红色荧光核酸染料使用说明
聚丙烯酰胺凝胶gelred泡染法

聚丙烯酰胺凝胶gelred泡染法
"聚丙烯酰胺凝胶"是一种常用于生物分子电泳的材料,常见的有聚丙烯酰胺凝胶和聚丙烯酰胺-琼脂糖凝胶。
而"gelred"是一种用于核酸染色的荧光染料。
泡染法是一种常见的核酸染色方法,适用于在聚丙烯酰胺凝胶中分离的核酸进行染色。
以下是聚丙烯酰胺凝胶gelred泡染法的步骤:
制备凝胶: 按照标准的聚丙烯酰胺凝胶制备步骤,将所需浓度的聚丙烯酰胺溶液与缓冲液混合,加入TEMED和过硫酸铵等成分,制备聚丙烯酰胺凝胶。
电泳分离: 将待分析的核酸样品加入凝胶孔中,进行电泳分离。
电泳结束后,将凝胶取出。
准备gelred染色液: 在染色缓冲液中加入适量的gelred染色液,按照厂家提供的使用说明调配。
泡染凝胶: 将电泳结束的凝胶完全浸泡在gelred染色液中,静置一定时间,通常15-30分钟。
洗脱凝胶: 将凝胶取出,放入无染色液的缓冲液中洗脱。
这一步的目的是去除多余的染料,增强成像的清晰度。
成像: 将染色后的凝胶放在紫外光或荧光成像系统中进行成像,gelred在荧光成像下能够发出红色荧光。
南京灵敏度高的核酸染料的使用方法

南京灵敏度高的核酸染料的使用方法南京灵敏度高的核酸染料是一种广泛应用于分子生物学领域的染料,它能够在水平上提高DNA和RNA的检测敏感度和定量性能。
本文将详细介绍南京灵敏度高的核酸染料的使用方法,包括选择染料种类、操作前准备工作、实验步骤和注意事项等方面。
一、选择南京灵敏度高的核酸染料目前市场上存在许多种有灵敏度高的核酸染料,要选择适合自己实验的染料,需要考虑到以下几点:1、染料颜色:不需要油绿色或者绿色的染料,而是需要选择在GelDoc等成像软件上具有较高亮度且区分率较高的颜色,比如紫外线激发下的深蓝色或者暗红色。
2、染料浓度:选择进口品牌或者大名鼎鼎的品牌,以确保染料浓度准确,不至于影响定量结果。
3、染料用量:按照各自的实验需求,选择不同的染料用量,最好是浓度低但是能够显色清晰的染料。
二、操作前准备工作在进行核酸染色实验之前,需要进行以下准备工作:1、准备好检测所需要的DNA或者RNA样本。
本实验建议用质粒DNA,其不需要如同限制酶切片段那样到次数轴上,只需要做多次步骤,即可做出好几个等级的对照片。
2、根据实验所需的染色剂量,准备好透明的PCR管和电泳用塑料凝胶。
3、检查好实验平台是否干净。
可以使用0.1%甲醛杀菌,并用去离子水冲洗干净。
三、实验步骤1、样品制备:将DNA或RNA样本加入到PCR管2μl离心管中,加入10μl TBE缓冲液,使用30mm针筒进行混合,至于混合比例是1:6.2、电泳载体准备:将凝胶放在盖板上,在电泳盒中加入TBE缓冲液进行电泳,30分钟后取出。
3、样品电泳:将样品加入到凝胶槽中,进行电泳,电压为180V,电流为60mA,电泳时间为30-40分钟。
4、染色:在按照染料的要求使用,通常是将染料放入PET环中,使用电子泳床对其进行冷泳处理,1-2h后可以进行成像。
5、成像:使用GelDoc等成像软件进行成像。
选择最佳光源,调整图像设置,进行成像。
四、注意事项1、注意实验室卫生,防止氧化还原物质泄漏导致伤害。
上海常用的核酸染料的使用方法

上海常用的核酸染料的使用方法
核酸染料在细胞学、免疫学、分子生物学研究以及临床检测等方面都有重要应
用价值。
上海常用的核酸染料有几种,它们在实验室研究样本的各种特性时扮演着重要的角色,如同悬挂灯笼般确定样本当前的活性和分子形态。
下面将介绍上海常用核酸染料在实验室使用时的几种方法。
首先,互补核酸染料可用于核酸的检测,因此很适合检测单链DNA或双链DNA
以及各类核酸杂质。
它可以实现荧光发射或发射的检测,简便的实验方法让许多研究人员受益。
其次,荧光增强剂将普通和低荧光强度红色染料的荧光强度提升10
倍以上,它的覆盖面比吸收染料覆盖的面更广,能检测更少量核酸,在实验室使用时操作起来具有便利性。
再者,序列确定染料用于核酸定位。
它可以识别序列突变,快速检测基因变体,被广泛应用于DNA序列确定,基因组研究、基因诊断,遗传检测等多种研究领域。
最后,荧光寡核苷酸染料可用于克隆验证,它可以测定用于PCR扩增的目的克隆的真实性,从而准确判断是哪个克隆是有进行修饰的。
上海常用的核酸染料的使用方法介绍完毕,总之,核酸染料使用实验室仪器检
测核酸的效果更佳,但更重要的是要根据样本的情况选择合适的染料进行检测,以获取更加准确的实验结果。
另外,掌握正确的染料使用方法也是制定检测流程中不可或缺的一部分,应根据实验规程进行操作,并定期进行染料检测,以确保实验结果准确可靠。
红色荧光核酸染料使用说明

红色荧光核酸染料使用说明货号:E1020规格:5ml(10mg/ml)保存:室温避光储存,有效期至少1年。
产品说明:红色荧光核酸染料是一种高度灵敏的荧光染色剂,常用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳后核酸染色。
该染料与DNA结合后在紫外光透射仪激发下放射出橙红色荧光,可用Polaroid 底片或带CCD成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
结合DNA染料的复合物荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的红色荧光核酸染料(0.5ug/ml)时,可以检测到少至10ng的DNA条带。
使用方法:1、胶染:将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)放入微波炉中融化,冷却至60℃左右(不烫手时)后加入5-10ul染料,轻轻摇匀后倒胶(避免产生气泡),待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫光灯下观察拍照(注:由于在该染料存在的情况下,线状DNA 的电泳迁移率约降低15%)。
2、泡染:琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有染料(0.5ug/ml)的电泳缓冲液或去离子水中,室温下染色15-45min(取决于凝胶厚度)。
脱色时用去离子水或者1mM的MgSO4溶液室温浸泡约10-30min可降低背景荧光(可选)。
注意事项:1,本品为强烈的诱变剂,使用时请注意安全。
2,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关试剂:T10505×TBE缓冲液T106050×TAE缓冲液D10106×DNA Lodding BuffeM1060D2000DNA LadderG8140GoldView I型核酸染色剂(10000×) G8142GoldView‖型核酸染色剂(5000×) SY1020SYBR Green I(10000×)SY1040SYBR Green‖(10000×)。
常见荧光染料及用途

常见荧光染料及用途《常见荧光染料及用途》荧光染料是一种能够吸收可见光或紫外光,并在吸收能量的激发下发射可见光的化学物质。
它们的应用非常广泛,涵盖了许多领域,例如生物医学、材料科学、环境监测等。
以下介绍几种常见的荧光染料及其主要用途。
1. 墨水蓝(BR):墨水蓝是一种具有强烈蓝色荧光的染料,常用于生物实验中的DNA染色。
它与DNA结合后能发出强烈的荧光信号,从而在实验中方便地观察和分析DNA的存在和定位。
2. 罗丹明B(RhB):罗丹明B是一种红色荧光染料,广泛用于组织切片和细胞染色。
它能够与细胞核和胞浆中的核酸结合,以显示细胞和组织的结构,帮助科研人员研究细胞分裂和组织结构变化。
3. 草酸罗丹明G(OG):草酸罗丹明G是一种绿色荧光染料,主要应用于蛋白质和核酸的定量分析。
在分光光度计中配合荧光检测器使用,可以精确测定溶液中蛋白质和核酸的浓度。
4. 罗丹明110(Rh110):罗丹明110是一种黄绿色荧光染料,常用于细胞活性检测。
通过与细胞内的酶或细胞膜结合,罗丹明110可以用来评估细胞的活力和存活情况,特别适用于细胞毒性测试和细胞增殖研究。
5. 荧光素(FITC):荧光素是一种与生物相容性极高的荧光染料,常用于免疫染色和分子生物学实验。
它能与抗体特异性结合,在免疫组化和流式细胞术中用于检测蛋白质的表达以及细胞表面标记。
以上只是常见的荧光染料中的几种,它们的应用还远不止于此。
随着科学技术的不断进步,新型的荧光染料不断问世,为各个领域的研究提供了更多更有力的工具。
通过荧光染料的运用,科学家们能够更好地理解和研究生物、物质和环境,进一步推动科学的发展。
埃希迪乌姆红荧光染料说明书

ETHIDIUM BROMIDEProduct Number E1510, E1385, E7637, and E8751Storage Temperature RTSynonyms: 3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridinium bromide; 2,7-Diamino-10-ethyl-9-phenylphenanthridinium bromide; Homidium Bromide; Dromilac; EtBr Product DescriptionAppearance: Red to purple powder Molecular formula: C 21H 20N 3Br Molecular weight: 394.3Melting point: 255-266°C with decomposition 1,2Spectral data:UV/Vis Absorbance:Maxima at 210 nm, E mM= 0.20-0.5; 285 nm,E mM = 5.0-10.0; 316 nm, E mM= 50.0; 343 nm,E mM = 40.0 (water)3Published absorption spectrum (methanol) with λmax at296 nm and 525 nm1λmax = 475 nm, E mM = 5.76 (0.66 M glycine buffer)4Solvent effects on absorbance:λmax = 480 nm (water); 515 (glycerol); 520 nm(methanol): 520 nm (acetone); 532 nm (ethanol); 535(DMSO) and 540 nm (pyridine).5The absorbance maximum relative to water is red-shifted to longerwavelengths upon binding to nucleic acids.6,7Fluorescence:Excitation / emission wavelengths reported for the EtBr-nucleic acid complex:Ex at 526 nm, Em at 605 nm (aqueous)8Ex at 360 nm, Em at 590 nm (in PBS)9Ex at 525 nm, Em at 600 nm (10 mM TBE, pH 8.0)10Ex (absorption) at 510 nm, Em at 590 nm.11Ex (absorption) at 482 nm (blue-green), Em at 616 nm(red-orange).12The fluorescence yield of EtBr increasesas solvent polarity decreases.13Ethidium bromide is a well-known and widely usedfluorescent dye in biotechnology research. Early usagewas as a veterinary trypanocide.14It is a mutagenic compound which intercalates double-stranded DNA andRNA.1,10The fluorescence of EtBr increases 21-fold upon binding to double-stranded RNA, 25-fold onbinding double-stranded DNA (although histones block binding of EtBr to DNA). Ethidium bromide has been used in a number of fluorimetric assays for nucleicacids.15,16,17It has been shown to bind to single-stranded DNA (although not as strongly)2and triple-stranded DNA.18Because of the binding to DNA, EtBris a powerful inhibitor of DNA polymerase.4E7637, Molecular Biology grade powder, is suitable for use in gel electrophoresis and DNA isolationprocedures. E-1510, Aqueous Solution (10 mg per ml),is suitable for use in gel electrophoresis and DNAisolation procedures. E1385, Molecular Biology grade Aqueous Solution (500 µg per ml), is suitable for use in gel electrophoresis.Related ProductsMethylene blue (M4159) was reported as an alternativestain.19Thiazole orange homodimer (monomer =Aldrich Product Number 39,006-2) was noted asnonmutagenic, but useful for detecting DNA in agarosegels.20For use in cell studies, dihydroethidium (Sigma Prod.No. D7008), also known as hydroethidine, is a possible alternative. It is the reduced form of the dye and is converted (dehydrogenated) inside the cell to theethidium cation, which then intercalates into DNA.21,22At present, the recommended ultimate disposal methodis by incineration as discussed in the MSDS.23Processing solutions through Rohm and HaasAmberlite XAD-16 resin was shown to be effective to the limit of detection, with none of the completelydecontaminated solution found to be mutagenic.24, 25Sigma offers XAD-16 as a bulk product, as well as several products that adsorb the dye for easierdisposal. See Rezorian A161 cartridges (5-7611 or 5-3URGXFW ,QIRUPDWLRQNH 3CH 2NNH 2Br7610) and the Extractor ™ for EtBr decontamination(Z36,156-9). A 5 ml Rezorian A161 cartridge can be used to treat more than 16 liters of solution (0.5 mg/liter of EtBr) before dye breakthrough. The luer lock cartridge can be used with 4 mm I.D. tubing, syringes or low-pressure chromatographic systems. The Extractor ™ for EtBr decontamination can process up to 10 liters of solution (0.5 mg/liter of EtBr). Other methods of treatment for disposal of aqueous EtBr solutions have been suggested.26,27,28 Sigma has not verified and does not endorse these procedures.Preparation InstructionsAt room temperature, EtBr dissolves in water at10 mg/ml to give a red solution.2 It should be soluble up to 20 mg/ml in water or up to 2 mg/ml in ethanol.1 It is soluble 1 part in 750 parts chloroform.3Stock solutions of EtBr in water or PBS are stable for at least two years at room temperature if protected from light.11Storage/StabilityThe solid powder has shown minimal change after two years stored at room temperature, protected from light. ProcedureUse in Electrophoresis Staining 61. The dye is usually incorporated into the gel and theelectrophoresis buffer at 0.5 µg/ml. Note:Electrophoresis mobility of linear double-strandedDNA is reduced by approximately 15% in thepresence of the dye.2. To stain after gel has been run, immerse gel inelectrophoresis buffer or water containing EtBr(0.5 µg/ml) for 30-45 minutes at room temperature.3. Destaining is optional. Detection of very smallamounts (<10 ng) of DNA is made easier if thebackground fluorescence caused by unbound EtBr is reduced by soaking the stained gel in water or1 mM MgSO4 for 20 minutes at room temperature. References1. Green, F.J., Sigma Aldrich Handbook of Stains,Dyes and Indicators, p. 318.2. Sigma quality control; Sigma molecular biologylaboratories.3. Merck Index, 12th ed., #4767 (1996).4. W.H. Elliott, Biochem. J., 86, 562-567 (1963).5. Olmsted, J., III. and Kerans, D.R., Biochem., 16,3647 (1977).6. Sambrook, J. et al., Molecular Cloning: ALaboratory Manual, 2nd ed., (Cold Spring HarborLaboratory, 1989), p 6.15, 6.44 etc.7. Le Pecq, J.-B., in Methods of Biochemical Analysis,20, 43-86.8. Bechtol, K.B. et al., American Biotechnology Lab,p. 8, December 1994.9. Anal. Biochem., 65, 225 (1975).10. 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Histochem.,66, 307-315 (1991).26. Lunn, G. and Sansone, E.B., Anal. Biochem., 162,453 (1987).27. Communications from M.A. Armour, University ofAlberta, Edmonton, Canada – prior to presentation at First Asian Symposium on Academic Activity for Water Treatment, Tokyo (1992).28. Zocher, R. et al., Biol. Chem. Hoppe Seyler, 369(10), 1191-1194 (1988).ckv 04/29/99Sigma brand products are sold through Sigma-Aldrich, Inc.Sigma-Aldrich, Inc. warrants that its products conform to the information contained in this and other Sigma-Aldrich publications. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply. Please see reverse side ofthe invoice or packing slip.。
GoodViewTM核酸染料使用说明

GoodViewTM核酸染料使用说明概述GoodViewTM是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoodViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。
在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。
因此用Goodview代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法 1. 将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)在微波炉中融化。
2. 加入5μl GoodView,轻轻摇匀,避免产生气泡。
3. 冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4. 电泳完毕在紫外灯下观察。
若使用数码相机照像记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可;若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
保存:室温保存2年注意事项 1. 胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2. 加入GoodView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显。
3. 通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoodView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4、未发现GoodView有致癌作用,但对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套。
GoodView和EB灵敏度检测对比 1. GoodViewTM核酸染料检测检测模板:5~70ng λDNA(将λDNA稀释成不同浓度进行检测)。
GoldViewTM核酸染料用量:100ml琼脂糖胶溶液(浓度1%)微波炉中融化后加入5μl GoodViewTM染料2. EB核酸染料的检测检测模板:5~70ng λDNA(将λDNA 稀释成不同浓度进行检测)。
gelred核酸染料原理

gelred核酸染料原理GelRed是一种广泛应用于核酸染色的染料,具有非常高的敏感性和选择性。
它以其独特的性质在核酸分离和分析领域发挥着重要作用。
本文将详细介绍GelRed核酸染料的原理和性能。
GelRed是一种光亮荧光染料,能够通过荧光显微镜观察到核酸的染色效果。
它在核酸凝胶电泳和核酸柱层析等方法中广泛应用。
GelRed的化学结构是由两个类似乙笼的分子基团组成。
这两个分子基团通过一个杂环连接在一起,形成一个芳香环结构。
在荧光激发下,GelRed会发出强烈的红色荧光信号,以此实现核酸的检测和定量分析。
GelRed核酸染料的基本原理如下:1.静电相互作用:GelRed是一种阳离子染料,它的阳离子部分与DNA或RNA等核酸分子中的负电荷基团发生静电相互作用。
这种相互作用可以使GelRed紧密结合在核酸分子表面,形成稳定的染色复合物。
2.内部排斥作用:GelRed分子中的芳香环结构会与核酸分子中的碱基间成π-π相互作用。
这种π-π相互作用可以增强GelRed与核酸分子之间的结合力,使其更容易与核酸分子结合。
同时,GelRed的分子结构还使其在胶体中形成聚集状态,进一步增强了与核酸分子的结合。
3.荧光激发和发射:GelRed能够吸收短波长的紫外光激发,从而发射长波长的红色荧光。
这种荧光信号可以被荧光显微镜或荧光成像系统捕捉和记录。
GelRed的发射峰位于约620nm 处,这个波长非常适合于红色荧光成像。
GelRed核酸染料的优势和应用主要有以下几个方面:1.敏感性:GelRed是一种极其敏感的核酸染料,它可以检测到非常低浓度的核酸。
与传统的核酸染料相比,GelRed的检测灵敏度提高了数十倍。
这使得在核酸分析和定量实验中能够使用更少的样品和试剂,降低了成本和浪费。
2.选择性:GelRed对核酸具有很高的选择性,它能够与DNA 和RNA等核酸分子结合。
GelRed与DNA和RNA的结合有明显不同的荧光特性,可以通过荧光强度和荧光发射波长等特征来区分它们。
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红色荧光核酸染料使用说明
货号:E1020
规格:5ml(10mg/ml)
保存:室温避光储存,有效期至少1年。
产品说明:
红色荧光核酸染料是一种高度灵敏的荧光染色剂,常用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳后核酸染色。
该染料与DNA结合后在紫外光透射仪激发下放射出橙红色荧光,可用Polaroid 底片或带CCD成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
结合DNA染料的复合物荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的红色荧光核酸染料(0.5ug/ml)时,可以检测到少至10ng的DNA条带。
使用方法:
1、胶染:将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)放入微波炉中融化,冷却至60℃左右(不烫手时)后加入5-10ul染料,轻轻摇匀后倒胶(避免产生气泡),待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫光灯下观察拍照(注:由于在该染料存在的情况下,线状DNA 的电泳迁移率约降低15%)。
2、泡染:琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有染料(0.5ug/ml)的电泳缓冲液或去离子水中,室温下染色15-45min(取决于凝胶厚度)。
脱色时用去离子水或者1mM的MgSO4溶液室温浸泡约10-30min可降低背景荧光(可选)。
注意事项:
1,本品为强烈的诱变剂,使用时请注意安全。
2,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关试剂:
T10505×TBE缓冲液
T106050×TAE缓冲液
D10106×DNA Lodding Buffe
M1060D2000DNA Ladder
G8140GoldView I型核酸染色剂(10000×) G8142GoldView‖型核酸染色剂(5000×) SY1020SYBR Green I(10000×)
SY1040SYBR Green‖(10000×)。