GBT22286-2008动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法
瘦肉精相关检测标准汇总
瘦肉精相关检测标准汇总央视曝光双汇济源分公司收购含“瘦肉精”猪肉，瘦肉精再次引起人们的关注，因此汇总整理出瘦肉精相关检测标准，供大家参考。
GB/T5009.192-2003动物性食品中克伦特罗残留量的测定本标准规定了动物性食品中克伦特罗的测定方法。
本标准适用于新鲜或冷冻的畜、禽肉与内脏及其制品中克伦特罗残留的测定。
本标准也适用于生物材料(人或动物血液、尿液)中克伦特罗的测定。
本方法检出限：第一法气相色谱—质谱法为0.5μg/kg;第二法高效液相色谱法为0.5μg/kg；第三法酶联免疫法为0.5μg/kg。
线性范围：第一法气相色谱—质谱法为0.025ng～2.5ng；第二法高效液相色谱法为0.5ng～4ng；第三法酶联免疫法为0．004ng～0.054ng。
GB/T20189-2006饲料中莱克多巴胺的测定高效液相色谱法本标准规定了检测动物饲料中莱克多巴胺含量的高效液相色谱（HPLC）方法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中莱克多巴胺含量的测定。
GB/T21036-2007饲料中盐酸多巴胺的测定高效液相色谱法本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中盐酸多巴胺含量的测定。
GB/T22147-2008饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定液相色谱质谱联用法本标准规定了同步测定饲料中β-激动剂沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的液相色谱质谱联用法。
GB/T21313-2007动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法液相色谱-质谱/质谱法本标准规定了β-受体激动剂类兽药残留检测的制样方法和高效液相色谱/质谱确证方法。
本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾等动物源性食品以猪屎中克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、特布它林、非诺特罗、福莫特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁等8种β-受体激动剂类残留量的高效液相色谱-质谱/质谱测定。
GB/T22286-2008动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法本标准规定了动物源性食品中沙丁胺醇(salbutamol)、特布他林（terbutaline）、塞曼特罗（cimat-erol）、塞布特罗（cimbuterol）、莱克多巴胺（ractompamine）、克仑特罗（clenbuterol）、溴布特罗（brombu-terol）、苯氧丙酚胺（isoxsuprine）、马布特罗（mabuterol）、马贲特罗（mapenterol）、溴代克仑特罗（brom-chlorbuterol）残留量的液相色谱-串联质谱的测定方法。
食品中瘦肉精检测存在的问题及解决方法分析
2021年8月Aug.2021第45卷第4期Vol.45,No.4热带农业工程TROPICAL AGRICULTURAL ENCINEERING食品中瘦肉精检测存在的问题及解决方法分析①方荣谦②（厦门市产品质量监督检验院福建厦门361000）摘要研究动物源性食品中瘦肉精的检测标准GB/T 22286《动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法》在检测过程中遇到的常见问题，并分析这些问题，提出解决方法。
简化前处理的沉淀蛋白步骤，大幅减少了前处理时间；优化自动固相萃取设置参数，调整仪器流速控制数值，增大洗脱溶剂体积，提高方法回收率；改进内标添加方式，提升检测结果稳定性。
关键词瘦肉精；固相萃取；内标中图分类号O657Analysis of Problems and Suggestions in the Detection of β-agonists Residue in FoodFANG Rongqian(Xiamen Products Quality Supervision &Inspection Institute,Xiamen,Fujian 361000)Abstract Analysis of solutions of the common problems encountered in the detection of β-agonists residue in food when using GB/T 22286«Determination of β-agonists residues in foodstuff of animal origin-Liquid chromatography with tandem-mass spectrometric method»,including simplifying the process of protein pre ‐cipitation,optimizing the parameters of automatic solid phase extraction(the flow rate was adjusted,and the volume of eluting solvent was increased ),and improving the method of adding internal standard,to make the pretreatment time greatly reduced,the method recovery steadily improved and finally the repeatability and accuracy of determination results guaranteed.Keywords β-agonists residue ;solid phase extraction ;internal standard1GB/T 22286标准检测瘦肉精存在的问题GB/T 22286标准作为重要的瘦肉精检测手段，方法较准确，检出限低，常用于畜禽肉及副产品中的莱克多巴胺、克伦特罗等β-受体激动剂（即瘦肉精）残留量的检测。
GBT22286-2动物源性食品中多种-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法
样品复测时应先将样品稀释一定倍数后过固相萃取柱，保证最终浓度在曲 线范围之内，且最终对应内标浓度应与曲线保持一致 ✓ 4、检测结果无需校正回收率
Q&A
目前，针对β-兴奋剂有效检测方法主要集中在胶体金快速检测卡法、酶联免 疫法（ELISA）、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱串联质谱法(LCMS/MS)、气相色谱-质谱法(GC-MS)
二、GB/T 22286-2008适用范围及原理
✓ 范围：本标准规定了动物源性食品中（适用于猪肝和猪肉）克伦特罗、 沙丁胺醇、特布他林、莱克多巴胺、塞曼特罗、塞布特罗、溴布特罗、 苯氧丙酚胺、马布特罗、溴代克伦特罗残留量的检测方法，检出限均为 0.5μg/kg。
2.“瘦肉精”体内代谢
盐酸克伦特罗在动物体内主要发生氧化作用，也发生硫酸 化反应和葡萄糖醛酸络合反应(存在形式为结合态和游离 态)。其主要代谢场所是肝脏，最终大部分随尿液排出， 实验证明，盐酸克伦特罗在动物体内代谢周期长，易富集 和残留，耐热性较高，在100℃的沸水中很稳定。
3.检测方法及相应标准
Β-受体激动剂是一类化学合成的苯乙醇胺类物质，早期主要 用于防治人、动物支气管哮喘和支气管痉挛，后来发现在饲料 中添加该类药物后具有营养再分配作用，可明显提高动物的瘦 肉率（提高10%），因此曾被作为促生长添加剂被广泛关注， 但是人们食用了该类药物残留的畜禽产品后会出现面色潮红、 头痛、头晕、胸闷、心悸、四肢麻木等不良反应，严重的可危 及生命。因此欧盟、美国等都先后立法禁止在养殖业中使用该 类药物，我国政府也明令禁止其使用。
克伦特罗
沙丁胺醇
特布他林 莱克多巴胺
贵阳市屠宰场生猪肉中违禁添加剂调查
贵阳市屠宰场生猪肉中违禁添加剂调查195贵阳市屠宰场生猪肉中违禁添加剂调查秦雯文明*(1.贵阳护理职业学院贵州贵阳550081; 2.贵州大学动物疫病研究所贵州贵阳550025)摘要：采集贵阳市生猪屠宰场猪肉样本及其对应的内脏样本，采用液相色谱串联质谱法测定违禁添加剂含量，结果显示：在540份屠宰场生猪肉品样本中，有33份的盐酸克伦特罗检出值为0.01pg/kg-0.07p g/k g，但小于国家标准规定的检出限值（0.5^g/kg)，说明贵阳市屠宰场屠宰的生猪肉品无盐酸克伦特罗残留。
关键词：猪肉盐酸克伦特罗中图分类号：S851文献标识码：A文章编号：1009-5349 (2017)17-0195-01自改革开放以来，贵阳市畜牧养殖业得到了持续、稳 定、健康的发展，人均占有量未达到世界平均水平。
人们 越来越关心动物产品的内在安全品质。
因此，提高动物产 品的品种质量与卫生安全，已成为当前贵阳市畜牧养殖产 业发展的重要关键。
本研究选择贵阳市具有代表性的生猪 屠宰场，随机采集屠宰场屠宰的生猪肉样和内脏器官样本，对猪肉和内脏器官中违禁添加剂情况进行检测和分析，为 贵阳市的违禁添加剂监控工作提供一定的科学根据。
一、材料(一）样本采集选择贵阳市具有代表性的生猪屠宰场，随机抽样采集 各屠宰场屠宰的生猪肉样本和内脏器官样本。
(2)实验仪器高效液相色谱仪（配荧光检测器和配紫外检测器）(Aglient1100)、数控超声波仪（K Q-500D E型）、电热恒温 水浴锅（Y L E-3000型）、离心机、分析天平（精确度0.00001g)、固相萃取装置、C18固相萃取柱（100m g/m l，含碳量>16%)、旋转蒸发仪、振荡器、匀浆机、沃动混合 器、微孔滤膜0.45p m。
二、方法按照中华人民共和国国家标准G B/T22286-2008 (动 物源性食品中多种P-受体激动剂残留量的测定：液相色谱 串联质谱法）进行违禁添加剂含量的测定。
超高效液相色谱串联质谱法检测动物源性食品中β-受体激动剂类药物残留
超高效液相色谱串联质谱法检测动物源性食品中β-受体激动剂类药物残留刘新辉1史永晖2丁文慧3郑洪妍1于振中1姜万丽1于金萍4曹亚栋1张媛媛1(1.山东拜尔检测股份有限公司,山东潍坊261000;2.济南市农业农村局,济南250099;3.潍坊职业学院,山东潍坊261041;4.山东标准检测技术有限公司,济南250000)摘要:建立了一种快速酶解提取与QuEChERS 净化相结合,经超高效液相色谱－串联质谱检测动物源性食品中β－受体激动剂类药物残留的方法。
试样在pH 为5.2的乙酸－乙酸钠缓冲体系及37℃水浴条件下,经β－葡萄糖醛酸酶水解提取2h ,经1％氨水乙腈萃取及无水硫酸镁脱水后,将上清液先后转移至QuEChERS 净化管及反萃管中净化并盐析除水。
以甲醇－5mmol/L 乙酸铵水溶液(含0.1％甲酸)作为流动相梯度洗脱,经Poroshell 120EC －C 18色谱柱分离待测物,采用鞘流电喷雾离子化,正离子分段扫描和多反应监测(MRM )模式检测,内标法定量。
17种β－受体激动剂在0.2～20ng/mL 范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,方法检出限为0.2μg/kg ,方法定量限为0.5μg/kg ,平均回收率为80.2％～108.5％,相对标准偏差为2.9％～12.4％(n ＝6)。
实验结果表明,该方法操作简便、效率高、成本低、安全环保、定量准确、重现性好,可满足多种类型的动物源性食品中β－受体激动剂的残留检测要求。
关键词:β－受体激动剂;动物源性食品;液相色谱串联质谱;QuEChERS ;β－葡萄糖醛酸酶基金项目:山东省重点研发计划项目(2018YYSP019);山东省重大科技创新工程项目(2019JZZY011014)。
作者简介:刘新辉(1990－),工程师,从事农产品质量安全检测研究。
E －mail :***************。
β－受体激动剂在生物体内具有“再分配效应”,促使动物摄入的能量不再形成脂肪贮存于体内,而是立即为蛋白质的合成所利用,提高了胴体的瘦肉率和饲料转化率,并可减少蛋白的分解,常见于家畜养殖中的违法添加。
瘦肉精相关检测标准汇总
瘦肉精相关检测标准汇总央视曝光双汇济源分公司收购含“瘦肉精”猪肉，瘦肉精再次引起人们的关注，因此汇总整理出瘦肉精相关检测标准，供大家参考。
GB/T5009.192-2003动物性食品中克伦特罗残留量的测定本标准规定了动物性食品中克伦特罗的测定方法。
本标准适用于新鲜或冷冻的畜、禽肉与内脏及其制品中克伦特罗残留的测定。
本标准也适用于生物材料(人或动物血液、尿液)中克伦特罗的测定。
本方法检出限：第一法气相色谱—质谱法为0.5μg/kg;第二法高效液相色谱法为0.5μg/kg；第三法酶联免疫法为0.5μg/kg。
线性范围：第一法气相色谱—质谱法为0.025ng～2.5ng；第二法高效液相色谱法为0.5ng～4ng；第三法酶联免疫法为0．004ng～0.054ng。
GB/T20189-2006饲料中莱克多巴胺的测定高效液相色谱法本标准规定了检测动物饲料中莱克多巴胺含量的高效液相色谱（HPLC）方法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中莱克多巴胺含量的测定。
GB/T21036-2007饲料中盐酸多巴胺的测定高效液相色谱法本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中盐酸多巴胺含量的测定。
GB/T22147-2008饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定液相色谱质谱联用法本标准规定了同步测定饲料中β-激动剂沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的液相色谱质谱联用法。
GB/T21313-2007动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法液相色谱-质谱/质谱法本标准规定了β-受体激动剂类兽药残留检测的制样方法和高效液相色谱/质谱确证方法。
本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾等动物源性食品以猪屎中克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、特布它林、非诺特罗、福莫特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁等8种β-受体激动剂类残留量的高效液相色谱-质谱/质谱测定。
GB/T22286-2008动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法本标准规定了动物源性食品中沙丁胺醇(salbutamol)、特布他林（terbutaline）、塞曼特罗（cimat-erol）、塞布特罗（cimbuterol）、莱克多巴胺（ractompamine）、克仑特罗（clenbuterol）、溴布特罗（brombu-terol）、苯氧丙酚胺（isoxsuprine）、马布特罗（mabuterol）、马贲特罗（mapenterol）、溴代克仑特罗（brom- chlorbuterol）残留量的液相色谱-串联质谱的测定方法。
盐酸克伦特罗胶体金快速检测试剂盒质量研究
盐酸克伦特罗胶体金快速检测试剂盒质量研究作者：赵才敏，李涛，蒋丽，杨昌彪，李莎，汪勋，曹虎灵来源：《现代食品》 2018年第23期摘要：选取 3 种市售同批次盐酸克伦特罗胶体金免疫层析快速检测试剂盒（D、M、A），引入金标读数仪，对其最小检出浓度、灵敏度、特异性、检出限、阳性检出率、假阳性率和假阴性率等方面进行研究，比较3 种市售盐酸克伦特罗胶体金免疫层析快速检测试剂盒的质量。
结果表明，D 试剂盒中的检测卡在检测盐酸克伦特罗标准溶液时产品性能最优，M 试剂盒的样品前处理方法和检测卡在猪肉基质中的综合使用效果最优。
阴性猪肉加标样本的快速检测结果显示，试剂盒检测结果与金标读数仪器检测结果100% 符合，3 种产品的最小检出浓度均小于产品说明书标注的检出限，且灵敏度100%，D、M 特异性100%，D、M 假阳性率0%，M 阳性检出率100%，D、A 阳性检出率均大于90%。
综合分析，3 种试剂盒的准确性、特异性等均较好，阳性检出率、假阴性率均在可接受范围内，其中，M 试剂盒产品性能最优，可用于日常生猪屠宰点和农贸市场中猪肉盐酸克伦特罗的初筛。
关键词：盐酸克伦特罗；胶体金快速检测试剂盒；质量研究盐酸克伦特罗（Clenbuterol，CLB），俗名瘦肉精，属于β- 肾上腺受体兴奋剂[1]，因其能加强脂肪分解促进蛋白质合成加快畜禽增长速度[2]，曾被用做养殖促进剂[3]，对人体有蓄积性毒性，临床中毒表现为心动过速、低血钾、肌肉震颤等，我国已于1997 年严令禁止使用[4]。
本研究选取 3 种市售同批次盐酸克伦特罗胶体金免疫层析快速检测试剂盒（D、M、A），引入金标读数仪作为仪器确证[5-6]，对其最小检出浓度、特异性、假阳性率、假阴性率等方面进行研究[7-9]，通过分析3 种市售同批次盐酸克伦特罗胶体金免疫层析快速检测产品（试剂盒）对盐酸克伦特罗标准溶液和阴性猪肉加标样本的快速检测结果，比较3 种市售盐酸克伦特罗胶体金免疫层析快速检测试剂盒的质量，筛选出质量优异的盐酸克伦特罗胶体金免疫层析快速检测试剂盒，用于畜禽肉屠宰点和农贸市场猪肉中的盐酸克伦特罗检测。
新版动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定作业指导书
作业指导书O P E R A T I N G I N S T R U C T I O N S动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法编号：XZJY083-00-2019版本：第一版第0次修改编制：审核：批准：实施日期：一、编制目的为规范动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的检验方法，编制本指导书。
二、适用范围本指导书适用于动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定。
三、编制依据GB/T 22286-2008《动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法》四、实验原理试样中的残留物经酶解，用高氯酸调节pH值，沉淀蛋白后离心，上清液用异丙醇-乙酸乙酯提取，再用阳离子交换柱净化，液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量。
五、试剂和材料除非另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,试验用水应符合GB/T6682规定的一级水的标准。
5.1 试剂5.1.1 甲醇：液相色谱纯。
5.1.2 乙酸钠( CH3COONa.3H2O )。
5.1.3 高氯酸：70％~72％。
5.1.4 氢氧化钠。
5.1.5 饱和氯化钠溶液。
5.1.6 异丙醇-乙酸乙酯：（6+4，体积比）。
5.1.7 甲酸水溶液：2％。
5.1.8 氨水甲醇溶液：5％。
5.1.9 0.1％甲酸水溶液-甲醇溶液：（95+5，体积比）。
5.1.10 β-葡萄糖醛甙酶/芳基硫酸酯酶（β-Glucuronidase/aryl sulfatase）:10000units/mg。
5.1.11 沙丁胺醇（CAS:18559-94-9）、特布他林半硫酸盐（CAS:23031-32-5）、塞曼特罗（CAS:54239-37-1）、赛布特罗（CAS:54239-37-1）、莱克多巴胺盐酸盐（CAS：90274-24-1）、克仑特罗盐酸盐（CAS:37148-27-9）、溴布特罗（CAS:41937-02-4）、苯氧苯酚胺盐酸盐（CAS：579-56-6）、马布特罗（CAS：54240-36-7）、马贲特罗（CAS:95656-68-1）、溴代克仑特罗（CAS:37153-52-9）标准品：纯度大于98％。
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样品复测时应先将样品稀释一定倍数后过固相萃取柱，保证最终浓度在曲 线范围之内，且最终对应内标浓度应与曲线保持一致 ✓ 4、检测结果无需校正回收率
Q&A
克伦特罗
沙丁胺醇
-NH- + H20
特布他林 莱克多巴胺
赛曼特罗
+
-
-NH2- + OH
水解作用
三、检测流程
✓ 检测流程： 酶解
提取
1.酶的最适pH 2.在酸性条件下溶于水， 易提取
水解作用 -NH- + H20
+
-
-NH2- + OH
净化
四、液相色谱-串联质谱条件
五、注意事项
✓ 1、每批检测样做样顺序为试剂空白、样品空白、空白样品加标曲线、样品。 ✓ 2、加标回收：取0.25 mL 10.0 ng/mL的四种兴奋剂混标到5g样品中，相当于
主要内容
背景介绍（特性及药理作用、危害、检测方法以及相应标准） GB/T22286-2008 检测原理及适用范围 检测流程（酶解、提取、净化） 仪器条件 注意事项
一、背景介绍
1.“瘦肉精”的危害
Β-受体激动剂是一类化学合成的苯乙醇胺类物质，早期主要 用于防治人、动物支气管哮喘和支气管痉挛，后来发现在饲料 中添加该类药物后具有营养再分配作用，可明显提高动物的瘦 肉率（提高10%），因此曾被作为促生长添加剂被广泛关注， 但是人们食用了该类药物残留的畜禽产品后会出现面色潮红、 头痛、头晕、胸闷、心悸、四肢麻木等不良反应，严重的可危 及生命。因此欧盟、美国等都先后立法禁止在养殖业中使用该 类药物，我国政府也明令禁止其使用。
目前，针对β-兴奋剂有效检测方法主要集中在胶体金快速检测卡法、酶联免 疫法（ELISA）、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱串联质谱法(LCMS/MS)、气相色谱-质谱法(GC-MS)
二、GB/T 22286-2008适用范围及原理
✓ 范围：本标准规定了动物源性食品中（适用于猪肝和猪肉）克伦特罗、 沙丁胺醇、特布他林、莱克多巴胺、塞曼特罗、塞布特罗、溴布特罗、 苯氧丙酚胺、马布特罗、溴代克伦特罗残留量的检测方法，检出限均为 0.5μg/kg。
✓ 实验室还针对鳗鱼及烤鳗等动物源性食品进行了方法验证
检测原理
✓ 原理：试样中的残留物经酶提取，再用阳离子交换柱净化，液相色谱串 联质谱法测定，内标法定量（沙丁胺醇-D3作为沙丁胺醇、特布他林和 莱克多巴胺的内标物，克伦特罗-D9作为其余β-受体激动剂的内标物质）
2.“瘦肉精”体内代谢
盐酸克伦特罗在动物体内主要发生氧化作用，也发生硫酸 化反应和葡萄糖醛酸络合反应(存在形式为结合态和游离 态)。其主要代谢场所是肝脏，最终大部分随尿液排出， 实验证明，盐酸克伦特罗在动物体内代谢周期长，易富集 和残留，耐热性较高，在100℃的沸水中很稳定。
3.检测方法及相应标准