次高分子量蛋白质 Marker (43kD-200kD)使用说明
WB二抗稀释液-凯基生物
WB二抗稀释液Cat Number：KGP107For Research Use OnlyStore at4℃for one yearExpire date：20130105一、试剂盒说明WB二抗稀释液是蛋白印迹(Western Blot，WB)等实验中最常用的蛋白类生物试剂，为保证抗体标记物具有较高的生物活性，厂家在生产运输过程中一般都以较高的浓度分装保存。
在蛋白印迹等实验中，为获得较好的染色结果，降低实验成本，二抗在使用前都需要适当稀释。
本产品仅用于WB实验中二抗的稀释。
二、试剂盒组份WB二抗稀释溶解液100mlBSA3g说明书一份三、使用说明1、WB二抗稀释液的配制：按照需求的量配制含3％BSA的WB二抗稀释溶解液，比如称取0.3gBSA溶于10ml的WB二抗稀释溶解液，现配现用。
2、用时取适量用于二抗稀释。
二抗的稀释倍数请参照抗体生产厂家使用说明。
四、注意事项1．本产品属蛋白制剂，室温放置过久易导致蛋白的降解和活性丧失。
2．反复冻融亦会导致蛋白活性的丧失。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4．WB二抗稀释液现配现用。
五、凯基相关产品（详见凯基网站）1、蛋白提取核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒全蛋白提取试剂盒膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒线粒体蛋白提取试剂盒磷酸化蛋白提取试剂盒（简易型）活性蛋白提取试剂盒红细胞裂解液细菌蛋白提取试剂盒酵母蛋白提取试剂盒植物蛋白提取试剂盒蛋白裂解液系列2、蛋白定量BCA法蛋白定量检测试剂盒Bradford法蛋白定量检测试剂盒Lowry法蛋白定量检测试剂盒3、蛋白染色蛋白质银染检测试剂盒蛋白质考马斯亮蓝染色检测试剂盒考马斯亮蓝蛋白快速染液4、蛋白分子量Marker蛋白分子量Marker（14KD-116KD）蛋白分子量Marker（10KD-200KD）预染蛋白分子量Marker（20KD-118KD）预染彩色蛋白分子量Marker（11KD-250KD）5、Western bloting组装试剂盒凯基蛋白提取和SDS-PAGE凝胶电泳试剂盒凯基Western bloting检测试剂盒6、Western bloting化学发光试剂盒ECL检测试剂盒加强型ECL检测试剂盒。
Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD） with 45kDa使用说明书
Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD）with45kDa使用说明书产品名称规格货号Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD）with45kDa250μl*1LVN150-1Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD）with45kDa250μl*2LVN150-2Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD）with45kDa2x250μl*10LVN150-10【储存条件】-20˚C恒温长期保存，4˚C保存6个月，建议分装保存，避免反复冻融。
【产品简介】本产品由跨度从10~180kDa的10种纯化的天然蛋白混合而成，各条带浓度约为0.2~0.4mg/ml。
其中75kDa条带为红色预染条带，方便判断各个条带的准确位置。
本产品适合作为SDS-PAGE电泳时，变性蛋白样品的分子量参照，并可实时观察蛋白样品的电泳分离状况，也可用于检测Western blot的转膜效率。
由于共价结合的染料会影响蛋白质分子的电泳迁移率，本产品适于粗略地估计目的蛋白样品的分子量。
【使用方法】1.将本产品于室温融化后，轻柔混匀，使沉淀充分溶解；2.加入3~5μl到SDS-聚丙烯酰胺胶的上样孔中，与待测样品一起电泳和转膜；3.电泳结束后，通过考马斯亮蓝染液染色观察条带。
【注意事项】1.使用时应该将从冰箱中取出的产品恢复至室温后使用，否则可能由于低温下蛋白变性不彻底导致电泳条带出现不同程度的弥散；2.使用前先将产品恢复至室温后混匀，使沉淀充分溶解，否则可能导致电泳条带出现不同程度的弥散或拖带；3.本产品含有SDS，蛋白已变性，不宜作为天然蛋白分子电泳时的分子量参照标准。
【图列展示】（单一浓度PAGE胶，Tris-Glycine电泳缓冲液，实际电泳图）8686************（梯度胶和单一浓度胶，Tris-Glycine 电泳缓冲液，带型示意图）【附录：转膜和洗膜】A 、转膜条件（冰上进行）：a.Transfer with buffer containing 20%methanol to fix proteins on membrane.b.Wash membrane with PBS or TBS containing less than 0.1%Tween-20at 4°C.B 、洗膜条件（4度进行）：Membrane:Nitrocellulose membranes /PVDFWash Buffer:1X Tris buffered saline,0.1%Tween-20(TBST)（吐温20不能超过0.1%）C 、Stripping Buffer:15g Glycine,1g SDS,10ml Tween20,pH2.2–Adjust volume to 1L如果需要用到含有DTT /b-ME 的Stripping buffer ，膜需要先以1X Tris buffered saline(TBS)洗三次，把Tween-20去干净后，再进行Stripping 。
预染蛋白marker说明书
g 时可以根据自身的实验条件和实验习 n 惯通过预实验确定合适的上样量，这样
可以节约成本，同时获得效果更佳的实 验图片； l 未使用的双色预染蛋白质分子量标准 保存于所要求的储存条件，在 4°C 可放 置 2 个月。
上样量
根据上样孔的大小，本双色预染蛋白分子量 标准通常每次上样 5-10 μl（5×1.5 mm 胶孔 5 μl 足够），即可在电泳时、电泳后或转膜后 观察到非常清楚的蛋白质条带。 注：35 和 50 kDa 之间的弱带为 40 kDa。
15-150 kDa 双色预染蛋白
Marker
Reagent Grade 产品编号: C610011 包装: 250 μl 储存: -15°C～-20°C 品牌: 生工 注：该产品不适用于人或动物诊断或治疗使 用。
一般描述
c 本双色预染蛋白分子量 marker 包含了从 15 te kDa 到 150 kDa 共 8 种纯化的预染蛋白质
内含物
67 mM Tris-HCl, pH 7.5, 20 mM DTT, 5 mM EDTA, 2% (W/V) proclin300.
注意
本彩色预染 marker 已经配制在 1×SDS-PAGE 上样缓冲液中，可直接使用， 不要煮沸。
(15, 20, 25, 35, 50, 70, 100, 150 kDa)，其中 70 kDa 条带为橙色，其余条带为蓝色，适合
io 作为 SDS-PAGE 和 Western 的蛋白质分子
量标准。
B 使用说明
l 室温下解冻后轻轻混匀或者是用移液 枪缓慢吹打均匀，不要煮沸；
n l 取本产品 5 μl 与实验样品同时进行聚 o 丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），建
蛋白marker分子量
蛋白marker分子量
蛋白marker分子量是指用于在蛋白质分子量测量中作为参考标准的特定蛋白质分子量标记。
这些marker通常是由具有已知分子量的蛋白质分子组成的混合物，通过电泳等技术与待测样品一起运行来确定待测样品中蛋白质分子的分子量。
常用的蛋白marker分子量范围从10 kDa到250 kDa不等，其中包括常见的标记蛋白如β-半乳糖苷酶、碱性磷酸酶和肌红蛋白等。
使用蛋白marker分子量可以快速、准确地确定待测蛋白质的分子量，是蛋白质分析中不可缺少的工具之一。
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PH0302-超低分子量蛋白Marker II (3.4-100kD)使用手册
PH0302|超低分子量蛋白Marker II(3.4-100kD)Ultra Low Molecular Weight Protein Marker货号：PH0302规格：☐10T（50ul）保存：Store@-20℃◆产品简介本产品包含5种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.4kD-100kD。
可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。
◆使用说明第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用；本产品为即用型，融化后既能使用，不能95℃加热处理。
一.制胶：I配制分离胶1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA（19:1）、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2．加入10%APS和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4．静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一（一块0.75mm mini胶用量）分离胶浓缩胶18％T,5%C/6.0ml5％T,3.3%C/2ml 40%PAA（19:1） 2.7ml/40%PAA(29:1)/0.25ml4×凝胶缓冲液 1.5ml0.5ml乙二醇（电泳级） 1.8ml/ddH2O/ 1.25ml10％APS50-65μl20μlTEMED6μl2μl注：如非必须，不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II配制浓缩胶去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA（29:1）和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2．加入10%过硫酸铵和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
蛋白标准品（Marker）知识汇总
蛋白Mark er可分为：一、未预染的Ma rker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Mar ker即单色预染和多色预染。
在wester n blot 过程中，分子量Mar ker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。
这个 Wester n Blot 参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Ma rker也是west ern blot实验成功的必要条件之一。
总体来说，蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。
以下是关于蛋白分子量标准的小叙：一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准未染色的蛋白分子量标准是最简单，也是最准确的一种。
由于没有附带染料分子或者是标记分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是精确判断蛋白大小必须的。
现在的Mar ker多数都选用预混和的Mar ker，方便不同大小的蛋白比较。
预混的Mar ker通常有几条带加倍浓度作为指示，因为混合的条带越多，越不好记，谁知道哪条是那条!数到眼都花了。
所以当看到特别浓的那几条标志带就记得是哪里了。
不过要记得，小带通常都不那么容易看清楚的。
在选择上来说，当然是选择其中至少有一条条带和自己的目的蛋白大小相近的最好，越近越好。
如果你的蛋白不幸在两条跨度较大M arker条带之间，选别的Mar ker吧。
预混的Mar ker 使用上不如预染Marke r(pre-staine d)好用，因为电泳过程中完全看不到，要和目标蛋白一起等到最后染色才―开蛊‖，无法对实验起预示参照作用。
彩虹130广谱蛋白marker说明书
第1页，共2页彩虹130广谱蛋白marker 说明书货号：PR1950规格：20T (100μL)/50T(250μL)/100T(250μL×2)/500T(250μL×10)保存：-20℃保存，有效期至少2年。
产品特点：●三色预染，颜色鲜亮，条带整齐，便于观察。
●用量少，节约成本，仅5μL 即可完美呈现（1.5mm ，10孔梳）。
●广谱多带，一支即可满足多种实验需求。
产品简介：本产品包含9种彩色预染的已知分子量标准蛋白，分子量范围为15kD-130kD ，每种蛋白含量约为0.2-0.4mg/mL 。
预染marker 可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot 的转膜效果。
经SDS-PAGE 凝胶电泳或转移到PVDF 或NC 膜上可得到清晰的9条彩色蛋白条带，其中72kD 条带为红色，25kD 条带为绿色，其余条带为蓝色。
使用说明（仅供参考）：1.本产品是即用型液体，可直接上样电泳。
上样前无需加热，稀释或添加还原剂。
2.上样5μL ，SDS-PAGE 电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。
3.建议分离胶浓度为15%。
电泳示意图说明：注意事项：1.本产品含有较高浓度甘油，常规-20℃保存为液体状态，可直接使用。
若冰箱温度不稳，导致结冰，可适当分装后置于4℃保存，至少稳定6个月。
2.Marker 分离效果与PAGE 胶浓度相关，若分离胶浓度低于15%，25kD 以下条带不易分离，但不影Beijing Solarbio Science &Technology Co.,LtdTel:400-968-6088Fax:响绿色（25KD）及以上条带。
如果目的条带小于25KD，建议分离胶浓度大于或等于15%。
3.转膜效果与转膜时间有关，需根据客户目的条带大小而定，如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜成功，属于正常现象。
相关产品：P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT）P1200SDS-PAGE凝胶制备试剂盒T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液D106010×电泳转移缓冲液PR1920彩虹245广谱蛋白markerPR1700预染次高分子量蛋白markerSW3010膜封闭液DA1010DAB显色试剂盒（20×）PE0010ECL Plus荧光检测试剂(ECL超敏发光液)第2页，共2页。
marker说明书
CERTIFICATE OF ANALYSISPageRuler ™Prestained Protein Ladder#SM067210 x 250 µl(for 100 mini gel applications 5 µl per well or 50 large gel applications 10 µl per well)Lot: Expiry Date:Storage: stable at 4°C for up to 3 months. For long term storage, store at -20°C.SM067_57_9.docDescriptionPageRuler ™Prestained Protein Ladder is a mixture of 10 recombinant, highly purified colored proteins with apparent molecular weights of 10 kDa to 170 kDa. Ladder proteins are covalently coupled with a blue dye except for two reference bands prestained with different colors. The 72 kDa reference band is orange and 10 kDa reference band is green.The ladder is supplied in gel loading buffer and isready-to-use: no heating, further dilution or addition of a reducing agent is required.ContentsApproximately 0.1-0.2 mg/ml of each protein in the storage buffer (62.5 mM Tris-H 3PO 4 (pH 7.5 at 25°C), 1 mM EDTA, 2% (w/v) SDS, 10 mM DTT, 1 mM NaN 3 and 33% (v/v) glycerol).Applications∙ Monitoring of protein separation during SDS-PAGE (1). ∙ Verifying Western transfer efficiency (2, 3).∙ Approximate sizing of proteins on SDS-polyacrylamidegels and Western blots.Instruction for Use❶ Thaw the ladder at room temperature for a few minutes to dissolve precipitated solids. DO NOT BOIL!❷ Mix gently, but thoroughly, to ensure the solution is homogeneous.❸ Load the following volumes of the ladder on an SDS-polyacrylamide gel:– 5 µl per well for mini gel,– 10 µl per well for large gel.Use the same volumes for Western blotting.❹ After the run is complete, stain the gel or perform Western transfer procedure as desired.Note•Each lot of the PageRuler™ Prestained Protein Ladder is calibrated against a precisely sized, PageRuler™ Unstained Protein Ladder and calculated apparent molecular weights are reported in the picture.•For precise molecular weight determinations use PageRuler™ Unstained Protein Ladder, #SM0661, see.•In 8 or 10% gels low molecular weight proteins may migrate with the dye front.•Loading volumes are intended for use in gels with a thickness of 0.75 mm. For thicker gels, the recommended loading volume should be increased.•PageRuler™ Prestained Protein Ladder could be used in Western blotting with all common membranes: PVDF, nylon and nitrocellulose.•Longer transfer times or higher transfer voltages may be required for Western blotting of large (>100 kDa) proteins.Lot specific MW, kDa4-20% Tris-glycine SDS-PAGEcontinued on back pageQUALITY CONTROL5 µl of PageRuler™ Prestained Protein Ladder resolves 10 bands of equal intensities in 4-20% SDS-PAGE (Tris-glycine buffer) and after Western blotting onto PVDF membrane.Quality authorized by: Jurgita Zilinskiene References1. Laemmli, U.K., Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4, Nature, 227, 680-685, 1970.2. Burnette, W.N., "Western blotting": electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate – polyacrylamide gels to unmodified nitrocellulose and radiographic detection with antibody and radioiodinated protein A, Anal. Biochem., 112 (2), 195-203, 1981.3. Towbin, H., et al., E lectrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76, 4350-4354, 1979.This product is manufactured under the license forStrep-tag® technology covered by US patents Nos.5,506,121, 6,103,493 and foreign counterparts. Related Products∙DualColor™ Protein Loading Buffer Pack #R1011∙Loading Buffer Pack #R0891∙Spectra™ Multicolor Broad Range Protein Ladder #SM1841∙PageRuler™ Unstained #SM0661∙PageRuler™ Plus Prestained Protein Ladder #SM1811∙PageSilver™ Silver Staining Kit #K0681∙PageBlue™ Protein Staining Solution #R0571∙10X Tris-glycine-SDS Buffer #B46∙10X Tris-tricine-SDS Buffer #B48∙DTT #R0861 ∙ProteoJET™ Mammalian Cell Lysis Reagent #K0301∙ProteoJET™ Cytoplasmic and Nuclear ProteinExtraction Kit #K0311∙Bradford Reagent, ready-to-use #R1271∙Bovine Serum Albumin Standard Set, ready-to-use #R1281∙Bovine Gamma Globulin Standard Set, ready-to-use #R1291PRODUCT USE LIMITATION.This product is developed, designed and sold exclusively for research purposes andin vitro use only. The product was not tested for use in diagnostics or for drugdevelopment, nor is it suitable for administration to humans or animals.Please refer to for Material Safety Data Sheet of the product.。
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次高分子量蛋白质Marker(43kD-200kD)使用说明
货号：PR1500
规格：10T
保存：-20℃可保存至少六个月。
避免反复冻融，建议分装保存。
产品简介：
次高分子量蛋白质Marker包含5种蛋白质混合物，分子量范围为43kD-200kD，每种蛋白的含量约为20ug。
经SDS-PAGE电泳，用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带。
可以用来判断SDS-PAGE电泳后蛋白质的分子量。
本产品配有一支蛋白上样缓冲液（150ul）。
使用说明：
将两支试剂开启，取110ul蛋白上样缓冲液加入蛋白Marker干粉中，混匀，取出液体，置于 1.5ml离心管中，100℃沸水浴加热5分钟，冷却后根据需要分装成小管，建议每管分装10µl，-20℃贮存，每次取一管使用。
注：如长期贮存后使用，使用前最好取分装后的小管99℃预热3分钟后再上样电泳。
用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带（见下示意图）。
注意事项：
1.建议分离胶浓度7%，浓缩胶浓度4%，制胶时先配制分离胶，聚合后再配制浓缩胶。
电泳时，80v电压大约跑1小时后，待指示剂沿到达分离胶上沿时，将电压调至120v，直到电泳结束。
整个电泳过程大约需3-4个小时。
2.电泳之后可将胶进行染色观察，如果使用配方进行染色时效果不好或考虑其毒性，可以选择考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液，具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。
相关试剂：
P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT）
T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液
P1300-1SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
P1300-500考马斯亮蓝快速染色液。