血浆盐酸二甲双胍的检测及药物动力学研究
高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度及临床应用
高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度及临床应用王长连1,刘亦伟1,黄品芳1关键词: 盐酸二甲双胍;血药浓度;高效液相色谱法中图分类号: R927.11 文献标识码: B 文章编号: 1672 4194(2007)06 0592 02收稿日期:2007 05 16 修回日期:2007 08 29作者单位:福建医科大学附属第一医院药学部,福州 350005作者简介:王长连(1954~),男,主任药师A:标准溶液[盐酸二甲双胍(M et)+尿苷(Uri)];B:空白血浆;C:标准品+空白血浆(含M et 500ng/m L);D:生物样品.图1 二甲双胍和内标尿苷H PL C 色谱图Fig 1 Chromato gr am of metfo rmin and inter nal standard(ur idine)盐酸二甲双胍(metfo rmin hydro chlor ide,M et)是临床常用的口服双胍类降糖药,近年有一些缓、控释制剂上市。
为了探讨其体内过程与临床疗效,笔者参考有关文献并加以改进[1 4],在实验室建立高效液相色谱法测定M et 血药浓度,报道如下。
1 材料和方法1.1 材料 高效液相色谱系统(包括510泵,996二极管阵列检测器,7725i 进样器,Empo wer 数据处理系统,美国Waters 公司);电子天平(A E 240,上海梅特勒 托利多有限公司);旋涡混合器(XW 80,上海医科大学仪器厂);石英亚沸高纯水蒸馏器(SY Z 550,金坛市丹阳门石英玻璃厂);台式高速离心机(T G L 16G ,上海医用分析仪器厂)。
M et 标准品(美国Sigma 公司,批号113K 0931);尿苷(U r i)对照品(上海化学试剂站分装厂,批号950906);IPR B 8离子对色谱试剂(天津化学试剂二厂,批号20070510);甲醇(国药集团上海化学试剂有限公司,批号T 20060930,色谱纯),实验用水为三蒸水。
盐酸二甲双胍缓释片人生物利用度和生物等效性
盐酸二甲双胍（ｍｅｔｆｏｒｍｉｎ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）是一种 治疗成年人２型糖尿病及部分胰岛素依赖型糖尿病 的降糖药。主要机制为抑制糖的吸收、增加糖的利 用和异生，与磺脲类降糖药相比，二甲双胍不增加体 重，且耐受性好。但其普通片常会引起胃肠道的不 良反应，并且产生乳酸中毒症等副作用；缓释制剂能 减少每天服用次数并降低副作用，达到药物作用持 久的目的。为考察该缓释片在人体的药代动学及生 物利用度，参考有关文献［１，２】，本文建立了简便、准 确的ＨＰＬＣ测定方法，进行盐酸二甲双胍缓释片与 普通片的单次给药的生物利用度比较研究和多次给 药的峰谷浓度波动研究，进行生物利用度和生物等 效性评价，为评价新药质量和临床用药提供参考依 据。
精密量取血浆样品０．５ ｍｌ于离心管中，加入 （１０％，ｖ／Ｖ）高氯酸Ｏ．２ ｍｌ，涡旋３ ｒａｉｎ，于１６ ０００ ｒ· ｍｉｎ。１离，５，３ ｍｉｎ。自动进样器精密吸取上清液５一 进样分析。 １．６数据处理
单次给药试验：血药浓度时间曲线下面积 （ＡＲＣ）采用梯形面积法计算，药动学参数采用３Ｐ９８ 药动学程序计算，并进行方差分析和双单侧ｔ检验， 判断缓释片与普通片是否生物等效。多次给药试 验：根据每位受试者多次服用盐酸二甲双胍缓释片
中国药师
２００７年第１０卷第５期
Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｉｓｔ ２００７，Ｖ０１．１０ Ｎｏ．５
盐酸二甲双胍缓释片人生物利用度和生物等效性
朱定春 朱余兵 （南京医科大学附属南京第一医院药剂科 南京２１０００６）
摘要目的：研究盐酸二甲双胍缓释片单次给药和多次给药的相对生物利用度及生物等效性。方法：采用随机双交叉实 验设计．２０名健康受试者单剂量口服受试制剂、参比制剂各１．０ ｇ及多剂量口服受试制剂（１．ｏ ｇ，ｂｉｄ）和参比制剂（５００ ｍｇ， ｂｉｄ），用ＨＰＬＣ法测定血浆中的二甲双胍浓度，采用３ｒ０８软件计算药物动力学参数。结果：单弃１量口服受试制剂、参比制剂
RP
ｔ ｏ ｄｐｋＣ８ （０ ，５ ｍ×４６ｒｎ ， 动 相 为 ００ ｏ・ 磷 酸 盐 缓 冲 液 （ Ｈ ７０ 一乙 腈 （０ ４ ）检 测 波 长 ￣ ｎ ａａ ｌ １ ２０ｍ Ｂ 柱 ． ｒ）流 ｎ ．１ｔ ｌ ｏ Ｌ ｐ ．） ６ ：０ ， ２ ３ｎｌ流 速 １０ｍ ・ ｉ～ 。 结 果 ３ ｎ， ． ｌ ｎ ｍ 结论 本 法 操 作 简 便 ， 敏 ， 速 ， 用 于盐 酸 二 甲双 胍 的 血 药 浓 度 测 定 及 药 物 动 力 学 研 究 。 灵 快 适
成年 人 非胰 岛素依 赖 型糖 尿 病 （ Ⅱ型糖 尿病 ） 部 分 及 胰 岛 素依 赖 型糖 尿 病 的 治疗 ， 别 适 于 标 准体 重 以 特 上 尤 其 肥胖 的 Ⅱ型 糖 尿病 患 者及 应用 磺 脲 类降 糖药
血 糖控 制 不 良者 ， 胰 岛素 治 疗 者 加 用 ＭＨ可 减 少 对 胰 岛 素 用量 。有 关 Ｍ 的 测 定 ， 献 报 道 有 气 相 色 Ｈ 文
酸二 甲双胍 峰 高 。测 得 的空 白血清 及 血清 样 品 的色
谱 图见 图 １ 由图可 见 ， 。 血清 中生 化 成 分 不影 响 Ｍ Ｈ 兰 的分 离 测定 ， Ｈ 的保 留时 间 为 ６ ９ ｎ Ｍ ．５ｍｉ。
谱 法 、 谱法 及 Ｈ Ｌ ￣ 但 均有 不 少缺 点 ， 血样 用 质 Ｐ Ｃ ， 如 量 大 、 品处 理 繁琐 、 敏 度 低 等 。现 参 考 文 献 一 样 灵 ， 建立 Ｒ Ｐ—Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ测 定 ＭＨ血 药 浓 度 ， 用 于其 药 物 并 动力 学 及生 物 利用 度 的研 究 ， 果 良好 。 效
HPLC法测定盐酸二甲双胍中二甲双胍的含量
HPLC法测定盐酸二甲双胍中二甲双胍的含量目的：通过HPLC方法测定二甲双胍在盐酸二甲双胍片剂中的含量。
方法：在色谱条件：选择Hypersil CN（200 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，流动相：乙腈：0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调至pH=3.5）（32∶78），检测波长：234 nm，进样量10μl，1.0 mL/min流速，柱温为室温（30℃）条件下进行检测。
结果：二甲双胍在2.56ug·mL-1-64.00ug·mL-1范围内线性关系良好，线性方程为：Y =65347X-324521（r=0.9996），平均回收率为100.46%，RSD为1.43%。
结论：采用高效液相色谱方法，可有效评估盐酸二甲双胍片剂中二甲双胍的含量，本法结果准确、方法简单、灵敏度高。
标签：HPLC法；二甲双胍；盐酸二甲双胍；含量二甲双胍是目前治疗2型糖尿病的首选药物，目前对于盐酸二甲双胍的含量测定方法较多，紫外及高效液相等检测方法，都有相继报道[1]。
考虑到紫外检测不能有效分离制剂中有关物质，所测结果准确性不高，故考虑分析高效液相法对盐酸二甲双胍片剂检测的有效性，结果报道如下：1 材料1.1 仪器与试药岛津LC-20A 型高效液相色谱仪；超声波清洗器；乙腈由国药集团化学试剂有限公司提供，为色谱醇；磷酸、磷酸二氢钾均为分析纯；盐酸二甲双胍对照品（中国药品生物制品检定所，批号：150913-151102）；盐酸二甲双胍胶囊（常州兰陵制药有限公司，国药准字H11021518，批号为：140923、150316、150728）。
2 方法与结果2.1 方法学验证2.1.1 色谱条件色谱柱选择Hypersil CN（200 mm×4.6 mm，5 μm），，流动相：乙腈：0.01 mol/L 磷酸二氢钾溶液（用磷酸调至pH=3.5）（32∶78），检测波长：234 nm，进样量10μl，1.0 mL/min流速，柱温为室温（30℃）。
国产盐酸二甲双胍缓释片的人体药动学及相对生物利用度
中国新药杂志２００５年第１４卷第２期竺！ｉ望！苎』！！！！！！！！堕！！旦！竖！；！！！！ｙ堕：！！塑！：；—’＇，＇ｌ，，＇’’’、２临床药学：～ｔｔｔｌＩｌｌｌＩｌ‘。
国产盐酸二甲双胍缓释片的人体药动学及相对生物利用度汤垮，钟国平，刘伟东，王雪丁，曾桂雄，黄丽慧，黄民，廖晓星（中山大学药学院临床药理研究所，广州５１００８０）［摘要］目的：研究健康志愿者单次及多次口服国产盐酸二甲双胍缓释片的药动学及与进口制剂比较的相对生物利用度。
方法：４０例健康志愿者随机交叉自身对照分别口服国产及进口盐酸二甲双胍缓释片，单剂量１９及多剂量１ｑ，ｑｄ，５ｄ。
用ＨＰＬＣ法检测服药后０～２４ｈ（单剂量）和０～１２０ｈ（多剂量）内系列时间点的血药浓度，以外标法定量。
结果：２０例志愿者单次口服国产和进口制剂ｌｇ后，Ｃ。
ａｘ分别为（１８９３．３±５３３．８）及（１８００．６±５１２．９）肛ｇ・Ｌ－。
；Ｔｎｍ。
分别为（３．６±０．７）及（３．４±０．７）ｈ；ｔ１口分别为（６．２±１．７）及（６．３±１．７）ｈ；ＡＵＣｏ～２４分别为（１２５８２．８±４０３０．２）及（１１１７９．２±２１５６．７）肛ｇ・Ｌ－。
・ｈ。
国产相对进口制剂的生物利用度（Ｆ）为（１１３．４±３７．０）％。
２０例志愿者多次口服２种制剂１０００ｍｇ・次－１・ｄ，５ｄ后，Ｃ。
ａｘ分别为（１５３６．３±３８５．０）及（１４７７．５±３４０．１）ｐｇ・Ｌ；Ｔ。
分别为（３．３±０．８）及（３．２±０．７）ｈ；Ｃ。
分别为（６８．３±２３．７）及（７７．５±２１．３）弘ｇ・Ｌ；Ｃ。
，分别为（４１２．７±９１．６）及（４１８．１±９５．３）ｐｇ・Ｌ一；ｔ１口分别为（７．７±２．１）及（７．６±２．１）ｈ；Ａｕｃ。
盐酸二甲双胍片人体药代动力学和生物等效性研究
１ ０ ｍｇ Ｍ ｅ ｆ ｒｎ ｎ Ｈｙ ｒ ｅ ｌｒｄ ｂ ｅ ｔ ｓ ｒ ｒ ｆ ｒ ｎ ｅ ． ｓ ｎ ｉ ｖ ｎ ａ ｉ ０ ０ ｔ ｒ ｉ ｄ ｏ ｈ ｏ ｉ ｅ Ｔａ ｌ ｔ（ ｅ ｔｏ ｅ ｅ ｅ ｃ ） Ａ ｅ ｓｔ ｅａ ｄ ｒ ｐ ｄ ＨＰＬ ｍｅ ｈ ｄ ｗａ ｅ ｅｏ ｅ Ｏ ｄ ｔ ｒ ｎ ｏ ｉ Ｃ ｔ ｏ ｓ ｄ ｖ ｌ ｐ ｄ ｔ ｅ ｅ ｍｉｅ ｔ ｅ ｍｅ ｒ ｍｉ ｌ ｓ ｏ ｃ ｎ ｒ ｔ ｎ Ｔｈ ｌｓ ｏ ｃ ｎ ｒ ｔ ｎ ｔ ｕ ｖ ｓａ ｄ ｔ ｅｂ ｏ ｑ ｉ ａ ｅ ｃ ｆｒ ｆ ｒ ｎ ｅ ａ ｄ ｔｓ ｒ ｐ ｒ — ｈ ｔ ｏｒ ｎ ｐ ａ ｍａｃ ｎ ｅ ｔａ ｉ ． ｅｐ ａ ｍａｃ ｎ ｅ ｔａ ｉ － ｉ ｃ ｒ ｅ ｎ ｈ ｉｅ ｕ ｖ ｌｎ ｅｏ ｅ ｅ ｅ ｃ ｎ ｅ ｔｐ ｅ ａ ａ ｏ ｏ ｍｅ ｔ ｎ ｗｅ ｅ ａ ａ ｙ ｅ ｙ ＤＡＳ１ ０ ｓ ｆｗａ ｅ ＲＥ ＵＬ Ｓ Ｔｈ ｉ ｈ ｒ ｃ ｋ ｎ ｔｃ ｐ ｒ ｍｅ ｅ ｓ ｗｅ ｅ ａ ｏ ｌ ｗｓ Ｃ （ ． ０ ０ ３ ） ｉ ｒ ｎ ｌｚ ｄ ｂ ｏ ． ｏ ｔ ｒ ． Ｓ Ｔ ｅ ｍａｎ ｐ ａ ｍａ ｏ ｉ ｅ ｉ ａ ａ ｔ ｒ ｒ ｓｆ ｌ ｏ ， ２０ 土 ． ７ ａ ｄ （ ． ６ ０ ４ ） ｇ・ｍＬ＿。 ｎ １９土 ．２￣ ，ＡＵＣ ２ （ Ｏ ７ 士 １ ４ ）ａ ｄ （ Ｏ ６ 土 １ ３ ） ｔ ４１．１ ．２ ｎ １． ２ ． ２ｔ ｇ・ｍＬ＿ ・ｈ， １ ＡＵＣｏ （ ２ ０ … １ ０土 １ ５ ）ａ ｄ （ １ ９ ．１ ｎ １． ４ 土 １ ４ ） ｇ・ｍＬ ．６￣ ・ｈ，ｔ ７ ９ 土 ０ ７ ）ａ ｄ （ ． Ｏ土 ０ ６ ｈ， ｘ １ ８ 土 ０ ２ ） ａ ｄ （ ． ９ ０ ２ ） ． ｅ ｒ ｌ ｔ ｅ ｂ ｏ ｖ ｉ ×（ ． ７ ．１ ｎ ８ １ ． ０） Ｔ ａ （ ． ９ ．１ ｎ １ ８ 土 ． １ ｈ Ｔｈ ｅａ ｉ ｉ ａ ａｌ ｖ —
HPLC法测定人血浆中盐酸二甲双胍含量
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ＬｉＦｅ ， ａ ｉ Ｒｅ ｎ。 ｎ Ｚｈ ｎｇ Ｈｕ ， ｎ Ｙｕ
慧 任 ，
耘。
３ ０５ ； ３ 天津医科大学总医院 ， ０００ ． 天津 ３ ０７ ） ０ ０ ０
３０ ９ ； ２ 天津市天和医院 ， ０ １２ ． 天津
摘 要 目的 ： 建立人血浆 中盐酸二 甲双胍 的 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ测定方 法 ， 为人体药 动学研 究和生 物等效性 研究奠定＿ 法学 了方
盐酸二甲双胍片在空腹及高脂餐条件下的人体生物等效性试验
盐酸二甲双胍片在空腹及高脂餐条件下的人体生物等效性试验李伟;曾跃红;孙姝雯;饶一淞;欧阳凯【期刊名称】《中国当代医药》【年(卷),期】2024(31)3【摘要】目的评价健康受试者在空腹和高脂餐条件下单次服用盐酸二甲双胍片的生物等效性、相对生物利用度及安全性。
方法采用单中心、单剂量、开放、随机、双交叉给药设计,选取2017年9月至10月益阳市中心医院的65例健康受试者作为研究对象,空腹入组32例,餐后入组33例。
受试者在服用0.25 g盐酸二甲双胍片后检测血浆中的药物浓度,计算药动学参数,并评价药物的生物等效性。
结果空腹入组32例受试者,二甲双胍受试制剂、参比制剂的主要药动学参数:C_(max)分别为(769.310±164.148)ng/ml和(738.720±127.457)ng/ml,AUC_(0-t)分别为(4737.900±920.287)h·ng/ml和(4647.700±869.177)h·ng/ml,AUC_(0-∞)分别为(4808.330±928.534)h·ng/ml和(4717.670±875.598)h·ng/ml。
餐后入组33例受试者,二甲双胍受试制剂、参比制剂的主要药动学参数:C_(max)分别为(476.100±99.755)ng/ml和(467.520±94.557)ng/ml,AUC_(0-t)分别为(3677.200±770.824)h·ng/ml和(3673.860±754.462)h·ng/ml,AUC_(0-∞)分别为(3762.760±783.383)h·ng/ml和(3745.280±761.178)h·ng/ml。
药代动力学参数C_(max)、AUC_(0-t)、AUC_(0-∞)经过对数转换后进行多元方差分析,几何均值比的90%CI均在80.00%~125.00%范围。
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血浆盐酸二甲双胍的检测及药物动力学研究
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定人血浆中盐酸二甲双胍浓度的方法。
方法血浆样品用10%高氯酸沉淀血浆蛋白后，以苯乙双胍为内标物，高速离心后取上清液进行分析。
色谱柱为lunaC8(4.3mm×280mm，6μm)，柱温为37℃，流动相为乙腈—磷酸盐缓冲液(含0.1％十二烷基硫酸钠和0.1％三乙胺，pH6.5)一乙腈(62:38)流速为0.9ml/min，检测波长：287nm。
结果盐酸二甲双胍的浓度在0.08～ 6.00mg/L范围内线性关系良好，回归方程为Y=0.7002C+0.0008(r=0.9698)，日内和日间精密度(RSD)均小于10％；检测限为0．6ng；检出浓度为45ng/ml～1150ng/ml。
结论本方法操作简便，适用于盐酸二甲双胍血药浓度的测定及药物动力学研究。
【关键词】盐酸二甲双胍；高效液相色谱法；血药浓度
盐酸二甲双胍(metofrminhydrochloride，MH)是双胍类降糖药，可用于单纯饮食控制和/或运动疗法血糖水平未得到满意控制的Ⅱ型糖尿病病人；亦可作为单用磺脲类或盐酸二甲双胍治疗血糖水平未得到满意控制的Ⅱ型糖尿病病人的二线用药的降糖药。
主要机制为抑制糖的吸收、增加糖的利用和异生，与磺脲类降糖药相比，盐酸二甲双胍不增加体重。
且耐受性好。
对于血中盐酸二甲双胍其浓度测定，国内外多见报道[1]。
本实验依托各相关文献研究的基础，改良并建立起一种高灵敏度且操作步骤简单的高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血浆浓度的方法：
1试药与仪器
1.1药品与试剂
盐酸二甲双胍片剂制粉，含量99.6％(贵州天安药业股份有限公司提供)；内标苯乙双胍(山东科源)；高纯色谱级别乙腈；MKP、N,N-二乙基乙胺、发泡粉(天津）、磷酸等均为分析纯；三蒸水为本药剂科室自制。
1.2仪器
日本岛津LC-6A型高效液相色谱仪，sPD 6A V紫外可见光检测器(日本岛滓)，LG-6A泵和C-R6A积分仪、CT06A柱温箱、手动进样阀，WH-2000色谱工作站；AG285电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；恒温水箱（江苏中大420型）；DT5-2自动平衡台式离心机(北京时代)；XW-80A旋涡混合器(上海琪特分析仪器有限公司)，微量进样器。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱为lunaC18(4.3mm×280mm，6μm)，流动相为：乙腈一磷酸盐缓冲液(31.25mmol/l)为62:38，流速为0.9ml/min。
，柱温为37℃，检测波长为305nm。
实验表明，在上述色谱条件下血浆中杂质对盐酸二甲双胍的测定无干扰。
2.2标准溶液的配制
精密称取阴凉存放的粉剂盐酸二甲双胍50mg，双蒸水稀释溶解于容量瓶中，继续加双蒸水至50ml刻度并混匀，储备液(1g/L)保存备用。
以此为母液基础，逐级梯度稀释，将之定浓度为0.5、1、2.5、5、10、25、50mg/L各系列标注浓度。
将内标物苯乙双胍精确称取10mg，溶解于50ml容量瓶中，三蒸水稀释至刻度混匀制备得到苯乙双胍储备液；再吸取苯乙双胍储备液5ml，置于容量瓶中，用25ml双蒸馏水稀释至刻度，混匀，制备得浓度为40mg/L内标标准液。
2.3血样采集与预处理
口服盐酸二甲双胍且无其它合并用药一周以上患者，晨起空腹静脉采血，注入EDTA抗凝真空采血管，离心3000rpm/min，10min，分离血浆。
精密量取血浆样品0.2ml，加入100ul 10%高氯酸振荡混合，置1.5ml的EP-Tubes管中，加入内标溶液20μl，振荡混合均匀，再精密量取加入乙腈0.18ml，旋涡混合2min，放置5min；13000rpm离心时间为20min，取其上清液20 微升进样。
2.4方法学验证
2.4.1专属性
我们发现基于上述色谱条件下，盐酸二甲双胍和苯乙双胍的保留时间分别为5.5min和13.5min，两组分之间呈峰形对称，其标准像达基线分离。
血浆中内源性物质如实验研究所示未显示影响二甲双胍、苯乙双胍出峰时间及高程。
2.4.2标准曲线及线性范围
本实验研究中我们分取梯度浓度各级别浓度的标准液，用阴性对照血浆按10倍稀释的方式，制得浓度分别为0.05、0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、及50mg/L 的盐酸二甲双胍血浆样品，按2.3项下依照本实验提供样本和研究方法操作，分别记录各组分峰高、色谱图，用统计软件计算峰高比（也有文献用grams进行分峰，计算两峰的面积比值）。
设定横坐标为MH血浆浓度数值，纵坐标为待测物与内标物的峰高比值，根据试验数据进行最佳配线，配线后进行F测验显著性，并采用加权最小二乘法求回归运算，求得标准条件下常规直线回归方程，即标准曲线为Y=0.6998C+0.0007(r=0.9697)；根据标准曲线，本方法的线性范围为0.08～6.00mg/l。
2.4.3准确度
阴性对照血浆制备浓度分别为0.075、1.0及3.75mg/L的MH血浆样品，按
2.3项所示方法操作测定，与标准测量曲线同时进行，由同日的标准测量曲线精确到0.01位数求出各样品的浓度，对比所求得的浓度与已知浓度，计算样品的方法其回收率见表1。
表1血浆中盐酸二甲双胍的绝对回收率(x±s，n=5)
P＜0.05
2.4.4精密度
在日内和日间(5天)对应每种浓度做样品，分别于日内间隔2h测定数次，并连续测定数日记录色谱图，求得日内和日间相对标准偏差。
测定的日内变异(n=7)其盐酸二甲双胍浓度分别为3.75，1.0及0.075 mg/L；测定的日间变异(n=7)其盐酸二甲双胍浓度分别为3.75，1.0及0.075mg/L时，两者的RSD见表二。
表2血浆盐酸二甲双服的实验方法精密度(n=5)
2.4.5检测限值
用浓度为0.5mg/L盐酸二甲双胍标准溶液配置浓度分别为0.015、0.03、0.045 mgL的血浆样品，预处理后进样：以空白血浆为对照，按信噪比S／N=2测得本方法中盐酸二甲双胍的最低检测限为0.6ng；根据实验精密度的要求，在本实验条件下，测得人血浆中盐酸二甲双胍的最低定量浓度为45g/L(n=5，RSD=9.18％)
3 讨论
国内外文献报道有关测定血中MH药物浓度的方法,有实验研究方法多种但有的手法繁复，耗时长，有的操作简单却数据有失精准，却以高效液相色谱法应用最为广泛并且最为准确和简便。
我们采用10%高氯酸作为蛋白沉淀剂，沉淀后能直接进样测定，简化了样品处理过程。
本方法简便、快速、准确、专一性好，可用于盐酸二甲双胍的血药浓度测定。
因MH是双胍类降糖药其极性较大，其保留反相色谱中能力较弱[2]。
本实验创新改用离子对色谱法利用二甲双胍与发泡剂（SDS）能直接结合为离子对而保留反相色谱中能力得到大幅度增强，在试验中确定其适宜浓度均为0.1％，配制乙腈-磷酸盐缓冲液作液相低压梯度流动相，如有气泡产生，用脱气机处理，尽量避免压力变动。
本研究中选用0.40ml 乙腈与0.40ml血浆混合，高速离心，取上清液进样，其标注计算曲线图形显示基线本底较低，分离效果好。
与文献对比，避免了血样用量大、处理环节多而繁杂等缺点[3]，同时还可以保证一定的测定灵敏度，而且实验操作手法简便，可以考虑作为MH血药浓度的一种常规测定方法，亦可应用于临床及药剂科药物动力学的研究。
参考文献
[1] 张梦军,曹文轩,张惠静.离子对高效液相色谱法测定体外人血浆中盐酸二
甲双胍浓度[J].解放军药学学报,2008,24(6)534-537
[2]魏敏吉,张慧琳,康子胜.一种快速灵敏测定人血清中二甲双呱含量的方法[J].中国新药与临床药理,2003,19(6):443-446.
[3]郑宝忠,窦学梅,肖淑华.复方盐酸二甲双肌胶囊在人体内药物动力学和生物等效性研究[J].天津药学,2OO6,l8(3):1-4
作者简介：
吕春芳，（1973-），湖南怀化人，主管药师，主要研究药剂学、药物动力学方向。