药理实验方法学(第二版)中关于LD50的部分
ld50测定
实验一、LD50的测定[目的] 通过测定药物LD50的方法、步骤和计算过程，了解急性毒性试验的常规。
[材料] 小鼠50只(体重17－25g，雌雄各半) 注射器及针头1. 探索剂量范围取小鼠8-10只，以2只为一组分成4-5组，选择组距较大的一系列剂量，按腹腔注射哈顿佐剂，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0％及100％死亡率(至少应找出引起20％—80％死亡率)剂量的所在范围。
2. 进行正式试验在预初试验所获得的0％和100％致死量范围内，选用5个剂量按等比级数增减；尽可能使半数组的死亡率都在50％以上，另半数组的死亡率都在50%以下。
每组10只左右，动物的体重和性别要均匀分配。
完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始，以使能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整。
LD50测定中应观察记录的项目：1、实验各要素：实验题目，实验日期，室温，检品的批号、规格、来源、理化性状、配制方法及所用浓度等；动物品系、来源、性别、体重、给药方式及剂量(药物的绝对量与溶液的容量)和给药时间等。
给药后各种反应；潜伏期(从给药到开始出现毒性反应的时间)；中毒现象及出现的先后顺序，开始出现死亡的时间；死亡集中时间；末只死亡时间；死前现象。
逐日记录各组死亡只数。
尸解及病理切片：从给药时开始记时，凡两小时以后死亡的动物，均及时尸解以观察内脏的病变，记录病交情况．若有肉限可见变化的则需进行病理检查．整个实验一般要观察7-14天，观察结束时，对全部存活动物称重，尸解，同样观察内脏病变并与中毒死亡鼠尸解情况相比较。
当发现有病变时，也同样作病理检查，以比较中毒后病理改变及恢复情况。
2、结果计算根据试验设计，采用相应的方法计算LD50，一般采用按Reed－Muench法计算或寇氏改进法karber法。
实验二、急性毒性试验试验目的：急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次（间隔6-8小时），观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官和观察指标的设计提供参考信息等。
药物LD50的测定ppt课件
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新斯的明
【药理作用】可逆性抑制Ach E，使Ach蓄积而产生 Ｍ、Ｎ样作用。
１、对骨骼肌的兴奋作用最强。 ２、对胃肠道及膀胱平滑肌有较强的兴奋作用。 ３、对心血管、腺体、眼及支气管平滑肌作用较弱。
【临床应用】 １、重症肌无力 ２、腹气胀和尿潴留 ３、阵发性室上性心动过速 ４、非去极化型肌松药和阿托品过量中毒
法、加权机率单位法（Bliss氏法）、累计 法、序贯法及寇氏法等。 寇氏法较常用，计算简便，结果较准确。
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LD50测定方法
寇氏法
孙瑞元改进的Kaerber(点斜法)
设计条件：
各组实验动物数相等 各组剂量呈等比数列 各组动物的反应率大致符合常态分布 不要求死亡率必须包括0%与100%
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LD50测定方法
熟悉改良寇氏(Karber)法测定LD50。 了解急性毒性实验的相关内容及新药安
全性评价的内容。
3
实验原理
LD50是药物、毒物等毒性作用强度的一个标 志，是指在一定条件下，使半数动物出现死 亡的剂量，是描述药物安全性的指标之一。
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实验原理
LD50越大，其毒性越小。 测定LD50的方法有很多，如目测机率单位
Σpi：各组反应率（即有效率或死亡率）的总和
Pi：各组动物的死亡率（以小数表示）
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95％可信限：
log LD50 1.96s log LD50 LD50 4.5s log LD50 LD50
pi(1 pi)
s log lD50 d
n 1
S ㏒ LD50 为㏒ LD 50 的标准误
组距（d）＝
logD
m－logD n－1
n
本次实验n=7, r=0.76
ld50的测定方法的实验报告思考题
ld50的测定方法的实验报告思考题【引言】在进行科学研究或毒理学评估时，LD50（半数致死剂量）的测定是一项重要的实验。
LD50是指能够致死一半受试动物的剂量，它是评估某种物质毒性的指标。
本文章将探讨LD50的意义和测定方法，并思考在实验报告中应该包含哪些重要的内容。
【LD50的意义】在毒理学研究中，确定物质的毒性是至关重要的。
而LD50作为一种实验评估指标，可以帮助我们判断物质的毒性程度和剂量效应。
通过测定一种物质在动物体内的LD50，可以进行危险品分类、毒物识别和毒性研究等领域的工作。
【LD50的测定方法】要测定一种物质的LD50，我们需要进行一系列的实验。
下面是常见的几种测定方法：1. 最常用的方法：经典Litchfield-Wilcoxon法（Up-and-Down 法）。
该方法是在动物（如小鼠、大鼠）体内逐渐增加剂量，直到对半数动物产生死亡为止。
根据每个动物的反应调整下一个动物的剂量，以便更接近于LD50。
最后通过计算不同剂量的死亡率，确定LD50。
2. 毒性分类法：根据测定的数据，将物质分为毒性类别。
这种方法是根据动物对不同剂量物质的反应，将物质分为五个毒性类别：非常毒、有毒、有限毒、少量毒和微毒。
这种分类法便于在实验中确定剂量的范围，并提供定量和定性的信息。
3. 统计学分析法：使用统计学方法来计算LD50。
这种方法是将实验测定得到的数据进行统计学分析，通过计算得到近似的LD50值，并给出统计上的置信区间以反映结果的可靠性。
统计学方法可以帮助我们更准确地评估LD50和预测剂量效应。
【实验报告的重要内容】实验报告是对实验进行总结和回顾的重要文件，对于展示和传达实验结果至关重要。
当涉及到LD50的测定时，以下是应该包含在实验报告中的重要内容：1. 实验目的和背景：简要介绍LD50的测定方法背后的科学原理和意义。
2. 实验设计和材料：详细描述实验所使用的动物种类、药物剂量、实验环境等。
3. 实验步骤：清晰地描述每个实验步骤，包括剂量递增、动物反应观察等。
实验二 经口急性毒性LD50测定
实验二经口急性毒性LD50测定实验二经口急性毒性LD50测定一、试验目的1. 熟悉急性毒性LD50测定的剂量设计2. 掌握小鼠灌胃技术3. 掌握改进寇氏法计算LD50的方法二、试验原理选择健康的实验动物，依据LD50计算的设计原则，将实验动物随机分成数个染毒组和一个阴性对照组。
一次或24小时内多次给予实验组受试物后，观察动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因。
根据受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死剂量(LD50)，并根据LD50值将受试物进行急性毒性分级。
三、材料和试剂1. 实验动物:健康成年小鼠60只，雌雄各半2. 器材:灌胃针(小鼠适用)、注射器、吸管、容量瓶、烧杯、滴管、分析天平、台秤、外科手术剪、镊子3. 受试物:(敌百虫或克佰威)4. 染色剂:苦味酸酒精饱和溶液、0.5%品红溶液四、实验内容1. 实验动物称重、编号和随机分组2. 染毒剂量设计及试剂配制3. 小鼠灌胃染毒技术4. 毒性反应的观察及LD50计算五、试验方法(一)预实验1. 探索剂量范围先找出100%与0%的致死量(或阳性反应的剂量)为实验的上、下限剂量(Dmax和Dmin)。
据经验或文献定出一个估计量，取动物若干，每4只一组，按估计量给药，如出现4/4死亡时，下一组剂量降低，当出现3/4死亡时，则上一剂量为Dmax;如降低一档剂量出现的死亡率2/4或1/4时，应考虑到4/4死亡剂量组在正式实验时可能出现死亡率低于70%，为慎重起见可将4/4死亡剂量乘以1.4倍，作为Dmax。
以次类推，找出Dmin。
2. 剂量分组一般染毒组数(G)以5-8组为宜，组间剂量比值为r。
在确定组数后，按下列公式计算r。
1/(G-1)r = (Dmax/Dmin) 3. 受试物溶液的配制配制等比浓度的敌百虫溶液，并使每只动物在给药容量上相等(如0.5ml/20g)。
剂量按等比级数增减，相邻两剂量比值1:0.6,0.9，设5个剂量组。
107853-药理学实验3盐酸利多卡因半数致死量_LD50的测定
小鼠的腹腔注射方法
抓好后将小鼠保持头低位，臀部在高位
给药位置：下腹部，腹中线的左右两侧； 给药方法：先刺入皮下，再将针头以45度角 刺入腹腔内约1cm，切不可过深，注入药液。
4. 观察30min，统计各组小鼠的死亡数（停止呼吸），计
算各组的死亡率。
5.计算LD50
LD50＝lg-1 [Xm－i(Σp－0.5)] ❖ Xm：最大剂量组剂量的对数值。 ❖ i：相邻两组给药剂量（D）对数值之差。 ❖ P：各组动物的死亡率，用小数表示。 ❖ ΣP：为各组动物死亡率的总和。
静脉给药，对中枢神经系统有兴奋和抑制双相作用。 ✓ 血药浓度较低时，出现镇痛和思睡、痛阈提高； ✓ 随着剂量加大，作用或毒性增强，出现肌肉震颤、惊厥昏
迷及呼吸抑制等中毒反应。
❖ LD50的测定方法有很多。如：加权机率单位法 (Bliss 氏法)、寇氏法（Karber氏法）等。
❖ Bliss 法要求剂量按等比级数排列，每组小鼠数相 等，剂量范围接近或等于0~100%死亡率之间，一 般分为5~8个剂量组。
❖ 我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评 定必须采用的方法。
【实验目的】 1.掌握药物的半数致死量测定方法和计算方法。 2.了解盐酸利多卡因给药后动物所产生的效应。
【实验材料】
❖ 实验动物：小白鼠（昆明种），体重18～22g， ♀♂各半。
❖ 实验器材：电子秤、注射器、小鼠笼。 ❖ 实验药品：盐酸利多卡因（20mg/mL）
C母
D 等容注射量
✓Cm=183.11mg/kg / 10ml/kg=18.311mg/ml
✓每组等比稀释液量=每组动物总重×用药量 =200g×0.1ml/10g=2ml
药理学-半数致死量(LD50)测定
半数致死量(LD50)
特点：1、是药物的剂量反应曲线上最敏感的 一点。
死亡率
50%
剂量
LD50
2、 测量简单，准确性高，误差小，易重复。
2020/7/28
实验目的
测定药物的LD50 了解常用的测定和计算方法
2020/7/28
实验方法
改良寇氏法 可直接用实验动物的死亡率进行计算，方法简 单，计算简便。
2 一组小鼠编号1-25，另一组小鼠编号26-50。 标签上排写编号，下排写体重，体重取整数。
3 根据Excell软件取随机数字,排序随机数字。 4 按随机数字取小鼠于另一鼠笼20/7/28
实验结果
解磷定LD50的实验结果
组别
1# 2# 3# 4# 5#
小白鼠 浓度
(只) （mg/ml）
10
1.5％
10
1.2％
10
0.96％
10
0.77％
10
0.61％
剂量 (mg/kg)
300 240 192 154 123
对数剂量
2.48 2.38 2.28 2.18 2.08
动物死亡数 死亡率
(只)
(％)
注：动物死亡数只统计给药后2小时内的死亡数
2020/7/28
3
1.5％
300
3
2#
3
0.75％
150
1
3#
3
0.375％
75
0
4#
3
0.188％ 35.5
0
2020/7/28
实验步骤
小鼠50只，称重，随即分为5组
1＃组10只
腹腔注射 1.5%的解 磷定溶液
普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定和计算实验w1
J I A N G S U U N I V E R S I T Y药理学实验报告学院班级姓名学号时间2012.04.11江苏大学实验报告学院班级姓名学号实验五普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定和计算实验一、实验目的通过实验了解测定药物LD50的方法、步骤和计算过程。
二、实验原理由于实验动物的抽样误差，药物能使动物致死的剂量大都在50%质反应的上下，成常态分布。
在急性毒物实验中50%质反应即所谓半数致死量（LD50）。
在这样的质反应中药物剂量和质反应间呈S型曲线，S型曲线的两端较平，而在50%质反应处的曲线斜率最大。
因此，这里的药物剂量稍有变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能比较准确的反映毒性的大小，LD50数字越小，毒性越大。
三、实验材料实验动物：小鼠（体重17~25g）；实验器材：鼠笼，天平，1mL注射器；实验药品：2%盐酸普鲁卡因溶液，苦味酸溶液。
四、实验方法和步骤1．探索剂量范围：取小鼠8~10只，以2只为一组，分成4~5组，选择剂量间距较大的一系列剂量，分别给各组腹腔注射盐酸普鲁卡因溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%及100%死亡率剂量的所在范围（致死量约在105~150mg/kg范围内）。
本步骤可由实验室预先进行。
2．正式试验：在预试验所获得的0%和100%致死量的范围内，选用几个剂量（一般用5个剂量，按等比级数增减，相邻剂量之间比例为1:0.7或1:0.8），各剂量组动物数为10只，分别用苦味酸标记。
动物的体重和性别要分层随机分配，完成动物分组剂量计算后按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始，以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整，尽可能使动物的死亡率在50%上下，死亡率为0%或100%时，不能用于计算。
实验以全班为一个单位，可以一个组观察一个剂量组(10只小鼠)，或每组各作每一剂量组的2只小鼠。
务求用药量准确，注射方法规范，以减少操作误差，避免非药要物所致的死亡，得到较理想的结果。
大学药理学实验（附）
⼤学药理学实验（附）实验题⽬：⼩⿏腹腔注射筒箭毒碱ED50的测定Determination of Cl-Tubocurarine's Median Effective Dose （ED50）【实验⽬的】了解ED50的测定⽅法、原理、计算过程与意义。
【相关理论】1．关于量反应，质反应：量反应是指个体上反应的强度并以数量的分级来表⽰；例如：⾎压、尿量等。
质反应是指群体中所观察到的某⼀效应的出现；如：⽣死、有效或⽆效。
以阳性反应的出现频率或百分数来表⽰（全或⽆，阳性率）。
2．关于ED50，LD50，以及治疗指数:能使群体中有半数个体出现某⼀效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则为半数有效量ED50，ED50是质反应的参数。
若此效应为死亡时，则为半数致死量LD50。
治疗指数= LD50/ ED50=TI，该值越⼤越好，说明药物越安全.可⽤机率单位正规法或点斜法求出LD1 ，ED99 ；LD5 ，ED95。
3．肌松药分为去极化型和⾮去极化型两种。
去极化型肌松药的代表为琥珀酰胆碱，其肌松作⽤不能被抗胆碱酯酶药新斯的明拮抗，反⽽会加重。
⾮去极化型肌松药的代表为筒箭毒碱，其肌松作⽤能被新斯的明解救。
4．测定ED50，LD50的意义可计算治疗指数TI（LD50/ ED50），为临床安全⽤药提供指导。
【实验动物】⼩⿏（昆明种KM），雌雄各半。
【实验器材】铁丝⽹，铁架台，天平，注射器等。
【实验⽅法】应⽤点斜法测定ED50。
应⽤该⽅法测定ED50时，实验设计必须符合以下5点要求：1）动物以5~8组为宜；2）每组动物数须⼀致；3）各组给药剂量应呈现等⽐数列；4）各组给药剂量的公⽐r = 1.1~1.6；5）最⼤剂量（Dmax）组的阳性反应率须≥80%，最⼩剂量（Dmin）组的阳性反应率须≤20%【实验⽅法】1．预实验：⽬的是为了找出符合上述点斜法要求5）的Dmax和Dmin。
阳性反应判定标准：20min内⼩⿏落下3次（注意排除因互相拥挤⽽落下所造成的假阳性）。