细菌分类鉴定方法的研究进展
细菌分子鉴定技术的研究进展
Ｗ ＡＮＧ ｏ－ｈ ｅ ｌ ｆ ｙ Ｌ ｂ ｒｔｒ ｆＩｄ ｔ ａ ｏｅ ｈｎ ｌｇ Ｈａ ｚ ｕ ｔａ ａ ｏ ａｏｙ ｏ ｎ ｕｓｒ ｌＢｉｔｃ ｏｏ ｙ．Ｃｕ ｔｒ ｎｄ Ｉｆ ｒ ｔ ｎ Ｃｅ ｔｒｏ ｎ ｕ ｔ ａ ｃｏ ｒ ａ ｉｍｓｏ ｉａ Ｋｅ ｉ ｌｕ ｅ ａ ｎｏ ｍａｉ ｎ ｅ ｆＩ ｄ ｓｒ ｌＭｉｒ ｏｇ ｎｓ ｆＣｈｎ ｏ ｉ
细菌在 生化循环 （ 、 以及其他 矿物质 ） 能 源转化 、 碳 氮 、 生
物催化等方 面扮演着重 要角色 ， 这使得 细菌 在新 的工业 和生
物 医学方法领 域成为重 要 的资源 。然 而 ， 目前 已知 的细 菌 种类有 限 ， 大概 有 ６３０种 。随 着越来 越 多 的细菌 的发 ７ 现， 对其分类 鉴定也就 变得非常 重要 。虽然 目前传 统 的表型 和化 学鉴定方 法是不可 缺少 的 ， 但是很 多种 属之 间生理生 化
鉴 定方法 。 １ 多位点 测序技 术 （ Ｓ ＭＬ Ｔ）
注 ： 用 限 制 性 片段 长度 分 析 （ Ｆ Ｐ）扩 增 的 ｒＮ 限制 性 分 应 ＲＬ 、 ＤＡ 析 （ Ｒ Ｒ 、 性梯 度 凝 胶 电泳 （ Ｇ Ｅ） 温 度 梯 度 凝 胶 电 Ａ Ｄ Ａ） 变 ＤＧ 、 泳 （ Ｇ Ｅ）单 链 构 象 多肽 性 （Ｓ Ｐ 、 光 原 位 杂 交 （ ＩＨ） ＴＧ 、 ＳＣ ）荧 ＦＳ 方 法 进 行 格局 分 析 。
Ｕ ｉｅｓ ｙ ｎｖ ｒｔ ，Ｍｉｉ ｒ ｆ ｄ ｃ ｔ ｎ Ｗｕ ｉ Ｊａ ｇｕ２ ４ ２ ） ｉ ｎｓ ｏ ｕ ａｉ ， ｘ． ｉｎ ｓ １ １ ２ ｔ ｙ Ｅ ｏ
DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展
DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展DNA测序是一种广泛应用于研究和诊断领域的技术，它能够揭示生物体的遗传信息。
对于非结核分枝杆菌（non-tuberculous mycobacteria，NTM）的鉴定和分类也可以借助DNA 测序的技术手段进行研究。
非结核分枝杆菌是一类常见的病原微生物，可以引起多种疾病，如肺炎、淋巴结炎等。
由于非结核分枝杆菌的种类繁多，传统的病原学鉴定和分类方法往往存在一些局限性，例如需要繁重的实验操作、缺乏灵敏度等。
而DNA测序则可以通过测定非结核分枝杆菌的基因组序列，来准确鉴定并分类不同的菌株。
近年来，随着高通量测序技术的发展，使得DNA测序研究在非结核分枝杆菌的鉴定和分类中得到了广泛应用。
通过对非结核分枝杆菌的基因组DNA进行测序，可以获取大量的遗传信息，例如基因组组成、基因间的序列差异等。
这些信息可以用于构建非结核分枝杆菌的遗传关系树，进而进行鉴定和分类。
在非结核分枝杆菌的DNA测序研究中，常用的方法包括全基因组测序和16S rRNA基因测序。
全基因组测序是一种高通量的测序方法，可以获得非结核分枝杆菌的整个基因组序列，从而揭示其完整的遗传信息。
而16S rRNA基因测序则是一种相对简单的测序方法，可以通过对非结核分枝杆菌的16S rRNA基因进行测序，来获取其与其他细菌的区别。
通过DNA测序的方法，研究人员已经对非结核分枝杆菌的分类和鉴定进行了一系列的研究。
利用全基因组测序技术，可以将非结核分枝杆菌进一步分为不同的种类和亚种，进而帮助医生选择更合适的治疗方法。
一些新的非结核分枝杆菌的种类也得到了发现和鉴定。
一项研究发现了一种名为Mycobacterium sherrisii的新的非结核分枝杆菌种类，并对其进行了基因组分析和药物敏感性测试。
DNA测序技术在非结核分枝杆菌的鉴定和分类方面取得了显著的进展。
随着技术的不断发展和完善，相信DNA测序技术将在非结核分枝杆菌的研究和临床应用中发挥越来越重要的作用。
基于生物信息学的微生物分类与鉴定研究
基于生物信息学的微生物分类与鉴定研究第一章概述微生物是一类重要的生物资源，具有丰富的生物学功能和广泛的应用前景。
其中，微生物分类与鉴定是微生物学研究中至关重要的一环。
近年来，随着生物信息学技术的快速发展，基于基因组学等手段对微生物分类与鉴定的研究得到了极大的促进。
本文将对基于生物信息学的微生物分类与鉴定的相关研究进行介绍和探讨。
第二章基于生物信息学的微生物分类生物信息学技术能够帮助我们更深入地理解微生物之间的生物学关系并进行更精确的分类。
其中，微生物分类的主要手段包括基因序列分析、代谢物分析、形态学特征等。
基于基因序列分析的微生物分类方法主要包括传统的16S rRNA序列分析和全基因组序列分析。
16S rRNA序列是细菌和古菌的小亚基核糖体RNA的部分序列，是进行细菌和古菌分类的重要工具。
与之相关的16S rRNA分析方法是一种基于比较序列相似度的分类方法，可以用于快速鉴定和分类细菌。
近年来，由于基因组学技术的发展，全基因组序列分析也被广泛应用于微生物分类中。
全基因组序列分析方法可以通过比对细菌全基因组的变异点来准确地分类和鉴定不同的微生物。
此外，微生物菌种分类的目的之一是确定该菌的有效名称。
基于基因组序列的分类方法可以使得命名更加准确和规范化。
第三章基于生物信息学的微生物鉴定微生物鉴定是通过对微生物形态特征、生理生化指标及代谢物等进行分析，根据某些标准，确定微生物种属及其学名的过程。
随着微生物鉴定技术的不断升级和生物信息学技术的发展，基于生物信息学的微生物鉴定方法也不断更新。
基于多重PCR技术的微生物鉴定技术是一种便捷、快速的鉴定方法。
在该技术中，通过选择和设计特定的引物，以鉴定特定目标基因的变异模式为依据，对微生物进行快速鉴定。
此外，基于基因测序技术的微生物鉴定方法也相当流行。
这种方法利用基因测序技术，通过对微生物基因组序列的分析，进行物种鉴定。
它可以进行更加快速、精确的微生物鉴定和分类。
第四章生物信息学在微生物分类和鉴定中的应用近年来，生物信息学在微生物学研究中的应用越来越广泛。
两株异养硝化—好氧反硝化细菌的分离、筛选、鉴定和特性研究
两株异养硝化—好氧反硝化细菌的分离、筛选、鉴定和特性研究一、本文概述本文旨在探讨两株异养硝化-好氧反硝化细菌的分离、筛选、鉴定及其特性研究。
异养硝化-好氧反硝化细菌是一类特殊的微生物，能够在好氧条件下进行硝化和反硝化过程，对于氮循环和环境保护具有重要意义。
本文首先通过分离和筛选方法，从自然环境中获取两株具有异养硝化-好氧反硝化功能的细菌，并对其进行初步的生理生化特性分析。
接着，采用分子生物学手段对这两株细菌进行鉴定，明确其分类地位和系统发育关系。
在此基础上，进一步深入研究这两株细菌的生长特性、硝化反硝化性能、以及环境因子对其生长和代谢的影响。
本文的研究结果不仅有助于深入了解异养硝化-好氧反硝化细菌的生物学特性和生态学功能，同时也为该类微生物在环境修复、污水处理等领域的应用提供理论支撑和实践指导。
二、材料与方法为了分离和筛选异养硝化—好氧反硝化细菌，我们从多个不同的生态环境中采集了土壤和水样，包括污水处理厂、河流、湖泊以及农田土壤等。
为了培养和筛选目标细菌，我们使用了多种培养基，包括常规的好氧反硝化培养基和异养硝化培养基。
这些培养基根据细菌的生长特性和需求进行了优化。
实验过程中使用了多种分子生物学试剂，如PCR引物、DNA提取试剂盒等。
同时，还使用了多种仪器，如PCR仪、凝胶电泳仪、微生物培养箱等。
采用稀释涂布法将采集的样品接种到含有相应培养基的平板上，通过观察菌落的形态、大小和颜色等特征，初步筛选出具有异养硝化—好氧反硝化能力的细菌。
通过形态学观察、生理生化特性分析以及分子生物学方法（如16S rDNA序列分析）对筛选出的细菌进行鉴定。
对筛选和鉴定出的细菌进行详细的特性研究，包括生长曲线测定、异养硝化速率测定、好氧反硝化速率测定等。
还研究了环境因子（如温度、pH、碳源和氮源等）对细菌生长和硝化反硝化活性的影响。
实验数据采用统计学方法进行分析，以揭示细菌的生长规律和硝化反硝化特性。
还通过图表等形式直观地展示了实验结果。
细菌分类鉴定的分子生物学方法研究进展
细菌分类鉴定的分子生物学方法研究进展一、本文概述随着分子生物学技术的快速发展，其在细菌分类鉴定领域的应用已经取得了显著的进展。
本文旨在对细菌分类鉴定的分子生物学方法研究进展进行系统的梳理和总结，以期为相关领域的学者和从业人员提供全面的科研进展参考。
本文将重点介绍分子生物学技术在细菌分类鉴定中的应用，包括基因测序技术、PCR技术、基因芯片技术、宏基因组学方法等，并探讨这些技术在细菌分类鉴定中的优势、挑战以及未来发展趋势。
同时，本文还将对近年来细菌分类鉴定领域的重要研究成果进行综述，以期为细菌分类鉴定领域的研究提供有益的参考和启示。
二、细菌分类鉴定的传统方法及其局限性传统的细菌分类鉴定方法主要依赖于细菌的表型特征，包括菌落形态、细胞形态、生理生化特性、血清学反应以及生态习性等。
这些方法在过去的一个多世纪里为细菌学的发展做出了重要贡献，随着科学技术的进步和细菌学研究的深入，传统方法的局限性逐渐显现。
传统方法的鉴定过程往往繁琐耗时，需要经过多步实验操作，包括细菌培养、形态观察、生理生化试验等，这不仅增加了实验成本，也限制了鉴定效率。
传统方法对于某些表型特征相似的细菌种类往往难以准确区分，容易出现误判或漏判的情况。
传统方法对于新出现的、未知的或者难以培养的细菌种类往往束手无策，无法进行有效的鉴定。
随着分子生物学技术的发展和应用，人们开始尝试将分子生物学方法引入细菌分类鉴定领域，以期能够更快速、更准确地进行细菌鉴定。
分子生物学方法以其高灵敏度、高分辨率和高通量的特点，为细菌分类鉴定提供了新的可能性和解决方案。
三、分子生物学方法在细菌分类鉴定中的发展与应用近年来，分子生物学技术的飞速发展极大地推动了细菌分类鉴定领域的研究进展。
这些技术以其高度的特异性和灵敏度，为细菌分类鉴定提供了全新的视角和强大的工具。
在细菌分类鉴定中，16S rRNA基因序列分析已成为最常用的方法之一。
16S rRNA基因在细菌中高度保守，同时又在不同种属间存在足够的变异，使得其成为细菌分类鉴定的理想靶标。
细菌的分类
放线菌、酵母菌与真菌的分类与特点
• 放线菌（Actinomycetes） • 分类：属于放线菌门（Actinomycetes），放线菌纲（Actinomycetales） • 特点：具有分支状菌丝体，需用显微镜观察，具有多种代谢途径，部分放线菌具有致病性，如结核分枝杆菌（ Mycobacterium tuberculosis）
生长环境
• 厌氧细菌主要分布在缺氧环境中，如肠道、沼泽、土壤 等 • 厌氧细菌可与其他细菌共生，形成复杂的微生物生态系 统
厌氧细菌的主要类群与代表物种
梭菌科（Clostridiaceae）
• 代表物种：梭状芽孢杆菌（Clostridium）、肉毒梭菌（Clostridium botulinum） 等 • 生理特性：严格厌氧，可产生多种毒素，如肉毒毒素、破伤风毒素等
02 弧菌科（Vibrionaceae）
• 代表物种：霍乱弧菌（Vibrio cholerae）、副溶血性弧 菌（Vibrio parahaemolyticus）等 • 生理特性：好氧或兼性厌氧，代谢多样性，可产生多种 酶和毒素，部分菌种具有致病性
03 嗜血杆菌科（Haemophilusaceae）
生长繁殖方式： 革兰氏阳性细 菌主要通过二 分裂方式进行 生长繁殖，生 长速度较快
革兰氏阳性细菌的主要类群与代表物种
01 链球菌科（Streptococcaceae）
• 代表物种：链球菌（Streptococcus）、乳球菌 （Lactococcus）等 • 生理特性：嗜氧或兼性厌氧，代谢多样性，可产生多种 酶和毒素
我国植物内生菌研究进展
我国植物内生菌研究进展一、概述植物内生菌，指的是在其生活史的某一阶段或全部阶段生活在健康植物组织内部的微生物。
这些微生物与宿主植物建立了复杂而微妙的共生关系，对植物的生长、发育和抗逆性等方面产生深远影响。
近年来，随着生物技术的快速发展和人们对植物微生物互作认识的加深，植物内生菌的研究已成为国内外生物学、农业科学和生态学等领域的热点之一。
我国作为世界上生物多样性最为丰富的国家之一，拥有大量的植物种类和丰富的植物内生菌资源。
在过去的几十年里，我国科研人员在植物内生菌的分离鉴定、功能挖掘和应用开发等方面取得了显著进展。
这些研究不仅增进了我们对植物内生菌多样性和生态功能的理解，也为农业可持续发展、生态环境保护和人类健康提供了新的思路和策略。
本文旨在综述我国植物内生菌研究的最新进展，包括植物内生菌的分离鉴定技术、种类多样性、功能特性、生态分布以及应用前景等方面。
通过系统总结和分析近年来的研究成果，旨在为植物内生菌的深入研究提供理论支撑和实践指导，同时也为我国农业生物技术的创新发展和生态环境保护贡献力量。
1. 内生菌定义与分类内生菌（Endophytes）是一类在植物组织内部生活而不引起明显病害症状的微生物，它们存在于植物的健康组织中，与宿主植物建立了密切的共生关系。
这些微生物可以是细菌、真菌或放线菌，它们的生活史大部分时间都在植物组织内部度过，从中获取营养并进行繁殖。
根据分类学上的特点，内生菌可分为多种类型。
内生真菌是最常见的一类，它们广泛存在于各种植物组织中，包括种子、叶片、茎干和根部等。
这些真菌与植物之间建立了复杂的相互作用关系，对植物的生长发育和抗逆性产生重要影响。
内生细菌也是一类重要的内生微生物。
它们存在于植物的组织和细胞间隙中，与植物建立共生关系，对植物的生长和健康状况具有重要影响。
与内生真菌相比，内生细菌在植物体内的数量和种类相对较少，但它们对植物的生长和抗逆性也具有重要作用。
除了内生真菌和内生细菌外，还有一些其他类型的内生微生物，如放线菌等。
Deinococcus属细菌分类和应用的研究进展
７ ３
Ｄｅ ｏｏｃ ｓ 细 菌分 类 和 应 用 的研 究 进 展 ｉ ｃｃｕ 属 ｎ
陈 立 ， 瑞 云 ，董俊 兴 邢
（ 事 医 学科 学 院 放 射 与 辐 射 医学 研 究 所 ， 京 军 北 １０ ５ ） ０ ８０
摘
要
Ｄ ｉ ｃｃｕ 属 茵株 是 一 类 对 引起 细胞 致 死 效应 的 辐射 有 极 强 抵 抗 能 力 的 细 茵 。 目前 已 有 ２ 个有 效 ｅ ｏｏｃｓ ｎ ３
Ａｄ ａ ｃ ｎ Ｔａ ｏ ｍ ｙ ａ ｖ ｎ ｅ ｉ ｘ ｎｏ ｎｄ Ａｐｐ ｉ ａ ｉ ｎ ｆ ｔ ｅ ｕ ｉ ｏ ｏ ｃ ｓ ｌｃ ｔｏ ｏ ｈｅ Ｇ ｎ ｓ Ｄｅ ｎ ｃ ｃ ｕ
Ｃ ＨＥＮ Ｌ ，ＸＩ ｉｙ ｎ，ＤＯ ｕ — ｉ ｇ ｉ ＮＧ Ｒｕ － ｕ ＮＧ Ｊ ｎ ｘｎ
１ Ｄｅ ｏｏｃｓ 的分 类 学特 征 ｉ ｃｃｕ 属 ｎ
细胞 多数 呈 球形 或杆 状 ， 形 细 胞革 兰染 色 球 反 应多 呈阳性 ， 杆状 细胞革 兰 反应 则 多呈 阴性 ； 不 形成 内生孢 子 ， 具运 动性 ； 落颜 色 多呈 红 至桔 不 菌 黄色 ， 落 表 面 干燥 、 呈 褶 皱 。化 能 有 机 营 养 菌 稍 型 ， 氧化氢 酶 阳性 ， 化酶 多 为 阴性 。在贫 营养 过 氧 的培养 基上 生 长 良好 ， 多数 菌株 在 一 般 培 养 基 但 上都能 够生 长。不 同菌 株对 温度 耐 受 范 围差 异 较
分支 上 ， 该分 支 紧邻 于 Ｔ ｅｍ ｓ属… ， 以 Ｍｉ ｏ ｈｒ ｕ 与 ｃ． ｒ
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细菌分类鉴定方法的研究进展目录细菌分类鉴定方法的研究进展........................................................................错误!未定义书签。
摘要 . (2)ABSTRATC (2)1、引言..............................................................................................................错误!未定义书签。
1.1细菌分类鉴定 (2)1.1.1 细菌常规鉴定方法 (2)1.1.2细菌的数值分类和自动化鉴定 (3)1.1.3化学分类鉴定法 (3)1.1.4分子遗传学分类鉴定法 (3)1.2细菌分类鉴定方法的前景 (3)细菌的鉴定方法的介绍与总结 (3)1、细菌常规鉴定方法 (3)1. 1 免疫诊断技术 (4)1. 1. 1 凝集试验 (4)1. 1. 2 免疫酶技术 (4)1.1. 3 免疫荧光技术 (4)1. 1. 4 放射免疫测定技术 (4)1. 1. 5 免疫胶体金标记技术 (4)1. 2 蛋白质图谱分析 (4)2、细菌的数值分类和自动化鉴定 (4)3、化学分类鉴定法 (5)3.1 磷脂脂肪酸分析技术（PLFA）[6] (5)3．2 高效液相色谱（HPLC）[7] (5)3.3 气相色谱（GC）[7] (5)4、分子遗传学分类鉴定法 (5)4. 1 细菌染色体DNA G+ C mol %含量测定 (5)4. 2 核酸杂交技术 (5)4. 3 限制性核酸内切酶分析法 (6)4. 4 质粒图谱分析法 (6)4. 5 脉冲场凝胶电泳分析法 (6)4. 6 PCR技术 (6)4. 7 16SrRNA 序列和16S～23SrRNA 间区序列分析法 (6)4. 8 微生物全基因组测序 (7)6、参考文献 (7)细菌分类鉴定方法的研究进展摘要细菌分类鉴定方法包括表型鉴定法和分子遗传学鉴定法两大类,分成4个水平:细菌形态和生理生化水平、细胞组分水平、蛋白质水平和核酸水平。
表型鉴定法是对前3个水平的鉴定,包括常规鉴定法、数值分类鉴定法和化学分类鉴定法。
分子遗传学鉴定法[1]是核酸水平的鉴定,对细菌染色体或质粒DNA 进行分析,核酸杂交、PCR 技术、16SrRNA 和16 ～23SrRNA 序列分析、全基因组测序等,此类方法使细菌种属定位和亲源关系判别由表型特征深化为基因型鉴定。
本文主要来介绍各种分类方法以及每种方法的优缺点。
关键词：细菌分类鉴定表型鉴定分子遗传学鉴定Bacterial classification and identification of theresearch progressABSTRATCBacterial classification and identification method two categories, including the the phenotype identification method and molecular genetic identification method is divided into four levels: the bacterial morphological and physiological and biochemical level, the level of cellular components, protein level and the nucleotide level. The phenotypic identification law is the identification of the first three levels, including conventional identification method, numerical classification and identification and chemical classification identification method. Identification of molecular genetics method [1] is the identification of the nucleic acid level, analysis of the bacterial chromosome or plasmid DNA, nucleic acid hybridization, PCR, 16SrRNA and the 16 ~ 23SrRNA sequence analysis of whole-genome sequencing, such positioning method bacterial species and phylogenetic discrimination by the deepening of the phenotypic characteristics of genotyping. This paper is mainly to introduce the various classification methods as well as the advantages and disadvantages of each method.Key word ：Bacterial classification and identificationPhenotypic identification Molecular genetic identification1、引言1.1细菌分类鉴定1.1.1 细菌常规鉴定方法细菌常规鉴定法是细菌形态和生理生化水平及蛋白质水平的鉴定,前者是最经典、最常用的分类鉴定指标,也是现代化分类鉴定的依据,后者包括免疫诊断技术、蛋白质图谱分析和氨基酸序列分析等。
1.1.2 细菌的数值分类和自动化鉴定目前应用较多的自动化鉴定系统主要有:Vitek - AMS(Automated Microbic System) [2]、Biolog、MicroScan 、Entero2tube 、MIDI、Sensititte 、Autosceptor 、Crystal 等鉴定系统。
数值分类法是近20 年来发展起来的细菌分类理论,它应用大量已知菌对相关生化试验反应出现的频率得出数据进行分析,优化组合数10 项生理生化指标集合成套试剂,根据相似系数大小判断细菌种属间的亲源性。
自动化微生物鉴定系统即采用数值分类原理。
微生物数值分类鉴定集数学、电子、信息及自动分析技术于一体,具有系统化、标准化、微量化和简易化等优点,采用商品化的鉴定测试卡,将未知菌鉴定到属、种、亚种或生物型,可不同来源的临床标本进行针对性鉴定,所得结果以数字方式表达,与数据库数据(手册或软件) 对比得出鉴定结果。
1.1.3 化学分类鉴定法20 世纪50 年代中期由Cummins 和Harris 建立起来的化学分类鉴定法[3]主要通过细菌细胞壁化学成分即氨基酸和糖的分析进行分类鉴定,属的分类主要测定各种氨基酸组分,种的鉴定主要是对糖的分析。
另外,还有全细胞水解液糖型分析、脂肪酸分析、磷酸类脂成分分析、枝菌酸分析、醌类分析和光合色素成分分析等,常使用红外光谱、气相色谱、高效液相色谱和质谱等新技术。
1.1.4 分子遗传学分类鉴定法分子遗传学分类法是以微生物的遗传型（基因型）特征为依据，判断微生物间的亲缘关系，排列出一个个的分类群。
目前较常使用的方法有：细菌染色体DNA G+ C mol %含量测定、核酸杂交技术、限制性核酸内切酶分析法、质粒图谱分析法、脉冲场凝胶电泳分析法、PCR技术、16SrRNA 序列和16S～23SrRNA 间区序列分析法、微生物全基因组测序1.2细菌分类鉴定方法的前景每种鉴定方法均有其优点和缺陷,常规鉴定法常出现表型表达不稳定、敏感性不高、测试项目多、费时费力等问题;免疫诊断技术若无相应抗体则无法鉴定;细菌自动化鉴定适于快速鉴定,但目前数据库中模式菌种数量有限,部分细菌只能鉴定至属,对革兰氏阳性菌和厌氧菌的鉴定效果较差;分子遗传学鉴定是从本质上阐明细菌间的亲源关系,但所需试剂和仪器昂贵,鉴定时间较长,专业性强,适于科研上的细菌分类研究,不适于基层和临床微生物的快速鉴定。
因此,细菌分类鉴定必须同时使用几种方法或系统全面鉴定,表型鉴定和分子遗传学鉴定结合可对未知菌进行准确合理定位,目前应充分利用和完善现有鉴定技术,继续积累核酸数据库资源,研究和推广新的分子遗传学鉴定法,使其在敏感性、特异性和实用性上更适合细菌快速准确鉴定的需要,使其发挥应有的和更大的作用。
随着细菌鉴定方法的不断建立和完善,将为科研和临床工作者提供简便、快速、准确、微量、灵敏和成本低廉的检测方法和更先进、更全面的检测手段。
细菌的鉴定方法的介绍与总结1、细菌常规鉴定方法1. 1 免疫诊断技术1. 1. 1 凝集试验目前常用的是葡萄球菌协同凝集试验(SPA - CoA) ,金黄色葡萄球菌细胞壁的A 蛋白(SPA) 能与动物血清中IgG的Fc 结合,成为致敏的颗粒载体,特异性IgG的Fc 与SPA 结合后, F ( ab’) 2 段暴露在葡萄球菌表面,与相应细菌反应呈现凝集现象,此法用于细菌快速鉴定和分型。
1. 1. 2 免疫酶技术免疫酶技术( EIA , Enzymeimmunoa2ssay) 是将酶标记的抗抗体与抗原—抗体复合物结合形成抗原- 抗体- 酶标记抗抗体复合物,加入酶底物产生有色产物。
以酶联免疫吸附测定( ELISA) 和斑点酶联免疫吸附技术(Dot - ELISA) 应用较广泛。
1.1. 3 免疫荧光技术免疫荧光技术( FIA , Fuorescenceimmunoassay) 是将一抗滴加于待检抗原上,再加一抗的荧光抗体(二抗) ,呈现特异性的荧光抗原抗体复合物以鉴定病原菌。
此法比ELISA 更直观,可直接观察到菌体形态。
1. 1. 4 放射免疫测定技术放射免疫测定( RIA , Rad2ioimmunoassay) 是用放射性同位素标记抗原或抗体,与相应的抗体或抗原结合后通过放射自显影定性和定量抗原或抗体。
1. 1. 5 免疫胶体金标记技术胶体金是继酶、荧光素和放射同位素后免疫标记技术中令人瞩目的新标记物。
胶体金是氯金酸(HAuCl4) 在还原剂如白磷、枸橼酸钠等的作用下,聚合成特定大小的金颗粒,通过静电作用与抗体或抗原形成一种稳定的胶体状态,即为免疫金,免疫金与相应的抗原抗体结合后,呈现特定的颜色反应。