组织培养
植物的组织培养方法
植物的组织培养方法植物组织培养是一种无性繁殖技术，通过培养植物的各种器官组织，包括种子、茎、叶和根的细胞和组织，使其在适当的条件下进行生长和分化，从而产生新的植株。
这项技术已被广泛应用于农业、园艺、林业和植物学研究中。
以下是植物组织培养的一般步骤和方法：1. 材料准备：首先，选择适合的植物作为材料，常用的包括水果、蔬菜和花卉植物。
收集新鲜的种子、茎、叶或根，并进行消毒处理，以防止细菌、真菌和其他病原体的污染。
2. 植物组织的分离：将植物材料切成小块或将细胞分离开来。
对于植物的种子，可以直接将种子表面进行消毒处理后，在培养基上进行培养；对于茎、叶和根等组织，则需要进行切割处理。
3. 培养基的准备：制备适当的培养基是进行植物组织培养的重要步骤。
培养基通常由无机盐和有机添加剂组成，以提供植物生长所需的营养物质。
根据组织的不同类型，可以使用不同种类和浓度的培养基。
4. 培养基的调整：将分离的组织放入培养基上，可以将培养基涂覆在组织表面上，或者将组织植入培养基中。
然后，在无细菌的条件下，将组织培养在适当的温度、湿度和光照条件下。
5. 激素的添加：植物生长激素是控制植物生长和分化的关键因素。
在组织培养中，可以根据实验的需要添加适量的激素来促进细胞分裂和分化。
常用的激素有生长素、细胞分裂素和愈伤组织生成素等。
6. 愈伤组织的诱导：愈伤组织是植物组织培养中产生的一种可分化细胞。
通过搅拌、震荡或辐射等途径，诱导组织分化成愈伤组织，然后将其继续培养。
7. 植株的再生：通过培养基中激素的平衡调节，可以使愈伤组织再生为整个植株。
在培养基中，植株的幼苗养分丰富，需要的培养基成分和激素浓度可能与之前的不同。
8. 培养环境的控制：为了使植物组织正常生长和分化，需要控制培养环境的参数。
例如，可以调节培养基的pH值、光照强度、温度和湿度等因素。
9. 组织转化：经过培养，植物组织中可以引入外源基因，使其具有某种特定的性状，这被称为转基因。
植物组织培养
1.植物组织培养（离体培养）：是指在无菌条件下，将植物体的任何一部分，培养在人工配制的培养基上，并给予适宜的培养条件，使之发育形成完整植物体的过程。
2、植物组织培养的类型（1）根据培养基的类型分为:固体培养液体培养半液半固体培养（2）根据培养材料（外植体类型）分为：植株培养器官培养组织培养原生质体培养胚胎培养细胞培养（3）按培养过程分：初代培养继代培养生根培养3、植物组织培养的一般工作流程1.准备阶段：（1）查阅资料，制定培养方案；（2）清洗组培用器皿、工具；（3）配制所需试剂和培养基；（4）试剂、培养基与器皿、工具的灭菌。
2.外植体的选择与消毒；3.初代培养；4.继代培养；5.生根培养；6.炼苗移栽4、植物细胞的全能性概念：指植物体的每个活细胞都携带有该物种的全套遗传信息，在适宜条件下，离体细胞都具有发育为一个完整植株的潜在能力。
注意：（1）活细胞（2）离体细胞（3）细胞全能性表达的难易程度取决于细胞的分化程度5、细胞全能性的强弱表现：（1）植物细胞全能性根据细胞的性质不同由强到弱：营养生长中心＞形成层＞薄壁细胞＞厚壁细胞（木质化细胞）＞特化细胞（导管等）（2）植物细胞全能性根据所处的组织不同由强到弱：顶端分生组织＞侧生分生组织＞居间分生组织＞薄壁组织＞厚角组织＞输导组织＞厚壁组织6、植物组织培养中全能性表达的条件：1.无菌条件；2.离体条件；3.一定的营养物质；4.植物生长调节物质；5.适宜的外界条件。
7、胚性细胞的特点：未分化状态；细胞具有旺盛分裂能力；具有两极性8、脱分化：指在一定条件下，已分化成熟的细胞、组织或器官恢复到未分化的分生状态，并进行细胞分裂形成未分化的细胞团，如愈伤组织的形成过程。
9、愈伤组织形成的三个时期：（1）诱导期又称启动期（最难）。
（2）分裂期（3）分化期10、优良愈伤组织的特征：（1）具有旺盛的增殖能力；（2）容易散碎；（3）具有高度的胚性或再分化能力，便于植株再生；（4）经过长期的继代保存而不丧失胚性。
组织培养的分类
组织培养的分类
植物组织培养概念(广义)又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织。
器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
植物组织培养概念(狭义)指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
按外植体分，植物组织培养可分以下几类：
1.胚胎培养植物的胚胎培养，包括胚培养、胚乳培养、胚珠和子房培养，以及离体受精的胚胎培养技术等。
2.器官和组织培养器官培养是指植物某一器官的全部或部分或器官原基的培养，包括茎段、茎尖、块茎、球茎、叶片、花序、花瓣、子房、花药、花托、果实、种子等。
组织培养有广义和狭义之分。
广义：包括各种类型外植体的培养。
狭义：包括形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组织和各种器官组织，以及其培养产生的愈伤组织。
3.细胞培养细胞培养包括利用生物反应器进行的，旨在促进细胞生长和生物合成的大量培养系统和利用单细胞克隆技术促进细胞生长、分化直至形成完整植株的单细胞培养。
4.原生质体培养植物原生质体是被去掉细胞壁的由质膜包裹的、具有生活力的裸细胞。
植物组织培养的七大步骤
植物组织培养的七大步骤植物组织培养是一种通过体外条件、培养基和植物激素等手段，从植物的细胞或组织片段中培养出完整植株或其它的植物器官的生物技术方法。
它在现代生物技术和农业生产中有着广泛的应用。
下面将详细介绍植物组织培养的七大步骤。
步骤一：组织材料的选择与处理植物组织培养的第一步是选择合适的组织材料。
组织材料可以是从植物的各个部位（如根、茎、叶）中获得的发育中组织片段或细胞。
在选择组织材料时，需要考虑到植物的种类、性别、生长期等因素。
同时，在取材时要注意保持材料的活性和无菌状态，以避免外部微生物的污染。
步骤二：材料的消毒和无菌处理在进行植物组织培养之前，必须对组织材料进行消毒和无菌处理。
常用的消毒方法有热处理和化学消毒法。
热处理是将组织材料放入含有消毒剂的培养基中，在适当的温度下进行反复处理，以达到杀灭细菌和真菌孢子的目的。
化学消毒法是使用一些消毒剂如过氧化氢、酒精等对组织材料进行处理，以达到无菌状态。
步骤三：培养基的配制与过滤培养基是植物组织培养的基础，它提供了植物生长所需的营养和生长因子。
培养基的配制需要根据组织材料的特性和需求来确定。
一般来说，培养基包括有机营养物、无机盐、糖类、维生素、植物激素等成分。
配制好的培养基需要进行过滤，以去除其中的颗粒物和微生物，保证培养基的无菌状态。
步骤四：培养体外的组织将经过消毒和无菌处理的组织材料，放在含有适当培养基的培养容器中。
培养容器可以是培养皿、瓶子或装载体。
然后，将培养容器放在恒温恒湿的光照条件下进行培养。
在培养过程中，需要定期检查培养容器的状态，确保培养基和气氛的正常。
步骤五：选择培养因子和激素在组织培养过程中，可以根据需要添加不同的培养因子和激素，以促进组织的生长和发育。
常见的培养因子包括生长素、细胞分裂素、维生素等，它们可以提供植物生长所需的营养物和调节植物生长的信号。
激素包括植物生长素、植物激素、生长激素等，它们可以调节植物的生长和发育，促进组织的分化和再生。
生物学中的组织培养
生物学中的组织培养一、组织培养(Tissue culture)的含义组织培养，简单地说即把来自机体的细胞、组织或器官放于类似于体内的体外环境中使其存活或/和生长、增殖。
严格地区分，它又可分为细胞培养(cell culture )：指细胞在体外的生长、增殖，但培养中的细胞不再结合成组织；组织培养：指组织在体外存活生长，并保持其结构和/或功能及进行分化；器官培养(Organ culture)：指器官的原基、全部或部分器官在体外的存活生长，并保持其结构和/或功能及进行分化。
但组织培养一词又常泛地指各种体外培养。
更广义地说，组织培养可包括人及动物的组织培养，植物的组织培养以及病毒培养等。
各种不同的组织培养在方法上虽有其不同和特殊要求，但它们又有共同的基本原则和技术。
本文主要从人和动物细胞培养的角度加以介绍。
二、组织培养技术的出现和发展早在19世纪末就开始了对活细胞的体外观察与保存工作。
1885年Roux用生理盐水培养鸡的神经板，发现它可在盐水中生活一段时间。
1887年Arnold 用一种巧妙的方法培养白细胞，他将赤杨木的髓质薄片浸于蛙的体液中，然后种植到蛙的皮下，当将髓片取出置于盐水中时，可观察到白细胞从髓片上向盐水内移动并能较长时期保持它的生活力。
1903年Jlly分别将皮肤及白细胞培养于腹水及血清中，细胞存活可达一周到一个月，并看到了细胞分裂。
但真正的组织培养应归功于1907年Harrison的努力，他为探讨神经纤维的真正来源，从蛙胚中分离出一部分神经管，培养在一滴蛙的淋巴液中，成功地看到了神经纤维的末端不停地进行阿米巴运动，其中一根神经纤维在25分钟之内长到20微米，另一根在50分钟内长到25微米，最长的达到了200微米。
这一发现不仅解决了当时争论不休的神经纤维的起源问题，也是在后来组织培养中悬滴培养法的开始。
1912年Carrel发现鸡胚浸出液对多种细胞生长有高度促进作用，他将7天鸡胚心脏的组织块培养在血浆和鸡胚提取液的混合物中，当细胞生长出晕后再把它分成两分进行培养，在当时没有抗菌素，所以细菌污染是一个最大的困难，但由于Carrel是一个有成就的实验外科学家，有丰富的无菌操作知识，所以在他的努力下鸡胚细胞的培养连续维持了34年之久。
组织培养概念
组织培养概念
组织培养是指组织通过各种培训和发展活动，提升员工的能力、知识和技能，以适应组织的需求和改变。
它是组织人力资源管理的重要组成部分，旨在不断提高员工的绩效和职业发展，并为组织的长期发展打下人才基础。
组织培养的目标是培养具备所需核心能力和技能的员工，以满足组织的战略目标和竞争优势。
通过培养，组织可以帮助员工掌握专业知识、技术和技能，提高工作效率和生产力。
此外，培养还可以培养员工的领导力和解决问题的能力，提高员工的自我认知和自我管理能力，促进员工的职业发展。
组织培养的方法包括内部培训、外部培训、培训项目和活动。
内部培训指由组织内部的培训师或高级员工进行的培训课程和工作坊。
外部培训则是通过聘请外部专业培训机构或顾问来进行培训。
培训项目和活动包括工作轮岗、参加工作项目和小组、参加专业组织会议和讲座等。
组织培养的关键是根据组织战略和人力资源需求，制定培养计划和目标。
这需要组织对员工进行绩效评估和需求分析，了解员工的培养需求和潜力。
在培养过程中，组织可以通过设立培训计划和指定培养路径，制定培养计划和目标，提供培训资源和支持，评估培养效果等，以保证培养的有效性和可持续性。
总之，组织培养是一种提升员工能力和素质的重要手段，不仅能够满足组织的人力资源需求，也能够促进员工的个人和职业发展。
组织培养技术的原理
组织培养技术的原理
嘿，恁问组织培养技术啥原理啊？那咱就好好唠唠。
组织培养技术这玩意儿啊，听着挺高深，其实也不难理解。
咱先说说啥是组织培养。
就是把一小块植物或者动物的组织，放在一个合适的环境里，让它能长大成一个完整的个体。
就像一个小种子，能长成一棵大树一样。
那它咋就能长大呢？这就靠细胞的分裂和分化。
细胞就像一个个小工人，它们会不断地分裂，一个变两个，两个变四个。
然后这些新的细胞会根据需要，变成不同的组织和器官。
就像盖房子一样，先有砖头，然后把砖头砌成墙，再盖成房子。
组织培养的环境也很重要。
得有合适的营养物质，就像人得吃饭一样，细胞也得有吃的才能长大。
还得有合适的温度、湿度和光照，不能太热也不能太冷，不能太干也不能太湿。
就像人得在一个舒服的地方才能生活得好。
还有啊，得防止细菌和病毒的感染。
要是有细菌和病毒，细胞就长不好了，就像人要是生病了，就没力气干活了。
所以得给细胞创造一个干净的环境，让它们能健康地长大。
咱举个例子哈。
俺村里有个种花的老王，他就用组织培养技术种兰花。
他先从一棵好的兰花上取一小块组织，放在培养瓶里。
然后给它加上合适的营养物质，放在一个温度、湿度都合适的地方。
过了一段时间，那些细胞就长成了一棵棵小兰花。
老王可高兴了，他说这组织培养技术可真厉害，能让他种出这么多好兰花。
所以啊，组织培养技术的原理就是靠细胞的分裂和分化，在合适的环境里让组织长大成一个完整的个体。
咱要是想种点啥好东西，也可以试试这技术。
组织培养在植物繁育中的应用及优势
组织培养在植物繁育中的应用及优势植物繁育中的组织培养技术，是一种常用的生物技术手段。
这种技术可以使所有植物细胞在无性条件下自我分裂，从而形成一定规律的新植株。
该技术的应用范围很广，可以帮助农业生产、森林资源培育、园林绿化等领域。
本文将从应用范围、优势等方面，探讨组织培养在植物繁育中的应用及优势。
一、应用范围1.农业生产组织培养技术可以促进农业种植业的发展。
农产品可以通过组织培养，使得单株产量提高，减少了播种量，节省了土地资源，也有利于农业生产管理的效率提升。
同时，该技术可用于农作物的良种繁育，使得农作物的品质、产量等方面也有了较大提升。
2.森林资源培育森林是重要的资源消耗来源。
组织培养技术可以培育出速生、优质的林木品种，进而为人们提供更好的森林资源。
同时，还可以有效减轻森林的损失问题，减小人为干扰的影响。
3.园林绿化组织培养技术在园林绿化领域中也有重要的应用。
它可以用于花卉和草坪等绿化工程的建设和维护。
在现代城市中，园林绿化的意义越来越重要，而该技术可以有效提升园林绿化的质量，节省建设过程中的时间和成本。
二、优势1.高效性组织培养技术可以大大提高植物生长的速度和效率。
在营养基的帮助下，一株细胞随时可以分裂成几十、几百、甚至上千的新植株。
这种方法有利于高效率繁殖大量的植株，而且效率极高。
具体来说，它是实现植物快速生长、快速繁殖和生成大量的相同品种的最佳方法。
2.可控性组织培养技术可以完全控制植物生长的过程。
营养基可以被制成有机体的感性环境，通过控制施肥和营养的方式操控其生长。
因此，可以制造出特定的植物衍生物质，从而满足市场或生产需要。
3.方便性组织培养技术可以在相对较小的空间内帮助培育大量植物，不需要耗费大量的土地资源，减少建设成本。
同时，该方法不需要特殊的设备，且易于操作，可以在标准实验室环境中进行。
总之，随着生物技术的不断发展，组织培养技术在植物繁育中的应用越来越广泛。
组织培养技术的应用范围已经涉及到农业等大量领域，优势显著，可以达到高效、可控、方便等目的。
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在铁皮石斛组织培养研究进展组织培养摘要：近年来，对铁皮石斛的需求日趋增加，而野生资源难以满足市场需求，组织培养技术使大规模人工栽培成为可能。
从种子萌发、原球茎分化、生根与壮苗、原球茎增殖等方面阐述了近年来关于铁皮石斛组织培养技术的研究概况，并展望了发展前景。
铁皮石斛为兰科石斛属植物，是传统名贵中药材。
神农本草经》《列为上品，具有益胃生津、滋阴清热、止咳润肺的功效。
现代药理研究表明，石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的作用。
由于石斛自然繁殖力低，种子需与真菌共生才能萌发，加上长期采挖，使得野生铁皮石斛资源日渐枯竭，成为濒危植物，被列为国家重点保护的野生药材品种。
为了满足市场的需求，国内许多科研人员进行了铁皮石斛组织培养技术的研究。
1 种子萌发 1.1 胚龄不同种龄的种子萌发率不一样。
叶秀嶙等取铁皮石斛 2~ 6 个月种龄的种子进行组织培养发现，种龄愈长，萌发率愈高。
2 个月种龄的种子接入改良 N6 培养基中，萌发率仅为 6 % ; 3 个月种龄的种子接入改良叹培养基中，培养 2 周后开始萌发，萌发率为 87 % ; 4 一 6 个月种龄的种子接入培养基中，只要培养一周即可萌发，萌发率为 95 ％。
曾宋君等将铁皮石斛种子接入改良 N6 培养基中进行组织培养，亦得到相似的结论，幼胚胚龄在 60d 以下时，萌发率极低，随着胚龄的增长，其萌发期逐渐缩短，萌发率逐渐升高，成苗率也逐渐升高，但到达一定的胚龄后，差异并不明显。
1.2 基本培养基铁皮石斛种子在 N6，改良 N6，MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、 KundsonC , 1 / 2N6，White 等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、 MS 等 14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以 N6 最好，SH 、Kn 、MS 次之，l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。
曾宋君等田将铁皮石斛种子在 SH 、改良 N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养，得出最适培养基为改良 N6 或自制 PT 培养基。
罗吉凤等比较了 MS 、l / 2MS 、 1 / 2 N6 和 White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响，30d 种子发芽率均达到 95 % ，但 1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。
1.3 激素在培养基中添加一定浓度的 NAA 可促进种子的萌发，浓度以 0.2 一 0.5mg/L 最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。
2 , 4-D 对胚的萌发起抑制作用。
6 一 BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。
KT 、IAA 对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过 1mg/L 时，对胚萌发和成苗起抑制作用。
ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用，但张铭等发现 ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量，浓度以 0.5mg/L 为最佳。
1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发，但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响，干扰其正常发育过程。
1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根，可加人 2 ％蔗糖。
曾宋君等在改良 N6＋NAA 0.2mg/L 的最适培养基上，发现以白糖、片糖为炭源时，胚萌发和成苗的效果比蔗糖好，这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素 2 原球茎增殖 2.1 基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以 1/2 MS，MS 等作为基本培养基。
张治国等研究了 6 种不同培养基对铁皮石斛原球茎增殖的影响，结果表明， /2 l MS 是原球茎增殖的适宜培养基。
2.2 激素适宜的 NAA 、KT 、6 一 BA 浓度对原球茎的增殖起促进作用。
唐桂香等以 1 / 2 MS 为基本培养基，发现 BA 1.0mg/L 和NAAO.lmg/L 有利于原球茎诱导增殖。
蒋林等叫研究表明，l / 2Ms + NAA1.0mg/L+ KTO.2mg/L 比较适合嗓球茎的增殖。
蒋波等以 1 / 2MS 为基本培养基.添加 BA 2.0mg/L + NAA0.5mg/L 或 6 一 BA3.0mg/L + NAAO.5 mg/L 的激素，原球茎的增殖系数较大。
陈兆贵等认为原球茎增殖以 MS + NAA1.0mg/L + 6 一 BA1.0mg/L + KT1.0mg/L 为最佳，35d 增殖倍数达到 5 倍。
2.3 天然添加物椰子汁、苹果汁对原球茎的增殖有较好的效果，但香蕉汁对原球茎的增殖有抑制作用。
张治国等认为原球茎增殖时最好不添加任何天然提取物。
2.4 炭源添加活性炭能使原球茎的增殖量显著增加，这可能是活性炭吸附了某种不利于原球茎增殖的物质，蔗糖浓度 0.5 ％~0.3 ％。
周根余等比较了不同炭源对铁皮石斛原球茎生长的影响，发现原球茎在蔗糖中生长最快，浓度 3 % ，葡萄糖中其次，而乳糖中最慢。
3 原球茎分化3.1 基本培养基铁皮石斛原球茎分化可以 1 / 2 MS， MS 等作为基本培养基。
张治国等比较了 VW 、N6、l / 2MS 、B5、KC 等 6 种基本培养基对原球茎分化的影响，发现 6 种基本培养基附加马铃薯提取液和植物激素后，原球茎均可分化，但以 1 /2MS 培养基作为原球茎分化的基本培养基最适宜，叶色浓绿，出苗整齐，这与刘瑞驹等困的报道一致。
3.2 激素培养基中添加 BA 和 NAA 后可加快原球茎分化的进程。
张治国等报道了 BA 和 NAA 不同的组合及浓度对原球茎分化的影响，在分化前期（40d ) ，高浓度的 BA 和低浓度 NAA 组合，加快原球茎分化进程，一 2 片叶的分化苗占 50 ％以上， 2mg/L BA 和 0.2mg/L NAA 1 以组合最好。
培养到 60d 后 NAA 浓度高的组合，分化苗整齐．尤其是 0.2mg/LBA 和2mg/LNAA 组合，小苗生长发育快。
蒋波等报道以 1 / 2 MS 为基本培养基，添加BA2.O mg/L + NAAO.2 mg/L 或 BA3.Omg/L 十 NAAO.2mg/L 的激素，有利于原球茎的分化。
陈兆贵等以 MS + NAA1.Omg/L + 6 一 BAmg/L + KT1.0mg/L 为培养基， 45d 原球茎分化率达 84 ％。
罗吉凤等认为原球茎分化适宜的培养基为 1 / 2MS 十 BA2mg/L+ NAA 0.2mg/L 十 IBAO.1mg/L＋蔗糖 3%。
唐桂香等研究发现，BA 对原球茎诱导芽影响大，而 NAA 对原球茎诱导芽影响小。
3.3 天然添加物土豆汁、马铃薯提取液能有效促进原球茎的分化，香蕉汁对原球茎的分化有抑制作用。
3.4 炭源培养基中加人活性炭能促进原球茎的分化际。
张治国等研究了蔗糖浓度对原球茎分化的影响，发现蔗糖为 2 ％时，分化率为100 % ，此时原球茎的增殖率达最高，当蔗糖为 3 ％时，原球茎不再分化，且增殖率随蔗糖浓度的增高而下降。
这可能是因为培养基的渗透压过高，抑制了原球茎的分化和生长。
故在原球茎分化中，蔗糖浓度以 3 ％为分化的临界值，而蔗糖 2 ％为原球茎分化的适宜浓度。
4 生根与壮苗4.1 基本培养基铁皮石斛试管苗生根壮苗常用的基本培养基有 1/2 MS、MS、B5、N6 等。
赵天榜等研究 N6、MS 等 14 种培养基对铁皮石斛种胚苗生长的影响，以从最好，SH 、MS 次之，1 / 2MS 、1 / 2VW 最差。
张玲等比较了 MS 、B5、N6 、KC 四种培养基对幼苗生长的影响，发现 N6 培养基最有利于幼苗的生长，其株高和根数都比其它培养基好， B5 次之。
刘弊等比较了 1 / 2 MS 、B5、VW 、KC 等 4 种基本培养基对试管苗生长的影响，发现培养到 120d 时，残培养基上的小苗生长最好，其次为 l /2MS 培养基，而 KC 和 VW 培养基上的试管苗生长明显不如 B5 和 1 / 2 MS 。
4.2 激素在基本培养基中添加 NAA、IAA、IBA 等激素有助于试管苗生根壮苗。
赵天榜等在 1 / 2N6 培养基内添加 2mg/L 或 lmg/L NAA ，可提高石斛种胚苗分桑率 6 . 00 一 7.14 倍。
唐桂香等研究了不同 NAA 含量对铁皮石斛苗成活率和生根的影响，结果表明 NAA 有助于试管苗的生根，以 0.5mg/L 试管苗平均根数最多和平均根长最长。
4.3 天然添加物在基本培养基中加人香蕉汁、马铃薯汁、孽葬汁、绿豆芽汁、苹果汁仁、椰子乳等能促进铁皮石斛幼苗的生长和根系的发育，香蕉汁的促进作用最为显著。
4.4 炭源铁皮石斛在生根培养时加入活性炭有利于试管苗的生长，能使根系长得更加粗壮闭。
唐桂香等认为在培养基中添加活性炭有助于提高试管苗的成活率，但对苗的根数和根长影响小。
5 其他外植体的离体培养其他外植体的离体培养除种子作外植体外，以铁皮石斛的茎尖、茎段、幼叶、种胚苗、幼根为外植体，均可培育出组培苗。
以茎尖、茎段为外植体，培养途径为茎尖、茎段一诱导形成不定芽～不定芽增殖～不定芽分化～生根壮苗，形成完整试管苗。
5.1 不定芽诱导曾宋君等比较 N6、MS 、KS 、VW 、KC 等培养基，以 MS 为基本培养基效果较好。
朱艳等比较 1 / 2 MS 、B5、改良 N6 、KC 等 4 种培养基对茎段分化丛生芽的影响，结果表明以 1 / 2 MS 诱导丛生芽效果最好。
张伟等比较 N6、MS 、1 / 2N6、1 / 2 MS 等培养基对试管苗生长的影响，结果表明，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以改良 N6 最佳，MS 次之。
张启香等比较 l / 2MS 、MS 、 VW 等培养基，结果表明以 1 / 2MS 诱导效果最好。
周俊辉等比较 N6、B5、MS 、KC 等 4 种基本培养基对铁皮石斛芽诱导和增殖的影响，以 B5 效果最好。
NAA、6 - BA、KT、IBA、LH 在不定芽诱导过程中具有良好的促进作用， NAA 浓度通常 0.1~0.5mg/L, 6 一 BA 浓度通常 0.5 一 2.0mg/L。
5.2 不定芽增殖将丛生芽切割后继续在此培养基上培养，可增殖产生大量丛生芽。
在不定芽增殖培养中可添加香蕉汁、土豆汁、椰子汁等天然附加物，周俊辉等认为添加椰子汁对芽的增殖效果最好。
5.3 生根壮苗生根壮苗适宜的培养基有 N6 ＋ 10 ％香蕉汁， 1 / 2 MS 十 IBAO.lmg/L，/ 2MS 十 10 ％香蕉汁十 0.5 % AC， l 改良 N6 十 0.2mg/L NAA + 10 ％香蕉汁，MS + NAAO.05 mg/L , + KTO.1mg/L,＋叶酸 2.0mg/L+ La 稀土 10mg/L，1 / 2 MS + NAAO.7mg/L 等。