银杏黄酮提取和精制工艺的研究
银杏叶提取 黄酮类化合物提取工艺过程分析
银杏叶提取黄酮类化合物提取工艺过程分析
银杏黄酮有强烈的清除细胞内自由基的作用，能降低细胞的氧化代谢，对脑和四肢动脉血流失调引起的一系列心脑血管疾病有明显和独特的疗效。
传统银杏黄酮提取工艺过程分析如下：
在浸提、过滤工序，传统银杏黄酮提取工艺耗用大量的有机试剂、操作复杂，设备昂贵，试剂损耗较大，直接用水提取，具有成本低廉、提取工艺简单的特点。
在抽滤工序，过滤介质精度低，且属于死端过滤，滤液质量不稳定，会带入较多的杂质，且收率较低。
改进后的银杏黄酮提取工艺过程：
原料→预处理→浸提→过滤→陶瓷膜过滤→卷式膜浓缩→色谱分
离→浓缩→干燥→银杏叶提取物成品
采用管式陶瓷膜系统可直接将高温的浸提液进行错流过滤，得到澄清透明的水提液，将抽滤和离心分离二道工序合二为一。
根据色谱分离对水提液浓度的要求，可以采用卷式有机膜系统进行浓缩，并可对树脂洗脱液做进一步浓缩，从而大大降低了生产成本，提高了收率。
其浓缩液再进行减压浓缩，真空低温干燥。
银杏叶总黄酮提取纯化技术的研究进展_胡春苗
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料比 25 ： 1 （ ml ： g） ，乙醇体积分数 70 % ，微波功率 300 W，微波 其中 D101 型、AB － 8 型应用较多。
时间 60 s，在该条件下银杏叶总黄酮的提取得率为 2． 698 % 。与
D101 大孔弱酸型阳离子交换树脂，其功能基羧基（ － COOH
传统加热法相比，微波辅助提取法可大大提高银杏叶黄酮的提取 ） 与吸咐质黄酮类化合物上的羟基（ － OH ） 之间形成氢键 HO － 率，缩短提取时间，具有操作简便、副产物少等优点，有效克服了 C = O……H － O － ，故能很好地进行吸附。邵京等［14］通过不同型
在此条件下，黄酮提取率为 6． 64 % 。与传统提取方法相比可缩 得出最佳工艺： 将银杏叶黄酮提取原液稀释 1． 5 倍（ 浓度为 0． 94
银杏叶黄酮提取工艺研究
银杏叶黄酮提取工艺研究银杏叶黄酮提取工艺研究引言：银杏树是一种受欢迎的树木，它们因其美丽的叶子和独特的生长模式而备受青睐。
这些树木的叶子含有一种重要的化合物，称为银杏叶黄酮。
银杏叶黄酮在医药和保健领域具有广泛的应用，因其抗氧化、抗炎和抗癌等益处而备受关注。
为了最大限度地提取银杏叶黄酮并确保其质量和纯度，科学家们进行了深入的研究，开发了各种提取工艺。
本文将探讨银杏叶黄酮的提取工艺，包括传统方法和现代方法，以及对这一概念的理解。
提取工艺的背景：银杏叶黄酮作为一种天然药物，具有广泛的药理活性。
因此，开发有效的提取工艺至关重要。
过去，传统的提取方法包括水煎法、浸泡法和热回流法。
这些方法相对简单，但存在一些缺点，如提取效率低、操作复杂等。
随着科学技术的进步，现代的提取方法也得到了广泛应用，包括超声波提取、微波提取和高压萃取等。
这些现代方法在提取效率和提取速度方面具有优势，但也存在一些挑战，如仪器设备的复杂性和成本的增加。
传统方法与现代方法的对比与评估：传统提取方法相对简单，但提取效率比较低，需要较长的提取时间。
水煎法是最常用的传统方法之一，它可以从银杏叶中提取黄酮化合物。
水煎法操作简单，但提取效率较低，对溶剂需求较多。
浸泡法是另一种传统的提取方法，它需要将银杏叶和溶剂浸泡一段时间，以提取黄酮。
尽管浸泡法提取过程简单，但提取效率依然有限。
热回流法是一种将溶剂与银杏叶混合后加热并循环回流的方法，以达到提取黄酮的目的。
尽管热回流法提供了更高的提取效率，但操作相对复杂。
相比之下，现代的提取方法在提取效率和提取速度方面更具优势。
超声波提取是利用超声波辐照的方式，使溶剂中的黄酮分子释放出来。
通过超声波的作用，能够有效地破坏细胞壁，提高提取效率。
微波提取是利用微波辐射能量使溶剂中的黄酮分子挥发。
与超声波提取相比，微波提取具有更快的提取速度和更高的提取效率。
高压萃取是利用高压下的溶剂来提取黄酮。
高压萃取可以在较低的温度下提取黄酮，从而减少了热敏化和氧化的风险。
银杏叶中黄酮的提取分离及测定1
四、实验步骤
3、测定：
(1)标准曲线的绘制： 精确称取芦丁标准样品50.0mg，置 于50mL烧杯中，加少量70%乙醇使之完全溶解，转入50mL容 量瓶中，再用70%乙醇定容至刻度，摇匀，得1.0mg/mL的芦 丁标准溶液，再分别吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL芦 丁标准溶液置于 50mL 容量瓶中，按照下述方法配置显色溶液； 各 加 70 % 乙 醇 使 成 2 5mL ，然 后分别加入 5%N a N O2 溶液 1.5mL ，摇匀，放置 6min 后，再加 10%Al （ NO3 ） 3 溶液 1.5mL,摇匀，放置6min后，加NaOH溶液20mL,最后用蒸馏水 稀释至刻度（ 50mL ），摇匀，放置 15min 后，以不加芦丁的 试剂为空白，用紫外光分光光度计测定510.0nm处的吸光度。 以浓度c为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，得到回 归方程。
四、实验步骤
1、粗提物： 称取干燥和粉碎的银杏叶粉末 50克，装入索氏提取器 的滤纸套袋中，在500ml圆底烧瓶内加入250ml60%乙醇， 用65-80℃水浴加热。连续提取3h左右，等叶子颜色变浅 可停止加热。待在虹吸管内冷凝液刚落下时，立即停止加 热，改成旋转蒸发器，减压蒸去溶剂即得棕黑色的银杏浸 液-液萃取法： 在500mL烧杯中，将银杏浸膏粗产物 加250mL去离子水，搅拌均匀，再将此溶液转移至分液漏 斗中，用 60mL 二氯甲烷萃取三次，取下层液，合并萃取 液。用无水NaSO4干燥。用旋转蒸发器蒸去二氯甲烷，蒸 馏剩余物为黄酮提取物。经干燥后称重，计算产率。
三、化学药品及仪器
1、化学药品 乙醇（20%、60%、70%） 二氯甲烷 无水硫酸钠 氢氧化钠溶液（0.5mol/L） 盐酸溶液（0.5mol/L） 银 杏叶粉末
银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究
验 " 研究了浸取温度 $ 乙醇含量和固液质量比对黄酮类化合物提取率的影响 % 结果显示温 度是影响提取率的主要因素 " 最佳工艺为浸取温度 K8 Q " 乙醇的体积分数为 F8X 和固液 质量比 >YF "银杏叶中黄酮类化合物的浸出率可达到 V!U%X % 关键词 银杏叶 & 黄酮类化合物 & 乙醇 & 提取 中图分类号 5Z!%DU
银杏黄酮提取工艺及纯化研究一、引言银杏黄酮作为一种天然的活性成分，具有广泛的生物活性和药用价值。
由于其在保健品和医药领域的广泛应用，银杏黄酮的提取工艺及纯化研究备受关注。
本文将对银杏黄酮的提取工艺以及纯化过程进行探讨。
二、银杏黄酮的提取工艺2.1 原料准备在进行银杏黄酮的提取前，首先需要准备好优质的银杏叶。
选取新鲜的银杏叶，通过去杂、洗净等处理方法，获得干燥均匀的原材料。
2.2 提取方法2.2.1 传统提取方法传统的银杏黄酮提取方法通常采用溶剂提取的方式。
具体步骤如下： 1. 将粉碎后的银杏叶与适量的有机溶剂（如乙醇）进行浸提。
2. 在适当的温度下，反复搅拌并浸提一定时间。
3. 过滤提取液，获得含有银杏黄酮的溶液。
4. 通过浓缩、脱色等步骤，得到纯化的银杏黄酮。
2.2.2 新型提取方法近年来，一些新型的银杏黄酮提取方法也得到了广泛应用。
如超声波辅助提取、微波辅助提取等。
这些新型提取方法具有高效、省时等特点，在提取工艺中发挥着重要的作用。
三、银杏黄酮的纯化研究3.1 纯化方法3.1.1 水相反萃取法水相反萃取法是一种常用的纯化方法，其步骤如下： 1. 将含有银杏黄酮的提取液与适量的水进行充分混合。
2. 静置一段时间，使得银杏黄酮被水相萃取。
3. 分离水相和有机相，得到含有高纯度银杏黄酮的水相。
3.1.2 分子筛吸附法分子筛吸附法是一种利用分子筛材料对银杏黄酮进行吸附的方法。
具体步骤如下：1. 将含有银杏黄酮的溶液与分子筛进行接触。
2. 利用分子筛对银杏黄酮进行吸附。
3. 通过适当的溶剂洗脱等步骤，得到高纯度的银杏黄酮。
3.2 精制技术3.2.1 重结晶技术重结晶技术是一种常用的精制技术，通过溶解和结晶的过程，使得杂质与银杏黄酮分离。
其步骤如下： 1. 将纯化后的银杏黄酮溶解于适量的溶剂中。
2. 加热溶液，使银杏黄酮充分溶解。
3. 慢慢降低温度，促使银杏黄酮结晶。
4. 过滤结晶物，获得重结晶的银杏黄酮。
银杏黄酮制备实验
实验四、银杏黄酮的提取与检测一、实验目的：1、了解黄酮类物质的分离提取和检测方法。
2、了解大孔吸附树脂的特性和在生化分离中的应用。
二、实验原理：1、提取原理溶剂加到原料中进行提取的过程中，由于扩散、渗透作用，逐渐通过细胞壁透入细胞中，溶剂进入细胞后溶解可溶性物质，造成了细胞内外浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入植物细胞中，可溶性成分不断被提取出来，如此多次反复，直到细胞内外浓度相等，达到动态平衡为止。
2、大孔吸附树脂纯化原理：大孔吸附树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸附剂，是在离子交换剂和其它吸附剂应用基础上发展起来的一类新型树脂，为用于固体萃取而设计。
是依靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作的。
大孔吸附树脂吸附能力高，易解吸，内部微孔即多又大，表面积也大，具有较多的活性中心，使离子、分子扩散速率增大，交换速度加快，在使用上可以缩短生产周期，提高效率，而且大孔吸附树脂可以进行再生重复使用，因此使生产成本大为降低，适于工业化生产。
3、银杏黄酮含量的分光光度法测定原理黄酮类化合物的测定使用较广泛的是络合—分光光度法，该法的基本原理是，黄酮类化合物分子结构中，凡在C 3或C 5位上有羟基，都会与铝盐形成有颜色的配位化合物，见图：O O OAl 2+O OOAl2黄酮和铝盐的络合物芦丁因此，银杏叶中的黄酮类化合物包括单黄酮、双黄酮和黄酮苷都能与铝盐形成络合物，比色测定结果是总黄酮含量。
硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在500波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般与芦丁标准系列比较定量.如果细说,硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮，再加硝酸铝络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2’羟基查耳酮而显色.它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的.三、仪器：电子天平（0.1mg ）、紫外分光光度计、恒温水浴摇床、电热恒温水浴锅、索氏提取器、电热恒温干燥箱、微波炉、超声波破碎仪、超声波清洗机、旋转蒸发器、循环水式真空泵、布式漏斗、真空抽率瓶、真空泵。
银杏叶黄酮的提取纯化工艺研究
1、实验材料
银杏叶：采集于健康无病虫害的银杏树，清洗干净后晾干备用。
Hale Waihona Puke 2、提取方法将清洗晾干的银杏叶粉碎成细粉，称取一定量的细粉加入到80%乙醇溶液中， 在60℃下进行回流提取，每次提取时间为1小时，提取3次。将提取液过滤，回 收乙醇，并加入适量水稀释至适当浓度备用。
3、纯化方法
采用大孔吸附树脂法进行纯化。将备用液通过大孔吸附树脂柱，用水洗脱至洗 脱液接近无色，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇并加入适量水稀释 至适当浓度备用。
参考内容
引言
银杏叶是一种具有多种生物活性的天然植物，其提取物中含有丰富的黄酮类化 合物，如儿茶素、黄酮醇、黄烷醇等。这些化合物具有显著的抗氧化、抗炎、 抗肿瘤等生物活性。因此，研究银杏叶总黄酮的提取纯化及其抗氧化性能具有 重要意义。本次演示旨在探讨银杏叶总黄酮的提取纯化方法及其抗氧化性能。
材料与方法
4、抗氧化性能测定
采用DPPH自由基清除法测定抗氧化性能。取适量纯化后的银杏叶总黄酮溶液与 等体积的DPPH溶液混合，室温下放置30分钟，在517nm处测定吸光度A1。同时 以无水乙醇为空白样品的吸光度A0进行对照。以Vc为阳性对照。根据公式：清 除率=（A0-A1）/A0×100%，计算银杏叶总黄酮对DPPH自由基的清除率。
结论
本研究成功地探索了一种高效提取纯化银杏叶总黄酮的方法，并对抗氧化性能 进行了研究。实验结果表明，采用80%乙醇回流提取和过大孔吸附树脂纯化可 以得到高纯度的银杏叶总黄酮，并且对DPPH自由基具有较强的清除作用。这一 发现为开发高效安全的抗氧化药物提供了新的思路和方法。
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银杏叶黄酮的提取纯化工艺研究
01 引言
03 研究目的 05 结果与讨论
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溶液制备：分别精密称取经 P2O5 干燥过夜的槲 皮素、山柰素、异鼠李素对照品，加甲醇制成每 1mL 分别含 0.0299，0.0387，0.015mg 的溶液，作为对照品 溶液。精密称取固体样品 0.05g，液体样品吸取样品 2mL 蒸干，将固体样品或者液体样品残渣加甲醇 - 25％盐酸溶液 (4∶1) 混合液 25mL 溶解，移入 250mL 烧瓶中，回流 30min，冷却，转移至 50mL 量 瓶中，以甲醇定容，摇匀，滤过，即得供试品溶液。
比选择 1∶15。
2.4 溶剂逆流循环提取对提取效果的影响
由于提取过程中第 2 遍和第 3 遍的提取液远 没有达到饱和，因此，设计将溶剂逆流循环使用，固
液比：第 1 遍 1∶5、第 2 遍 1∶5、第 3 遍 1∶5，将第 一轮的第 2 遍萃取液作为第二轮的第 1 遍使用，第 二轮的第 3 遍和作为第二轮第 2 遍，第 3 遍使用新 溶剂，然后第二轮的第 2 遍萃取液作为第三轮的第 1 遍使用，这样依次循环下来，保证提取溶剂每次提 取溶剂都达到饱和，并且浓缩时只浓缩第 1 遍料 液 ，减 少 了 浓 缩 量 ，降 低 了 生 产 消 耗 ；提 取 温 度 为 65℃，时间为每遍 2h。考察逆流循环提取的效果见 表 4。
70%乙醇 整叶
提取液
浓缩
调 pH 浓缩液
浓缩液
pH=5
加水沉淀
上柱纯化 清液
解析液 喷雾干燥
产品
离心分离
2 结果与讨论
目前，对银杏叶中黄酮类化合物的提取,广泛使 用的以乙醇 - 水溶液(70％乙醇)和纯水为浸取溶剂 进行生产。结果表明：1 次浸取 2 h，计算黄酮类化合 物的浸出率，乙醇 - 水体系高于水体系。综合考虑 能耗和得率成本，故本实验选 70％乙醇作为浸取溶 剂。
2.3 固液比对提取效果的影响
在提取 3 遍，提取时间 3h，提取温度 65℃条件
下，选取总固液比 1∶9，1∶15，1∶18 的条件,考察
固液比对提取银杏叶中总黄酮含量的影响, 以考察
提取完的渣中的含量检测提取率，结果见表 3。
表 3 固液比对黄酮提取率的影响 Tab.3 Effect of solid-to-liquid ratio to extraction ratio of
ture 65℃; solid-liquid ratio 1∶5; number of extraction times: 3. The experiment studies the refining technique of
Ginkgo flavonoids; it determines using D101 macroporous resin, the fluid column should be adjusted to pH 5, re－
吸附流出液浓度 /mg·mL-1
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 吸附流出体积 /BV
图 1 D101 树脂对银杏黄酮的动态吸附效果
Fig.1 Dynamic adsorption effect of D101 resin to ginkgetin
树脂型号 AB- 8 产品含量 /% 23.8 黄酮得率 /% 70.1
LXA- 8 22.9 72.8
LX- 38 24.0 63.7
D101 25.5 73.6
HZ- 841 23.5 70.3
由于目前市场上银杏产品黄酮含量大于 24%， 因此，选择 D101 作为下步实验用树脂。
D101 树脂的动态吸附效果见图 1。
2.5 树脂选择
选择树脂需要考察树脂的分离效果和产品的 含量两项指标才能确定树脂的使用，因此，选择了 5 种树脂：AB- 8、LX- 38、D101、LXA- 8、HZ- 841，进行 实验，实验结果见表 5。
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韩学哲等：银杏黄酮提取和精制工艺的研究
2011 年第 04 期
表 5 不同树脂的产品含量和得率 Tab.5 Content and yield of different resin production
择浸取温度 65℃为宜。
2.2 提取遍数对提取效果的影响
在提取每遍固液比 1∶5，提取 5 遍，提取时间 2h 条件下，考察提取遍数对银杏叶中总黄酮提取率 的影响，结果见表 2。
表 2 提取遍数对黄酮提取率的影响 Tab.2 Effect of extraction times to extraction ratio of flavone
测定法：分别精密吸取上述对照品溶液与供试
2011 年第 04 期
韩学哲等：银杏黄酮提取和精制工艺的研究
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品溶液，注入液相色谱仪，测定，分别计算 3 种黄酮 苷元的含量，以下式换算成总黄酮醇苷的含量。总 黄酮醇苷含量 = (槲皮素含量 + 山柰素含量 + 异鼠 李素含量)×2.51。
1.3 银杏黄酮的提取工艺过程
项目
第1遍 第2遍 第3遍 第4遍 第5遍
黄酮提取率 /% 61.3 28.2 7.9
1.5
1.1
由表 2 数据可以看出，提取遍数增多，提取率 增大，当提取遍数在第 4 遍时，浸出率 1.5%，第 5 遍
和第 4 遍相差 0.4%，提取遍数再增多浸出率没有增长
太多，考虑到生产成本，故选择提取遍数 3 遍为宜。
solved by ethonal and refined Ginkgo flavonoids 24% can be obtained.
Key words：Ginkgo biloba; flavonoids; cycle extraction; refining
银杏叶提取物(Ginkgo Biloba Extract)的主要含 有是银杏黄酮和内酯两大活性成分[1 ]，其中银杏黄 酮有效成分包括：银杏双黄酮 (gilobetin)、白果素 (bilobetin)、槲皮素(quercetin)、山奈 酚 (kaempferol)等 都具有 3,3,4- 三羟基结构的物质[2 ]，具有抗氧化、降 血脂、抗肿瘤等方面的作用[ 3 ]。鉴于银杏叶中黄酮具 有独特的生理作用、临床治疗和保健价值[4 ]，使GBE 及其制剂一直为国际国内研究开发的热点之一 [5 ]。 目前，银杏叶中银杏黄酮的得率不高, 生产消耗较 大,对满足市场需求不利,因此，不断探索银杏叶中 黄酮新的提取、精制工艺，提高得率，降低成本，以 达到节能增效的目的,具有很现实的意义。本研究旨 在通过实验研究,筛选最佳工艺,提高黄酮得率,降低 生产成本。
表 4 循环提取工艺银杏黄酮的提取率 Tab.4 Extraction ratio of flavone by extraction process cycling
轮次 提取率%
第一轮 第二轮 第三轮 第四轮 第五轮 62.0 84.8 91.2 91.3 91.6
由表 4 数据可以看出，逆流循环提取，提取溶 剂能达到饱和，提取率达到非循环提取效果，并且 溶剂使用量、浓缩量较非循环提取能减少三分之二。
温度 /℃
45
55
65
70
80
黄酮提取率 /% 52.7 55.2 60.6 60.9 60.5
由表 1 数据可以看出，温度升高，提取率增大， 当提取温度在 65℃和 70℃时，浸出率仅差 0.3％， 温度再升高提取率反而有所下降。这是由于银杏黄 酮苷的分子结构中，存在多个酚羟基，酚羟基性质 很不稳定，在温度较高时易被空气氧化所致，故选
Abstract：Flavonoids were extracted from Ginkgo leaf circularly by using component solvent of ethanol water.
Extraction conditions were optimized through the experiments. Extraction solvent: ethanol 70%; extraction tempera －
配银杏黄酮浓度为 3mg·mL-1 的溶液，吸附流 速为 2BV·h-1，处理 11BV 的料液，每处理 1BV 的物
料液收集一次流出液并用液相检测银杏黄酮的含
量。从图 1 中可知，3 个树脂床体积气有泄漏，未达
到饱和之前，吸附柱内被吸附的银杏黄酮的浓度由
上至下梯度降低，因而采用串联吸附方式，可以使
2.1 提取温度对提取效果的影响
在提取固液比 1∶5，提取 1 次，提取时间 2h 条 件下，选取温度 80 、70 、65 、55、45℃的条件,考察温 度对银杏叶中总黄酮提取率的影响, 不同温度下提 取结果见表 1。
表 1 温度对黄酮提取率的影响 Tab.1 Effect of temperature to extraction ratio of flavone
Sum 187 No.4
化学工程师 Chemical Engineer
2011 年第 4 期
文章编号：1002-1124（2011）04-0060-03
工
程
师 园
银杏黄酮提取和精制工艺的研究
地
韩学哲，王东双，安晓东，连运河
(1. 河北省天然色素工程技术研究中心，河北 邯郸 057250；2.晨光生物科技集团股份有限公司，河北 邯郸 057250)
州理工大学化学工艺专业，主要研究方向：天然产物提 取。
工艺条件。
1 实验部分
1.1 仪器和试剂
Agilentl200 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司)。 银杏叶(从山东郯城收购)；乙醇(食品级)，其他 试剂均为分析纯。槲皮素，山萘酚,异鼠李素对照品 均购于上海同田生物技术有限公司。