雏鸡实验性硒中毒的病理组织学研究_任玉红

雏鸡实验性硒中毒的病理组织学研究任玉红　唐朝忠(山西农业大学动医系　太谷　030801)摘要　对10日龄雏鸡实验性急性硒中毒的病理组织学变化进行了详细研究。

结果表明,随着给药剂量增加,雏鸡出现急性中毒症状,病理剖检变化以胃肠道出血及心、肝、肾等器官变性、坏死及出血为主;病理组织学变化以肝、心、肾、肺、脑等器官实质细胞变性、坏死及组织内充血、出血与炎性细胞浸润为特征;超微病理变化表现为肝细胞、心肌细胞及肾小管上皮细胞核形不规则,染色体分布不均匀,线粒体肿胀、空泡化,内质网扩张。

关键词　雏鸡　硒中毒　尸体剖检　病理组织学 自从Fra nke(1934)首次报道食富硒植物引起动物中毒以来,国内外对多种动物硒中毒进行了大量研究,但缺乏有关雏鸡硒中毒的病理组织学变化的详细报道。

本试验对硒中毒雏鸡的临床症状及病理组织学变化进行了详细观察,旨在为雏鸡硒中毒的诊断、防治及发病机理研究提供科学依据。

1　材料与方法1.1　试验材料1.1.1　试验药品　化学纯亚硒酸钠(N a2SeO3),纯度97%,西安化学试剂厂生产,批号870406。

用前以无离子水溶解配成浓度为0.1mg/mL、0.5mg/mL、1mg/ m L、5mg/m L、10mg/m L的亚硒酸钠水溶液。

1.1.2　试验鸡　10日龄蛋用健康雏鸡60只。

1.2　试验方法及检查指标1.2.1　服药方法及剂量　将60只试验鸡随机分为6个组,每组10只,其中A、B、C、D、E为试验组,用滴管滴服对应上述浓度的亚硒酸钠溶液,每只1mL,每日1次,试验期20d。

F为对照组,每只滴服生理盐水1mL。

1.2.2　临诊观察　服药后每日观察3次,主要观察临诊表现、饮食情况及死亡情况。

1.2.3　尸体剖检及病理组织学观察　对各组死亡鸡只进行系统的尸体剖检,详细观察病理剖检变化并速取心、肝、肾、脾、肺、脑及胃肠道等器官组织,用中性福尔马林液固定,石蜡包埋,切片厚度4～5μm,H.E.染色,光镜观察。

同时采取急性中毒死亡鸡的肝、心、肾,固定于2.5%戊二醛及锇酸溶液中,逐级乙醇脱水,环氧树脂包埋,超薄切片,铅铀双染色,JEM—100CXⅡ型透射电镜观察并拍照。

2　结 果2.1　临床症状随着服硒剂量的增加,中毒症状逐渐明显。

D、E两组鸡于服药后1d便表现出明显的中毒症状,并于服药后48h全部死亡;A、B两组鸡到试验结束时,出现个别死亡,中毒症状比较轻微;C组鸡于服药后第5d时,出现中毒症状,试验结束时死亡6只。

急性中毒鸡表现为精神沉郁,呼吸极度困难,食欲废绝,运动失调,倒地,闭目呆立,双翅下垂,流涎,死前发出惨叫,全身抽搐、痉挛,鸡冠肉髯发紫,衰竭而死。

慢性中毒鸡出现食欲减退,精神不振,羽毛粗乱,体重减轻,拉白色稀粪,发育迟缓,但死亡较少。

2.2　病理剖检变化急性中毒死亡鸡皮下点状出血,胸肌有出血点或出血条斑。

心包积液,心内、外膜有出血点,心肌色淡,质地柔软,心腔内有积血。

肝脏肿大,土黄色,肝表面有针尖大的出血点或黄白色坏死灶。

胆囊肿大,胆汁稀薄。

肺水肿、气肿,局部有散在的出血点,切面湿润并流出大量暗红色血液。

气管、支气管内充满白色、泡沫状液体,粘膜有点状出血。

肾轻度肿大,表面弥漫性点状出血,皮髓质界限不清。

腺胃和肌胃交界处粘膜脱落、出血,肌胃角质层下出血。

十二指肠粘膜弥漫性出血,肠道内充满血样物质。

小肠粘膜充血、出血及水肿。

泄殖腔粘膜点状出血,其它脏器无明显肉眼可见病变。

2.3　病理组织学变化2.3.1　肝脏　肝小叶中央静脉及小叶间静脉扩张、淤血、出血,肝细胞肿大,颗粒变性和空泡变性,部分肝小叶肝细胞发生局灶性坏死,坏死灶周围有不同程度淋巴细胞和嗜酸性粒细胞浸润。

2.3.2　心脏　心肌纤维肿胀,排列紊乱,颗粒变性,部分心肌纤维坏死、断裂、溶解,呈红染的颗粒样物质,心肌纤维间充血、出血、水肿及少量炎性细胞浸润,成纤维细胞及淋巴细胞增生。

2.3.3　肾脏　肾小球肿大,肾小球毛细血管内皮细胞—11—变性,肾小管上皮细胞肿大,颗粒变性或空泡变性。

部分肾小管上皮细胞坏死、崩解,胞浆进入管腔,形成蛋白性管型,肾小管间充血、出血及单核样细胞增生。

2.3.4　肺脏　肺小叶严重出血,肺房、呼吸毛细管及三级支气管内有淡红染的浆液,内有脱落的上皮细胞、炎性细胞及大量红细胞,部分呼吸毛细管代偿性扩张。

肺内小静脉、毛细血管扩张、淤血,间质水肿。

2.3.5　脾脏　脾白髓淋巴细胞萎缩、变性,数量减少,网状细胞肿胀、增生,脾静脉扩张、淤血。

2.3.6　大脑　大脑膜或脑实质血管扩张淤血和出血,神经细胞肿胀变圆,个别神经细胞呈液化性坏死,神经胶质细胞增生,形成卫星现象或噬神经现象。

2.3.7　胃肠道　腺胃、肌胃及十二指肠粘膜上皮细胞变性脱落,固有层及粘膜下层充血、出血、水肿及炎性细胞浸润。

2.4　超微病理组织学变化2.4.1　肝脏　肝细胞核变形,核内染色质分布不匀,内质网扩张,线粒体肿胀变圆(见图1),线粒体嵴断裂,严重者结构消失呈空泡状。

2.4.2　心肌　心肌细胞内肌原纤维断裂,横纹消失,心肌细胞内线粒体肿胀,嵴断裂或崩解,线粒体呈大空泡(见图2)。

2.4.3　肾脏　肾小管上皮细胞核极不规则,核膜突起,核内染色质减少(见图3),上皮细胞内线粒体嵴断裂或消失,其它细胞器结构消失。

3　结论与分析3.1　随着服硒剂量增加,雏鸡表现出明显的中毒症状,精神沉郁,食欲废绝,呼吸极度困难,全身抽搐,痉挛而死。

服硒剂量少时,出现轻微中毒症状,精神不振,食欲减退,拉稀,消瘦,发育迟缓,死亡较少。

3.2　病理剖检变化以消化道出血及肝、心、肾等实质器官变性、坏死及出血为主。

病理组织学变化以肝、心、肾、肺、脑等实质细胞变性、坏死及组织内充血、出血和炎性细胞浸润为特征。

超微病理变化表现为肝细胞、心肌细胞及肾小管上皮细胞核形不规则,染色质分布不均匀,线粒体肿胀、空泡化,内质网扩张,其它细胞器结构消失。

3.3　硒进入体内后主要通过肝、肾、肺、肠道排出,进入机体的量一旦超过排泄器官的排泄能力就会导致硒在体内器官组织中残留。

硒与硫有竞争作用,硒可取代体内含硫化合物的硫,从而抑制体内许多含硫氨基酸的活性,发生代谢障碍,引起中毒,导致器官组织受损。

心脏和肝脏是硒中毒的重要靶器官,肝细胞和心肌细胞的变性、坏死是硒对其直接作用的结果。

图1　肝细胞核变形,内质网扩张,线粒体肿胀变圆。

×13000图2　心肌细胞内线粒体肿胀,嵴断裂,线粒体呈空泡状。

×13000图3　肾小管上皮细胞核形极不规则,核膜突起。

×13000主要参考文献:1　王丽云,张英.雏鸡亚硒酸钠急性中毒试验.黑龙江畜牧兽医,1991;(3):29～302　李国勤,王建华等.奶山牛硒中毒临床及病理学研究.西北农业大学学报,1994;22(1):35～393　李引乾.硒的毒理机制与毒物动力学.畜牧兽医杂志,1997;16(1):41～434　陈纪艾,匡宝晓等.雏鸡硒中毒的诊断.当代畜牧,1997;(2):24—12—调查报告1997年上半年胶东地区鸡病流行特点吴延功　杜元钊　朱万光　刘佩兰　仰惠芬　刘雁征(农业部动物检疫所　青岛　266032) 1997年上半年,农业部动物检疫所禽病防治中心共接诊来自胶东地区(包括青岛、烟台、潍坊、威海和日照等地市)的病鸡470例,发病鸡数1508710只。

为了使广大养鸡户更好地了解胶东地区鸡病发生和流行的情况,及时作出防制对策,现根据临床和实验室诊断记录,以及胶东地区几个大型鸡场发病情况记录进行了整理(见表1),报道如下。

1　鸡病特点在470个病例中,鸡病发生种类有30多种,其中既包括病毒性传染病、细菌性传染病和寄生虫病,也包括营养代谢病、中毒病和其他疾病。

这些疫病的发生有以下几个特点:1.1　疾病发生的种类增多,危害严重近年来,胶东地区养鸡业持续发展,对外贸易的不断扩大,在引进世界各地优良鸡种的同时,新的疾病也随之而来。

上半年流行的鸡病中85%是传染性疾病, 15%是非传染病,传染性疾病中有57.5%为病毒性传染病。

原有的主要疫病如新城疫(N D)、大肠杆菌病、马立克氏病(M D)、传染性支气管炎(IB)和传染性喉气管炎(IL T)等尚未得到有效控制的情况下,过去少见的或仅见于国外的、新的疫病也开始发生和流行,如传染性腺胃病、股骨头坏死病、蛋鸡猝死症、病毒性关节炎、传收稿日期:1997—08—21染性脑脊髓炎、肿头综合征、肉鸡腹水综合征、肉鸡瘁死综合征等。

这些新发生的传染病发病率较高,占总发病鸡数的24.5%,或因对其认识不足,或没有好的防治办法,给胶东地区养鸡业带来极大损失。

1.2　免疫失败现象层出不穷近两年来,N D、IB、IL T和M D一直给胶东地区造成较大的经济损失,而这些病大部分发生于免疫鸡群,引起这种现象的主要原因包括:1.2.1　免疫抑制病的存在　IBD、CI A、网状内皮增生症、M D和V E—Se缺乏症等均是重要的免疫抑制病,这些病不同程度的存在,是导致免疫失败的重要原因。

近年来,典型IBD发病率相对减少,仅占6.5%,但多因应用毒力偏强的弱毒苗,使法氏囊受到较大损害,鸡的免疫能力严重下降,从而导致其它疾病的不断发生。

胶东地区是重要的饲料缺硒地区,饲料中V E又极易氧化,V E—Se缺乏症的存在,以及M D的发病率较高,都会导致免疫失败。

1.2.2　免疫程序不当　有的疫苗质量低劣不能达到理想的免疫效果,滥用疫苗使鸡体内正常的免疫应答反应出现混乱现象等是免疫失败的另一重要原因。

1.3　中毒病和营养代谢病发病率增高与过去几年相比,中毒病的发病率有了较大幅度的增加。

这类疾病的发生主要有以下原因:Pathomorphological Studies on Experimental Selenium Intoxication in ChickensRen Yuho ng　Tang Chao zhong(Depa rtm ent of Animal M edicine,Shanxi Ag ricultural Univ ersity　Taigu　030801) Abstract　T he autho rs gav e a minute patho mor pho lo gica l o bserv a tion o n ex perimental selenium acute into xi-ca tio n in10day s o ld chickens.T he results sho wed that patho lo gica l lesio ns w ere pr ese nted in the liv er,hear t,kid-ney,lung,brain and dig estiv e trac t.Th e principal hispa tho lo gica l chang es wer e deg enera tio n,nec rosis in the tissue cells and congestion,h emor rhag e and infla mmato ry cell infiltra tion in the tissue.The cha ng es of ult rastr uctur e in the liv er,hea rt and kidney show ed the nucleus defo rmed,the ch ro ma tio ns dec reased,the mito cho ndrias swelled and emptied and endo plasmic reticulum ex panded.Key words　chicken;selenium;into xica tio n;pa thomo rpholog y■—13—。