保持科学的工作态度和严谨的工作作风,熟悉病理科常用免疫组化试剂的种类和处理方法。
严格按照免疫组化标准的操作方法认真制片,制片时应做到四核对(对蜡块的号码、标记的项目、抗体的种类和浓度进行核对)。
要求修复的抗体不能省略该程序,抗体的滴加量应适中,在取得最佳染色结果的前提下,尽量节约抗体,严格控制抗体作用时间,确保制片质量。
十一、操作者应了解和熟悉各种免疫组化试剂在冰箱中存放的位置,工作中尽量减少开启冰箱门的次数和时间,并应观察记录冰箱温度,保证冰箱温度符合要求。
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病理科免疫组化及特殊染色工作制度
免疫组化和特殊染色已经成为现代病理学中不可或缺的重要工具,准确的免疫组化和特殊染色可极大地帮助病理诊断,或提供准确的分子治疗靶标;而不准确的免疫组化和特殊染色反而产生误导,造成误诊。
因此必须对影响免疫组化和特殊染色的各个环节进行严格的质控,对技术人员和病理医师进行培训,保证准确的染色结果和正确的结果判读。
免疫组和特殊化染色是特殊的技术,相关操作人员必须经过专门的培训;每一批次的免疫组化和特殊染色必须设阳性和阴性对照,可利用组织中的内对照;
必须建立本实验室每种免疫组化和特殊染色的操作规程,并根据染色效果及时更新;
更换抗体或试剂后,需要用阳性和阴性组织对新试剂进行有效性验证,并有相应的文字记录和染色切片档案,相关档案保留 2 年;
免疫组化和特殊染色过程中产生的有毒液体应专门回收,严禁随处倾倒;病理医师必须熟悉各种抗体染色结果和特殊染色结果,阳性信号表达部位、其诊断应用范围,以期做到正确的结果判读;
免疫组化和特殊染色结果不能作为最终诊断,必须由病理医师结合形态学综合判断,并将染色结果写到病理报告中。
按免疫组化和特殊染色工作单要求,及时制片,一般要在 1~2
日出结果。
实验室的各种仪器设备,由专人保管和使用,未经保管人允许或主任批准禁止他人使用,精密贵重仪器由专人负责,操作按程序,不得违章操作。
认真做好本实验室文字资料的记录、登记工作,加强各种资料的保管,防止资料丢失。
统计报表及时。