传代细胞培养实验
细胞的传代实验报告

一、实验目的1. 了解细胞传代培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握细胞传代培养的基本技术,包括细胞消化、计数、接种和观察等。
3. 观察细胞在不同代数的生长情况,分析细胞传代过程中的变化。
二、实验原理细胞传代培养是指在原代培养的基础上,将细胞从培养瓶中取出,通过消化、计数、接种等步骤,将细胞转移到新的培养瓶中继续培养。
细胞传代培养的目的是为了获得足够数量的细胞,满足后续实验的需求。
细胞传代培养可分为原代培养和传代培养。
原代培养是指从组织或细胞中直接获取细胞进行培养;传代培养是指将原代培养的细胞进行消化、计数、接种等操作,转移到新的培养瓶中继续培养。
三、实验材料1. 培养基:DMEM培养基、胎牛血清、青霉素、链霉素、胰蛋白酶。
2. 培养器具:细胞培养瓶、培养皿、移液器、吸管、无菌操作台、显微镜等。
3. 试剂:生理盐水、75%乙醇、碘伏、双氧水、氯化钠等。
四、实验步骤1. 原代培养(1)取适量组织或细胞,用生理盐水清洗,然后用剪刀剪碎。
(2)将剪碎的组织或细胞放入培养皿中,加入适量胰蛋白酶,37℃消化5-10分钟。
(3)消化结束后,用吸管轻轻吹打培养皿,使细胞分散。
(4)将细胞悬液转移到细胞培养瓶中,加入适量DMEM培养基,37℃、5%CO2培养箱中培养。
2. 传代培养(1)待细胞生长至80%-90%融合时,用胰蛋白酶消化细胞。
(2)消化结束后,用吸管轻轻吹打细胞,使细胞分散。
(3)将细胞悬液转移到计数板中,用生理盐水洗涤计数板,计数细胞数量。
(4)根据计数结果,调整细胞悬液浓度,将细胞接种到新的细胞培养瓶中。
(5)将细胞培养瓶放入培养箱中,继续培养。
3. 观察细胞生长情况(1)每天观察细胞生长情况,记录细胞形态、生长速度等。
(2)通过显微镜观察细胞在不同代数的生长情况,分析细胞传代过程中的变化。
五、实验结果与分析1. 细胞传代培养成功,细胞生长情况良好,细胞形态正常,生长速度较快。
2. 随着细胞传代次数的增加,细胞生长速度逐渐减慢,细胞形态逐渐发生变化,部分细胞出现老化现象。
mlf细胞传代实验步骤

mlf细胞传代实验步骤细胞传代实验是生物学研究中常见的一种实验方法,主要用于医学研究、提供细胞种和进行细胞生物学研究。
在进行细胞传代实验时,需要注意控制细胞密度、使用合适的培养基、避免细菌和真菌污染等问题。
以下是细胞传代实验的具体步骤:1.细胞培养:从生物体中取出某种组织或细胞,模拟体内生理条件,在人工培养条件下使其生存、生长、繁殖或传代。
细胞培养可分为原代培养和传代(继代)培养。
直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养。
2.细胞分离:将原代培养的细胞进行分离,常用的方法有消化法、直接吹打法和离心分离法等。
不同类型的细胞需采用不同的分离方法。
3.细胞传代:将分离后的细胞进行传代,通常以1:2或1:3的比例进行分瓶。
传代过程中,需注意观察细胞分散情况,避免出现细胞成团现象,确保传代后的细胞为单细胞悬液。
4.细胞检测:传代实验后,对细胞进行检测,观察细胞的生长状况、形态特征等,以判断传代是否成功。
常用的检测方法包括显微镜观察、细胞计数、细胞活力检测等。
5.细胞冻存:对于需要长期保存的细胞,可以进行细胞冻存。
将细胞悬液与冷冻保护剂混合,然后放入低温冰箱或液氮中保存。
6.细胞复苏:当需要使用冻存细胞时,将其从低温冰箱或液氮中取出,逐步升温至室温,然后进行细胞培养。
7.细胞废弃处理:在实验过程中,会产生废弃细胞和培养液。
废弃细胞中含有生物活性物质,需进行适当的处理,避免对环境造成污染。
常用的处理方法包括消毒、灭菌、焚烧等。
通过以上步骤,可以顺利进行细胞传代实验。
在实验过程中,应注意细胞密度、培养基选择、污染防控等方面的问题,以保证实验结果的准确性和可靠性。
动物细胞传代培养试验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除篇一:细胞传代培养实验报告细胞传代培养一.实验目的初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程,为生物技术在医学上的应用打下基础。
二、原理从生物体中取出某种组织或细胞,模拟体内生理条件,在人工培养条件下使其生存、生长、繁殖或传代,这一过程称为细胞培养。
细胞培养技术的最大优点是使我们得以直接观察活细胞,并在有控制的环境条件下进行实验,避免了体内实验时的许多复杂因素,还可以与体内实验互为补充,可同时提供大量生物性状相同的细胞作为研究对象,耗费少,比较经济,因此成为生物学研究的重要手段。
细胞培养可分为原代培养和传代(继代)培养。
直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养,即将培养的细胞分散后,从一个容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养,为传代培养,传代培养的累积次数就是细胞的代数。
细胞培养是一种程序复杂、要求条件多而严格的实验性工作。
所有离体细胞的生长都受温度、渗透压、ph值、无机盐影响,消毒、配液等均有严格的规范和要求,特别是无菌操作是细胞培养成败的关键。
三、材料和试剂1、细胞:293细胞株2、试剂:0.25%胰酶、1640培养基(含10%小牛血清)3、仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、电动枪,培养板,吸液枪,5ml玻璃吸管、酒精灯等四、操作步骤1、将长满细胞的培养板中原来的培养液吸去。
2、加入1〜2m10.25%胰酶溶液,使板底细胞都浸入溶液中。
3、马上吸走胰酶液,再次加入2ml左右的胰酶,同样马上吸去,再加入几滴胰酶放入培养箱中消化几分钟4、用吸管将贴壁的细胞反复吹打成悬液,再按照观察的生长情况确定的传代比例传代5.根据确定的比例来取需要的量(剩余的细胞拿来做细胞计数),加入4ml左右的培养液6.前后左右的来回震荡使细胞分散均匀后,将培养板放入培养箱7.收拾整理超净台附:消化液配制方法:称取2.5克胰酶蛋白酶,加入100m110xpbs+纯水溶解到1L,滤器过滤除菌,4℃保存,用前可在37℃下回温。
细胞传代培养实验报告

一、实验目的1. 掌握细胞传代培养的基本操作流程。
2. 熟悉细胞传代培养过程中的注意事项。
3. 了解细胞传代培养在生物科学研究中的应用。
二、实验原理细胞传代培养是指将已经生长到一定阶段的细胞,通过特定的方法进行分离、洗涤、消化、计数和稀释等步骤,将细胞转移到新的培养容器中继续培养的过程。
细胞传代培养是维持细胞生长、扩大细胞数量和保持细胞特性的重要手段。
三、实验材料1. 细胞:HeLa细胞2. 培养基:DMEM/F12培养基(含10%胎牛血清)3. 试剂:0.25%胰蛋白酶、10%FBS、PBS缓冲液、酒精4. 仪器:超净工作台、倒置显微镜、细胞培养箱、离心机、移液枪、培养瓶/皿、吸管等四、实验步骤1. 准备阶段(1)将HeLa细胞从培养瓶中取出,用PBS缓冲液轻轻洗涤一次,去除残留的培养基。
(2)准备胰蛋白酶工作液,将其置于37℃水浴中预热。
(3)准备含有10%FBS的培养基,将其置于37℃水浴中预热。
2. 分离细胞(1)用移液枪吸取适量胰蛋白酶工作液,滴加到细胞培养皿中的细胞层上。
(2)将培养皿置于37℃、5%CO2的培养箱中消化2-3分钟。
(3)倒置显微镜下观察细胞,当大部分细胞变圆且亮时,加入等体积含有10%FBS的培养基终止消化。
(4)用移液枪轻轻吹打细胞,使其成为细胞悬液。
3. 计数(1)取适量细胞悬液,使用细胞计数仪或显微镜配合琼脂滴定法计数。
(2)根据计数结果,调整细胞密度至所需的浓度,一般为每毫升105-106个细胞。
4. 传代(1)向含有预热的培养基的离心管中加入细胞悬液,并轻轻混匀。
(2)离心管离心,在1500 rpm速度下离心3-5分钟,以沉淀细胞。
(3)弃去上清液,保留沉淀的细胞。
(4)加入适量的新鲜培养基,将细胞重新悬浮。
(5)将细胞悬液转移到新的培养瓶中,置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
五、实验结果1. 成功完成细胞传代培养,观察到细胞在新的培养瓶中继续生长。
2. 细胞生长状态良好,细胞密度符合预期。
细胞传代培养实验

实验步骤
注意事项
1. 吹打制悬:用吸管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。 2. 吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入 10 ml 离心管中。 3. 平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以 1 000 转/分钟离心 5 分钟。 4. 弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入 2 ml 培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬 液。 四、分装稀释细胞 1. 分装:将细胞悬液吸出分装至 2~3 个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。 2. 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的 5 生长,传代细胞的密度应该不低于 5×10 /ml,最后要做好标记。 五、传代培养 用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入 CO2 培养箱中继续培养。传代细胞 2 小时后开始贴附 在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积 25%时为一个+,占 50%为++,占 75%时为+++。
(细胞培养技 术)实验方法 原理
培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。 贴壁生长的细胞用消化法传代; 部分贴壁生长的细胞 用直接吹打可传代; 悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代, 或用自然沉降法吸除上 清后,再吹打传代。
实验材料
细胞
试剂、试剂盒
D-Hanks 液小牛血清 RPMI1640 双抗胰蛋白酶 EDTANHClNaHCO3
收起
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
注意事项
1. 严格的无菌操作 2. 适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消 化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立 即终止消化。 附:0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin) 配方:100 ml PBS,0.25 g 胰酶。 步骤:先配 100 ml PBS。 称胰酶 0.25 g。加入 PBS 中,低速搅拌。调 pH7.4。过滤,分装,-20℃ 保存,4℃短期内用完。 注意:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,酶就变性了。低温,防止酶失活;对难 消化的细胞,在上述配方中,加入 0.02 g 的 EDTA(0.02%) 根据细胞生长的恃点,传代方法有 3 种:悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代(Hela 细胞) 、贴壁生长细胞传代。
细胞的传代实验报告

细胞的传代实验报告细胞的传代实验报告细胞的传代实验是生物学研究中常用的一种实验方法,通过观察细胞在不同代数中的变化,可以了解细胞的生长、分裂和遗传特性等方面的信息。
本次实验旨在观察细胞在连续传代过程中的生长情况,并探讨细胞的传代对细胞特性的影响。
实验材料和方法:1. 实验材料:细胞培养基、细胞培养器具、显微镜等。
2. 实验方法:取一定数量的细胞,接种于含有适宜培养基的培养皿中,定期观察细胞的生长情况并记录。
实验过程:1. 第一代细胞接种:将细胞接种于培养皿中,加入适宜培养基,放置于恒温培养箱中,控制培养条件。
2. 观察细胞生长:每隔一段时间,取出培养皿,使用显微镜观察细胞的生长情况,包括细胞数量、形态和颜色等。
3. 细胞传代:当细胞达到一定密度时,将细胞进行传代,即将细胞分散到新的培养皿中,继续培养。
4. 连续传代:重复第2和第3步,观察细胞在连续传代过程中的变化。
实验结果:经过连续传代,观察到以下几个方面的变化:1. 细胞数量的增加:随着传代的进行,细胞数量逐渐增多。
初始接种的细胞数量较少,但随着细胞的分裂和生长,细胞数量呈指数增长。
这表明细胞具有较高的增殖能力。
2. 细胞形态的变化:在连续传代过程中,观察到细胞形态发生了一定的变化。
初始接种的细胞通常呈现典型的形态特征,如细胞核清晰可见,细胞质丰满。
但随着传代的进行,细胞形态逐渐变得不规则,细胞核变得模糊,细胞质出现空泡等。
3. 细胞生长速度的变化:在连续传代过程中,观察到细胞的生长速度逐渐减慢。
初始接种的细胞生长迅速,但随着传代的进行,细胞的生长速度逐渐减缓。
这可能是由于细胞在长时间培养中逐渐丧失了一些生长因子或细胞自身的功能受到了限制。
4. 细胞特性的变化:通过观察细胞在连续传代过程中的变化,可以发现细胞的特性也发生了一定的改变。
例如,细胞的分化程度可能发生变化,细胞的功能可能受到调控等。
这些变化可能与细胞的遗传特性和环境因素有关。
结论:细胞的传代实验结果表明,细胞在连续传代过程中会发生一系列的变化。
传代细胞培养实验报告单

实验名称:传代细胞培养实验实验日期:2023年4月10日实验者:张三一、实验目的1. 掌握哺乳动物细胞原代培养与传代培养的基本操作过程。
2. 熟悉细胞传代过程中所需的无菌操作技术。
3. 了解细胞传代对细胞生物学研究的重要性。
二、实验原理细胞培养是一种在人工条件下模拟体内生理环境,使细胞生长、繁殖或传代的技术。
细胞培养技术可以让我们直接观察活细胞,避免体内实验的复杂因素,为生物学研究提供大量生物性状相同的细胞作为研究对象。
细胞培养分为原代培养和传代培养。
原代培养是指从生物体中取出组织或细胞进行首次培养,而传代培养则是在原代培养基础上,将细胞从一个容器转移到另一个容器中扩大培养。
传代培养的累积次数即为细胞的代数。
三、实验材料1. 培养基:DMEM培养基(含10%胎牛血清、1%青链霉素双抗)2. 细胞:小鼠成纤维细胞3. 工具:超净台、移液器、吸管、培养皿、离心机、显微镜、无菌操作箱、消毒剂等四、实验步骤1. 培养基配制:按照说明书配制DMEM培养基,加入胎牛血清和青链霉素双抗。
2. 细胞复苏:将冻存细胞从-80℃冰箱取出,放入37℃水浴中解冻,轻轻摇匀后移入离心管,1000 rpm离心5分钟,弃上清,加入适量DMEM培养基重悬细胞。
3. 细胞接种:将重悬细胞接种于培养皿中,放入培养箱中培养,保持细胞密度在80%-90%。
4. 细胞传代:当细胞密度达到80%-90%时,进行细胞传代。
具体操作如下:a. 吸除旧培养基,用PBS缓冲液清洗细胞2-3次。
b. 加入适量胰蛋白酶,37℃水浴消化细胞,显微镜下观察细胞变圆、收缩,待大部分细胞脱离培养皿底面时,立即终止消化。
c. 加入适量DMEM培养基终止消化,用吸管轻轻吹打细胞,使其分散均匀。
d. 将细胞接种于新的培养皿中,放入培养箱中继续培养。
5. 细胞观察:在显微镜下观察细胞生长状态,记录细胞形态、生长速度等指标。
五、实验结果1. 细胞在培养皿中生长良好,细胞形态正常,呈梭形。
细胞传代的实验报告

一、实验目的1. 理解细胞传代培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握细胞传代培养的方法,提高细胞培养的纯度和活力。
3. 分析细胞传代过程中可能遇到的问题及解决方法。
二、实验原理细胞传代培养是指将培养的细胞从原代培养瓶中取出,通过胰蛋白酶消化分散成单个细胞,再将其转移到新的培养瓶中进行培养的过程。
细胞传代培养的目的是为了获得更多的细胞,并保持细胞的生长活力和纯度。
细胞传代培养的基本原理是利用细胞增殖的特性,将原代培养的细胞分散成单个细胞,再进行培养。
细胞传代培养过程中,需要注意以下几点:1. 细胞传代频率:细胞传代频率过高会导致细胞生长活力下降,过低则可能引起污染。
2. 胰蛋白酶浓度:胰蛋白酶浓度过高会损伤细胞,过低则难以将细胞分散成单个细胞。
3. 细胞密度:细胞密度过高会导致细胞之间竞争营养物质,过低则会影响细胞生长速度。
三、实验材料1. 细胞:原代培养的细胞(如人胚胎肾细胞、小鼠成纤维细胞等)。
2. 培养基:DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶。
3. 仪器:无菌操作台、超净工作台、培养箱、显微镜、移液器、培养瓶等。
四、实验步骤1. 将原代培养的细胞从培养瓶中取出,用移液器加入适量的胰蛋白酶,置于37℃水浴锅中消化。
2. 观察细胞消化情况,待细胞完全分散成单个细胞时,立即加入等量的胎牛血清终止消化。
3. 将细胞悬液转移至新的培养瓶中,加入适量的培养基,混匀。
4. 将培养瓶置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
5. 每隔一定时间(如3-5天)观察细胞生长情况,待细胞长满培养瓶底时,重复上述步骤进行细胞传代。
6. 观察细胞生长活力和纯度,分析细胞传代过程中可能遇到的问题及解决方法。
五、实验结果与分析1. 细胞生长活力:通过观察细胞在培养瓶中的生长情况,可以判断细胞传代培养的成功与否。
细胞生长活力高的细胞在培养瓶中生长迅速,细胞形态正常。
2. 细胞纯度:通过观察细胞在显微镜下的形态,可以判断细胞纯度。
纯度高的细胞形态一致,无杂质。
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2.细胞培养所用玻璃及塑料制品的处理
用于细胞培养的器材包括:细胞培养瓶, 细胞培养板,吸管,各种瓶子等。
目前,上述器材均可以从商家买到无菌一 次性的用品。但是,成本太高。
玻璃器材,经过湿热或者干热灭菌后可以 反复使用。
实验内容:
1.工作环境及表面的处理(超净台的使用)
* 早期细胞培养,依靠的是精湛的操作技术和尽可能的靠 近火焰一达到细胞的无菌化。
* 目前,超净台是使工作台无菌化最经济有效的手段。
(1)超净台的选择,应选择层流超净台。不能选择平流 超净台。超净台应该尽可能的安装紫外灯。 (2)超净台的维护,超净台的HEPA过滤层应该每一年 或一年后由认可的机构进行维修。
(3)使用超净台的方法,在每次使用前,应用紫外 灯照30分钟。首先打开吹风的开关,在关掉紫外 灯,打开日光灯。点燃酒精灯,开始操作。
(4)超净台表面的处理。
a. 应做到每日清洁,以使操作中溅出的培养液或其 它液体及时被清除而不蓄积,达到杜绝细菌和真 菌繁殖的目的。
b. 工作台中只限放置每日工作所必需的物品,其他 非必须物应当除去。
传代细胞培养实验
2005年5月
指导教师:费晓方
实验目的和要求:
掌握无菌操作技术。 了解传代细胞的培养的一般方法与步骤。 了解培养细胞的消化分散。 了解细胞计数方法。 了解培养液配制方法。 了解倒置显微镜的使用。
实验原理:
细胞培养是将机体内的某组织取出,分散成单 细胞,在人工条件下培养使其生存并不断生长、 繁殖的方法。借助这种方法可以观察细胞的分 裂繁殖、细胞的接触抑制、以及细胞的衰老, 死亡等生命现象。还可以利用培养细胞制备染 色体,分析外界因素(如理化因素)对细胞的 影响,研究细胞癌变等等。在细胞培养的基础 上发展了细胞融合、细胞杂交等细胞工程技术 及单克隆抗体技术。
装吸管或吸头的容器也不应该在工作区以外打开。
细胞培养中液体的吸取,均需机械移液装置移取。 切勿采用口吸的方法。口吸是最大的微生物污染源, 更重要的是细胞培养液及成分通过食入或吸入的方 式及入人体,可能对研究人员造成伤害。
细胞培养瓶在超净台中打开后,瓶盖应盖顶超下放 置与工作台中。
如果培养的细胞已经被污染,切勿直接倒掉,应高 压灭菌后倒掉处理。
动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。 直接从有机体获取的细胞进行的培养是原代培 养,若将培养细胞洗脱后转移到另外的容器中 进行在培养叫做传代培养。
目前,动物细胞培养技术已经达到一个新的 阶段:从不同分化组织衍生得到的许多类型的 细胞能够成功地在培养液中生长、反复传代。 在维持一个独特细胞系长达数月的过程中,记 录下细胞的倍增次数和生长速率是很有用的, 以便在合适的时间传代以及在体外生活是中不 同时间冻存细胞。
配制培养液需要滤菌装置:除菌器、真空 泵以及0.45μm或0.22 μm的滤膜。
培养液应贮藏在4°C冰箱中。
配好的培养液应在无抗菌素的无菌条件下 进行放置,每次配好后留样,培养72小时, 观察培养液确实没有污染后使用。
学习传代细胞的培养技术
本次试验应用HeLa细胞或A375-S2细胞 进行传代培养。
细胞的生长不仅产生CO2,也需要CO2才能生存。 所以,细胞的培养需要子在CO2培养箱中
CO2培养箱中CO2的浓度应与培养液中碳酸氢钠 平衡。如果CO2的浓度为5%,则配培养液中应 加入1.97g/L的碳酸氢钠。
培养瓶盖应轻轻的拧上,不要完全拧死,以保证 气体的交换。
培养液的pH值应为7.2至7.4。
湿润的培养箱是常见的污染源。通常由充满液体的 托盘提供培养箱合适的湿度,然而托盘本身及可导 致各种细菌和真菌的污染,这种污染还可能存在与 培养箱壁上和提供气体的管道上。应该定期对培养 箱进行加热处理。也可以采用70%乙醇擦洗表面, 并定期更换输送CO2管道,并将该管子浸泡与 20%的含氯漂白剂中消毒。
不宜进行高温高压灭菌的器材,可以浸泡 在70%乙醇中进行消毒,并在超净台上 吹干。
3.实验者的操作技术
无菌操作的原则:保证细胞培养板,细胞培养皿, 细胞培养瓶内部以及吸管包裹层等内部的无菌状态。
细胞培养应在超净工作台或有空气滤过装置的工作 间里进行。
培养液或其它溶液不应该在工作区以外打开。
为了防止交叉污染,超净台中每次应进行一种细胞 系的操作。
不应用的细胞应及时丢弃处理,不应继续放置于培 养箱中不予理睬。
4.细胞的处理以及维持细胞生长所需培
养液的无菌处理。
基本培养液由必须氨基酸、维生素、无机盐、葡 萄糖和作为生长因子、激素和贴壁因子来源的血 清组成。一般用碳酸氢钠(NaHCO3)体系进行 缓冲。
培养液的pH值应为7.2至7.4。
高密度细胞使细胞培养液中葡萄糖耗竭并产 生CO2和乳酸,在含酚红作为指示的培养液 中,培养液将从红色变为橙色。细胞培养液 长时间贮藏在4°C冰箱中,会使培养液的 pH值产生变化,变碱,是培养液的颜色呈深 品红紫色。应用时可用Hepes(N-2-羟乙基 哌嗪-N’-2-乙磺酸)调整。
可以向培养液中加入抗生素,比如青霉素, 链霉素,庆大霉素等,抑制由于操作中的微 小失误而导致的低水平的感染。但是,有时 由于抗生素的加入,也会使感染不易被迅速 发现。
培养液的配制:
商家一般以三种形式提供培养液:1.粉末 剂 (需要实验着配制)2.浓缩装(用无菌 水稀释即可)3.无需进一步处理的工作液 形式。由于粉末剂是其中最便宜的一种, 一般实验室较多采用。
HeLa 细胞:人子宫颈癌细胞株 A375-S2细胞:人黑色素瘤细胞株
实验材料:
每组的超净台中有以下物品: 1. PMI1640培养液1瓶;5ml小牛血
清(FCS) 1瓶;2ml胰蛋白酶 1瓶;1ml谷 氨酰胺 1瓶;1ml Hepes 1瓶;PBS(-)1 瓶 2. 灭菌1ml移液管 1支;装有试管的灭菌小 饭盒 1个;试管架1个;1ml ,200μl移液器 各1支;枪头盒2个;细胞计数板1块; 镊子1把,小烧杯1个;酒精灯1台; 培养好细胞的细胞培养瓶1个