聚赖氨酸盐酸盐检验方法
盐酸赖氨酸注射液细菌内毒素检查法方法学验证
和 ２支供试 品阳性对照 （ 即含 ２０ 浓度标准 内毒素的该浓度 ．
的供 试 品稀 释 液） 。
５ １ 鲎 试剂 ．
批 号 为 １０ １ １ １２ ５ ；生 产 厂 家 为 湛 江安 度 斯 生 物 有 限公 司 。
盐 酸赖氨酸 注射液 限值 Ｌ：０ ＵｍＬ，按最 大有效稀 释 ．Ｅ ／ ５
ｌ － （ ／） ｏ ＹＸ４ ｇ
（） 待复核鲎试剂 ：批号为 １０ １ １ １ １ ２５ ；生 产厂家为湛江安
度斯生物有 限公 司；终 点浓度 （ Ｕｍ ）为 ０ ５ ．５ ． 、 Ｅ ／Ｌ ． 、０２ 、０ ５ ２ ２
０２ 。 ．５
ｌ ｏ （ ／ ） ｏ ［１ｇ．５＋ｌ ｏ２ ＝ｌ ｇ ∑Ｘ４ ＝ｌ ｇ （ ０２ ｏ ｏ ．５＋ｌ ０２ ｇ ｏ ． ｇ ５＋ ｌ ０２ ） ］ ．５ ＵｍＬ ｏ ． ／ ＝０２ ／ ｇ ５４ Ｅ （）待复核鲎试剂 ：批 号为 １０ ２ ０ ２ ６ １ ；生产厂家 为湛 江博 １ 康海 洋 生物 有 限公 司 ；终 点 浓 度 （ Ｕｍ ） 为 ０１５ ．５ Ｅ ／Ｌ ．２ 、０ 、 ２
司。
（） 阴性对照管 （ Ｃ管） ４ Ｎ ：加入 ０２ｍ 细菌内毒素检查用 ． ｌ
水 ，其作用是防止试剂或器具 自身的污染影响检查结果的准确 性 ，做 ２ 。 支
（） 标 准对 照反 应 终点 浓 度 （ ＵｍＬ ：０１５ ． ５ １ Ｅ ／ ） ．２ 、０１ 、 ２
０．５、 ０．５。 ２ ２
（） 标 准对 照 反 应终 点 浓 度 （ ＵｍＬ 为 ０２ 、０ ５ １ Ｅ／ ） ． ５ ． 、 ２
０２ ．５、 ０２ 。 ．５
倍数 Ｍ Ｄ＝ Ｌ 计算 ，确定稀释倍数 为 ２ ４ 、１ 、１ Ｖ Ｃ× ／ 、 、８ ２ ６
(岗位职责)盐酸检验操作规程
1 目的确定药用盐酸检验的操作程序和方法，确保合格的药用盐酸投入生产。
2 适用范围适用于本厂质监科化验室对本厂生产所需的盐酸的检验。
3 责任化验员有责任按照本操作规程对生产过程中所需的盐酸进行检验、判定，并对检验结果负责。
4 内容4.1性状本品为无色发烟的澄清液体、有强烈的刺激臭；呈强酸性。
4.2鉴别4.2.1仪器试管、滴定管、玻璃漏斗、滤纸等。
4.2.2试剂及配制4.2.2.1 0.1mol/L硝酸银液取硝酸银17.5g，加水适量使成1000ml，摇匀。
保存于棕色瓶中。
4.2.2.2 1mol/L硫酸溶液取浓硫酸60ml ，缓缓注入适量水中，冷却至室温，加水稀释至1000ml，摇匀。
4.2.2.3 碘化钾-淀粉试纸于100ml新配制的0.5%淀粉溶液中，加入0.2g的碘化钾，将无灰滤纸放入该溶液中浸透，取出于暗处晾干，保存于密闭的棕色瓶中。
4.2.3操作4.2.3.1取样品溶液，加入0.1mol/L硝酸银试液即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸，沉淀复生成。
4.2.3.2取样品溶液加氨水使呈碱性，如有沉定需过滤，滤液加硫酸使成酸性，加数粒高锰酸钾结晶，加热即放出氯气，能使碘化钾-淀粉试纸呈蓝色。
4.3检查4.3.1游离氯或溴4.3.1.1仪器分析天平、量筒、电炉等。
4.3.1.2试液及配制含锌碘化钾淀粉指示剂取水100ml，加碘化钾溶液（3→20）5ml与氯化锌溶液（1→5） 10ml，煮沸，加淀粉混悬液（取可溶性淀粉5g，加水30ml搅匀制成），随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，即得。
本液应放置冰箱内保存。
4.3.1.3操作取本品10g（8.5ml），加水稀释至20ml，冷却，加含锌碘化钾淀粉指示剂0.2ml，10分钟内溶液不得显蓝色。
4.3.2硫酸盐4.3.2.1仪器水浴锅、容量瓶、刻度吸管、量杯、纳氏比色管等。
4.3.2.2试剂及配制a.碳酸钠试液取一水合碳酸钠12.5g或无水碳酸钠10.5g，加水使溶解成100ml，摇匀，即得。
盐酸赖氨酸检验操作规程
盐酸赖氨酸检验操作规程1．目的：建立盐酸赖氨酸检验操作规程，便于检验人员规范操作。
2．范围：适用于配制各种氨基酸注射液的盐酸赖氨酸测定。
3．责任：质检科检验员对实施本规程负责。
4．程序：4.1性状：白色结晶或结晶性粉末，无臭。
4.2鉴别试验（1）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集1035图）一致。
（2）取本品的水溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。
4.3酸度（ pH值）测定4.3.1范围：5.0～6.04.3.2配制溶液称取本品1.0g，加新沸过的冷水10ml，溶解。
4.3.3操作步骤：同亮氨酸。
4.4溶液的透光度测定4.4.1测定范围>99.0%4.4.2溶液配制取本品0.5g溶于10ml水中。
4.4.3操作步骤：同亮氨酸。
4.5比旋度测定4.5.1测定范围：+20.80～+21.504.5.2试剂和试液：6mol/L 盐酸：取54ml盐酸用水稀释至100ml，即得。
4.5.3操作步骤取本品，精密称定，加6mol/L 盐酸溶液溶解并稀释成每1ml中约含80mg的溶液，依法测定（见旋光度测定操作规程）。
4.6含氯量测定4.6.1测定范围：19.12%～19.51%4.6.2试剂和试液：同盐酸精氨酸。
4.6.3操作：取本品约0.35g ,精密称定，加水20ml溶解后，加稀醋酸2ml与溴酚蓝指示液8~10滴，用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定至蓝紫色。
4.6.4计算公式：同盐酸精氨酸。
4.7硫酸盐测定4.7.1测定范围：<0.02%4.7.2试剂和试液：同亮氨酸。
4.7.3操作步骤：同亮氨酸4.8铵盐测定4.8.1测定范围：<0.02%4.8.2试剂和试液：同亮氨酸。
4.8.3操作步骤：同亮氨酸4.9铁盐测定4.9.1测定范围：<0.001%4.9.2试剂和试液：同亮氨酸。
4.9.3操作步骤：同亮氨酸4.10重金属测定4.10.1测定范围：<百万分之十4.10.2试剂和试液：同亮氨酸。
食品添加剂 ε-聚赖氨酸盐酸盐标准2023年
食品添加剂ε-聚赖氨酸盐酸盐1 范围本标准适用于淀粉醇产色链霉菌（streptom>ces diastatochromogenes）经受控发酵 , 培养液经离子交换树脂吸附、盐酸洗脱并精制后得到的食品添加剂ε- 聚赖氨酸盐酸盐。
2 化学名称、分子式和结构式2. 1 化学名称ε- 聚2, 6-二氨基己酸盐酸盐。
2. 2 分子式H[C6H12N2OHCl]n HO（n—2535）2. 3 结构式3 技术要求3. 1 感官要求感官要求应符合表1的规定。
表1 感官要求3. 2 理化指标理化指标应符合表2的规定。
表2 理化指标附录A检验方法A. 1 一般规定本标准所用试剂和水，除特别说明外，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级及以上试验用水。
试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按 GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。
试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。
A. 2 鉴别试验A. 2. 1 试剂和材料A. 2. 1. 1 硝酸锹溶液：硝酸锹 0. 85g加冰乙酸 10mL及水 40mL溶解。
A. 2. 1. 2 碘化钾溶液：碘化钾 8g加水 20mL溶解。
A. 2. 1. 3 Dragendorff试液：硝酸锹溶液（A. 2. 1. 1）5mL、碘化钾溶液（A. 2. 1. 2）5mL、冰乙酸20mL和水100mL混合而成。
现用现配。
A. 2. 1. 4 磷酸盐缓冲溶液：1. 36g磷酸二氢钾溶于约 80mL水中，磷酸调 PH6. 8，加水定容至100mL。
A. 2. 1. 5 甲基橙试液：1. 0mmol/L水溶液。
A. 2. 1. 6 盐酸溶液（6mol/L）：取 100mL浓盐酸，加水稀释至 200mL。
A. 2. 1. 7 正丁醇/水/冰乙酸溶液：正丁醇：水：冰乙酸—4：2：1（体积比）。
A. 2. 1. 8 苗三丽的丙丽溶液：1g苗三丽溶于 50mL丙丽中。
STP-QY-122盐酸赖氨酸质量标准及检验规程
目的：明确盐酸赖氨酸的质量标准和规范盐酸赖氨酸的检验规程。
适用范围：盐酸赖氨酸的检验。
责任人：化验员。
引用标准：CP2000版二部。
本品为L-2，6-二氨基已酸盐酸盐。
按干燥品计算，含C6H14N2O2不得少于98.5%。
[性状] 本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭。
本品在水中易溶，在乙醇中极微溶解，在乙醚中几乎不溶。
比旋度取本品，精密称定，加6mol/L盐酸溶液溶解并稀释成每1ml中含80mg的溶液，依法测定，比旋度为+20.0°至+21.5°。
[鉴别] （1）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集165图一致）。
（2）本品的水溶液显氯化物的鉴别反应。
[检查] 酸度取本品0.10g，加水10ml溶解后，依法测定，PH值应为5.0—6.0。
溶液的透光度取本品0.5g，加水10ml溶解后，照分光光度法，在430nm 的波长处测定透光率，不得低于98.0%。
硫酸盐取本品1.0g，依法检查，与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.02%）。
铵盐取本品0.10g，依法检查，与标准氯化铵溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更深（0.02%）。
其他氨基酸取本品，加水制成每1ml中含16mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加水稀释成每1ml中含80μg的溶液，作为对照溶液。
照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶解各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丙醇-氨溶液（2：1）为展开剂，展开后，晾干，在100℃干燥10分钟，喷以茚三酮的丙酮溶液（1→50），在80℃干燥5分钟，立即检视，供试品溶液所显杂质斑点的颜色，与对照溶液的主斑点比较，不得更深（0.5%）。
干燥失重取本品，在105℃干燥3小时，减失重量不得过0.4%。
炽灼残渣不得过0.1%。
铁盐取本品0.50g，依法检查，与标准铁溶液1.5ml制成的对照液比较，不得更深（0.003%）。
重金属取本品2.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml，依法检查，含重金属不得过百万分之十。
一种快速测定发酵液中_聚赖氨酸的方法
图 1 显色反应的稳定性
由图 1可见 ,铋与硫脲的络合物在 45 m in内是 稳定的 ,所以测定时间应在 45 m in内完成 。文献中 报道铋的硫脲络合物的稳定时间与温度有关 ,最适宜 的温度为 20 - 25℃,大约可稳定 115 h,时间过长溶 液容易浑浊 [ 4 ] 。 213 pH的选择
134 2009 V o l135 N o 111 ( To ta l 263 )
图 3 ε2聚赖氨酸工作曲线
由图 3可知 ,ε2聚赖氨酸浓度在 0 - 115 g /L 线 性关系良好 。得到回归方程为 y = 01335 6x + 01002 3。式中 x为 ε2聚赖氨酸的浓度 , y为吸光度 , 相关系 数为 R2 = 01999 9 ( n = 3) 。检出限 (DL )为 0101 g /L (DL = 313σ/ slope,σ: 空白样品测定值的标准偏差 ; slope:检出限界附近标准曲线的斜率 ) 。由标准曲线 的斜率可知 ,此方法的灵敏度不高 ,但能满足试验的 测定要求 。由标准曲线的回归方程可直接算出待测 样品中 ε2聚赖氨酸的浓度 。
食品添加剂ε-聚赖氨酸盐酸盐标准
食品添加剂ε-聚赖氨酸盐酸盐1 范围本标准规定了食品添加剂ε-聚赖氨酸盐酸盐的基本要求、技术要求、检验方法、检验规则、标志、包装、贮存和运输以及质量承诺。
本标准适用于以葡萄糖、酵母抽提物为主要原料，由淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)受控发酵后经分离提纯所制得的食品添加剂ε-聚赖氨酸盐酸盐。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 191 包装储运图示标志GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T 602 化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB 4789.2 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB 4806 食品安全国家标准（所有部分）GB 5009.3—2016 食品安全国家标准食品中水分的测定GB 5009.4 食品安全国家标准食品中灰分的测定GB 5009.11 食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定GB 5009.12 食品安全国家标准食品中铅的测定GB/T 6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 9724 化学试剂pH值测定通则GB/T 20880 食用葡萄糖GB/T 23530—2009 酵母抽提物GB 29924 食品安全国家标准食品添加剂标识通则JJF 1070 定量包装商品净含量计量检验规则定量包装商品计量监督管理办法（国家质量监督检验检疫总局令第75号）3 分子式、结构式和相对分子质量3.1 分子式C6H14N2O Cl [C6H12N2O•HCl]n C6H14N2O2Cl,n为23～33。
3.2 结构式T/ZZB 1625—202023.3 相对分子质量4133.8-5780.2 Da（按2016年国际相对原子质量）。
原子吸收法直接测定食用L-赖氨酸盐酸盐中的铜和铅
第22卷,第3期 光谱学与光谱分析Vol 122,No 13,pp48024822002年6月 Spectroscopy and Spectral AnalysisJ une ,2002 原子吸收法直接测定食用L 2赖氨酸盐酸盐中的铜和铅陕 方,边俊生山西省农业科学院农产品综合利用研究所,山西太原 030031摘 要 本文报道了用石墨炉2原子吸收分析法,将食用L 2赖氨酸盐酸盐样品经稀酸溶解后,直接进样测定。
该方法省去了通常必需的干灰化或湿消解过程,充分利用石墨炉本身所具有的对样品进行部分预处理的功能,在无基体改进剂的条件下,快速测定样品中的Cu 和Pb 的含量。
方法简便、快速、准确、实用。
Cu 和Pb 的精密度试验的相对标准偏差分别为418%和513%;回收率分别为100%～110%和102%～105%。
主题词 石墨炉原子吸收;L 2赖氨酸盐酸盐;Cu ;Pb 中图分类号:O657131 文献标识码:A 文章编号:100020593(2002)0320480203 收稿日期:2001204221,修订日期:2001210208 作者简介:边俊生,1958年生,山西省农业科学院农产品综合利用研究所副研究员 随着人民生活水平的提高,作为食品营养强化剂的L 2赖氨酸盐酸盐也越来越受到人们的关注。
据报道,目前国际上氨基酸工业中,除谷氨酸外,生产最多的是L 2赖氨酸。
产品的质量与人体健康密切相关,随着赖氨酸生产工业的发展,对其中金属元素的测试要求日益迫切。
由于L 2赖氨酸盐酸盐中Cu 和Pb 的含量甚微,给测试带来很大困难。
样品的预处理,诸如湿法消解、干法灰化、萃取等,易引起待测成分的逸失或干扰测定结果,使操作繁琐,分析时间延长[1]。
本实验将样品用稀酸溶解,直接注入石墨炉进行Cu ,Pb 的测定。
操作简便、快速、缩短了分析周期。
1 实验部分111 仪器与试剂仪器:日本岛津AA 2650型原子吸收分光光度计,日本岛津GFA 23型石墨炉,20μL 微量进样器,Cu 和Pb 的空心阴极灯。
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检验方法
A.1 安全警示
试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。
操作者应采取适当的安全
和防护措施。
A.2 一般规定
本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682
中规定的三级水。
试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603 的规定制备。
试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。
A.3 鉴别试验
A.3.1 试剂和材料
A.3.1.1 碱性硝酸铋溶液：碱性硝酸铋0.85 g 加乙酸10 mL 及水40 mL 溶解。
A.3.1.2 碘化钾溶液：碘化钾8 g 加水20 mL 溶解。
A.3.1.3 Dragendorf 试液：碱性硝酸铋溶液5 mL、碘化钾溶液5 mL、乙酸20 mL 和水100 mL 混合而成。
现用现配。
A.3.1.4 pH 6.8 的0.1 mol/L 磷酸缓冲溶液。
A.3.1.5 甲基橙试液：0.1 mmol/L。
A.3.1.6 正丁醇/水/冰乙酸溶液：（4:2:1）。
A.3.1.7 茚三酮的丙酮溶液：1→50。
A.3.2 分析方法
A.3.2.1 0.1%试样液1 mL 加Dragendorf 试液1 mL，应产生红褐色沉淀。
A.3.2.2 取试样0.1 g 溶于pH6.8 的0.1 mol/L 磷酸缓冲溶液100 mL 中，取试样溶
液1 mL，加甲基橙试液1 mL，应产生红褐色沉淀。
A.3.2.3 参照GB/T5009.124 方法将试样水解成单一氨基酸，制成含本品约1
mg/mL 的近中性水溶液，作为试样溶液；精密称取赖氨酸盐酸盐标准样品适量，加水稀释成1 mg/mL 的溶液，作为标准溶液；另取试样适量，制成含试样约1 mg/mL
的水溶液，作为对照液；另取赖氨酸盐酸盐标准样品与精氨酸标准样品各适量，置于同一量瓶中，用水溶解并稀释成0.4 mg/mL 的溶液，作为系统适用性试验溶液。
按照薄层色谱法（《中国药典》附录V B）试验，吸取上述四种溶液各2 μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以正丁醇/水/冰乙酸溶液为展开剂，展开液由原始线上升高于10 cm 处时，晾干，90 ℃干燥10 min，喷以茚三酮的丙酮溶液，90 ℃
加热至斑点出现，立即检视。
标准溶液应显示一个清晰斑点；系统适应性试验溶液应显示两个完全分离的斑点，且其中一个斑点与标准溶液斑点色泽相似，Rf 值相等；试样溶液所得斑点与标准溶液所示斑点，色泽相似，Rf 值相等。
对照液应
在原点处显示一个清晰斑点，没有其它斑点出现。
A.4 ε-聚赖氨酸盐酸盐含量的测定
A.4.1 方法提要
利用高效液相色谱测定ε-聚赖氨酸盐酸盐的含量。
A.4.2 试剂和材料
A.4.2.1 磷酸氢二钾。
A.4.2.2 硫酸钠。
A.4.2.3 磷酸。
A.4.2.4 乙腈。
A.4.3 仪器和设备
高效液相色谱仪：配有紫外检测器，或其他等效的检测器。
A.4.4 参考色谱条件：
A.4.4.1 检测波长：215 nm；
A.4.4.2 色谱柱：C18 色谱柱，柱为4.6 mm×250 mm。
或其他等同分离效果的色谱
柱和色谱条件。
A.4.4.3 流速：0.4 mL/min；
A.4.4.4 定量进样器100 μL。
A.4.5 分析步骤
A.4.5.1 流动相的制备
将1.7 g 的磷酸氢二钾和1.42 g 的硫酸钠溶于800 mL 的水中，用磷酸调pH 至3.4 后，用水定溶至1000 mL，取此溶液920 mL 加入80 mL 乙腈，混匀。
用0.45 μm 的膜过滤器过滤。
A.4.5.2 标准样品溶液的制备
精确称量约20.00 mg ε-聚赖氨酸盐酸盐标准样品，加入到25 mL 的容量瓶中，
加流动相到刻度下1 cm 处超声10 min，待冷至室温用流动相定容至刻度混合均匀。
将此溶液用0.45 μm 的膜过滤器过滤，待用。
A.4.5.3 试样溶液的制备
精确称量约20.00 mg 试样，加入到25 mL 的容量瓶中，加流动相到刻度下1 cm 处超声10 min，待冷至室温用流动相定容至刻度混合均匀。
将此溶液用0.45 μm 的膜过滤器过滤，待用。
A.4.5.4 测定
分别向液相色谱仪注入标准样品溶液和试样溶液，记录主峰的峰面积，进样
量为20 μL。
A.4.6 结果计算
ε‐聚赖氨酸盐酸盐含量（以干品计）的质量分数w1，按公式（A.1)计算：
w1 = [(Ws × Ps / Wu) (Ru / Rs)×100 %]÷(1－w2) ………………（A.1）
式中：W s——制备标准样品溶液所用的ε‐聚赖氨酸盐酸盐标准样品的质量（mg）；P s——制备标准样品溶液所用的ε‐聚赖氨酸盐酸盐标准样品含量（%）；
W u——试样溶液中试样的质量（mg）；
R s——标准样品溶液中主峰面积的响应值；
R u——试样溶液中主峰面积的响应值；
w2——A.5 中测得的干燥减量的质量分数。
注：系统适用性为重复注入标准样品溶液三次，所得响应面积的相对平均偏差小于1.0％。
A.5 干燥减量的测定
按GB 5009.3 中的第一法，直接干燥法进行测定。
A.6 pH 的测定
试样溶液为10 g/L 水溶液，采用酸度计进行测定。