谷氨酸棒状杆菌生产流程
甘油法制作谷氨酸棒杆菌感受态
1，培养基LBG培养基（g/l）：酵母膏5，蛋白胨10，氯化钠10，ph7.0，用于培养谷氨酸棒状杆菌制备感受态的种子液。
EPO培养基（g/l）：酵母膏5，蛋白胨10，氯化钠10，甘氨酸30，Tween80 1。
用于谷氨酸棒状杆菌感受态的制备。
LBHIS培养基（g/l）：酵母膏2.5，蛋白胨5，氯化钠5，脑心浸液18.5，山梨醇91，用于谷氨酸棒状杆菌转化子的培养。
谷氨酸棒杆菌的培养条件：30℃，200rpm，需要卡那霉素时，加入的终浓度为30ug/ml，相应的固体培养基中加入2%的琼脂粉。
2 ，谷氨酸棒状杆菌感受态的制备：（1）将一环谷氨酸棒状杆菌的种子接种于种子培养基中，200rpm，30℃过夜培养。
（2）以10%的比例转接于100ml培养基中，使初始细胞OD达到0.3，200rpm 30℃培养3-5h至OD达到0.6-0.9。
（3）将所有菌液放入50ml离心管中冰浴15min，4000rpm，4℃离心10min。
（4）取预冷的10%甘油约30ml，充分悬浮菌体，4000rpm，4℃离心10min。
（5）再次取预冷的10%甘油重复洗涤两次。
（6）用400ul预冷的10%甘油重悬细胞，1.5ml离心管分装，每管80ul，-70℃保存或者点击转化。
3 谷氨酸棒状杆菌的电转化法：（1）将新鲜制备(或者冰箱取出)感受态细胞和连接产物置于冰上，轻弹管壁使其混匀。
（2）吸取5ul冰上预冷的质粒加入感受态细胞中，轻弹管壁使其混匀，然后冰浴5-10min。
（3）加入预冷的0.1cm电击杯中，1.8kv，5ms电击。
加入恢复用培养基LBHISml，混匀46℃水浴6min。
（4）30℃，100rpm培养1h。
（5）涂布含有抗生素的平板，30℃过夜培养观察。
甘油法制作谷氨酸棒杆菌感受态
甘油法制作谷氨酸棒杆菌感受态1，培养基LBG培养基（g/l）：酵母膏5，蛋白胨10，氯化钠10，ph7.0，用于培养谷氨酸棒状杆菌制备感受态的种子液。
EPO培养基（g/l）：酵母膏5，蛋白胨10，氯化钠10，甘氨酸30，Tween80 1。
用于谷氨酸棒状杆菌感受态的制备。
LBHIS培养基（g/l）：酵母膏2.5，蛋白胨5，氯化钠5，脑心浸液18.5，山梨醇91，用于谷氨酸棒状杆菌转化子的培养。
谷氨酸棒杆菌的培养条件：30℃，200rpm，需要卡那霉素时，加入的终浓度为30ug/ml，相应的固体培养基中加入2%的琼脂粉。
2 ，谷氨酸棒状杆菌感受态的制备：（1）将一环谷氨酸棒状杆菌的种子接种于种子培养基中，200rpm，30℃过夜培养。
（2）以10%的比例转接于100ml培养基中，使初始细胞OD达到0.3，200rpm 30℃培养3-5h至OD达到0.6-0.9。
（3）将所有菌液放入50ml离心管中冰浴15min，4000rpm，4℃离心10min。
（4）取预冷的10%甘油约30ml，充分悬浮菌体，4000rpm，4℃离心10min。
（5）再次取预冷的10%甘油重复洗涤两次。
（6）用400ul预冷的10%甘油重悬细胞，1.5ml离心管分装，每管80ul，-70℃保存或者点击转化。
3 谷氨酸棒状杆菌的电转化法：（1）将新鲜制备(或者冰箱取出)感受态细胞和连接产物置于冰上，轻弹管壁使其混匀。
（2）吸取5ul冰上预冷的质粒加入感受态细胞中，轻弹管壁使其混匀，然后冰浴5-10min。
（3）加入预冷的0.1cm电击杯中，1.8kv，5ms电击。
加入恢复用培养基LBHISml，混匀46℃水浴6min。
（4）30℃，100rpm培养1h。
（5）涂布含有抗生素的平板，30℃过夜培养观察。
谷氨酸发酵过程控制—谷氨酸棒杆菌三角瓶液体培养
2、培养条件 ①温度 种子培养应选择最适温度。 ②通气量 足够的通气量可以提高种子质量。
3、接种量 接种量的大小决定于生产菌种在发酵罐中生长繁
殖的速度。接种量过大会引起溶氧不足，影响产物合 成；接种量过小会延长培养时间，降低发酵罐的生产 率。
通 常 接 种 量 ： 细 菌 1-5% ， 酵 母 菌 5-10% ， 霉 菌 715%，有时20-25%。
请阅读引导文，并回答以下问题：
1、由斜面接种至液体培养基，采用什么接种工具？ 2、无菌操作接种应该在什么环境下进行？ 3、谷氨酸棒杆菌摇瓶种子培养条件和培养时间？
❖ 由斜面接种至液体培养基，采用的接种工具:接种环。 ❖ 接种环境：必须在一个无杂菌污染的环境中进行严格的
无菌操作。
摇瓶培养条件和时间： 培养时间12h; 设置摇床转速100rpm; 培养温度33-34℃。
谷氨酸发酵条件控制-谷氨酸棒杆菌三角瓶液体培养
谷氨酸的生产工艺流程： 一级种子扩大培养
摇瓶培养（三角瓶培养）的目的：
产生大量繁殖活力强的菌体，培养基组分应以少含 糖分，多含有机氮为主，培养条件有利于长菌。
1、培养基 种子培养基要满足以下要求： （1）营养成分适合种子培养的需要； （2）选择有利于孢子发芽和菌体生长的培养基； （3）营养上要易于被菌体直接吸收和利用； （4）营养成分要适当丰富和完全，氮源和维生素 含量要高； （5）营养成分要尽可能与发酵培
谷氨酸生产工艺流程
谷氨酸生产工艺流程
谷氨酸是一种重要的氨基酸，广泛应用于食品、饲料、医药和化工等领域。
下面将介绍一种常见的谷氨酸生产工艺流程。
首先是原料准备。
谷氨酸的生产主要依靠微生物发酵，常用的菌株有谷氨酸棒状杆菌、曲霉等。
菌种的培养需要合适的培养基，常用的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐和微量元素等。
其中，常用的碳源有糖类、淀粉类和脂肪类，常用的氮源有尿素、氨基酸和蛋白质等。
其次是发酵过程。
将培养基加热灭菌后，转入发酵罐中，控制好温度、pH值和搅拌速度等条件，接种适量的菌种，并进行
培养。
在发酵过程中，菌株利用培养基中的碳源和氮源进行生长和代谢，并分泌出谷氨酸。
通常发酵时间为30-48小时。
然后是分离提取。
发酵结束后，需要将发酵液中的谷氨酸进行分离提取。
一般采用酸碱法进行提取，即先用酸调整发酵液的pH值使其酸化，然后用碱调整pH值使其碱化，谷氨酸因为
在酸性条件下溶解度较大，在碱性条件下溶解度变小，从而通过溶液的酸碱调节将谷氨酸分离出来。
最后是纯化和结晶。
将提取的谷氨酸溶液进行纯化和结晶工艺，以提高产品的纯度和晶体形态。
常用的纯化方法有酸沉淀、蒸发结晶和逆流结晶等。
纯化后的谷氨酸产品可以用于进一步加工和应用。
以上就是一种常见的谷氨酸生产工艺流程。
当然，不同厂家和
规模的生产工艺可能略有不同，但总体来说，这是一种经济有效的谷氨酸生产方法。
随着生物工程技术的发展，谷氨酸的生产工艺也在不断改进和创新，以提高生产效率和产品质量。
谷氨酸发酵的工艺流程
谷氨酸发酵的工艺流程
《谷氨酸发酵的工艺流程》
谷氨酸是一种重要的氨基酸，广泛应用于食品、医药和化工等领域。
发酵工艺是生产谷氨酸的主要方法之一，下面将介绍谷氨酸发酵的工艺流程。
1. 选择菌株：选择适合发酵生产的菌株是谷氨酸发酵工艺的第一步。
通常采用属于放线菌属或棒状杆菌属的菌株进行发酵。
这些菌株具有较高的谷氨酸产量和较好的耐受性。
2. 发酵培养基的配制：发酵培养基是支撑谷氨酸发酵的重要基础。
一般包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等组成成分。
常用的碳源包括葡萄糖、麦芽糖等，氮源包括氨基酸、尿素等。
3. 发酵条件控制：发酵过程中的温度、pH值、氧气供应等条件都会影响谷氨酸的产量。
通常采用恒温发酵，温度一般控制在28-32摄氏度。
同时控制好培养基的pH值，通常在6.5-7.5之间。
氧气供应也是非常重要的，通过控制搅拌速度和通气量来保证充足的氧气供应。
4. 发酵过程监测：在发酵过程中需要对微生物生长、培养基中各种成分的消耗和产物的生成进行持续监测。
通过检测微生物生长曲线和培养基中各成分的浓度变化来掌握发酵情况，及时调整发酵条件以提高产量。
5. 发酵产物的提取与精制：发酵结束后，需要对发酵产物进行
提取和精制。
通常采用离心、过滤等方法将微生物分离，然后通过酸碱调节、浓缩、结晶等工艺步骤来得到纯净的谷氨酸产物。
通过以上工艺流程，谷氨酸发酵生产可以实现高效、稳定的产量，并且能够得到高纯度的产物，满足市场需求。
氨基酸类药物的发酵生产—谷氨酸的发酵生产
生物素的来源：氨基酸生产上可以作为生物素来源的原料 有玉米浆、麸皮水解液、糖蜜及酵母水解液等，通常选取 几种混合使用。例如，许多工厂选择纯生物素、玉米浆、 糖蜜这三种物质来配制培养基。各种原料来源及加工工艺 不同，所含生物素的量不同。玉米浆含生物素500μg/kg， 麸皮含生物素300μg/kg，甘蔗糖蜜含生物素1500μg/kg。
操作简单 周期长，占地面积大。
直接常温等电点法工艺流程
发酵液
起晶中和点（pH4-4.5) 育晶（2h）
盐酸
菌体及细小的 谷氨酸晶体
等电点搅拌pH3-3.22 静置沉降4-6h 离心分离
成品
母液
干燥
湿谷氨酸晶体
2、离子交换法
可用阳离子交换树脂来提取吸附在树脂上的谷氨 酸阳离子，并可用热碱液洗脱下来，收集谷氨酸 洗脱流分，经冷却、加盐酸调pH 3.0～3.2进行结 晶，之后再用离心机分离即可得谷呈棒形或短杆形； 革兰氏阳性菌，无鞭毛，无芽孢；不能运动； 需氧性的微生物； 生物素缺陷型； 脲酶强阳性； 不分解淀粉、纤维素、油脂、酪蛋白、明胶等；
发酵中菌体发生明显形态变化，同时细胞膜渗透性改变； 二氧化碳固定反应酶系强； 异柠檬酸裂解酶活力欠缺或微弱，乙醛酸循环弱； α-酮戊二酸氧化能力微弱； 柠檬酸合成酶、乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶活
有机氮丰富有利于长菌，因此谷氨酸发酵前期要 求一定量的有机氮，通常在基础培养基中加入适 量的有机氮，在发酵过程中流加尿素、液氨或氨 水来补充无机氮。
（3）无机盐
磷酸盐 ：工业生产上可用K2HPO4·3H2O、KH2PO4、 Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O等磷酸盐，也可用磷酸。 过高：代谢转向合成缬氨酸。 过低：菌体生长缓慢。
谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的调节控制
谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的调节控制1 菌种的选育目前工业上应用的谷氨酸产生菌有谷氨酸棒状杆菌、黄色短杆菌、噬氨短杆菌等。
我国常用的菌种有北京棒状杆菌、纯齿棒状杆菌等。
在谷氨酸发酵中，如果能够改变细胞膜的通透性，使谷氨酸不断地排到细胞外面，就会大量生成谷氨酸。
研究表明，影响细胞膜通透性的主要因素是细胞膜中的磷脂含量。
因此，对谷氨酸产生菌的选育，往往从控制磷脂的合成或使细胞膜受损伤入手，以提高细胞膜对谷氨酸的通透性，如生物素缺陷型菌种的选育。
发酵中原料要消耗在如下三个方面:第一、供菌体增殖，生成足够量的菌体，使其干重占到发酵液的1.0%1.5%，这是产酸前提与基础。
第二、生成谷氨酸。
第三、由于菌体代谢多支路及发酵条件控制不当而产生的一些其他副产物如乳酸、酮酸、其他氨基酸等等及一些原料被分解而随空气逸出。
【1】2 糖液质量是发酵的基础糖液质量是发酵成功的基础" 这是氨基酸发酵业界同仁的共识。
氨基酸发酵所需的糖液不同于麦芽糖、结晶糖。
有它自身特点，其糖液DX、DE、透光率高而且经糖谱分析，糖（及以上的)值要低，防止发生复合反应。
为达到上述要求，作出符合发酵所需要的优质糖液，可按以下条件实施生产调控：2.1一次喷射双酶法%2.2选用高效优质酶和喷射器-水热器);2.3 液化:调浆ph5.8～6.0 液化维持温度100～95％;液化维持时间100～120min2.4糖化:ph4.1～4.3 糖化温度60% 糖化时间32～36h2.5过滤:高液位压差法3 接种量和种子培养扩大级数为提高发酵罐中菌的增殖速度，菌体数尽快达到高峰，使产物的合成时间提前，力争采用较大种量。
大种量可使发酵时间缩短，但种量过大，也使菌体生长过快，料液粘度增加，导致DO不足，影响产物合成。
同时要消耗过量的糖和营养，致使糖酸转化率下降。
一般常用接种量，谷氨酸发酵为5%～10％赖氨酸为10～15%更高者达20%代谢产物的合成是靠菌来完成，菌体量越多自然产量越大，但菌体的活力必须保持在最佳状态。
谷氨酸棒杆菌发酵原理
谷氨酸棒杆菌发酵原理
谷氨酸棒杆菌（Lactobacillus brevis）是一种常见的乳酸菌，广泛应用于酒类、啤酒、面包等食品的发酵过程中。
谷氨酸棒杆菌发酵制品味醇香、口感丰富、均衡度好，深受消费者的喜爱。
谷氨酸棒杆菌发酵原理主要包括产酸、产乳酸、产二氧化碳和发酵剖分四个方面。
一、产酸
谷氨酸棒杆菌是一种嗜酸性乳酸菌，能够在低pH值环境下生存和繁殖。
它通过代谢糖类和蛋白质来产生有机酸，主要酸种为乳酸。
乳酸可以降低食品的pH值，增强口感和保鲜效果。
谷氨酸棒杆菌通过乳酸发酵过程，将葡萄糖和其他碳水化合物转化为乳酸。
这个过程分为两步：
（1）糖类分解：谷氨酸棒杆菌分泌酶类，将多糖和双糖分解为简单糖（葡萄糖、半乳糖等）。
（2）乳酸代谢：简单糖被代谢成乳酸，同时产生能量。
乳酸的产生使pH值下降，抑制其他有害微生物的生长繁殖。
三、产二氧化碳
谷氨酸棒杆菌在繁殖过程中产生大量的二氧化碳（CO2），使食品膨胀并形成气孔。
这个过程称为二氧化碳发酵。
二氧化碳的产生也使食品柔软松散，口感更佳。
四、发酵剖分
发酵剖分指发酵过程中所发生的化学反应，涉及到物质的转化和能量的消耗。
谷氨酸棒杆菌引起的发酵剖分过程如下：
（1）生长期：菌量增长，主要代谢糖分。
（2）发酵期：菌量稳定，糖分代谢增加，有机酸和二氧化碳产生。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
谷氨酸棒状杆菌生产流程
谷氨酸棒状杆菌（Corynebacterium glutamicum）是一种重要的微生物菌株，广泛应用于食品添加剂、药品和化工等领域。
本文将介绍谷氨酸棒状杆菌的生产流程。
一、谷氨酸棒状杆菌的培养基制备
1.选择适宜的碳源和氮源：谷氨酸棒状杆菌可以利用多种碳源和氮源进行生长，常用的碳源包括葡萄糖、淀粉和甘油等，常用的氮源包括硝酸盐、尿素和天然蛋白质等。
2.加入必需元素：谷氨酸棒状杆菌需要大量的镁离子、钾离子和钙离子等元素进行生长，因此在培养基中需要加入适量的这些元素。
3.调节pH值：谷氨酸棒状杆菌适宜生长的pH范围为7.0-7.5，因此在培养基中需要调节pH值。
4.灭菌处理：为了避免其它微生物污染，需要对培养基进行灭菌处理。
二、谷氨酸棒状杆菌的预培养
1.选取合适的菌种：选择活力强、生长快、产量高的谷氨酸棒状杆菌菌株进行预培养。
2.制备接种液：将选取的谷氨酸棒状杆菌菌株接种到含有适宜碳源和氮源的液体培养基中进行预培养，待细胞生长到一定程度后制备接种液。
3.调节接种液浓度：通过测定细胞密度来调节接种液浓度，一般要求接种液的细胞密度为10^7-10^8 CFU/mL。
三、谷氨酸棒状杆菌的发酵过程
1.接种：将调节好浓度的接种液加入到含有适宜碳源和氮源、必需元素和pH值调节好的发酵罐中进行接种。
2.控制温度：谷氨酸棒状杆菌适宜生长温度为30-35℃，因此在发酵过程中需要控制发酵罐内温度。
3.控制pH值：谷氨酸棒状杆菌生长过程中会产生大量的有机酸，会导致pH值下降，因此需要在发酵过程中定期测量pH值并进行调节。
4.控制通气量：谷氨酸棒状杆菌需要充足的氧气进行生长，因此需要在发酵过程中控制通气量。
5.添加发酵助剂：为了提高谷氨酸棒状杆菌的产量和质量，可以在发酵过程中添加适当的发酵助剂，如L-丙氨酸、亚油酸等。
四、谷氨酸棒状杆菌的分离和提纯
1.分离：将发酵液离心沉淀后取上清液，通过滤纸或膜过滤等方法去除悬浮物，然后进行分离。
2.提纯：通过离子交换层析、凝胶层析、透析等方法对分离得到的谷氨酸棒状杆菌进行提纯。
五、谷氨酸棒状杆菌的检测和质量控制
1.检测：对谷氨酸棒状杆菌进行菌落计数、生长曲线分析、电镜观察等方法进行检测。
2.质量控制：对谷氨酸棒状杆菌的产量、纯度和活性等进行质量控制，确保产品的质量符合要求。
六、谷氨酸棒状杆菌的应用
1.食品添加剂：谷氨酸棒状杆菌可以产生谷氨酸和赖氨酸等味增成分，广泛应用于味增、豆腐乳等食品添加剂中。
2.药品：谷氨酸棒状杆菌可以生产多种药物原料，如头孢菌素C和丙硫氧嘧啶等。
3.化工：谷氨酸棒状杆菌可以生产丙二酸和乳酸等有机化合物，广泛应用于化工领域。
结语：
以上就是谷氨酸棒状杆菌的生产流程，通过科学合理的操作流程和质量控制措施，可以获得高质量的产品，并广泛应用于食品添加剂、药品和化工等领域。