彩色预染蛋白质分子量标准marker 说明书
分子量Marker
38 第五章 分子量Marker50 bp DNA Ladders目录号产品说明规格 浓度 范围(bp) 价格 供应商 SM0371 GeneRuler , 50bp(EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 50-1,031480MBI SM0372 GeneRuler , 50bp(EB/SYBR Green I 染色检测)250 ug 0.5 ug/ul 50-1,031 1900 MBI SM0373 GeneRuler , 50bp, Ready to use(EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.1 ug/ul 50-1,031 600 MBI SM1133 O ’GeneRuler , 50bp (与Xylene cyanol FF 和Orange G 染料混合) 50 ug0.1 ug/ul50-1,031 620 MBI SM0613O ’RangeRuler , 50bp (EB/SYBR Green I 染色检测)25 ug 0.05 ug/ul50-1,000670MBI100 bp DNA Ladders目录号产品说明规格 浓度 范围(bp) 价格 供应商 SM0241 GeneRuler , 100bp (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 80-1,031 410 MBI SM0242 GeneRuler , 100bp (EB/SYBR Green I 染色检测)250 ug 0.5 ug/ul 80-1,031 1640 MBI SM0243 GeneRuler , 100bp, Ready to use (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.1 ug/ul 80-1,031 490 MBI SM0321 GeneRuler , 100bp plus (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 100-3,000 410 MBI SM0322 GeneRuler , 100bp plus (EB/SYBR Green I 染色检测)250 ug 0.5 ug/ul 100-3,000 1640 MBI SM0323 GeneRuler , 100bp plus, Ready to use (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.1 ug/ul 100-3,000 490 MBI SM1143 O ’GeneRuler , 100bp (与Xylene cyanol FF 和Orange G 染料混合) 50 ug 0.1 ug/ul 80-1,031 490 MBI SM1153 O ’GeneRuler , 100bp plus (与Xylene cyanol FF/ Or ange G 染料混合) 50 ug 0.1 ug/ul 100-3,000 490 MBI SM0623 O ’RangeRuler , 100bp, ready-to-use (EB/SYBR Green I 染色检测) 25 ug 0.05 ug/ul 100-1,500 620 MBI SM0633 O ’RangeRuler , 200bp, ready-to-use (EB/SYBR Green I 染色检测) 25 ug 0.05 ug/ul 200-3,000 620 MBI SM0643 O ’RangeRuler , 500bp, ready-to-use (EB/SYBR Green I 染色检测) 25 ug 0.05 ug/ul 500-6,000 620 MBI SM0653O ’RangeRuler , 100bp+500bp, ready-to-use (EB/SYBR Green I 染色检测)25 ug0.05 ug/ul100-6,000620MBIGeneRuler, 50bp LadderSM0371/2/3O'GeneRuler, 50bp LadderSM1133O'RangeRuler, 50bp LadderSM0613391kb bp DNA Ladders目录号产品说明规格 浓度 范围(bp) 价格 供应商 SM0317 GeneRuler , 1kb (EB/SYBR Gr een I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 250-10,000 200 MBI SM0311 GeneRuler , 1kb (EB/SYBR Gr een I 染色检测) 250 ug 0.5 ug/ul 250-10,000670MBI SM0312 GeneRuler , 1kb (EB/SYBR Gr een I 染色检测)1250 ug 0.5 ug/ul 250-10,000 2680 MBI SM0313 GeneRuler , 1kb, Ready to use (EB/SYBR Green I 染色检测) 250 ug 0.1 ug/ul 250-10,000 770 MBI SM0337 GeneRuler , Mix (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 100-10,000 200 MBI SM0331 GeneRuler , Mix (EB/SYBR Green I 染色检测) 250 ug 0.5 ug/ul 100-10,000 670 MBI SM0332 GeneRuler , Mix (EB/SYBR Green I 染色检测)1250 ug 0.5 ug/ul 100-10,000 2680 MBI SM0333 GeneRuler , Mix, R eady to use (EB/SYBR Gr een I 染色检测) 250 ug 0.1 ug/ul 100-10,000 770 MBI SM1331 GeneRuler™ 1kb DNA Ladder Plus 5x50 ug 0.5 ug/ul 75-20,000 1100 MBI SM1332 GeneRuler™ 1kb DNA Ladder Plus25x50 ug 0.5 ug/ul 75-20,000 4400 MBI SM1333GeneRuler™ 1kb DNA Ladder Plus, ready -to-use5x50 ug 0.1 ug/ul 75-20,000 1500 MBI SM1163 O ’Gene Ruler , 1 kb(与Xylene cyanol FF/ Orange G 染料混合) 250 ug 0.1 ug/ul 250-10,000 770 MBI SM1173O ’Gene Ruler , Mix(与Xylene cyanol FF/ Orange G 染料混合)250 ug0.1 ug/ul100-10,000770MBIGeneRuler, 100bp Ladder SM0241/2/3 GeneRuler,100bp Ladder PlusSM0321/2/3O'GeneRuler, 100bp LadderSM1143O'GeneRuler, 100bp Ladder PlusSM1153O'RangeRuler, 100bp adder SM0623O'RangeRuler, 200bp Ladder SM0633O'RangeRuler, 500bp LadderSM0643O'RangeRuler,100bp+500bp LadderSM065340定量Marker目录号产品说明规格 浓度 范围(bp) 价格 供应商 SM1103 FastRuler , low range 快速（8-14分钟）检测目标片段大小和数量 2x500 ul 20 ug/ul 50-1,500 500 MBI SM1113 FastRuler , middle range 快速（8-14分钟）检测目标片段大小和数量 2x500 ul 20 ug/ul 100-5,000 500 MBI SM1123 FastRuler , high range 快速（8-14分钟）检测目标片段大小和数量 2x500 ul 20 ug/ul 500-10,000 500 MBI SM0383 MassRuler , low range, ready-to-use 2x500 ul60.8 ug/ul80-1,031 770 MBI SM0393 MassRuler , middle range, ready-to-use 2x500 ul 42.2 ug/ul 1500-10,000 770 MBI SM0403 MassRuler , high r ange, ready-to-use2x500 ul103 ug/ul80-10,000850MBIGeneRuler, 1kb LadderSM0311/2/3GeneRuler, Ladder Mix SM0331/2/3MassRuler, Middle RangeSM0393MassRuler, Low Range SM0383MassRuler, High rangeSM0403FastRuler, low range ，Cat# S M1103FastRuler, middle range ，Cat# SM1113FastRuler, high range ，Cat# S M1123O'GeneRuler, 1kb LadderSM1163O'GeneRuler, DNA Ladder MixSM1173GeneRuler, 1kb, plusSM1331/2/3Marker制备DIY (Do-it-yourself)MBI提供36条高质量（通过层析柱纯化）的DNA片段，大小区间为10-20,000 bp。
蛋白标准品（Marker）知识汇总
蛋白Mark er可分为：一、未预染的Ma rker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Mar ker即单色预染和多色预染。
在wester n blot 过程中，分子量Mar ker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。
这个 Wester n Blot 参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Ma rker也是west ern blot实验成功的必要条件之一。
总体来说，蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。
以下是关于蛋白分子量标准的小叙：一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准未染色的蛋白分子量标准是最简单，也是最准确的一种。
由于没有附带染料分子或者是标记分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是精确判断蛋白大小必须的。
现在的Mar ker多数都选用预混和的Mar ker，方便不同大小的蛋白比较。
预混的Mar ker通常有几条带加倍浓度作为指示，因为混合的条带越多，越不好记，谁知道哪条是那条!数到眼都花了。
所以当看到特别浓的那几条标志带就记得是哪里了。
不过要记得，小带通常都不那么容易看清楚的。
在选择上来说，当然是选择其中至少有一条条带和自己的目的蛋白大小相近的最好，越近越好。
如果你的蛋白不幸在两条跨度较大M arker条带之间，选别的Mar ker吧。
预混的Mar ker 使用上不如预染Marke r(pre-staine d)好用，因为电泳过程中完全看不到，要和目标蛋白一起等到最后染色才―开蛊‖，无法对实验起预示参照作用。
蛋白免疫印迹杂交(Western Blot)图示
彩色预染蛋白分子量标准
考马斯亮蓝染色 试剂盒(常规法)
快速银染试剂盒
染胶
转膜
硝酸纤维素（NC）膜、PVDF 膜 转膜缓冲液（甘氨酸、Tris-Base、甲醇）
转印滤纸
丽春红染色液
染膜
DAB 显色试剂 DAB 显色检测试剂盒 BCIP/NBT 显色试剂
培养细胞总蛋白提取试剂哺乳动物组织总蛋白提取试剂细菌总蛋白提取试剂细胞胞浆和胞核蛋白提取试剂细胞真核膜蛋白提取试剂盒细胞线粒体提取试剂盒红细胞裂解液快速沉淀和浓缩蛋白试剂盒提取蛋白蛋白定量bca蛋白定量试剂盒bca蛋白定量试剂盒增强型考马斯亮蓝bradfor
蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）图示
清 无色蛋白条带清晰，（膜也可以用 TBST 或水重新洗后再进行染色）PVDF 膜需用甲醇再活化后用 TBST 洗后进行封闭。
C-4 膜的封闭 为防止一抗或/和二抗与膜的非特异性结合产生的高背景，因此需要进行膜的封闭，传统上有 两种封闭液：脱脂奶粉或 BSA，脱脂奶粉成本低但不能用于磷酸化蛋白（因脱脂奶粉含有酪蛋白， 该蛋白 本身就是一种磷酸化蛋白），使用脱脂奶粉会结合磷酸化抗体从而易产生高背景。
蛋白免疫印迹杂交（Western Blot ,WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转 移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。WB 是进行蛋白质分 析最流行和成熟的技术之一。
培养细胞总蛋白提取试剂 哺乳动物组织总蛋白提取试剂
细菌总蛋白提取试剂 细胞胞浆和胞核蛋白提取试剂 细胞真核膜蛋白提取试剂盒
(4) 耗材
10、100、1000 uL 枪头与移液枪、EP 管、EP 管防爆夹、96 孔板、单格或 5 格孵育盒、镊子、锡纸、保鲜膜、
TaKaRa 蛋白质分子量标准(低)
∙o Protocolso Standard Protocolo Manual/Datasheet∙Cat.# Product Size Note3450 Protein Molecular Weight Marker (Low) 200 lanes3451 Protein Molecular Weight Marker (High) 200 lanes3452 Protein Molecular Weight Marker (Broad) 200 lanesDescriptionProtein Molecular Weight Markers are designed for use in SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis. There are 3 kinds of Protein Molecular Weight Marker, Low (Molecular weight range : 14.3 - 97.2 kDa) , High (Molecular weight range : 44.3 - 200 kDa) and Broad (Molecular weight range : 6.5 - 200 kDa).Each protein is proportioned to yield uniform band intensities when perform staining Coomassie Brilliant Blue R-250 after run on SDS polyacrylamide gel.5µl of 20-fold diluted marker is loaded per lane of SDS-PAGE minigel for standard use. In this case, this marker is sufficient for 200 lanes.Electrophoresis ResultLow(Cat.# 3450) High(Cat.# 3451) Broad(Cat.# 3452)15% SDS-PAGE 7.5% SDS-PAGE 5-20% gradientSDS-PAGEStorageProtein Molecular Weight Marker, 1 MDTT: -20°C5×Loading Buffer : Store at room temperature after used.ComponentProtein Molecular Weight Marker 50 µl5×Loading Buffer1 ml1 M DTT 100 µlConcentration12 µg/µl (Cat.# 3450) 10 µg/µl (Cat.# 3451) 18 µg/µl (Cat.# 3452)Form50 mM Tris-HCl, pH6.81 mM EDTA200mMNaCl50% glycerolComponent Protein Low(Cat.# 3450)Protein Source M.W.(Da)Phosphorylase B Rabbitmuscle97,200Serum Albumin Bovine 66,409Ovalbumin Hen eggwhite44,287Carbonic Bovine 29,000anhydraseTrypsin Inhibitor Soybean 20,100Lysozyme Hen eggwhite14,300High(Cat.# 3451)Protein Source M.W.(Da)Myosin Pig 200,000 β-galactosidaseE. coli116,000Phosphorylase B Rabbitmuscle97,200SerumAlbuminBovine 66,409Ovalbumin Hen eggwhite44,287Broad(Cat.# 3452) < /TR>Protein Source M.W.(Da)Myosin Pig 200,000 β-galactosidase E. coli116,000 Phosphorylase B Rabbit muscle 97,200 Serum Albumin Bovine 66,409Ovalbumin Hen eggwhite44,287CarbonicanhydraseBovine 29,000 Trypsin Inhibitor Soybean 20,100Lysozyme Hen eggwhite14,300Aprotinin Bovinepancreas6,5005×Loading Buffer200 mM Tris-HCl , pH6.810% SDS 0.05%BPB50% GlycerolNote∙All products are intended to be used for research purpose only. They are not to be used for drug or diagnostic purposes, nor are they intended for human use. They shall not to be used products as food, cosmetics, or utensils, etc∙Takara products may not be resold or transferred, modified for resale or transfer, or used to manufacture commercial products without written approval from TAKARA BIO INC.∙If you require licenses for other use, please call at +81 77 543 7247 or contact from our website at ∙Please confirm the content about the license or patent used in this document that relates to the Takara Bio product by clicking the license mark.Moreover, please confirm the "Limited Use Label License" or "patent" concerning the product of another manufacturers or respective owners in their Web site/catalog etc.Page TOP。
PH0304 宽分子量蛋白Marker10-200kD使用手册
1PH0304|宽分子量蛋白Marker (10-200kD)Catalog No ：PH0304Size ：☐20T (100ul)Storage ：Store@-20℃
◆简介
本产品包含14种蛋白质混合物，分子量范围为10kD-200kD，经过SDS-PAGE 电泳，用考马斯亮蓝染色后可以得到14条带，可以用来判断SDS-PAGE 电泳后蛋白质的分子量。
◆保存
Store at -20℃；有效期12个月
◆使用参考
a 第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用。
b 取出分装后的Marker，常温融化，轻柔彻底混匀，管底不能见沉淀物。
注：此Marker 为即用型，溶化后直接上样，不要95℃处理！
c 上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。
一般说来，0.75mm×5mm（厚度×宽度）的加样孔上样5μl，其他规格梳子请适当调整上样量。
注：使用银染时，由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法，可以适当降低Marker 上样量。
d 电泳结束后，染色，观察结果。
电泳结果如出现带型缺失现象或样品聚集在分离胶上沿，可在Marker 中加入终浓度为100mM 的DTT 后再上样。
12%分离胶电泳示意图
梳子尺寸：0.75mm*5mm
上样量：5ul。
marker标准蛋白
marker标准蛋白Marker标准蛋白是一种用于标记和检测蛋白质的工具，它可以在生物学实验中起到非常重要的作用。
在实验室中，科研人员经常需要对蛋白质进行定位、检测和表达，而Marker标准蛋白则可以帮助他们更准确地进行这些操作。
本文将介绍Marker标准蛋白的基本概念、分类、应用和优势。
Marker标准蛋白是一种具有已知分子量和丰度的蛋白质混合物，通常由多种不同的蛋白质组成。
它的主要作用是作为分子量标准品，用于蛋白质电泳和免疫印迹等实验中的分子量校准。
Marker标准蛋白通常会在凝胶电泳或Western blotting实验中与待测样品一同进行分析，通过比较Marker标准蛋白的迁移位置和待测样品的迁移位置，可以准确地确定待测样品的分子量。
根据Marker标准蛋白的来源和性质不同，可以将其分为多种类型。
例如，有些Marker标准蛋白是从天然来源中提取的，如鱼肌蛋白、牛血清蛋白等；而另一些Marker标准蛋白则是通过基因工程技术人工合成的，如GST融合蛋白、His标记蛋白等。
此外，Marker标准蛋白还可以根据其分子量范围进行分类，通常分为低分子量、中分子量和高分子量三类。
Marker标准蛋白在生物学实验中具有广泛的应用价值。
首先，它可以用于验证蛋白质电泳实验的准确性和可重复性，通过观察Marker标准蛋白在凝胶上的迁移情况，可以评估电泳实验的质量。
其次，Marker标准蛋白还可以用于Western blotting实验中的分子量校准，帮助研究人员准确地确定待测蛋白的分子量。
此外，Marker标准蛋白还可以作为蛋白质表达和纯化实验的内标，用于评估蛋白质表达水平和纯度。
与传统的分子量标准品相比，Marker标准蛋白具有许多优势。
首先，它的成本相对较低，可以满足实验室日常实验的需要。
其次，Marker标准蛋白的稳定性较好，不易受到环境因素的影响，可以长期保存和重复使用。
另外，Marker标准蛋白的分子量范围广，可以满足不同实验的需求，具有较高的通用性。
#SM0431 Unstained Protein Molecular Weight Marker-1
蛋白样本：SDS-PAGE 电泳前处理
DualColor™ Protein Loading Buffer Pack Protein Loading Buffer Pack (#R1011) 处理样本 (#R0891) 处理样本
步 骤 融 化 混 合
室温或 37° C 融化缓冲液几分钟，确保试管中的固体完全溶解。
天然蛋白的修饰，如磷酸化和糖基化，均会改变蛋白的迁移率。修饰蛋白的表观分子量可能与 同分子大小未修饰蛋白的分子量不同。
蛋白 Ladder/Marker：上样推荐
1. 2. 3. 室温或 37° C 融化 Ladder 几分钟，确保试管中的固体完全溶解。 轻轻混匀，确保溶液完全混匀。 Unstained Protein Molecular Weight Marker:
组配制胶装置， 在两块玻璃板(边缘)之间加入间隔物， 形成三明治形式。 按上述方法制备分离胶溶液。 最后加入 APS 和 TEMED，小心混匀避免产生气泡。 重要提示：混合物中加入 APS 后，聚合反应立即开始，后续操作须立即执行。 用枪头小心将凝胶溶液注入两块玻璃板之间的空隙。留出大约 1/4 的空间(制备浓缩胶用)。小心在分 离胶顶部覆盖 50%异丙醇、0.1% SDS 溶液或水，静置约 30 分钟使分离胶聚合。当聚合反应完成 后，分离胶和覆盖的溶液之间会产生清晰线条。
轻轻混匀，确保溶液完全混匀。 2.0 µ l 20X Reducing Agent 蛋白样本 (~0.5 ng – 2.5 µ g) 2.5 µ l 20X Reducing Agent
稀 释
如需 Western 杂交或 Coomassie 染料染色，每孔（小凝胶）上样可达 2.5 μg 总蛋白。 如需银染，每孔（小凝胶）上样可达 10 ng 总蛋白。 10 µl 4X DualColor™ Protein Loading Buffer 10 µ l 5X Protein Loading Buffer 水，无核酸酶 (#R0581) 至 40 µ l* 水，无核酸酶 (#R0581) 至 50 µ l*
中分子量蛋白Marker
中分子量蛋白Marker I使 用 说 明 书包 装 量：浓 度：每种蛋白约0.1－0.2mg/ml 在1×loading Buffer储运温度：收到产品后分装冻存，避免反复冻融降解蛋白，-20℃ (长期保存请置于-70℃ )(用于小胶5µl/次可用20次 用于大胶10µl /次 可用10次)制品说明：本产品是由6种蛋白质分别纯化后混合而成的蛋白质溶液，分子量范围为14KD －94KD ，经SDS －聚丙烯酰胺凝胶电泳后，用考马斯亮蓝R －250（Coomassie Blue R-250）染色后可得清晰的7条蛋白带。
建议使用分离浓度为12%～15%。
适用胶浓度：最优适用于12% (37.5:1 丙烯酰胺:双丙烯酰胺)的聚丙烯酰胺凝胶。
该Marker 也可用于8-15%的胶。
胶浓度为8-10% 时蛋白Marker 中低分子量的蛋白易于同染料前沿跑在一条线上不易区分，在12-15%的胶上及梯度电泳中，所有的条带都能锐利清晰分开。
推荐上样量：上样量胶厚度大小 5µl 0.75mm thick mini 10µl1.5mm thick mini 0.75mm thick large 20µl 1.5mm thick large操作步骤：1.室温融解Marker 或37- 40°C 温浴几分钟使之融解，混匀均一，不要高温加热。
2.为避免污染最好分装保存以备使用，取所需体积的Marker 置于一干净离心管中并封好口。
3. 上样并进行 SDS-PAGE 电泳。
4.该Marker适用于考马斯亮蓝, 银染或其他蛋白染色方法。
注意：银染比考马斯亮蓝染色敏感度高10～100 倍，相应的银染需要减少用量。
5.变性蛋白Marker储存于-20°C。
6.在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中不要使用该Marker，因为在该Marker的储存缓冲液中存在SDS。