高效液相色谱仪主要组成
Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100series安捷伦⾼效液相⾊谱仪操作规程Agilent1100⾼效液相⾊谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100⾼效液相⾊谱系统主要由⼯作站、在线脱⽓机、柱温箱、输液泵、⾃动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及⼯作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进⼊待机状态，指⽰灯为黄⾊或⽆⾊。
1.2.2打开HP ChemStations,进⼊Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进⼊⼯作站的操作页⾯。
该页⾯主要由以下⼏部分组成：最上⽅为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下⽅为快捷操作图标，由多个样品连续进⾏分析、单个样品进样分析、调⽤⽂件、保存⽂件等；左边为样品信息栏；中部为⼯作站各部件的⼯作流程⽰意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为⾊谱⼯作参数：进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等。
2.⾊谱条件的设定(⾊谱条件的设定可以通过下列⼏种⽅法实现2.1直接设定在操作页⾯的右下部⼀⾊谱⼯作参数中设定。
将⿏标移移⾄要设定的参数如进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等，单击⼀下，即可显⽰该参数的设置页⾯，键⼊设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调⽤已设置好的⽂件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定⽂件名，单击“OK”，此时，⼯作站即调⽤所选⽤⽂件中设定的参数。
如欲进⾏修改，则可同2.1项下，在⾊谱⼯作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页⾯中键⼊设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新⽂件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页⾯中键⼊设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新⽂件命名，单击“OK”。
高效液相色谱仪组成
高效液相色谱仪组成
高效液相色谱仪是一种广泛应用于分析化学、生物化学、环境分析
等领域的仪器设备，它能够快速准确地分离各种化学成分并进行定量
分析。
下面是高效液相色谱仪的组成部分：
1.液相泵
液相泵是高效液相色谱仪中的重要组成部分之一，主要作用是将溶液
按计划流量输送到色谱柱中，为后续的分离和分析提供必要的支持。
2.进样器
进样器是将待测样品导入到高效液相色谱仪系统中的部件，其结构一
般由进样针、进样器、样品瓶等组成，它能够自动化地进行定量或定
体积的进样操作。
3.色谱柱
色谱柱是高效液相色谱仪中的核心部件之一，它能够根据不同的化学
性质对待测样品进行快速准确的分离，常用的色谱柱包括反相色谱柱、离子交换柱、凝胶柱等。
4.检测器
检测器是高效液相色谱仪中的另一个重要组成部分，通常包括紫外可
见检测器、荧光检测器、电化学检测器等，它能够对分离后的化合物
进行快速灵敏的检测和定量分析。
5.色谱数据系统
色谱数据系统是高效液相色谱仪中的一款软件程序，它能够实现对色谱分离和检测数据的自动采集、处理和分析，从而实现自动化分析。
总的来说，高效液相色谱仪的组成部分非常复杂，但是只有这些部分综合作用才能达到高效、准确地分离和检测化合物的目的。
高效液相色谱仪的五大组成部分
高效液相色谱仪的五大组成部分
高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）的五大组成部分包括：
1. 液相分离部分：液相分离部分由色谱柱和液相泵组成。
色谱柱是分离和分析样品的地方，其中填充有固定相，可以根据其化学特性选择不同的色谱柱。
液相泵则通过压力将试样和溶剂混合并推送进入色谱柱。
2. 采样和进样系统：采样和进样系统用于将待分析的样品引入到色谱柱中。
这包括样品的准备、进样量的控制和溶剂的混合等操作。
3. 检测器：检测器用于检测分离出的化合物，并将其转化为可观察的信号。
常见的HPLC检测器包括紫外-可见吸收光谱检
测器、荧光检测器、折射率检测器和质谱检测器等。
4. 数据处理系统：数据处理系统用于记录和分析检测到的信号，并进行数据的整理、处理和解释。
这些系统可以包括计算机软件和数据处理设备。
5. 溶剂系统：溶剂系统由溶剂储罐、混合器、进样泵和排泄器等组成，用于准备溶剂，并将其送入色谱柱中。
溶剂系统需要保持恒定的压力和流量，以确保色谱分离的准确性和重现性。
高效液相色谱仪组成及日常维护
减少死体积 防止填料的氧化
常用的脱气方法有： 抽真空脱气法： 特点：可以一次完成过滤和脱气任务 注意：抽真空会引起混合溶剂组分的
变化，适合单一溶剂体系
超声波脱气法 简单，但效果不理想
常用的脱气：
(1)使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓 冲液建议不超过两天，最好每天更换
双柱塞往复式串联泵示意图
输液系统的辅助设备
主要有管道过滤器、脉动阻尼器、由 压力传感器组成的压力测量、显示装置， 以及流动相流量的测量装置
梯度洗脱装置 梯度洗脱技术可以提高柱效、缩短分
析时间，改善检测器的灵敏度，它类似于 GC种使用的程序升温技术
影响梯度洗脱的主要因素有：溶剂的 纯度、溶剂的互溶性、检测器的种类
二极管阵列检测器
紫外-可见光检测器光路示意图
光栅
氘灯
狭缝
光电二极管
流通池
可变波长紫外检测器
﹠ 选用氘灯作为光源，在190—600 nm 范围内可连 续调节，选择不同的波长检测
流动相的要求：
(4)pH的影响
高压输液泵和梯度洗脱装置
性能：①泵体材料耐化学腐蚀 ②能在高压下连续工作 ③ 输液流量范围宽
对填充柱：分析型输出流量为0.1~10 ml/min 制备型输出流量为1~100 ml/min
对微孔柱：分析型输出流量为10~1000 μl/min 制备型输出流量为1~9900 μl/min
吸光度∶ A = -log(T)= log(I0/I)
吸光度 ∶ A = abc
溶剂的影响
不同种类溶剂有其截止波长 溶剂的质量好坏对其截止波
长有影响 何为溶剂质量不好?
含紫外吸收的杂质 溶解在其中的氧气 缓冲液溶质的紫外吸收
液相色谱仪的结构和工作原理
液相色谱仪的结构和工作原理
液相色谱仪（Liquid Chromatography，简称LC）是一种分离和分析化合物的仪器，主要应用于生物、药学、环境和化学等领域。
以下是液相色谱仪的基本结构和工作原理：
结构：
1. 溶剂输送系统：通常由一个高压泵组成，用于将溶剂以高压推送到色谱柱中。
2. 自动进样器：用于将样品自动注入到色谱柱中，确保样品的精准、快速进样。
3. 色谱柱：是色谱仪中最关键的部分，其中进行样品的分离。
柱内填充有固定相，样品在此相中被分离。
4. 检测器：用于检测样品分离后的峰值，最常见的检测器包括紫外-可见吸收检测器（UV-Vis Detector）、荧光检测器等。
5. 信号处理系统：将检测器获得的信号转换为可视化的结果，通常是色谱图。
6. 数据采集和处理系统：用于采集、分析和处理检测器输出的数据，生成最终的分析结果。
工作原理：
1. 样品注入：样品通过自动进样器被注入到高效液相色谱仪系统。
2. 溶剂输送：溶剂通过高压泵被输送到色谱柱。
3. 分离过程：样品在色谱柱中经过分离，这是因为样品分子在柱内与填充固定相的相互作用不同。
4. 检测：检测器测量样品分离后的峰值，生成相应的信号。
5. 数据处理：信号经过信号处理系统和数据采集系统，最终生成色谱图。
在液相色谱中，分离过程是通过样品在液相（溶剂）中的相互作用来实现的，相比气相色谱，它适用于高极性、热不稳定和大分子量的化合物。
液相色谱仪的选择取决于分析的样品类型、目标化合物和分辨率的要求。
高效液相色谱仪主要组成
高效液相色谱仪主要组成
高效液相色谱仪主要由以下几个主要组成部分构成：
1. 洗脱系统：包括溶剂供应系统、溶剂混合系统和洗脱泵。
溶剂供应系统提供所需的洗脱溶剂，溶剂混合系统将各种溶剂按照一定比例混合，洗脱泵负责将混合溶剂送入色谱柱进行洗脱。
2. 色谱柱：是液相色谱分离的关键部分，常用的色谱柱有反相、离子交换、正相、凝胶等多种类型，可以选择不同类型的色谱柱来实现不同的分离需求。
3. 检测器：常用的检测器有紫外-可见吸收检测器（UV-Vis）、荧光检测器、电化学检测器等，用于检测样品在分离过程中的信号变化。
4. 数据采集系统：用于采集和分析检测器输出的信号，并进行峰识别、峰面积积分等数据处理。
5. 自动进样系统：用于将待分离样品按照一定的比例或体积注入到色谱柱中，常见的进样方式有手动进样、自动进样和固定容积进样等。
6. 控制系统：用于控制仪器的运行参数和实时监测仪器的工作状态，如控制洗脱泵的流速、控制检测器的工作波长等。
以上是高效液相色谱仪的主要组成部分，不同型号的仪器可能具有不同的配置和功能，但大致都包括了这些组成部分。
液相色谱仪的基本构造和各部分作用
液相色谱仪的基本构造和各部分作用液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
它通过将待测样品溶解在流动相中，利用固定相对溶质进行分离和分析。
液相色谱仪的基本构造和各部分作用对于了解其工作原理和性能非常重要。
本文将围绕液相色谱仪的基本构造和各部分作用展开阐述。
一、基本构造1.1 主体部分液相色谱仪的主体部分包括进样器、柱温箱、检测器和数据处理系统。
进样器用于将待测样品引入色谱柱系统，柱温箱用于控制色谱柱的温度，检测器用于检测溶质的浓度和组成，数据处理系统用于数据的采集与分析。
1.2 流动相传递系统流动相传递系统由溶剂瓶、输液泵、进样阀和色谱柱等组成。
溶剂瓶用于存储流动相溶剂，输液泵用于将溶剂从溶剂瓶中输送至色谱柱，进样阀用于控制待测样品的输入，色谱柱用于溶质的分离。
1.3 控制系统控制系统包括温度控制、流量控制、压力控制和信号采集等功能。
通过对这些参数的精确控制，可以实现对色谱分离过程的精确控制和数据采集。
二、各部分作用2.1 进样器进样器的作用是将待测样品引入色谱系统，并确保样品的准确、快速输入。
进样器通常分为自动进样器和手动进样器两种类型，能够满足不同实验需求。
2.2 柱温箱柱温箱的作用是控制色谱柱的温度。
适当的温度可以提高分离效率和减少分离时间，对于一些高温或低温敏感的样品分析也有重要作用。
2.3 检测器检测器是液相色谱仪的核心部件，主要用于检测溶质的浓度和组成。
常见的检测器有紫外-可见检测器、荧光检测器、电化学检测器等，不同的检测器适用于不同类型的溶质。
2.4 数据处理系统数据处理系统用于数据的采集与分析。
它能够实现对色谱分离过程中产生的数据进行实时采集和处理，提高数据的准确性和可靠性。
2.5 流动相传递系统流动相传递系统起着输送溶剂和样品的作用，是保证液相色谱分离正常进行的重要组成部分。
其中输液泵的性能直接影响分离的准确性和稳定性。
2.6 控制系统控制系统通过对温度、流量、压力等参数的控制，实现对色谱分离过程的精确控制和数据采集。
高效液相色谱分析法(仪器+组成+分离类型+流动相选择)
2、主 要 部 件
(1) 高压输液泵
主要部件之一，压力：30MPa以上。 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（ <10μm），液体的流动相高速通过时，将产生 很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱 的特点之一。 应具有压力平稳、脉冲小、 流量稳定可调、耐腐蚀等特性
(2)梯度淋洗装置
3.离子交换色谱分离固定相
结构类别： （1）薄壳型离子交换树脂
薄壳玻璃珠为担体，表 面涂约1%的离子交换树脂； （2）离子交换键合固定相
薄壳键合型；微粒硅胶 键合型（键合离子交换基团）
树脂类别： （1） 阳离子交换树脂（强酸 性、弱酸性） （2） 阴离子交换树脂（强碱 性、弱碱性）
4. 空间排阻分离固定相
liquid-solid adsorption chromatography 固定相：固体吸附剂如硅胶、氧化铝等，较
常使用的是5～10μm的硅胶吸附剂；
流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 基本原理：利用溶质分子占据固定相表面吸 附活性中心能力的差异；适用于分离相对分子 质量中等的油溶性试样，对具有官能团的化合 物和异构体有较高选择性； 缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾；
GC：H = A + B / u + C • u （填充柱）
A = 2λ • dp
A ∝ λ • dp
B = 2γ • Dm = 2γ • Dg B ∝ t R ，B ∝ Dg
Dg
∝
T η
或Dg
∝
T M
B = 2γ • Dm
Dm
∝
T η
柱温T ↓低，流动相η ↑大 ⇒B相忽略
在高效液相色谱中, 液体的扩散系数
(4) 高效分离柱
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高效液相色谱仪主要组成
高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种在化学分析中广泛使用的分离技术，主要用于分离和测
定样品中的化合物。
HPLC是液相色谱的一种进化形式，相比传统的液
相色谱，其分离效率更高，分离速度更快。
下面将介绍HPLC的主要组
成部分。
1.液相输送系统：液相输送系统由溶剂供应、进样、混合和泵送
过程组成。
其中，溶剂供应单元负责提供所需的溶剂，通常由一个贮
液瓶和一组输送管道组成。
进样器用于将待分析样品注入到流动相中，常见的进样方式有汽缸进样和自动进样器。
混合器用于混合不同的溶
剂以得到所需的流动相。
泵送单元负责将混合好的流动相通过色谱柱
进行分离。
2.色谱柱：色谱柱是HPLC中最为重要的部分，用于分离样品中的
化合物。
色谱柱是由特定的填充材料填充而成，填充材料可以根据待
分离样品的性质选择不同的类型，如反相色谱柱、离子交换色谱柱等。
色谱柱通常由不锈钢、玻璃或硅胶等材料制成。
在色谱柱两端，通常
会安装一些连接件，如高压接头和柱连器，以确保柱与其他部件的连
接牢固。
3.检测器：检测器用于检测色谱柱流出的化合物，并将其转化为
可以被记录和分析的电信号。
常见的HPLC检测器包括紫外可见光检测器、荧光检测器、质谱检测器等。
不同的检测器可以对不同类型的化
合物进行特异性检测。
4.数据处理系统：数据处理系统用于记录、处理和分析HPLC实验
得到的数据。
数据处理系统通常由计算机和相关的软件组成。
计算机
负责与HPLC仪器的其他部件进行通信，并将检测到的信号转化为数字
数据。
软件则用于对数据进行处理和分析，如峰识别、峰面积积分和
定量分析等。
5.控制系统：控制系统用于控制整个HPLC仪器的运行。
控制系统
通常由一个控制面板和相应的控制器组成，用于设置和调节液相输送
系统、检测器和数据处理系统的参数。
通过控制面板，用户可以设置
流速、柱温、检测器波长等参数，以满足不同的分析要求。
除了上述主要组成部分，HPLC仪器还可以根据需要添加其他附件，如脱泡系统、自动采样器、冷却系统等，以扩展其功能和提高实验效
率。
不同类型的HPLC仪器在细节上可能有所不同，但上述的主要组成部分是构成HPLC仪器的核心元件。
高效液相色谱仪的主要组成部分密切配合，共同完成分离、检测和数据处理等分析任务，为广大科研工作者提供了一种强大而可靠的分析工具。