浊度法测定抗生素影响因素的探讨

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浊度检测过程中,会受到哪些因素影响

浊度检测过程中，会受到哪些因素影响开展浊度检测过程中，会受到多种因素影响，影响可以为正偏差影响，也可以是负偏差影响。

所谓正偏差，指的是进行浊度测量过程中，其测量值高于实际情况，一般情况在浊度较低的水样检测之中存在，其浊度值大都在0.1UNT之下，比如经过过滤后的纯净度较高的饮用水。

所谓负偏差，指的是测量值低于实际情况，一般在浊度超过1UNT 的水样检测之中发生，且浊度值越高，将形成越大的负偏差。

若是水样的浊度低于5NTU的情况下，水样浊度检测中，会受到污染物、水样气泡、杂散光及周围光线的影响，若是水样的浊度高于5NTU的情况下，会受到颗粒密度、颗粒的光线吸收度和水样颜色的影响。

综合分析，污染物、检测仪器、颗粒沉降、颗粒密度、杂散光、水样瓶、气泡、颗粒大小、水样自身颜色及悬浮颗粒的色彩均会产生浊度检测的影响。

开展浊度检测过程中，可依靠光学特征，从水样中包含的悬浮颗粒散射效用检测影响。

由于悬浮颗粒为物理颗粒，其包括沙土、与你、微生物和绿藻等物质，也可以为木质素和丹宁等物质。

水样颗粒几何形状及颜色、颗粒浓度和颜色、光学特点等均为水样特点形成因素。

水中，悬浮颗粒会产生多角度的光散射现象，不同角度的散射光会受到颗粒大小和入射光的影响而形成，若是悬浮颗粒大小在入射光波长之下的情况下，散射光前后的光强大都为对称性存在。

若是悬浮颗粒在入射光波长之上的情况下，光散射的优势将更加显著。

波长也会对光散射产生影响，在相同大小的颗粒之中，长波长散射远远低于短波长的散射。

短波长的入射光极易被带颜色的水样所吸收。

水样不会吸收近红外光源，所以其并不会受到水样颜色的影响，这就是不选择技术相同浊度仪进行干预无法进行对比的主要因素。

若是光源存在差异性，则水样之中的散射状况也会存在差异性，最终光散射计算后所形成的浊度值也存在较大差异性，所以，90度散射光检测角度为主流性浊度仪检测的角度。

由入射光源至散射光源的检测时，检测广成也会对浊度产生影响。

动态浊度法定量检测茵栀黄注射液中细菌内毒素的探究

动态浊度法定量检测茵栀黄注射液中细菌内毒素的探究【摘要】目的：细菌霉素是革兰氏阴性菌的重要组成，当细菌死亡或者自然溶解之后便会释放出内毒素，这种毒素在自然界广泛存在，进入人体并不会对人体产生危害，但毒素大量进入血液便会引起热源反应，给人们身体健康构成威胁，这里主要通过建立定量检测茵栀黄注射液中的细菌内毒素试验方法。

方法：结合《中国药典》附录中的茵栀黄注射液中细菌内毒素的检测方法，并分析了其有关干扰因素。

结果：采用动态浊度定量检测茵栀黄注射液中细菌内毒素的时候，几乎不受外在因素的干扰，内毒素回收率高达80%以上。

结论：使用动态浊度定量检测进行茵栀黄注射液中细菌内毒素，效果十分好，有着良好的临床价值且值得推广，这种方法代替了传统免热源检查方法，又避免了限量法内毒素检测干扰。

【关键词】茵栀黄注射液；动态浊度定量检测；细胞内毒素；检测茵栀黄注射液是当前临床中常见灭菌水溶液药剂，有着清热、解毒、退黄的作用，在肝胆湿热、胸肋胀痛、慢性肝炎等临床中十分常见，这种药物主要是为茵陈提取物、金银花提取物和栀子提取物以及黄芪苷加工而成。

由于茵栀黄注射液临床应用范围广、价值高，其在热源控制中有着良好的临床价值，这也让其细菌内毒素检测受到人们的关心，使得细菌内毒素在预计限值内，保证了用药安全、采用动态浊度定量检测法进行茵栀黄注射液中细菌内毒素检测，其可靠性、抗干扰能力强，结果较为准确。

1、材料与仪器本次试验采用了茵栀黄注射液，批号为20090206，由江苏长江药业有限公司生产。

TAL试剂为20080208，由湛江海洋生物有限公司提供，细菌内毒素按照国家现行规定进行检测。

细菌用水为湛江海洋生物制品检定厂提供。

2、方法与结果细菌内毒素这个概念最早出现于十九世纪九十年代，最早主要是引发热物质变化引起人们关注的内容。

到了上个世纪中期随着生物学、物理学、化学、免疫学和医学的进一步发展，细菌内毒素研究力度不断增加，成为医学、药学人士研究的重点，其化学结构组成成分以及各生物活性之间的关系变得更加明确，对其研究也越来越深入。

比浊法测定麦迪霉素效价及其影响因素分析

比浊法测定麦迪霉素效价及其影响因素分析作者：靖研研来源：《科学与财富》2014年第13期摘要：目的：利用比浊度测定法，对麦迪霉素效价以及影响因素进行分析，并建立比浊度测定麦迪霉素绩效的方法。

方法：本实验主要以金黄色葡萄球菌作为试验的菌体，将菌液的浓度控制在1.0%，对菌体的培养测定时间为3～4h左右。

结果：通过试验与分析发现，将麦迪霉素的浓度控制在1.0%～3.0U/mL左右，其浓度的对数可以与吸光度形成最佳的线性关系，而且评价回收率可达到100.5%左右，其中RSD为0.12%。

结论：通过分析发现，利用微生物比浊度测定麦迪霉素的效价，操作较为简单，而且测定的结果准确率以及效率较高。

关键词：比浊度；测定；麦迪霉素；效价；影响因素微生物比浊度法，是国际上惯用的效价测定方法之一，主要利用比浊度法对麦迪霉素的效价进行了测定，还对影响测定结果的因素进行了分析。

麦迪霉素属于大环内酯类抗生素，传统测定麦迪霉素效价的方法主要利用是管碟法，其操作比较复杂，而且耗费的时间比较长，测定的效率并不高，而且测定结果容易受到外界因素的影响，使得测定结果缺乏准确性，可信度不高。

为了改善这一问题，笔者利用微生物比浊度法，对麦迪霉素的效价进行测定，还对其影响因素进行了分析，比浊度法操作简单，耗费的时间比较短，而且测定结果准确度高，下面笔者对该实验进行简单的介绍。

1 实验仪器与试药WBS-101微生物比浊法测定仪（北京先驱威锋技术开发公司），BT25S赛多利斯电子天平（d=0.01mg）。

麦迪霉索标准品（中国食品药品检定研究院，编号：130337-9803，效价：980U/rag）；麦迪霉素（明治医药（山东）有限公司，批号：CMEB-201109072；CMEB-201109051；CMEB-201109062）金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]第三代；抗生素检定培养基Ⅲ号pH7.O（北京市三药科技开发公司，批号：1008232）；pH7.8磷酸盐缓冲液。

浊度法测定硫酸庆大霉素注射液含量

1997年 3月Jou rnal of H ebeiU n iversity M ar.1997浊度法测定硫酸庆大霉素注射液含量3刘保生左阳 (理化分析中心)摘要　本文采用阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠与庆大霉素形成非常稳定的乳浊液,进行比浊光度,操作简便,方法快速,结果准确,可满意地用于硫酸庆大霉素注射液含量的监测。

7次平行实验的变异系数为3.4%,6～40u m l庆大霉素与浊度呈线性关系。

关键词　庆大霉素　浊度法　抗生素中图法分类号　O657.322由于庆大霉素稳定性、水溶性好,抗生广谱,用量小且毒性低,工艺路线简单,已作为败血症、烧伤感染、脓毒血症的首选药物。

然而,近年来分析、鉴定庆大霉素的方法研究似乎被人们所忽视。

目前的分析方法有:光度法,核磁共振法和液相色谱法〔1〕。

后两种方法能同时测定庆大霉素的C1、C2和C1a三种组成含量,显然这些仪器存在局限性。

光度方法只能测定庆大霉素总量,有二甲氨基苯甲醛比色法和雷氏盐比色法。

前者需采用高温强酸水解释放出氨乙酸糖,在碱性条件下用N,N-对二甲基苯甲醛显色,于540nm波长下光度测定。

雷氏盐比色法以硫氰酸铬铵作为庆大霉素的沉淀剂,能够定量地沉淀庆大霉素,用525nm测定沉淀的乙醇溶液。

雷氏盐法需要在冰水浴中进行沉淀反应。

筛选出十二烷基苯磺酸钠,它和庆大霉素以4∶1的分子比形成缔合物,该缔合物不沉淀而是非常稳定的乳浊液,据此,建立了庆大霉素的比浊光度法,反应快速,操作简单,测定准确,7次测定硫酸庆大霉素针剂的变异系数为3.4%,6～40u m l庆大霉素与浊度值呈线性关系,几个厂家的产品用本方法测定的结果和药典标准方法〔2〕测定的结果一致。

1　实验部分1.1　仪器U V-265紫外可见分光光度计(日本岛津);pH S-3C型数字酸度计(上海雷磁仪器厂)。

1.2　试剂庆大霉素标准样品由中国药品生物制品检验所提供,纯度为631u m g;十二烷基苯磺酸钠(England BDH进口分装,简称LA S),1×10-2m o l L水溶液;二次蒸馏水。

抗生素微生物检定法——浊度法方法验证浅析

现代畜牧兽医2019年第2期抗生素微生物检定法——浊度法方法验证浅析张明（辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心，辽宁沈阳110016）摘要：总结本实验室在抗生素微生物检定——浊度法方法验证过程中取得的相关经验，以期对各兽药检测机构在进行抗生素浊度法的方法验证中提供参考。

按照2015年版《中国兽药典》附录1201第二法进行浊度法的方法学验证，并使用管碟法（第一法）与浊度法进行方法的比较测定。

结果显示，管碟法与浊度法对同一样品测定的结果无明显差异，相对偏差为0.4%～0.8%；抗生素浓度在3.0～7.0U/mL 时，A 与抗生素浓度对数呈良好的线性关系；对同一样品测量的浊度法重复性RSD 为0.8%，管碟法RSD 为2.2%，证明浊度法的重复性优于管碟法，且易于获得较好的可信限率，证明其测定结果的可靠性；不同人员使用浊度法对同一样品进行测定，结果分别为102.1%和98.9%，相对偏差为1.6%。

表明浊度法作为抗生素微生物检定法之一，与管碟法相比，耗时短、操作简便、灵敏度高，大大提高了检测效率。

本文总结的浊度法方法验证经验可为检测机构开展该项工作提供参考。

关键词：抗生素；效价；浊度法；方法验证中图分类号：O658文献标识码：B文章编号：1672-9692(2019)02-0012-04Analysis of the Verification on Antibiotic Microbial AssayMethod by Turbidimetric MethodZhang Ming(Liaoning Testing &Inspection Center for Quality &Safety of Veterinary Drugs,Feed and Livestock Products,LiaoningShenyang110016)Abstract:Summarize the relevant experience gained by the processofverification on antibiotic microbial assay method by turbidimetric method in our laboratory,in order to provide reference for the verification of the antibiotic microbial assay method by turbidimetric method for each veterinary drugs testing institution.The methodological verification of turbidimetric method was performed according to the second method of Appendix 1201of the Chinese Veterinary Pharmacopoeia 2015,the method of tube dish method(first method)and turbidimetric method was used for compari‐son and determination.The results showed that there was no significant difference between the tube dish method and the turbidimetric method for the same sample.The relative deviation was 0.4%～0.8%.When the concentration of antibiotic was 3.0～7.0U/mL,A had a good linear relationship with the logarithm of antibiotic concentration.The turbidimetric method has a repeatability RSD of 0.8%for the same sample and 2.2%for the tube dish method,which proves that the repeatabili‐ty of the turbidimetric method is better than the tube dish method,and it is easy to obtain a good fiducial limit rate,which proves the reliability of the results,different people used the turbidimetric method to determine the same sample,the results were 102.1%and 98.9%,respective‐ly,and the relative deviation was 1.6%.As one of the antibiotic microbial assays,the turbidi‐metric method is shorter in time,easier to operate,and more sensitive than the tube-disc meth‐收稿日期：2018-12-15作者简介：张明（1963-），男，本科，高级兽医师，主要从事兽药饲料畜产品残留检验检测工作。

探讨抗生素微生物检定法的误差因素及解决对策

差，比如常见的吸附性强的平阳霉素和庆大霉素等。
１．３检定菌老化，在培养基中受热的时间过长或者是培养基的温度过高，细菌被高温烫死。应将培养基高温加热后，根据试验的菌种不同，在相应温度的温水
菌圈或者是圈小。第三是缓冲液的ｐＨ浓度，例如庆大霉素等测定时应严格要求培养基ｐＨ值，由于目前灭菌条件各不相同，或者是在储存中受潮，容易导致培养基灭菌后的ｐＨ不在规定范围内，抑菌圈小，以上多
扩散。导致发生这种情况的原因有检测菌液中菌龄不
等或者是放置时间过长，此应做好检测菌的纯化¨ ｒ作，提高抗生素的活性以及严格按照试验规范进行。２．１做好检定菌纯化Ｔ作，定期进行菌种传代，保持菌种的新鲜度。不常用的菌种应进行冷冻或者干燥存放，或者接种在营养基内进行储存，避免检验菌在空气中被污染导致出现抗药性。针对一些容易出现变异
种因素均会造成检定出现误差。
进行泡制一段时间，待培养基温度适宜后再加入试
验菌［２１。
１．４将抗生素用的缓冲液进行稀释，过高的浓度和低ｐＨ值会使抑菌圈不圆整，例如四环素类，溶液浓度过高、ｐＨ值低、试品溶液和标准溶液的浓度不一等原因，均会造成抗生素的功能下降，而且当抑制圈过大

比浊法测定抗生素2

比浊法测定抗生素一、实验目的1.掌握比浊法测定的原理及方法；2.学会标准曲线的制作和培养基的制备。

二、实验原理细菌接种于澄清的营养丰富的液体培养基中，在一定的温度下培养一段时间，变浑浊，其浑浊程度与细菌生长的浊度与细菌数的增加，细菌群体质量的增加和细菌细胞容积的增加之间，存在直接关系，可用朗伯-比尔定律形式表示。

1og I0/I = A = NEab / 2.3I0：入射光的强度I：透射光的强度N：细菌的质量E：细菌颗粒的吸收系数a：细菌颗粒的光学有效面积b：细菌悬液的厚度在抗生素存在时，理论的剂量反应方程为：Nt = N0exp[K0 + f（V）Km - KaC] tNt：培养t时间后细菌的质量N0：开始培养时细菌的质量K0：在无抗生素存在时，细菌繁殖代数的速度常数C：抗生素浓度，Ka为其抑制常数，Km为溶剂效应f（v）：试管内样品体积的函数实际上，上面的N0、K0、f（v）、Km、Ka和t不能确知，但在各试管内均相同为一常数，因此，可简化为log N = G + BCG：直线的截距B：直线的斜率C：抗生素的浓度如1og N用细菌悬液的吸收度表示，则logA = E + FC因此，在剂量反应曲线的直线范围内，可设计微生物浊度法测定抗生素的含量。

三、实验试剂、材料及设备1.材料：金黄色葡萄球菌2.试剂：营养肉汤培养基（蛋白胨10g，氯化钠5g，肉浸液1000ml，混合上述成分，调节pH使比最终的pH略高0.2~0.4，调节pH使灭菌后为7.2~7.4，分装，在121℃灭菌30分钟，趁热释放使凝固成斜面。

）、无菌水、0.9%灭菌氯化钠溶液、甲醛溶液、抗生素标准品、抗生素供试品，灭菌缓冲液。

3.设备：立式整齐灭菌锅、培养箱、检测仪、试管、烧杯、天平、电炉等。

四、实验步骤(一)、准备工作1.试管的准备（1）．新试管经洗净后，用160℃干烤1～3小时灭菌，注意保持清洁，避免被抗生素、抑菌物质、毛点、纤维污染。

浊度法测定硫酸庆大霉素及其制剂效价的影响因素

浊度法测定硫酸庆大霉素及其制剂效价的影响因素
罗晓茹;魏立平;王亚南;吴艳;刘成红;周尚
【期刊名称】《解放军药学学报》
【年(卷),期】2010(026)001
【摘要】目的测定硫酸庆大霉素及其制剂的效价.方法微生物比浊法.结果硫酸庆大霉素在0.41～1.00U/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系,r=0.9948(n=5).结论对影响试验的因素进行了归纳,并提出了相应的控制措施,对减少试验误差保证检验结果的可靠性具有一定的参考指导价值.
【总页数】2页(P73-74)
【作者】罗晓茹;魏立平;王亚南;吴艳;刘成红;周尚
【作者单位】100071,北京,总后勤部卫生部药品仪器检验所;100071,北京,总后勤部卫生部药品仪器检验所;100071,北京,总后勤部卫生部药品仪器检验所;100071,北京,总后勤部卫生部药品仪器检验所;100071,北京,总后勤部卫生部药品仪器检验所;100071,北京,总后勤部卫生部药品仪器检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R927.1
【相关文献】
1.微生物浊度法测定红霉素及其制剂的效价 [J], 郭钫;蔡美明
2.微生物浊度法测定硫酸庆大霉素颗粒的效价 [J], 汪洋;闵盛
3.微生物浊度法测定安普霉素及其制剂效价的研究 [J], 高延玲;班付国;刘占通;刘
宏伟;周红霞;马俊
4.微生物浊度法测定泰乐菌素及其制剂效价的研究 [J], 木尼热.热合木
5.浊度法测定兽用抗生素药品效价影响因素探讨 [J], 李树纲;张蕾;于清伟;史梓萱;杲寿善
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浊度法测定12-去羟基阿奇霉素的效价

浊度法测定１２-去羟基阿奇霉素的效价【摘要】目的建立浊度法测定12．去羟基阿奇霉素效价的方法。

方法以肺炎克雷伯菌为试验菌，加菌量0．6%~1．0%(V/V)，37℃±0．5℃培养4 h左右测定。

结果抗生素线性浓度为2．0~10．0 U/ml，二剂量法原料的平均回收率为101．2%，RSD为2．2%(n=9)。

结论本方法灵敏，快速，影响因素较少，可作为测定12．去羟基阿奇霉素的效价的方法。

【Abstract】Objective To establish a turbidimetric method for the content determination of Dihydroxyl Azithromycin.Methods The test organism was Klebosiella Pneumociacand cultured with fresh medium(pH7．8).Adjust spore suspension ofKlebosiella Pneumociaciinoculate with a 0．6%．1．0%(V/V)ratio，at 37℃±0．5℃for about 4 h.Results The liner range was 2．10 U/ml.The average recovery of Fosfomymin Calcium Capsules was 101．2%(RSD=2．2%，n=9).Conclusion The method is sensitive，rapidand feasible to determine Dihydroxyl Azithromycin.【Key words】Potency;Turbidimetric method;Dihydroxyl Azithromycin12-去羟基阿奇霉素是由红霉素C为原料，通过化学合成的方法合成的。

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液放置时间不要超过３ｄ，斜面放置时间不要超过玻璃质地应一致，否则会影响传热速度，同一批
７ｄ。试验用菌种代数不宜超过５代。
样品的各支培养管，应按正交拉丁方排列，以抵
１．３菌液的浓度。比浊法测定时，菌液过浓，消各位置温度的差异。
２０１３年第６期
经
浊度法测定抗生素影响因素的探讨
庞晓江，陈智慧
（新疆维吾尔自治区兽药饲料监察所，新疆乌鲁木齐８３０生素药品的效价采用液体培养基法，消除了多组分抗生素在固体培养基中扩散不同的影响，具有快速、灵敏度高、可信限率低等特点。试验过程中需注意试验茵、培养基、培养条件、仪器测定时的误差、玻璃仪器的选用及清洗等影响因素，以保证测定结果的准确性。
驻义务监事，督促合作社规范运作；建立合作社代办缴纳城镇社会保险手续，在合作社工作的农
财务状况审计制度，切实维护社员合法权益，保业科技人员和大中专毕业生均可按有关规定优先
障资金规范运行。建立一支熟悉法律法规与生产评定职称，确保合作社留得住人才。
收稿Ｅｌ期：２０１３—０３—１１作者简介：庞晓江（１９７３一），男，汉族，大专，从事兽药饲料
检验工作。
１．２菌的均一稳定性。试验菌的均一稳定性是影响试验结果的重要因素，因此在菌悬液制备过程中，要严格控制菌种斜面的质量、菌种培养的温
２０％～６０％Ｔ（０．２２～０．７Ａ）以外，仪器本身的测量误厌氧性。如采用振摇和搅拌培养法，增加氧的供
差也将增大。因此，在比浊法进行测定时，最好应，可促进生长，缩短培养时间。
镇三级合作社指导服务平台，建立合作社动态监农业人才支撑计划。将合作社人才培训工作纳入
测和审计监督机制，将合作社财务管理纳人农经 “阳光工程”。同时，对到合作社工作的农业科
管理范畴；区县农经部门可向有需求的合作社派技人员和大中专毕业生实行人事代理，并按规定
经营管理的合作社辅导员队伍，指导合作社加强３．５加大宣传，提高农牧民对合作社的认知程度
农业标准化生产经营。
乌鲁木齐应充分利用广播、电视、网络等媒
３．４加强合作社人才队伍建设
体，采取经验交流、现场观摩等方式，加强对合
支持合作社开展对成员的培训教育。把合作社的宣传，扩大合作社知名度，保持对成员及
作社人才培养纳入农村实用人才队伍建设和现代更多农户的吸引力。
ｏ
畜牧业
２０１３年第６期
度与时间。菌液需新鲜配制，最好当天制备、当验菌种。可避免加注试管时的先后误差。
天使用，若在冰箱放置一段时间后再使用，所测３．２培养温度。培养温度的恒定与均匀性也直接
关键词：浊度法；效价测定；培养基
中图分类号：Ｑ５０３文献标识码：Ｂ文章编号：１００３—４８８９（２０１３）０６—００５１—０２
可在当天获得结果。缺点是：试验条件要求较严，如玻璃仪器比色管的清洁度、菌液浓度、培养基
目前各国药典通常采用管碟法和浊度法两种方法测定抗生素的效价。微生物浊度法测定抗生素的效价是利用抗生素在液体培养基中对试验菌生长的抑制作用，通过测定培养后细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品对试验菌生长抑制的程度，以测定供试品效价的一种方法。此方法与管蝶法相比的优点是：采用液体培养法，消除了多组分抗生素在固体培养基中扩散不同的影响，具有快速、灵敏度高、可信限率低的特点。而且结果的精密度与准确度均较好，试验过程较短（约３～４ｈ）易于操作，
及其ｐＨ值、培养条件以及仪器测定等均影响其结果。现从以下几方面来探讨：１试验菌的影响１．１菌种。本实验以《中华人民共和国兽药典》（２０１０年版）一部附录抗生素微生物检定法规定的试验菌一金黄色葡萄球菌为试验菌。其菌繁殖生长速度在实验所需的时间之内较稳定，无毒变株，可作为本试验的微生物检定菌种。在测量杆菌悬液的浊度时，由于杆菌运动的流动双折射现象较球菌悬液更难于正确测量，因此试验菌种应尽量采用球菌。
定的数据不稳定，误差大。因为菌液在放置一段影响试验菌的生长速率。美国药典２８版中对管碟
时间后，部分细菌老化甚至死亡，从而影响试验法的培养温度要求为 ±０．５℃，而浊度法的温度要
时活菌的量，使结果产生偏差。一般情况下菌悬求 ±０．１℃，此法更为严格。培养用的试管厚度、
可使浓度一光吸收度不成直线关系；菌液过稀，３．３通气。各培养管静态培养时，试验菌慢慢
则读数偏低，误差增大。另外，分光光度计的沉降至底部，就会产生梯度的微生物生长区及代
最正确测量范围在３６．８％Ｔ处，因此，如读数在谢环境。培养基的上半部分为微亲氧性，底部为