实验2-组织
6 植物组织培养实验二PPT课件
谢谢你的到来
学习并没有结束，希望大家继续努力
Learning Is Not Over. I Hope You Will Continue To Work Hard
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
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2、无菌操作要注意：每次操作前， 将双手用酒精棉球擦拭消毒；镊 子、解剖剪刀等金属工具用火焰 烧过灭菌，冷却后方可使用；尽 量减少无菌三角瓶或培养皿在空 气中的暴露时间；所有无菌操作 尽量快速完成，并要求在酒精灯 附近进行。
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3、请先在自然条件下练习外植体解剖， 分割成0.5cm2左右的小块（段），经操 作熟练，检查无误后，再进行无菌解 剖分割及接种，以减少植物材料染菌 或失水死亡的机率。
欢迎同学们进入奇幻的植物组织培养实验世界
1
植物组织培养实验Ⅱ——— 外植体取材﹑表面消毒与接种
实验目的 实验原理、基本知识 实验用品、材料 实验要求 实验内容 、方法 实验报告——作业 下一次实验预告
2
一、实验目的
1、掌握无菌操作技术，加深对无菌操作的了
解；
2、掌握常规的植物细胞组织培养技术，达到 能独立操作的能力
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7、打开三角瓶——铝箔纸的拿法
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8、瓶口在火焰上烧过
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9、铝箔纸的放法
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10、镊出黄瓜苗
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11、镊出黄瓜苗
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12、放入培养皿中
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13 、
黄 瓜
幼 苗 形 态
生 长 点
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——
14、剪取茎段
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15、剪好的外植体
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16、黄瓜切块的接种
实验1-上皮组织
胞组成，细胞高
度和宽度一致，
界限清楚，胞核
圆，位于中央，
1 2
染成紫蓝色，细
胞质嗜酸性。
1.立方细胞 2.细胞核
管壁由一 层大致呈 立方状细 胞构成。
细胞界限 较清楚， 胞质染色 深浅不一。
细胞核圆， 位于细胞 中央。
图5 单层立方上皮（甲状腺）
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四、单层柱状上皮： 本片为动物胆囊壁垂直切片。 肉眼观：标本下方不整齐的一面为胆囊内
平的一面为膀胱的内外表。
低倍镜：
膀胱壁内外
表覆有变移上皮，
1
细胞核有多层
〔5--6层〕，可
见表层细胞较大，
基底部较平坦。
1.变移上皮
高倍镜：
可见表层 细胞大，呈立 方形或倒梨形， 中间层细胞为 多边形，基底 层细胞呈低柱 状。想一想本 片中变移上皮 处于什么机能 状态。
1.上皮
2.结缔组织
1 2
细胞核也相应变扁。
1.扁平细胞 2.多边形细胞
3
2
3.基内幕胞
图12 未角化的复层扁平上皮（食管）
上皮为未角 化的复层扁 平上皮。固 有层为细密 的结缔组织 ，它有较高 的乳头突入 上皮的基底 部。
图 13 角 化 的 复 层 扁 平 上 皮 （ 表 皮 ）
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七、变移上皮 本片为动物膀胱壁切片。 肉眼观：标本呈块状，其下方染成蓝色、凸凹不
实验一： 上皮组织、 结缔组织、 观察并绘图：单层柱状上皮〔HE小肠〕 观察：
单层扁平上皮 假复层纤毛柱状上皮
复层扁平上皮 骨骼肌
骨磨片 血涂片 示教： 疏松结缔组织
一、单层扁平上皮〔外 表观〕
本片为肠系膜铺片， 硝酸银染色。
低倍镜：选择标本最薄 〔染成淡黄色〕处观察。
实验二 动物、植物基本组织观察
实验二动物、植物基本组织观察一、实验目的与要求1、掌握植物体各种组织的类型及其特征。
2、了解各种组织在植物体内的分布。
3、掌握动物的4类基本组织结构特点及其结构与机能的密切关系。
二、实验原理在植物个体发育中，由具有相同来源的细胞分裂、生长与分化所形成的细胞群叫组织。
植物组织分为两大类：分生组织和成熟组织。
成熟组织按其功能可分为基本组织、保护组织、输导组织、机械组织和分泌结构等。
成熟组织根据其性质又可分为简单组织和复合组织，简单组织是由一种类型的细胞所构成的，如：基本组织、保护组织等；复合组织是由数种不同类型、但具有共同起源的细胞结合在一起所构成的，如：输导组织、次生保护组织等。
动物组织同形态相似、机能机同的细胞及细胞间质组成。
根据其起源、形态结构和机能上的共同特性可将动物组织分为上皮组织、肌肉组织、结缔组织和神经组织4大类。
4类组织按照一定的空间位置和机能关系有机地联合在一起，从而构成动物的器官。
因此，应该用整体的、动态的观点来认识组织的形态结构特点，同时要充分理解有机体与机能相适应的一般规律。
四、实验步骤植物组织部分（一）分生组织１．顶端分生组织观察洋葱根尖纵切面可见如下特征。
２．侧生分生组织常位于根和茎的外周部分，靠近器官的边缘。
它包括形成层和木栓形成层。
２．１形成层观察椴树属茎的横切面。
２．２木栓形成层结合椴树属茎横切面中周皮的观察，找出木栓形成层（图4-1）。
对木栓形成层和维管形成层进行比较观察。
３．居间分生组织观察玉米节间基部纵切面。
（二）保护组织１．表皮观察女贞叶片横切面，最外一层细胞、夹竹桃叶片的横切面、龟背竹根的横切面，注意表皮的形态与女贞叶表皮有何不同，如何解释复表皮的定义？试分析复表皮所具有的生态意义。
撕取一小片蚕豆叶下表皮，制成临时装片，观察表皮细胞的表面观。
气孔器。
气孔是叶片和外界环境之间进行气体交换和水分蒸腾的孔道。
许多植物的保卫细胞周围常具有不同于表皮细胞的副卫细胞，由于保卫细胞和副卫细胞的不同排列方式导致气孔器类型的不同。
实验二、鲜牛乳相对密度的测定
圆筒高度应大于乳稠计的长度，其直径大小应使在沉入乳稠计时使乳稠计 周边和圆筒内壁的距离不小于5mm。
结合实验想一想，列举仪器全面吗？
（二）实验材料
市售散装鲜xx,共计3500mL。
四、操作方法
1、密度计和量筒的洗涤和干燥洗净密度计和量筒，晾干备用。
2、 采样与处理将盛装容器中的牛乳混匀，将牛乳样品升温至40C，混合均 匀后，降温至10C〜25C。
密度（20C/4°C）>
1.0280。
一、目的要求
掌握使用乳稠计测定鲜乳的相对密度的程序和方法。
二、原理
利用乳稠计在乳中取得浮力与重力相平衡的原理测定乳的密度。
三、实验组织每4人一组，共1 2组，每组需仪器及材料。
（一）实验仪器
1、温度计：0C〜100C；
2、牛奶密度计（乳稠计）：20C/4C
3、量筒：
乳的密度是指乳在20C时的质量与同体积水在4C时的质量之比。
乳的相对密度是指乳在15C时的质量与同体积水在15C时的质量之比
正常XX的相对密度在
1.028〜
1.032，牛乳的相对密度与其脂肪含量、总乳固体含量有关，脱脂乳相对密 度升高，掺水乳相对密度降低。GB6914-1986《生鲜牛乳收购标准》规定：
1320
计算举例：
试样温度为18C，使用20C/4C乳稠计，读数28°得相对密度为
1.028;换算成20C时相对密度，查表（18C,28读数）应为
27.5 ,°0C时的相对密度为
1.0275。
五、结果的表示
所用的乳则 须对温度的差异加以校正。
温度比20C每高出1C时，要在得出的乳稠计度数上加
乳的相对密度是指乳在15c时的质量与同体积水在15c时的质量之比正常xx的相对密度在10281032牛乳的相对密度与其脂肪含量总乳固体含量有关脱脂乳相对密度升高掺水乳相对密度降低
实验二 外植体的灭菌与接种
/v_show/id_XMTE2NzgwNjg=.htm l
超净工作台的使用
接种前，用75％酒精棉球或用1%新洁尔灭溶
液擦拭超净工作台台面
将培养基及接种用具放入超净工作台台面 打开超净工作台紫外灯，照射约20～30 关闭紫外灯，打开送风开关 通风10
１０％ＮaClO 浸 泡15-20min 无菌水冲洗4-5次
分割成边长为 0.8~1cm的正方形 培养
清理超净工作台
贴标签
接种注意事项
接种前75%酒精或0.1%新洁尔灭擦手 进入接种室:穿已灭菌工作服, 换拖鞋 接种时尽量不要说话(防交叉污染)
不要在接种室来回走动(防超净工作台气流波动) /v_playlist/f1461876o1p5.html
标签格式(例)
材料名称:烟草(叶) 培养基名称:MS+NAA2mg/L+6-BA1mg/L 接种日期:2010.4.26 姓名:xxx
五、观察记录
观察污染情况
细菌性污染:菌斑呈粘液状,接种后1-2天出现 真菌性污染:出现不同颜色(霉菌),接种后3-10天出现 材料发黄,组织变软,可能是因消毒时间过长,组织破坏死亡 污染率(%)=污染的材料数/接种材料总数×100
min
min后,开日光灯即可进 1、拿镊子在顶部1/3处；
2、接种工具要勤在火焰上烧；
3、接种工具在消毒冷却后才能使用； 4、接种工具不能直接放在超净工作台上，应
倒立放在工具架上； 5、接种工具若不小心碰到带菌的物品，必须 重新消毒后才能使用。 6、不要用手直接接触无菌的物品。
观察愈伤组织情况
愈伤组织出现时间 愈伤组织形态特征 颜色 质地 诱导率(%)=形成愈伤组织的材料数/接种总材料数×100
《织物结构与设计》实验指导书2
《织物结构与设计》实验指导书上海工程技术大学服装学院纺织工程系2012年9月织物结构与设计实验指导书前言织物组织是纺织品赖于存在的重要因素，它是形成织物千变万化的内在依据，解析它的组织结构，探其变化原因，掌握设计技能成了织物设计的重要手段。
材料、工具、技术、知识、经验是织物设计的五大要素，也是织物设计构思敏锐的美的感情表现的基础，但是这些知识与技能如果缺乏实践的体验，通常难于变成有机的学问。
加强实践性环节不仅能使它们超于有机的深化，同时也能使设计思考力富于弹性，以适应现代织物设计的需要，并有所建树。
实验一了解自动剑杆织样机的工作原理一、实验目的1、了解自动织样机的各主要机件的作用与相互的配合；2、了解穿综、穿筘、投纬、绘制纹板图等准备工作；3、了解在织样机上的织造方法；4、进一步理解上机图中各图的作用。
二、实验设备及功能（一）SUⅢ型全自动剑杆织样机SUⅢ型全自动剑杆织样机从开口、引纬、选色、打纬、送经、卷取等等动作皆可为全自动操作，所以打样品质控制非常精密。
织样机的运转速度可依需求而作适当地调整，最快可达到40rpm，与传统人工打样或半自动织样机的速度比，可节省非常多的时间。
采用该种自动小样机的目的在于，严格控制织物的紧密度，随时掌控布面质量，使织物尽量符合实验要求，以便实验顺利进行，数据更加准确。
SUⅢ型全自动剑杆织样机的运作过程中，除了经纱卷取是由马达带动外，其余动作皆由汽缸驱动。
因此，还配备一个4.0~7.5bar的空气压缩机。
钢筘的宽度为12英寸。
SUⅢ型全自动剑杆织样机共有二十片综框，其中前两片由系统控制，作为绞纱与废边之用。
而第三片综框才是纹板图上的第一片，其余依次类推，所以纹板图设计最多可达十八片综框。
每片综框最多可安装280~300根综丝。
（二）设备具有的功能1、可输入相应的数字来修改机上纬密。
2、可以找寻断纬。
3、在显示区，显示了设计文件名、总梭数、当前梭数、纬密、开口情况（哪些综框提起）、选色情况和当前织机的运转情况。
实验2-1 动物肝脏DNA提取..
设法除去RNA的污染； 防止DNA酶的降解作用；
要提取动物组织DNA，一般选择 细胞膜较脆弱，容易破碎的动物脏
器，如胸腺、肝脏、脾脏、胰脏等。
细胞破碎方法—机械物理法：
研磨：将剪碎的动物组织置于研钵或匀浆器中，加入 少量石英砂研磨或匀浆，破碎细胞。这种方法温和， 适合实验室使用。 组织捣碎器：较剧烈的破碎细胞的方法，为了防止发 热和升温过高，通常是转10秒—20秒，停10秒—20秒，
（4）既可用于DNA也可用于RNA的检测。
（5）EB可加到样品中，也可加到凝胶中，可随时用紫外 灯检测电泳的进程和效果。 （6）EB-DNA复合物中的EB发出的荧光比游离的EB强10倍， 因此不需洗净凝胶中游离的EB也可检测出DNA的条带。
3、缺点：
溴化乙啶是一种强的致突变剂，在操作和配制试剂 时应戴手套。含溴化乙啶的溶液不能直接倒入下水道， 应进行处理。 （1）每100ml溶液中加入100mg粉状活性炭； （2）室温下放置1小时，不时的摇动； （3）用新华一号滤纸过滤，弃滤液； （4）用塑料袋封装滤纸和活性炭，作为有害废物处理。
（7）电泳缓冲液：Tris-硼酸－EDTA（50×TBE）pH8.0。 （8）加样缓冲液：0.25%溴酚蓝（BPB）40%蔗糖。
（9）溴化乙啶（EB）溶液：10μg/ml。
（10）琼脂糖凝胶：浓度为0电泳仪 （2）可调微量移液器
（3）水平电泳槽
（4）暗箱紫外透射仪等。
* 溴化乙啶在 260 ℃分解，在标准条件下进行焚化后不会有 危险性。
(一)材料：动物肝脏
(二)试剂：
（1）0.14mol／LNaCl－0.15mol／L EDTA-Na溶液： （2）20％SDS溶液： （3）氯仿一异戊醇(24:1)混合液： （4）95％乙醇溶液。 （5）80％乙醇溶液。 （6） pH8.0TE缓冲液：10 mmol／LTris－HCI，lmmol ／L EDTANa，其中含RNA酶20ug／mL。
实验二组织的观察和背散射电子相应用
实验二组织的观察和背散射电子相应用一、实验目的1.利用二次电子像对材料形貌进行观察2.了解背散射电子像的应用二、实验原理扫描电镜具有景深大、图像立体感强、放大倍数范围大且连续可调、分辨率高、样品室空间大且样品制备简单等特点，是进行样品表面研究的有效工具。
扫描电镜是利用细电子束在样品表面进行逐点扫描，与样品相互作用产生各种物理信号，这些信号经检测器接收、放大并转换成调制信号，最后在荧光屏上显示反映样品表面各种特征的图像。
扫描电镜的图像放大倍数在一定范围内(几十倍到几十万倍)可以实现连续调整。
放大倍数等于荧光屏上显示的图像横向长度与电子束在样品上横向扫描的实际长度之比。
扫描电镜的电子光学系统是为了提供扫描电子束，作为使样品产生各种物理信号的激发源。
扫描电镜最常使用的是二次电子信号和背散射电子信号，前者用于显示表面形貌衬度，后者用于显示原子序数衬度。
1.二次电子像衬度形成原理二次电子是指被入射电子轰击出来的核外电子。
由于原子核和外层价电子间的结合能很小，当原子的核外电子从入射电子获得了大于相应的结合能的能量后，可脱离原子成为自由电子。
如果这种散射过程发生在比较接近样品表层处，那些能量大于材料逸出功的自由电子可从样品表面逸出，变成真空中的自由电子，即二次电子。
二次电子来自表面5-10nm的区域，能量为0-50eV。
它对试样表面状态非常敏感，能有效地显示试样表面的微观形貌。
由于它发自试样表层，入射电子还没有被多次反射，因此产生二次电子的面积与入射电子的照射面积没有多大区别，所以二次电子的分辨率较高，一般可达到5-10nm。
扫描电镜的分辨率一般就是二次电子分辨率。
二次电子产额随原子序数的变化不大，它主要取决与表面形貌。
2.原子序数衬度形成机理原子序数衬度是利用对样品微区原子序数或化学成分变化敏感的物理信号作为调制信号得到的一种显示微区化学成分差别的像衬度。
背散射电子、吸收电子和特征X射线等信号对微区原子序数或化学成分的变化敏感，都可以作为原子序数衬度或化学成分衬度。
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1.分生组织：
1.1分生组织
植物组织
实验内容
1.2细胞的有丝分裂
2.成熟组织：
2.1保护组织 2.3机械组织 2.5分泌结构 2.2基本组织 2.4输导组织
1.分生组织
实验材料 顶端分生组织：
• 洋葱根尖纵切面切片 • 黑藻顶芽纵切面切片
侧生分生组织：
• 椴树茎横切面切片 （维管形成层、木栓形成层）
木栓形成层
维管形成层
2.成熟组织——2.1保护组织
实验材料和方法 表皮（初生保护组织）
• 番薯叶：撕取下表皮→临时装片（表面观） • 茶叶片：横切（已预先切好）→临时装片（切面观）
周皮（次生保护组织）
• 椴树茎横切面切片 • 桑老根横切面切片
番薯叶下表皮临时装片（表皮的表面观）
茶叶片横切面临时装片
9、椰子内果皮切片 10、梨果实 11、离析纤维（预先分离） 12、南瓜茎横切片
13、南瓜茎纵切片
14、留兰香叶表皮 15、生姜块茎 16、新鲜橘皮 17、松茎横切片
细胞质的有无
细胞壁的厚度和次生 变化 经番红、固绿染色后 细胞壁呈现的颜色
南 瓜 茎 纵 切 片
南瓜茎纵切片
观察与思考：
南瓜茎的导管分子有几种 类型？ 其直径大小和次生壁加厚 的纹式有何不同？ 有无中间过渡类型？
分泌结构
（一）外分泌结构
• 腺毛：烟草叶→徒手切片→ 临时装片（示例） • 留兰香叶→10%过氧化氢-乙酸溶液解离→ 剥去表皮→ 临时装片（课堂操作）
观察与思考
纤维细胞是活细胞还是死细胞？其细胞壁的加厚方式怎样？是初生壁还是次生 壁？细胞壁与细胞腔的比例如何？ 有何生理功能？
输导组织
实验材料和方法
导管
• 南瓜茎横切片 • 南瓜茎纵切片
筛管和伴胞
• 南瓜茎横切片 • 南瓜茎纵切片
南瓜茎横切片
观察与思考：
说明各种组织细胞的特征： 大小、形状
茶叶片同化组织
栅栏组织
细脉（纵切面）
细脉（横切面）
海绵组织
野芋叶柄横切面临时装片 （观察通气组织）
机械组织
实验材料和方法
厚角组织
• 番薯茎→横切（已预先切好）→临时装片
厚壁组织
• 石细胞
椰子内果皮切片 梨果实→挑取果肉中的颗粒→ 压碎→临时装片
• 纤维
离析纤维→ 临时装片（木纤维的纵面观） 椴树茎横切面切片（木纤维、韧皮纤维的切面观）
（二）内分泌结构
• 分泌细胞：生姜块茎→ 徒手切片→临时装片 • 分泌腔：新鲜橘皮（外果皮）→ 徒手切片（横切） →临时装片 • 树脂道：松茎横切片
腺毛：烟草叶
分泌细胞：生姜块茎
分泌腔：新鲜橘皮（外果皮）
树脂道：松茎横切片
实验报告
说明植物体内不同组织类型的细胞所存在的部位、 结构特征及其功能？（按下表的格式完成）
番薯茎横切面临时装片
（观察厚角组织） 表皮
厚角组织 观察与思考 厚角组织是活细胞还是 死细胞？ 其细胞壁的加厚方式怎 样？是初生壁还是次生壁？ 厚角组织有何生理功能？
梨果肉临时装片（观察石细胞）
细胞壁
纹孔
细胞腔
离析纤维临时装片
（木纤维的纵面观）
椴树茎横切面切片
（木纤维、韧皮纤维的切面观）
细胞的有丝分裂
• 洋葱根尖纵切面切片
洋葱根尖纵切面切片
－－观察顶端分生组织、细胞的有丝分裂
观察与思考
如何区分原分 生组织和初生分 生组织？ 细胞有丝分裂 主要发生在植物 体的哪些部位？ 有丝分裂过程 中各个时期细胞 的形态特点如何？
黑藻顶芽纵切面切片
－－观察顶端分生组织
椴树茎横切面切片 －－观察侧生分生组织
（表皮的切面观）
A
B
A.上表皮 B.下表皮
茶叶片下表皮的气孔器
A
A. 气孔关闭时 B. 气孔张开时
注意比较： 上、下表皮的气孔器数 量的差异性
B
椴树茎横切面切片（观察周皮）
2.成熟组织——2.2基本组织
实验材料和方法
吸收组织：萝卜根尖（下次实验课时观察） 贮藏组织：马铃薯块茎横切面临时装片(上次实验 课时已观察) 同化组织：茶叶片横切面临时装片 通气组织：野芋叶柄→横切（徒手切片法）→临时 装片
细胞类型 表皮细胞 保卫细胞 木栓细胞 厚角组织细胞 石细胞 纤维细胞 导管分子 筛管分子 伴胞
注：将导管分子绘成纵切面观图
存在的部位
结构特征
图例
功能
实验材料
1、洋葱根尖纵切面切片 2、黑藻顶芽纵切面切片3、椴树茎横切面切片 4、番薯叶 5、茶叶片（滑走机预先 横切） 6、桑老根横切面切片 7、野芋叶柄 8、番薯茎（滑走机预先 横切）