微生物的培养与应用专题课件
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微生物的培养与应用课件
微生物分类
根据形态、遗传、生态等特点，微生 物可分为细菌、病毒、真菌等多个门 类，每个门类下又包含众多不同的物 种。
微生物培养的基本原理
无菌操作
微生物培养需要在无菌环境下进行， 以避免外来杂菌的污染。
选择性培养基
培养条件控制
微生物的生长和繁殖速度受温度、湿 度、pH值等环境因素的影响，需要控 制这些因素以获得最佳的培养效果。
微生物的培养与应用课件
目录 Contents
• 微生物培养概述 • 微生物培养技术 • 微生物的分离与鉴定 • 微生物的应用 • 微生物培养的挑战与前景
01
微生物培养概述
微生物的定义与分类
微生物定义
微生物是微小生物的统称，包括细菌 、病毒、真菌、原生动物等，它们在 自然界中广泛存在，对生态平衡和物 质循环具有重要作用。
通过配制特定的培养基，可以筛选和 分离特定的微生物。
微生物培养的重要性和应用领域
科学研究
工业生产
微生物培养是生物学、遗传学、生态学等 领域的重要研究手段，有助于深入了解微 生物的生理机制和生态行为。
微生物培养在发酵工程、酶工程等领域具 有广泛应用，如生产酒精、醋酸、抗生素 等。
医学与健康
环境监测与治理
将微生物接种在液体培养 基中，通过振荡或静止培 养，使微生物生长繁殖。
厌氧培养法
在无氧环境下培养厌氧微 生物，需要使用特殊的厌 氧培养装置。
自动化培养技术
自动液体培养系统
通过自动化设备进行液体培养，可实现连续培养和自动化检测。
微生物自动鉴定系统
利用计算机技术和图像识别技术，对微生物进行快速鉴定和分类。
无菌操作
在无菌环境下进行实验操作，避免微生物污染。
根据形态、遗传、生态等特点，微生 物可分为细菌、病毒、真菌等多个门 类，每个门类下又包含众多不同的物 种。
微生物培养的基本原理
无菌操作
微生物培养需要在无菌环境下进行， 以避免外来杂菌的污染。
选择性培养基
培养条件控制
微生物的生长和繁殖速度受温度、湿 度、pH值等环境因素的影响，需要控 制这些因素以获得最佳的培养效果。
微生物的培养与应用课件
目录 Contents
• 微生物培养概述 • 微生物培养技术 • 微生物的分离与鉴定 • 微生物的应用 • 微生物培养的挑战与前景
01
微生物培养概述
微生物的定义与分类
微生物定义
微生物是微小生物的统称，包括细菌 、病毒、真菌、原生动物等，它们在 自然界中广泛存在，对生态平衡和物 质循环具有重要作用。
通过配制特定的培养基，可以筛选和 分离特定的微生物。
微生物培养的重要性和应用领域
科学研究
工业生产
微生物培养是生物学、遗传学、生态学等 领域的重要研究手段，有助于深入了解微 生物的生理机制和生态行为。
微生物培养在发酵工程、酶工程等领域具 有广泛应用，如生产酒精、醋酸、抗生素 等。
医学与健康
环境监测与治理
将微生物接种在液体培养 基中，通过振荡或静止培 养，使微生物生长繁殖。
厌氧培养法
在无氧环境下培养厌氧微 生物，需要使用特殊的厌 氧培养装置。
自动化培养技术
自动液体培养系统
通过自动化设备进行液体培养，可实现连续培养和自动化检测。
微生物自动鉴定系统
利用计算机技术和图像识别技术，对微生物进行快速鉴定和分类。
无菌操作
在无菌环境下进行实验操作，避免微生物污染。
微生物的培养与应用ppt课件
40
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
微生物的培养技术及应用课件(共37张PPT)人教版选择性必修3
固氮微生物
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或化学药品，用于鉴别不同类型微 生物的培养基
例如：伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌 （菌落呈深紫色，并带有金属光泽）
4．培养基的营养组成
各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等 营养物质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊 营养物质以及O2的需求
（1）基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐
微生物
常药剂消毒法、 紫外线消毒法
适用对 象
操作空间、双手等
灭菌
使用强烈的理化方法杀 死物体内外所有的微生 物，包括芽孢和孢子
湿热灭菌、干热灭菌、 灼烧灭菌
培养微生物的器皿、接 种用具和培养基等
（1）常用的消毒方法
①煮沸消毒法：日常生活（餐具、食品等）常用100℃煮 沸5-6min。可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
阅读教材P9~10相关内容，回答以下问题： 1.何为培养基？
2.按照不同的培养基划分标准，培养基有哪些种类、 配制特点及其应用？
3.不同的培养基有不同的配方，但是其基本成分都相 同，都包括哪些营养元素？有何作用？请举例说明。
1、培养基概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供 其生长繁殖的营养基质。 2、培养基的作用： 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物 （ ①提供微生物繁殖所需各种 营养，②异养微生物的能源）
（只有蛋白质）
微生物结构简单、个体微小，眼睛看不到， 若想得到纯净的微生物，就必须对其进行 培养和分离。
2、实验室培养微生物条件
培养微生物需要解决的两个问题是什么？ （1）为微生物提供合适的营养和环境条件
培养基 （2）确保其他微生物无法混入，并将需要的 微生物分离出来
无菌技术(获得纯净培养物）
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或化学药品，用于鉴别不同类型微 生物的培养基
例如：伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌 （菌落呈深紫色，并带有金属光泽）
4．培养基的营养组成
各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等 营养物质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊 营养物质以及O2的需求
（1）基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐
微生物
常药剂消毒法、 紫外线消毒法
适用对 象
操作空间、双手等
灭菌
使用强烈的理化方法杀 死物体内外所有的微生 物，包括芽孢和孢子
湿热灭菌、干热灭菌、 灼烧灭菌
培养微生物的器皿、接 种用具和培养基等
（1）常用的消毒方法
①煮沸消毒法：日常生活（餐具、食品等）常用100℃煮 沸5-6min。可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
阅读教材P9~10相关内容，回答以下问题： 1.何为培养基？
2.按照不同的培养基划分标准，培养基有哪些种类、 配制特点及其应用？
3.不同的培养基有不同的配方，但是其基本成分都相 同，都包括哪些营养元素？有何作用？请举例说明。
1、培养基概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供 其生长繁殖的营养基质。 2、培养基的作用： 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物 （ ①提供微生物繁殖所需各种 营养，②异养微生物的能源）
（只有蛋白质）
微生物结构简单、个体微小，眼睛看不到， 若想得到纯净的微生物，就必须对其进行 培养和分离。
2、实验室培养微生物条件
培养微生物需要解决的两个问题是什么？ （1）为微生物提供合适的营养和环境条件
培养基 （2）确保其他微生物无法混入，并将需要的 微生物分离出来
无菌技术(获得纯净培养物）
微生物的培养与应用精品PPT课件
1.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方
物质 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂
重量 5g
10g 5g 20g
水
定溶至 1000mL
2、配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
3、注意事项:
①倒平板的温度一般在50℃左右适宜 （温度过高会烫手，过低培养基又会凝固） ②平板需倒置 （这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防 止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染）
特殊营养物质：如:生长因子(即细菌 生长必需，而自身不能合成 的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌 呤、嘧啶) pH：细菌pH为6.5–7.5; 放线菌pH
小结
培养基的营养物质及作用
营养物质
作用
举例
碳源
提供碳元素（有机碳源还能提供 无机碳源：CO2、NaHCO3
能量）
有机碳源：糖类、脂肪酸、
花生粉饼、石油
染的方法。 2、消毒：指使用较为温和 的物理或化学方法杀死物体 表面或内部的部分微生物 （不包括芽孢和孢子） 3、灭菌：使用强烈的理化 因素杀死物体内外所有的微 生物，包括芽孢和孢子。 4、归纳实验室常用的消毒
小结消毒
小结灭菌
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物 被其他外来微生物污染外，还有什么目的？
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消 毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
3 .利用酒精消毒时，酒精浓度是不是越高越好？
氮源
提供氮元素，主要用于合成蛋白 分子态氮、氨、铵盐、硝酸 质、核酸以及含氮的代谢产物 盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨
物质 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂
重量 5g
10g 5g 20g
水
定溶至 1000mL
2、配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
3、注意事项:
①倒平板的温度一般在50℃左右适宜 （温度过高会烫手，过低培养基又会凝固） ②平板需倒置 （这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防 止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染）
特殊营养物质：如:生长因子(即细菌 生长必需，而自身不能合成 的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌 呤、嘧啶) pH：细菌pH为6.5–7.5; 放线菌pH
小结
培养基的营养物质及作用
营养物质
作用
举例
碳源
提供碳元素（有机碳源还能提供 无机碳源：CO2、NaHCO3
能量）
有机碳源：糖类、脂肪酸、
花生粉饼、石油
染的方法。 2、消毒：指使用较为温和 的物理或化学方法杀死物体 表面或内部的部分微生物 （不包括芽孢和孢子） 3、灭菌：使用强烈的理化 因素杀死物体内外所有的微 生物，包括芽孢和孢子。 4、归纳实验室常用的消毒
小结消毒
小结灭菌
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物 被其他外来微生物污染外，还有什么目的？
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消 毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
3 .利用酒精消毒时，酒精浓度是不是越高越好？
氮源
提供氮元素，主要用于合成蛋白 分子态氮、氨、铵盐、硝酸 质、核酸以及含氮的代谢产物 盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨
专题2微生物的培养与应用
必要条件： 1、提供合适的营养和环境条件； 2、确保无其他微生物混入。
教学ppt
1
教学ppt
2
生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的 化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)
教学ppt
3
教学ppt
6
教学ppt
7
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他 外来微生物污染外，还有什么目的？
答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（H、
P18
37℃恒温箱培养 图片
22
教学ppt
23
教学ppt
24
教学ppt
25
教学ppt
26
土壤取样
P28
选择培养
梯度稀释
挑选产生透明 圈的菌落
将样品涂布到鉴别纤维 素分解菌的培养基上
教学ppt
27
教学ppt
33
氮源
碳源
无机盐
水
恒温培养箱
无菌水
教学ppt
高压蒸汽灭菌
34
盐（NaCl）
多 高
选择培养基
教学ppt
35
无氮
P20
教学ppt
9
本课题知识小结:
稀释涂布平板法
菌种的保藏
教学ppt
19
教学ppt
20
①原理： ②操作：
稀释涂布平板法
c.设置对照组，排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高 实验结果的可信度。
教学ppt
1
教学ppt
2
生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的 化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)
教学ppt
3
教学ppt
6
教学ppt
7
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他 外来微生物污染外，还有什么目的？
答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（H、
P18
37℃恒温箱培养 图片
22
教学ppt
23
教学ppt
24
教学ppt
25
教学ppt
26
土壤取样
P28
选择培养
梯度稀释
挑选产生透明 圈的菌落
将样品涂布到鉴别纤维 素分解菌的培养基上
教学ppt
27
教学ppt
33
氮源
碳源
无机盐
水
恒温培养箱
无菌水
教学ppt
高压蒸汽灭菌
34
盐（NaCl）
多 高
选择培养基
教学ppt
35
无氮
P20
教学ppt
9
本课题知识小结:
稀释涂布平板法
菌种的保藏
教学ppt
19
教学ppt
20
①原理： ②操作：
稀释涂布平板法
c.设置对照组，排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高 实验结果的可信度。
微生物的培养技术及应用ppt课件
二、无菌技术 获得纯净的微生物培养物的关键是 防止杂菌污染 ， 主要包括 消毒 和 灭菌 。
无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，
还有什么作用？
还能有效避免操作者被微生物感染。
二、无菌技术 1.消毒 （1）概念
使用较为 温和 的物理、化学或生物等方法杀死物体 表面 或内部 一部分 微生物。 （2）消毒方法
杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污 接种结束后 染环境和感染操作者
接种环共需灼烧 几次？
6次
【问题探究2】在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
避免接种环温度太高，杀死菌种。
【问题探究3】在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次 划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端酵母菌的数目比线条起始处要 少 ，每次从上一次 划线的末端开始，能使酵母菌的数目随着划线次数的增加而逐步 减少 ， 最终能得到由 单个 细胞繁殖而来的 菌落 。
培养、分离出 特定微生物
鉴别不同种类 微生物
【注意】病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能
利用人工培养基来培养。
一、培养基的配制 4.培养基的营养构成：（1）基本成分
一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等。
组分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl
H2O
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
含量
怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物呢？
应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并 控制发酵条件，避免杂菌进入。
研究和应用微生物的前提，发酵工程的重要基础： 防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物。
在实验室培养微生物： ①为微生物提供合适的营养和环境条件 ——培养基
②确保其它微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。 ——无菌技术、微生物的纯培养
专题微生物的培养与应用ppt文档
【例2】可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( A ) A．以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B．以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C．以尿素为惟一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．以尿素为惟一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
三、分解纤维素的微生物的分离 (1)实验原理
即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
【答案】 (1)葡萄糖 尿素 (2)有选择作用。因为此配方中尿素是惟一氮源， 因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长 (3)A
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．分离的原理
土壤中的细菌能合成脲酶，能把尿素分解成无机物。
泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中
筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 原 油 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养
基属于 选择 培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法
有两种，即 平板划线法 和 稀释涂布平板法 。
2．纯化大肠杆菌以及菌种的保藏
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：
计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
【友情提醒】平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的温度也比较高，将平板倒置，既可以 使培养基表面的水分更好地挥发；又可以防止皿盖上的 水珠落入培养基，造成污染。
(2)纯化大肠杆菌
①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细 胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的 细菌菌落。
(2)纯化大肠杆菌
平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续 划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；
微生物的培养与应用(PPT-41)
• 无碳源培养基
分离自养型微生物
• 加入青霉素等抗生素的培养基
分离导入了目的基因的受体细胞
3、不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材附录内容)
4、培养基的营养构成：
一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等 营养物质，
另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营 养物质，例如：生长因子(即细菌生长必需， 而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨 基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗 透压等的要求。
3.培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果 不同，请分析产生差异的原因？
培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不 同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大。
4.如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析其 可能的原因。
无菌操作未达到要求： 可能是培养基灭菌不彻底； 可能是接种时发生了污染；
五、结果分析与评价
1.未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落 生长，说明了什么？
未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长， 说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
2.在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌 落？它们的大小、形状、颜色相似？
如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、形 状、颜色相似的菌落。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通 的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基，由于这 种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的 营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨、NaCl和琼脂。 其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和 维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供 无机盐。 由于这种培养基多用于培养细菌，因此要用稀酸或 稀碱将其pH调至中性或微碱性(7.0-7.2)，以利于细菌 的生长繁殖。
分离自养型微生物
• 加入青霉素等抗生素的培养基
分离导入了目的基因的受体细胞
3、不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材附录内容)
4、培养基的营养构成：
一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等 营养物质，
另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营 养物质，例如：生长因子(即细菌生长必需， 而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨 基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗 透压等的要求。
3.培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果 不同，请分析产生差异的原因？
培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不 同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大。
4.如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析其 可能的原因。
无菌操作未达到要求： 可能是培养基灭菌不彻底； 可能是接种时发生了污染；
五、结果分析与评价
1.未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落 生长，说明了什么？
未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长， 说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
2.在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌 落？它们的大小、形状、颜色相似？
如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、形 状、颜色相似的菌落。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通 的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基，由于这 种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的 营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨、NaCl和琼脂。 其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和 维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供 无机盐。 由于这种培养基多用于培养细菌，因此要用稀酸或 稀碱将其pH调至中性或微碱性(7.0-7.2)，以利于细菌 的生长繁殖。
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。
③
（6）调右整表pH中各成分重量确定的原 ④
则是
。
（7）若右表培养基用于菌种鉴定，⑤
应该依增微加生物的的成生分长需要确定
。⑥
K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2
4.0g 9.25g 0.5g 0.5g
⑦
H2O
100m l
琼脂（或凝固剂）
㈣.无菌技术
思考： 1. 获得纯净培养物的关键？
含量 10g
0.4g
4.0g 9.25g 0.5g 0.5g 100ml
Hale Waihona Puke （3）若除去成分②，加入（CH2O），该培养基可用于培
养 固氮微生。物
编号 成分 含量
（4）表中营养成分共有 3 类。① 粉状硫 10g
（5）不论何种培养基，在各种成 分都溶化后分装前，要进行的
②
（NH4） 2SO4
0.4g
是
在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌。利用上述方法
能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ）
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④纤维素分解菌
A.④②
B.①②
C.①③
D.③④
解析：选A。本题考查了微生物分离知识。纤维素分解菌可 以利用纤维素，大部分微生物却不能；培养基中加入青霉素可 以抑制细菌和放线菌，但霉菌能够生长。
物的生长
培养、分离出特 定微生物
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂 或化学药品,用以鉴别不同
种类的微生物
鉴别不同种类微
生物 P84
练习
1.不能作为异养微生物碳源的是（D） A．牛肉膏 B．含碳有机物 C．石油 D．含碳无机物
2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的 主要差别是（A ）
A．碳源 B．氮源
⑶.常见的生长因子：
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
㈢.培养基
1.概念：培养基（培养液）是由人工方法配制 而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。
P14
2.培养基的成分：
一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物
质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营
养物质以及氧气等的要求。
P15
3.培养基的类型和用途
防止外来杂菌的入侵
2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他 外来微生物污染外，还有什么目的？（P15 旁栏思考）
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
3. 消毒和灭菌有何不同？
4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些？
消毒与灭菌的比较
比 理化因素的 消灭微生物 芽孢和孢子 较 作用强度 的数量 能否被消灭 项
表面灭菌和空气 灭菌等使用 紫 外线 灭菌法， 所用器械是 紫 外灯 。照射 30min，可先喷 洒石炭酸或煤酚 皂溶液加强消毒 效果。
（2）灭菌 a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌
a. 灼烧灭菌
注意适用范围
微生物的接种工具 (接 种环、接种针)或其 他金属用具直接在火 焰的充分燃烧层灼烧
C．无机盐 D．生长因子
3.下列关于生长因子的说法中，不正确的一项是 （ B）
A．是微生物生长不可缺少的微量有机物
B．是微生物生长不可缺少的微量矿质元素
C．主要包括维生素、氨基酸和碱基等
D．一般是酶和核酸的组成成分
4.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的
微生物。在碳源为纤维素的培养基上，大部分微生物无法生长；
5．右表是某微生物培养 基成分，请据此回答：
（1）右表培养基可培养 的微生物类型 是 自养型微生。物
（2）若不慎将过量 NaCl加入培养基中。如不 想浪费此培养基，可再加 入 含碳有机物 ，用于培 养
金黄色葡萄球菌 ，
编号 ①
②
③ ④ ⑤ ⑥ ⑦
成分 粉状硫 （NH4） 2SO4 K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2 H2O
消 较为温和 部分生活状
毒
态的微生物
不能
灭 强烈 全部微生物
能
菌
3.常用的消毒与灭菌的方法 ⑴.消毒的方法：
①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。 ②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。 ③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。 ④紫外线消毒。
划分标准 物理性质 化学成分
用途
培养基的种类
培养基种类
特点
用途
液体培养基
不加凝固剂
工业生产
半固体培养基 固体培养基
加凝固剂，如琼脂
观察微生物的运动、 分类鉴定
微生物分离、鉴定、 活菌计数、保藏菌
种
天然培养基 合成培养基
含化学成分不明确的天然物 质
培养基成分明确
工业生产 分类、鉴定
选择培养基
在培养基中加入某种化学物 质,以抑制不需要的微生物 的生长,促进所需要的微生
㈡.微生物需要的营养物质及功能
微生物需要的五大类营养要素物质是： 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水
1.微生物的碳源
⑴.概念 ：凡是能为微生物提供所需碳元素的 营养物质。
⑵.来源： ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生 粉饼、石油等
⑶.作用：①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
3.细菌的菌落
⑴.定义： 单个或者少数细菌在固体培养基上大量 繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有 一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
⑵.特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、 透明度等。
⑶.功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落， 可以作为菌种鉴定的重要依据。
几 种 菌 落 及 其 形 态
几 种 菌 落 及 其 形 态
b. 干热灭菌 160－170℃ ；1－2h 能耐高温的需要保持干
燥的物品( 玻璃器皿)
c. 高压蒸汽灭菌 100kPa 121℃ 15-30min
通常用于培养基的灭菌
P16旁栏思考
请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。 ⑴培养细菌用的培养基与培养皿 ⑵玻棒、试管、烧瓶和吸管 ⑶实验操作者的双手
一.微生物基础知识
㈠.微生物的类群
原核类: 细菌、支原体、放线菌、蓝藻
原生生物：显微藻类、原生生物
微
（如：草履虫、变形
生 真核类
虫等）
物
真菌：酵母菌、霉菌、食用菌
非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒
◆微生物的共同特点：个体微小、结构简单
1.细菌的形态
球菌
杆菌
弧菌
2.细菌的繁殖 二分裂
为抵抗不良环境可形成细菌的休眠体——芽孢
2.微生物的氮源
⑴.概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 ⑵.来源： ①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。
②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨 基酸等 ⑶.作用： 主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产 物。
3.生长因子
⑴.概念：微生物生长不可缺少的微量有机物。
⑵.作用： 酶和核酸的组成成分。