藏药巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠粒-巨噬系造血功能的影响及机理研究
藏药经方滋补酥油颗粒毒理学研究
藏药经方滋补酥油颗粒毒理学研究陈银芳;余日跃;多吉;格桑顿珠;德吉;白玛措姆;多杰仁青【期刊名称】《时珍国医国药》【年(卷),期】2011(22)11【摘要】目的对新药藏药滋补酥油颗粒进行急性毒性及长期毒性试验研究,为临床安全用药提供参考。
方法①急性毒性试验:昆明种小鼠40只,随机分成给药组和对照组,采用最大给药量法观察小鼠的急性毒性反应;②长期毒性试验:SD大鼠120只,随机分成4组。
连续灌胃给药6个月,停药恢复1个月。
观察大鼠长期毒性反应。
结果藏药滋补酥油颗粒急性毒性实验未见明显毒性反应,小鼠最大耐受量按浸膏计为80.0 g/kg,该剂量相当于成人临床等效剂量的242.42倍。
长期毒性实验,高、中、低剂量给药组大鼠在给药期和恢复期都没有出现明显的毒副反应。
可初步确定大鼠180 d的最大安全灌服剂量按浸膏计为13.3 g/kg。
结论在该实验条件下,藏药滋补酥油颗粒对受试动物未见明显的急性毒性和长期毒性作用,表明该药具有良好的安全性。
【总页数】3页(P2634-2636)【关键词】藏药;滋补酥油;急性毒性;长期毒性;颗粒剂【作者】陈银芳;余日跃;多吉;格桑顿珠;德吉;白玛措姆;多杰仁青【作者单位】江西中医学院;西藏藏医学院藏药有限公司;西藏藏医学院;西藏自治区藏医院【正文语种】中文【中图分类】R29【相关文献】1.藏药玛奴西汤颗粒的毒理学研究 [J], 红梅;陈秋红;刘有菊;王志瑾2.HPLC法测定藏药巴桑母酥油颗粒中没食子酸的含量 [J], 赖先荣;何新友3.藏药甘露酥油丸质量标准研究 [J], 次仁旺姆;拥宗卓玛4.剂型改良藏药滋补酥油颗粒剂的水提工艺研究 [J], 李普元;李长山;江春艳5.滋补酥油颗粒成型工艺研究 [J], 韩珊颖; 钟绍金因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
用于提高免疫力的藏药巴桑母酥油丸软胶囊的制备方法[发明专利]
![用于提高免疫力的藏药巴桑母酥油丸软胶囊的制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/fdde3e2008a1284ac85043f4.png)
专利名称：用于提高免疫力的藏药巴桑母酥油丸软胶囊的制备方法
专利类型：发明专利
发明人：吴宗耀,米玛,张红伟,蒋士卿,朱星昊,陈亚楠,魏丹丹,苗明三,鞠明兵
申请号：CN202010699995.0
申请日：20200717
公开号：CN111821379A
公开日：
20201027
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了用于提高免疫力的藏药巴桑母酥油丸软胶囊的制备方法，该巴桑母酥油丸软胶囊由如下重量份的原料制成：诃子170‑180g、毛诃子145‑155g、余甘子120‑130g、黄精
155‑170g、天冬155‑170g、西藏棱子芹155‑170g、蒺藜155‑170g、喜马拉雅紫茉莉
155‑170g、冬虫夏草10‑30g、西藏野生松茸10‑30g、牛奶3000‑5000ml、水8000‑11000ml、酥油8000‑11000ml、白糖适量、软质囊材适量。
本发明所述的巴桑母酥油丸软胶囊在原有巴桑母酥油丸的基础上加入了冬虫夏草以及西藏野生松茸两种药材，使得该软胶囊在原有药效的基础上能够显著提高人体免疫力，进而使得药物对肿瘤以及糖尿病等病症具有显著的疗效，同时通过软质囊材将药液进行包裹，不仅便于药材存储，而且有助与药材被人体快速的吸收。
申请人：西藏藏医药大学
地址：850000 西藏自治区拉萨市城关区娘热路24号附10号
国籍：CN
代理机构：北京化育知识产权代理有限公司
代理人：尹均利
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藏药巴桑母酥油丸对放、化复合损伤血虚证小鼠造血功能干预初探
38中药与临床Phar m acy and C l i ni c s of C hi nese M at er i a M edw a2010；1(2)藏药巴桑母酥油丸对放、化复合损伤“血虚证"小鼠造血功能干预初探黄晓芹，赖先荣，降央泽仁，冯冠榕药理毒理f摘要]目的：探究传统藏医滋补方巴桑母酥油丸的药效学机理。
方法：以不同赍町量的巴桑母酥油丸灌胃放、化复合损伤“血虚证”模型小鼠14天，检测其外周血象各指标变化率，并与灌胃双蒸水组进行比较。
结果：中剂量组的白细胞和网织红细胞数显著高于对照组；高剂量组的白细胞、网织红细胞显著高于对照组和低剂量组，红细胞和血红蛋白显著高于对照组。
结论：巴桑母酥油丸剂量依赖性地提高模型鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、网织红细胞数，造血系统干预可能是其滋补作用机理之一；巴桑母酥油丸在缓解肿瘤病人放、化疗后的造血功能抑制中具有研究运用前景。
[关键词]藏药；巴桑母酥油丸；药效学；放化疗；造血功能[中图分类号]R285．5[文献标识码]A[文章编号]1674-926X(2010)02-0038—02T h e r ese a r ch o n t he ef f ect of t r a di t i onal Ti be t a n m edi c i ne B a sangm u Suyou W an on t he bem t opoi esi s f u nc t i o n of bl o od def i ci en cy s yndr om e m i ce i nj ur ed by r adi ochem i s t ry／H U A N G X i ao—qi n．L4，Xi an—r o ng，Ji ang-yan g-ze—r en，FE N G G u a n-r ong／／(T he N at i on al M e di ca l Sch ool of C hengdu U ni ver s i t y of T radi t i onal C hi nese M e di ci ne．Chengdu610075，Chi na)[A bst r act1obj ect i ve：To exp l or e t he pha r m ac odyna m i cs m ec ha ni s m of t r ad i t i onal T i bet a n t oni c m e di ci n e B as a ngm u Su you w锄．M et hod：D i f f er ent dos e of B as a ngm u Su you W an w a s gi ve n by gast r i c per f usi on t o bl ood def i c i ency syndr om e m i ce i nj ur ed by r adi ochem i s t r y f or14day s．7['hen t he per i ph er al hem ogr am ch ang e r at i ons w e r e t est ed a nd t he r esul t s w er e com par e d w i t h t he cont r ol gr oup w hi chW a s gi ven doubl e dis t i ll ed w at er．R esul t：The w hi t e bl ood cel l s(W B C)and r et i eul ocyt e s(R et s)of m i ddl e gr oup w e r e oh-vi ous l y m or e t h an t he cont r ol gr o up．The w h i t e bl oodcel l s(W B C)and re t i cul ocyt es(R et s)of hi gh dos e gr oup w er e obvi o usl y m or e t h an t he cont r ol gr oup a nd t he l ow do se gr o up．The r ed bl ood cel l s(R B C s)and he m ogl obi n(H b)“hi{；Il do se gr o up w er e obvi ous l y m or e t ha n t he cont r ol gr oup．C onc l usi on：Basa ngrnu Suy ou W a n dose—depende nt l y r ai ses t he coun t s of per i pher al bl ood W B C。
藏药翁布提取物对CCl4所致小鼠肝损伤的保护作用研究
作 者 简 介 ： 敏 （９ １ ）女 ， 鲍 １ ７ 一 ， 四川 乐 至 县 人 ， 副教 授 ， 士 ． 硕
பைடு நூலகம்
４ ４
青海师 范大 学学报 （ 自然科 学版 ）
２１ ０ ０血
取小 鼠 ５ ０只 ， 雌雄 各半 ， 机分 ５组 ， 组按 表 １所示 的药 物及 剂 量 灌 胃（ｇ ７ ， 随 各 ｉ） ｄ 于末 次 给 药 ２ｈ 后， 除正 常对照组 以外其 余组 均腹 腔注射 （ｐ ０ １ Ｃ １（０ｍｌｋ ） 禁食 （ 禁水 ） ６ｈ之 后 ， 动 脉取 ｉ） ． Ｃ １ ／ ｇ ， 不 １ 颈 血 ， ，０ ｐ 离 心 ， 离血 清 ； 肝称重 ， ２ ０ ０ｒｍ 分 取 用冷 生理盐 水 （ Ｓ ） 净血 污 ， 干备用 ． Ｎ． ． 洗 吸
第 Ｏ １号 ） ． １ ２ 药 品 和 试 剂 ．
翁布 （ ｒｃｒａｐ ｎｃ ｌｔ ．Ｙ Ｍｙ ｉ ｉ ａ ｉｕａａ Ｐ ．Ｚ ａ ｇｅ ａ ｈ ｎ ｔ Ｙ．Ｊ ｈ ｎ ） 采 自青海 省祁 连县 ， ．Ｚ ａ ｇ ， 海拔 ２ ０ ｍ， ３ ０ 由青
海师范 大学 生命 与地理 科学 学 院吴学 明教授 鉴定． 核 黄素 ， 氯化 硝基 四氮 唑 兰 ， 甲硫 氨 酸 （ ｔ ， Ｍｅ） 四氯 化 碳 （ Ｃ （ 用 前 配 制 成 ０ １ 的 橄 榄 油溶 Ｃ １） 使 ．％
中图 分 类 号 ： ６ １ ４ ０ ４ ． 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ １ ５ ２ ２ １ ） １ ０ ４ —０ １ ０ —７ ４ （ ０ ０ Ｏ — ０ ３ ４
藏 药翁布 原植 物 为柽柳科 （ ｍａｉａｅｅ 水柏 枝属 （ ｒｃ ｒａＤ ｓ．１ ２ ） Ｔａ ｒ ｃａ ） ｃ Ｍｙ ｉ ｉ ｅｖ ８ ５ Ｚ春 水柏 枝 （ ｒｃｒ ａ Ｍｙ ｉａ — ｉ ａ ｉ ｌｔ ．Ｙ．Ｚ ａ ｇ ｅ Ｙ．Ｊ ｈ ｎ ） 灌 木 ， 传 统 藏 药 ， 泛 分 布 于 我 国 西 部 海 拔 ２ ０ ０ ａｐ ｎｃ ａａ Ｐ ｕ ｈ ｎ ｔ ．Ｚ ａ ｇ ， 为 广 ， ０ ～ ２ ９ ０ｍ的藏 区 ， ，０ 其药 用部 分为 干燥 嫩枝 ． 具有 清 热解毒 ， 风 、 表 、 疏 解 透疹 、 咳等 功 效 ， 止 主治麻 疹不
六种藏药对食用油脂抗氧化作用的初步研究
六种藏药对食用油脂抗氧化作用的初步研究
林鹏程;卢永昌;鲁芳;康吉森
【期刊名称】《中国油脂》
【年(卷),期】2006(031)003
【摘要】通过在日常食用的菜籽油、酥油、猪油、花生油、大豆油中添加中藏药藓生马先蒿、斑唇马先蒿、益母草、珠牙蓼、蜜花香薷和白苞筋骨草的乙醇提取物,以VC、VE为对照,利用Na2S2O3-I2滴定法,测定不同时间油脂POV的方法,初步研究了中藏药对常用食用油脂的抗氧化作用.结果发现6种藏药乙醇提取物对所选5种油脂均有一定的抗氧化效果.
【总页数】3页(P28-30)
【作者】林鹏程;卢永昌;鲁芳;康吉森
【作者单位】青海民族学院化学系,810007,西宁市;青海民族学院化学系,810007,西宁市;青海民族学院化学系,810007,西宁市;青海民族学院化学系,810007,西宁市【正文语种】中文
【中图分类】TQ641
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1.四种藏药对食用油脂抗氧化性的初步研究 [J], 胡树青;卢永昌;沈晓锟
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巴桑母酥油丸抑制高浓度小鼠血清对MC3T3E1细胞的毒性作用
Basangmu Suyou Wan Inhibits the Toxic Effect of High Concentration of Mouse Serum on MC3T3-E1 Cells
212
World Latest Medicine Information (Electronic Version) 2019 Vo1.19 No.12
·民族医药·
巴桑母酥油丸抑制高浓度小鼠血清对 MC3T3-E1 细胞的毒性作用
张灵莉，黄晓芹
（成都中医药大学基础医学院，四川 成都）
摘要：目的 初步研究巴桑母酥油丸在小鼠血清对细胞毒副作用及成骨细胞桑母酥油丸 1.5 g·kg-1·d-1 和等体积生理盐水 ×14d 制备含药 / 生理盐水血清，加入小鼠成骨细胞株 MC3T3-E1 培养体系（浓度 1，5， 10，20%），CCK 法检测 24h、48h、72h 细胞增殖情况。结果 与空白组比较，24h 时，药物组 5、10% 浓度具有极显著促细胞增殖作用（P<0.01）； 48h、72h 时，生理盐水组 1、5% 浓度及药物组各浓度均具有极显著促细胞增殖作用（P<0.01），且 48h 时生理盐水组 10% 浓度也具有显著促 细胞增殖作用（P<0.05）。与相同浓度生理盐水血清组比较，24h 时，药物组 5、10、20% 浓度及 48h、72h 时 10、20% 浓度均具有极显著促 细胞增殖作用（P<0.01）。结论 巴桑母酥油丸能缓解小鼠血清对成骨细胞的毒副作用并促进其增殖。 关键词：巴桑母酥油丸；小鼠血清；增殖；成骨细胞 中图分类号：R329.2+8 文献标识码：B DOI: 10.19613/ki.1671-3141.2019.12.128
藏药“桑蒂”抗肝损伤作用机制研究
藏药“桑蒂”抗肝损伤作用机制研究
孟宪华;陈德道;张樱山;刘鸿雁;李智勤;拉毛卓玛
【期刊名称】《西部中医药》
【年(卷),期】2014(000)001
【摘要】从“桑蒂”抗肝损伤作用机制研究现状以及“桑蒂”治疗急性黄疸型肝炎，治疗免疫性肝损伤，治疗急、慢性肝损伤，治疗肝缺血-再灌注损伤(HIRI)的研究文献入手，归纳整理传统藏药“桑蒂”抗肝损伤的作用机制，以期为“桑蒂”的现代化研究提供参考。
【总页数】4页(P135-138)
【作者】孟宪华;陈德道;张樱山;刘鸿雁;李智勤;拉毛卓玛
【作者单位】西藏奇正藏药股份有限公司，甘肃兰州 730000;西藏奇正藏药股份有限公司，甘肃兰州 730000;西藏奇正藏药股份有限公司，甘肃兰州 730000;西藏奇正藏药股份有限公司，甘肃兰州 730000;西藏奇正藏药股份有限公司，甘肃兰州 730000;西藏奇正藏药股份有限公司，甘肃兰州 730000
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71
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1.桑蒂复肝胶囊对D-半乳糖胺致小鼠急性肝损伤的保护作用 [J], 李莉;张喜德;张恩户
2.藏药渣驯及其不同萃取部位抗胃溃疡抗肝损伤作用的比较研究 [J], 叶翠萍;王文
倩;赵明明;曾勇;古锐
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5.藏药“蒂达”6种原植物抗慢性肝损伤作用比较研究 [J], 郭永强;沈磊;杨晓泉;夏从龙;;;;
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6种市售西藏酥油理化指标及物理特性分析
6种市售西藏酥油理化指标及物理特性分析李婕妤;马传国;王英丹;季敏;李胜【期刊名称】《河南工业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(039)003【摘要】西藏酥油是从牦牛牛奶中提取的油脂产品,在西藏地区作为藏民主要的食物来源,同时还是宗教活动中制作酥油花和酥油灯必不可少的原料,其制作工艺复杂繁琐且不易储存.以西藏地区的6种市售西藏酥油产品为研究对象,测定了其主要成分及理化指标,使用气相色谱仪、脉冲核磁共振仪、流变仪、差示扫描量热仪和X-射线衍射仪分别测定了酥油的脂肪酸组成、固体脂肪含量、流变学性质、热力学性质以及晶型.结果表明,西藏酥油产品主要含有棕榈酸(28％～34％)、油酸(21％～37％)和硬脂酸(9％～19％),高含量的饱和脂肪酸是西藏酥油呈现固体状态的原因,且它们都含有少量的反式脂肪酸.6种酥油的固体脂肪含量和热力学性质表明其熔化温度的范围较大,因此具有很好的可塑性,可用于制作酥油花.酥油的流变学性质表明其弹性模量(G')均大于黏性模量(G"),呈现类固体性质,均属于剪切变稀流体.XRD结果表明,6种酥油产品均以β'晶型为主,呈现出柔软的质地,因此,西藏酥油具有起酥、搅打、可塑性等功能,可以作为食品和酥油花的原料.【总页数】10页(P38-46,57)【作者】李婕妤;马传国;王英丹;季敏;李胜【作者单位】河南工业大学粮油食品学院,河南郑州450001;河南工业大学粮油食品学院,河南郑州450001;国家粮食局粮油食品工程技术研究中心,河南郑州450001;河南工业大学粮油食品学院,河南郑州450001;大马棕榈油技术研发(上海)有限公司,上海201108;河南工业大学粮油食品学院,河南郑州450001【正文语种】中文【中图分类】TS225【相关文献】1.西藏三个市市售牦牛酥油重金属含量比较及分析 [J], 刘娜;贾明宏;扎西穷达;曹叶伟2.市售人造奶油反式脂肪酸含量及物化特性分析 [J], 王挥;汪金宋菲陈卫军;赵松林3.新疆石河子市市售奶粉理化指标测定 [J], 孙耀强;刘继荣4.银川市1989～1998年市售食品卫生理化指标监测与分析 [J], 刘晓青;边长缨;杨惠芳;张汉秀;于明哲5.2004年滨州市市售牙膏部分理化指标检测 [J], 苏筱军;张维江;张志新;张小红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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藏药巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠粒-巨噬系造血功能的影响及机理研究黄晓芹;卫莉玲;黄茜;降央泽仁【摘要】目的探讨藏药巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠粒-巨噬系造血功能的影响及可能机理.方法 60 Coγ射线照射和环磷酰胺腹腔注射方式制造放射线-化学复合损伤小鼠模型,采用外周血细胞计数、造血祖细胞集落分析、实时荧光定量PCR,检测灌胃不同浓度巴桑母酥油丸后不同时间放射线-化学复合损伤小鼠外周白细胞数、骨髓粒-巨噬系(CFU-GM)造血祖细胞集落产率、粒-巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)和粒-巨噬系集落刺激因子受体(GM-CSF R) mRNA相对表达量.结果灌胃14 d后,中、高剂量组的白细胞数显著高于生理盐水组;中剂量巴桑母酥油丸灌胃14 d后,骨髓CFU-GM集落产率、GM-CSF mRNA和GM-CSFR mRNA 也显著高于空白组、生理盐水组.结论适当浓度的巴桑母酥油丸可以通过上调骨髓GM-CSF、GM-CSFR mRNA表达、促进CFU-GM增殖分化,进而促进放射线-化学复合损伤后小鼠外周血白细胞数的提前恢复.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2014(033)001【总页数】5页(P113-117)【关键词】巴桑母酥油丸;放-化疗;小鼠;白细胞;粒-巨噬系祖细胞;粒-巨噬系集落刺激因子【作者】黄晓芹;卫莉玲;黄茜;降央泽仁【作者单位】成都中医药大学民族医药学院,成都611137;雅安职业技术学院附属医院,四川雅安625000;成都中医药大学民族医药学院,成都611137;成都中医药大学民族医药学院,成都611137【正文语种】中文【中图分类】R285.5放、化疗是现代医学治疗恶性肿瘤重要甚至唯一的手段，骨髓抑制及由此带来的造血功能低下是放、化疗最严重、最根本的毒副作用。
由于骨髓不均匀地分布于骨小梁间隙的特点，其损伤程度不便于直接测量，常采用外周血细胞数，尤其是白细胞数量的下降来反映(Hu & Cucinotta，2011)，而贫血、出血、白细胞减少及由此带来的身体虚弱、抵抗力下降等症状，符合藏医“七精耗损、身体虚弱”的“补益”疗法实用范围(第司·桑吉嘉措，2012)。
巴桑母酥油丸是藏医补益根本方剂之一，据藏医经典著作《四部医典》记载，“巴桑全身皆益” (宇妥·云丹衮波，2011)即：巴桑母酥油丸“对身体上下之各种疾病均有裨益”。
本研究拟以放射线-化学复合损伤小鼠模拟病人放、化疗后状态，研究巴桑母酥油丸对放、化疗后粒-巨噬系造血的具体影响和可能机制，探讨巴桑母酥油丸在放、化疗后外周血白细胞数恢复中的可能作用，为缓解肿瘤病人放、化疗后毒副作用，提高病人生存质量和生存年限另辟蹊径。
1.1 实验动物8～12周龄雄性C57BL6J 小鼠，购于四川大学实验动物中心，动物许可证号SCXK(川)2009-09。
动物饲养条件：20～25℃，自由接受冷开水和C57BL6J小鼠配方颗粒饲料(四川大学实验动物中心购买)喂养，每2 d换1次消毒干燥垫料。
1.2 药品及试剂巴桑母酥油丸(Basangmu Suyou Wan，西藏藏医学院藏药有限公司，批号101201)，用生理盐水稀释溶解至所需浓度，4℃贮存备用，用前加热混匀；IMDM培养基(美国Invitrogen公司，批号1282295)，特级马血清(北京元亨圣马生物技术研究所，批号110320)；重组小鼠粒-巨噬系集落刺激因子(Peprotech，批号050755-1)；逆转录试剂盒(Eu Fermentas公司，批号00098448)；Taq DNA PCR反应试剂盒(TaKaRa大连宝生物，批号ck3501AA)；Trizol(美国Invitrogen，批号50563209)；dNTP(美国Promega，批号251230)；DNA分子量标准(DNA Marker：Marker I，显示条带：100、200、300、400、500、600 bp，北京康为世纪公司，批号16911K)；琼脂糖(电泳级，GENE TECH上海有限公司，批号111760)。
1.3 主要仪器设备60Coγ源(四川省农业科学院生物技术核技术研究所辐照中心)；全血细胞自动计数仪(奥地利Abacus Junior，型号VET 130004-动物专用3分类)；CO2培育箱(日本SANYO公司，型号MCD-15A)；超净工作台(北京半导体设备厂，型号JJT-900/1300)；倒置相差显微镜(日本Olympus公司，型号CX-1O)；实时荧光定量基因扩增仪(加拿大FUNGLYN，型号FTC2000)；水平电泳仪(美国BIO-RAD，型号Powerpac Basic TM)；凝胶成像系统(美国BIO-RAD，型号Gel Doc 1000)。
1.4 放射线.化学复合损伤小鼠制备小鼠经60Coγ射线2Cy照射，照射后第4天，经腹腔注射环磷酰胺40mg/(kg·d)，qd×3 d，视为造模完成(黄晓芹等，2009)(以下简称：放-化复合损伤小鼠或60Co-Cy injury mice)。
1.5 外周血白细胞数检测小鼠于造模完成后第2天开始分别灌胃0.75 g·k g-1·d-1(低剂量组)，1.5 g·kg-1·d-1(中剂量组)，3.0 g·kg-1·d-1(高剂量组)的巴桑母酥油丸乳液和等体积生理盐水(生理盐水组)，每天1次，同时设立造模后自然恢复小鼠组(空白组)。
于灌胃的3 d、7 d、14 d、20 d，各取10只小鼠，麻醉后去眼球取全血，用动物专用全血细胞自动计数仪计数白细胞(WBC)数。
1.6 骨髓CFU.GM集落产率检测造模后小鼠灌胃1.5 g·kg-1·d-1巴桑母酥油丸14 d后，在无菌条件下分离骨髓细胞(BMC)，进行粒-巨噬系祖细胞培养，培养时间7 d，第8天于显微镜下(放大40倍)直接计数集落数，以50个细胞以上为1个集落。
1.7 骨髓GM-CSF mRNA和GM-CSFR mRNA 相对表达量检测造模后小鼠灌胃1.5 g·kg-1·d-1巴桑母酥油丸14 d后，分离骨髓细胞，按常规方法提取总RNA，进行琼脂糖凝胶电泳检验，确认总RNA提取完整无降解后按试剂盒要求进行逆转录。
逆转录后进行常规PCR，确认引物合成正确后进行实时荧光定量PCR。
ACTB基因作为内参基因同时进行扩增。
所用引物为：1.小鼠GM-CSF(M-GM-CSF)：引物：M-GM-CSFF，5’-AACTCCGGAAACGGACTGT-3’；M-GM-CSFR，5’-CTCATTACGCAGGCACAAAAG-3’；探针：M-GM-CSFTaqMan probe，5’-TCAGAGCTGGCCTGGGCTTCCT-3’，扩增产物长度为178 bp。
2.小鼠GM-CSFR (M-GM-CSFR)：M-CSFRF：5’-CACTGGAGGCTGAG-CTTCGTCA-3’；M-CSFRR，5’-GTCGTGACCCGTGGA-GTTGAGG-3’；探针：M-CSFRTaqMan probe：5’-CCTGACCTGCGAGATCCGAGCC-3’，扩增产物长度为168 bp。
3.内参：β-肌动蛋白(Beta-actin，ACTB)：引物：ACTBF：5’-GAAGATCAAGATCATTGCTCCT-3’；ACTBR：5’-TACTCCTGCTTGCTGATCCACA-3’；探针ACTBTaqMan：5’-TCACTGTCCACCTTCCAGCAGA-3’，扩增产物长度为111 bp。
引物合成及探针修饰：上海生物工程有限公司。
反应条件为94℃×2 min；94℃×20s/55℃×30 s/60℃×40 s，45个循环。
记录每一样品目的基因和ACTB基因Ct值(Cyclethreshold)，将原始数据(Ct值)换算为基因的相对表达量(2-ΔΔCt)后，分析比较初始基因表达量。
1.8 实验数据的统计处理数据以均值±标准差表示，组间比较采用方差分析，P<0.05为有显著性差异。
2.1 巴桑母酥油丸对放.化复合损伤小鼠外周血白细胞数的影响灌胃不同浓度巴桑母酥油丸3 d、7 d、14 d、20 d后，各组小鼠外周血白细胞数见表1。
从表中可以看出随着时间的延长，各组小鼠的白细胞数都逐渐增加；在7 d 后，高剂量组的白细胞数显著高于空白组，但与其余各组间没有显著性差异；灌胃14 d后，中、高剂量组的白细胞数显著高于空白组和生理盐水组，但与低剂量组没有显著性差异；灌胃20 d时，高剂量组的白细胞数显著高于空白组，而与其余各组间没有显著差异。
2.2 巴桑母酥油丸对放.化复合损伤小鼠骨髓CFU.GM集落产率的影响培养的CFU-GM集落见图1，灌胃14 d后，空白组、生理盐水组、巴桑母酥油丸组的骨髓CFU-GM集落产率分别为47.50±7.10、45.25±7.59、51.00±6.97(5×104BMC)，巴桑母酥油丸组显著高于空白组和生理盐水组(P<0.05，图2)。
2.3 巴桑母酥油丸对放.化复合损伤小鼠骨髓细胞GM-CSF mRNA和M-CSFR mRNA相对表达量的影响各组目的基因的相对表达量见图3，从图中可以看出：空白组、生理盐水组、巴桑母酥油丸组的GM-CSF mRNA和GM-CSFR mRNA相对表达量分别为3.03±2.16、2.90±0.96、5.76±1.80和1.44±0.88、1.97±0.71、2.84±0.28(2-ΔΔCt)，巴桑母酥油丸组均显著高于空白组和生理盐水组(P<0.05)。
由于低剂量辐射联合环磷酰胺可使机体肿瘤细胞产生G1期阻滞，对肿瘤增殖细胞杀伤作用增强，明显提高机体抗肿瘤的作用，故在肿瘤治疗中具有一定的实际意义(于洪升等，2004)。
但电离辐射和烷化剂类的环磷酰胺可通过损伤DNA(Cortellino et al., 2004；徐宏贵等，2007)，阻止其复制、延迟细胞分裂、加速细胞调亡等途径，导致骨髓抑制。
放、化疗双重因素共同作用时，骨髓造血功能抑制更为明显(Larson & Le Beau，2005)，因而采用Co60γ射线照射联合环磷酰胺注射方式可以建立模拟放、化疗后病人机体功能状态的动物模型，进行相关研究。
由于单纯运用细胞因子，无法达到促进放、化疗后外周血细胞数稳定恢复的理想效果，传统补益药物在该领域的独特效果得到广泛的研究和运用(左晶晶，2011；刘红卫等，2012)。