Ⅱ型胶原酶对兔角膜生物力学特性的影响
胶原润眼液能够加快眼角膜上皮损伤的修复
胶原润眼液能够加快眼角膜上皮损伤的修复雷静;陈淡嫦;黄冬晶;宋鄂;杨威;孙雅彬【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2012(016)003【摘要】背景:Ⅰ型胶原不仅是角膜的主要组成成分,还能对受伤角膜起到营养修复作用,具有很好的药物缓释功能.目的:了解胶原润眼液对兔损伤角膜的修复作用,并评价其生物安全性.方法:采用角膜环钻制备兔双眼角膜损伤模型,抗感染处理后,右眼滴胶原润眼液作为实验组,左眼滴生理盐水作为对照组,以结膜分泌物及水肿度、2%荧光素角膜染色评分、损伤愈合率等指标评价胶原润眼液对损伤角膜的修复作用.结果与结论:对照组兔术后结膜分泌物增多,水肿严重;实验组动物术后结膜分泌物较少,无严重水肿和充血.实验组术后第11 天,13 天角膜损伤愈合率明显高于对照组(P<0.05).体外细胞毒性试验不大于2 级反应,且无致敏和刺激反应,结果显示胶原润眼液无生物学危害,能够加快兔损伤角膜的愈合.%BACKGROUND: Type I collagen is not only a major component of the cornea, but also can repair the injured cornea and play the role of nutrition, with a good drug delivery capability. OBJECTIVE: To understand the effect of collagen eye drop on the repairing of injured rabbit's corneal and to evaluate the biological safety.METHODS: Corneal Ring Drill was used for rabbit cornea injury model preparation. Anti -infection treatment was performed after surgery. Right eyes treated with collagen eye drop were used as experimental group, and left eyes treated with normal saline served as controls. Secretion and edema degrees, 2% fluorescent element corneal dyeingratings, damage healing rates were used for evaluation of the effect of collagen eye drop on cornea injury. RESULTS AND CONCLUSION: The conjunctival secretions in the experimental group were greatly lower than that in the control group. Compared with the control group, the edema and congestions of rabbits after surgery were lighter in the experimental group. The healing rates of the cornea lesion at 11 and 13 days after surgery in the experimental group were significantly higher than those in the control group (P < 0.05). In vitro cytotoxicity test showed not more than 2 levels of reaction. And there was no allergic reaction, and the results showed that the collagen eye drops had no biological hazards and could accelerate the wound healing of the cornea.【总页数】4页(P463-466)【作者】雷静;陈淡嫦;黄冬晶;宋鄂;杨威;孙雅彬【作者单位】广州创尔生物技术有限公司,广东省广州市,510663;广州创尔生物技术有限公司,广东省广州市,510663;广州创尔生物技术有限公司,广东省广州市,510663;吉林大学,吉林省长春市,130012;吉林大学,吉林省长春市,130012;吉林大学,吉林省长春市,130012【正文语种】中文【中图分类】R318【相关文献】1.少阳生骨方对大鼠在体软骨损伤关节液IL-1β及软骨修复组织Ⅱ型胶原影响的实验研究 [J], 扶世杰;杨本伍;舒从科;邓小文;李廷富2.胶原润眼液对新洁尔灭所致兔干眼症的治疗 [J], 陈淡嫦;雷静;赵澎;黄冬晶;宋鄂;董宇3.小牛血去蛋白提取物凝胶和羟糖苷眼液对LASIK术后角膜上皮损伤的修复作用[J], 唐静;邓应平;鲜依鲆;邱乐梅4.唯地息眼用凝胶对眼角膜化学烧伤后上皮修复的疗效观察 [J], 封亚玲;田华;王林菊5.贝复舒滴眼液与爱丽滴眼液治疗眼角膜上皮缺损的随机对照研究 [J], 唐耀冰;邢艳巧;郝娟;赵倩;张相冉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Ⅱ型胶原在兔股骨头软骨炎中的变化及机制研究
ｉ ｔ ｏ ｔｏ ｒ ｕ （２ １ ） ｎ ｄ ｌｇ ｏ ｐ （ ｎｏｃ ｎ ｒ ｌ ｏ ｐ ， ｇ — ０ ａ ｄ ｍｏ ｅ ｒ ｕ 一 ２ ） ０ ．Ａｎ ｍａ ｓｉ ＷＯ ｇ ｏ ｐ ｏ ｈ ｒ ｃ ｉｅ ｔｒｌ ｐ ｒ ｔｏ ｔ ｉ ｌ ｎ ｔ ｒ ｕ ｓｂ ｔ ｅ ｅｖ ｄ ｓｅ ｉ ｏ ｅ ａ ｉ ｎ ｗｉ ｅ ｈ
目的 ： 察 Ｐ ｒｈ ｓ病 模 型 股 骨 头 骺 软 骨 Ｉ 胶 原 及 血 清 抗 体 的 变化 ， 讨 观 ｅｔ ｅ Ｉ型 探
Ｐ ｒｈ ｓ病 的 发 病 机 制 。方 法 ： ｅｔｅ 选择 经 Ｘ 线 拍 片证 实 双侧 股 骨 头骺 板 完 整 无 损 且 未 闭合 骨 化 的 健 康 新 西 兰 长 耳 白兔 ３ ０只 ， 雄 各 半 ， 机 分 为 对 照 组 （ ０只 ） 实 验 组 （０只 ） 分 别 于 造 模 后 ４ 雌 随 １ ， ２ 。 ， ６ ８ １ ，２周 行 右 侧 髋 关 节 屈 曲 位 Ｘ 线 检 查 ， ， ，０ １ 随后 取 右 侧 股 骨 头 用 免 疫 组 化 法 观 察 Ｉ Ｉ型胶 原 和 收 集 血 清 检 测 Ｉ 型 胶 原 抗 体 浓 度 。 结 果 ： 验 组 软 骨 内 Ⅱ型 胶 原 结 构 排 列 紊 乱 ， 量 明 显 减 少 ， Ｉ 实 数
Ｔ Ｈ ａ ｉ ｏ ｄｉｔ ｌｏ ｐｉ ｍ ｓｃｔ ｓ ａ ｆｅ ｐｈｙ ｅ ｌｐｌ ｔ ｉ ｕｆｓ ａ ｄ ｃ ｎｔｅ ｏｆｃ ｌｕｍ ｅ ｏｒｓ ｏ ｗ ｉｈ ｓ ａ ａ ｅ ｖ ａ ｃ ｆ ｎ ｅ ｒ ｏ ｌ ｆ ｍ ｉ ｔ ｔ １ ２＃ ｔ ａ ｆｘ ｏ ｎ ｕｎ ｒ ｒ ｎｓｉ ｉ ｎ ｐｉ ｄｅ
ｃ ｍ ｐａｅａ ｏ ｌ ｔ ｎｄ ｎｏｎ— ｓ ｉｉ ｐｉ － ｓｆｃ ｅ ｐｈｙ ｉｌｃ ｒ ｉａ ｅ ｏｆｆ ｍ ｏｒ ｌｈｅ ｄ ｉ ｎ ｉｉｄ ｂｙ Ｘ — ａ ｓ ｉ ａ ｅ ｗ ｅ ｅ ｄ ｖｄｅ ａ ｏ ｓａ ａ ｔｌ ｇ ｅ ａ ａ ｄｅ ｔｆｅ — ｙ ｍ ｇ ｒ ｉ ｉ ｄ ｒ ｎｄｏ ｌ ｒ ｍ ｙ
低强度脉冲超声对兔关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原表达的影响
低强度脉冲超声对兔关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原表达的影响郭杨;马勇;董睿;刘尚仑;屠娟;黄桂成【摘要】目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对体外培养兔关节软骨细胞增殖及其合成Ⅱ型胶原的影响.方法选取生长状况良好的第3代兔膝关节软骨细胞,随机分为空白组及3种强度的LIPUS干预组,其超声强度分别为40、50、80mW/cm2,其余作用参数相同,中心频率:1.0 MHz,脉冲重复频率:1.0 KHz,脉冲宽度:200 μs,作用周期:50.各LIPUS干预组每日照射20 min,连续照射3d后,采用CCK-8比色法检测软骨细胞增殖情况,免疫组化染色分析Ⅱ型胶原表达量的变化.结果强度50、80 mW/cm2的LIPUS干预组软骨细胞增殖较空白组显著增多(P＜0.01),且50mW/cm2LIPUS的作用最为明显,而40 mW/cm2 LIPUS促软骨细胞增殖效应与空白组相比差异无统计学意义(P =0.249);各强度LIPUS组Ⅱ型胶原表达量均高于空白组(P＜0.01),尤以50 mW/cm2 LIPUS组Ⅱ型胶原表达量增加最为显著,优于40、80 mW/cm2 LIPUS的效应(P＜0.01).结论 LIPUS能够促进体外培养关节软骨细胞增殖,增加软骨细胞Ⅱ型胶原的分泌,且强度为50 mW/cm2时效应较为明显.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2014(049)012【总页数】4页(P1739-1742)【关键词】低强度脉冲超声;软骨细胞;细胞增殖;Ⅱ型胶原【作者】郭杨;马勇;董睿;刘尚仑;屠娟;黄桂成【作者单位】南京中医药大学骨伤研究所,南京210023;南京中医药大学骨伤研究所,南京210023;南京中医药大学附属医院骨伤科,南京210029;南京中医药大学骨伤研究所,南京210023;南京中医药大学骨伤研究所,南京210023;南京大学声学研究所,南京210093;南京中医药大学骨伤研究所,南京210023【正文语种】中文【中图分类】R274.3低强度脉冲超声（low intensity pulsed ultrasound，LIPUS）能够影响机械运动场中运动的细胞、生物大分子等结构，独特的空化效应可以增强细胞生长因子、药物分子等大分子物质的跨膜转运能力，且具有安全、价廉等优势，在软骨修复领域逐渐受到研究者的青睐。
ii型胶原酶的作用
ii型胶原酶的作用ii型胶原酶（Matrix Metalloproteinases, MMPs）是一类能够降解胶原蛋白的酶类，广泛存在于多种细胞和组织中。
它在细胞外基质的重塑、组织发育、炎症反应和肿瘤转移等生理和病理过程中起着重要的调控作用。
ii型胶原酶主要由成纤维细胞、巨噬细胞、内皮细胞和中性粒细胞等产生，并通过细胞外基质中的细胞外酶原激活酶（proenzyme）状态释放出来。
它的活性受到多种内外因素的调控，如细胞因子、生长因子、炎症因子、细胞外基质成分等。
ii型胶原酶的活性主要通过其与组织抑制金属蛋白酶抑制物（TIMPs）的平衡来维持。
ii型胶原酶在多种生理和病理过程中发挥着不可或缺的作用。
首先，它参与细胞外基质的重塑。
在胚胎发育和组织再生过程中，ii型胶原酶可以降解旧的细胞外基质，为新的细胞外基质的合成和组织重塑提供空间和支持。
其次，ii型胶原酶在组织发育中起到了重要的调控作用。
研究发现，ii型胶原酶参与了骨骼、肌肉和肺部等器官的正常发育过程。
在这些过程中，ii型胶原酶可以调节细胞外基质的合成、降解和重构，从而影响细胞迁移、增殖和分化。
ii型胶原酶还参与了炎症反应的调控。
在炎症反应中，ii型胶原酶可以被炎症细胞激活，释放到炎症部位，参与细胞外基质的降解，促进炎症细胞的迁移和组织修复。
然而，在某些情况下，过度活化的ii型胶原酶可能导致炎症反应的持续和损伤，甚至参与慢性炎症疾病的发生和发展。
最重要的是，ii型胶原酶在肿瘤转移中发挥着重要的作用。
研究表明，ii型胶原酶可以降解细胞外基质，促进肿瘤细胞的侵袭和转移。
此外，ii型胶原酶还可以调节肿瘤血管的生成和新生，影响肿瘤的血液供应和营养。
因此，ii型胶原酶成为肿瘤治疗的重要靶点，针对其活性的抑制剂已经成为临床研究的热点。
ii型胶原酶作为一类重要的酶类，在细胞外基质的重塑、组织发育、炎症反应和肿瘤转移等生理和病理过程中发挥着重要的调控作用。
对ii型胶原酶的深入研究不仅有助于揭示其作用机制，还有望为相关疾病的治疗提供新的靶点和策略。
兔关节软骨接受体外冲击波治疗后细胞增殖及Ⅱ型胶原的表达
兔关节软骨接受体外冲击波治疗后细胞增殖及Ⅱ型胶原的表达王明波;赵喆;云文科【摘要】背景：关节软骨损伤后自身修复能力有限,体外冲击波可能提供一种高质量的修复关节软骨损伤并达到很好远期疗效的方法.目的：探讨体外冲击波对兔关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原蛋白表达的影响.方法：酶消化法获得正常兔膝关节软骨细胞,培养并传代,实验 A、B、C 组分别用0.5×105,1.5×105,2.5×105 Pa等3种强度能量体外冲击波干预,空白对照组无任何干预措施.结果与结论：细胞生长曲线在第6天实验 B 组显著高于其他各组(P <0.05)；ELISA 法检测实验 B 组Ⅱ型胶原 A 值与其他各组相比,显著升高(P <0.05)；RT-PCR 法检测实验 B 组Ⅱ型胶原表达明显增强,与其他各组相比差异有显著性意义(P <0.05).提示适当能量强度及频次的体外冲击波刺激,能够明显促进软骨细胞的增殖及Ⅱ型胶原表达.%10.3969/j.issn.2095-4344.2012.46.012【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2012(000)046【总页数】4页(P8611-8614)【关键词】体外冲击波;软骨细胞;细胞增殖;Ⅱ型胶原;兔【作者】王明波;赵喆;云文科【作者单位】武警内蒙古总队医院外二科,内蒙古自治区呼和浩特市 010020;解放军总医院骨科研究所,北京市100039;武警内蒙古总队医院外二科,内蒙古自治区呼和浩特市 010020【正文语种】中文【中图分类】R3180 引言关节软骨损伤后自身修复能力有限，大的关节软骨缺损常由纤维软骨修复，常因无力承担长时间的关节内各种机械应力而退变。
但临床上尚无一种方法能高质量的修复关节软骨损伤并达到很好的远期疗效。
近年来，发现体外冲击波在治疗骨关节炎中有显著疗效。
实验利用体外培养的正常原代软骨细胞，施加不同能量强度的体外冲击刺激，观察体外冲击是否对关节软骨细胞的增殖有影响，检测体外冲击对软骨细胞增殖情况及Ⅱ型胶原表达的影响。
利用PLA、PGA、PLGA三种支架再生兔关节软骨
·论著·利用P L A、P G A、P L G A三种支架再生兔关节软骨陈哲峰范卫民刘峰【摘要】目的观察兔关节软骨细胞在聚乳酸(P L A),聚羟基乙酸(P G A),以及两者的共聚物P L-G A三种三维支架上的贴附和生长情况,利用组织工程技术培养工程化关节软骨。
方法多聚赖氨酸包埋P L A,P G A,P L G A三维细胞支架。
分离培养兔关节软骨细胞,体外扩增后种植到三种支架中。
在体外培养软骨细胞一支架复合物,4周终止培养,进行H E、M a s s o n组织学染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色。
结果(1)体外培养发现,软骨细胞在P L G A支架材料内贴附生长良好,长期培养仍保持软骨细胞特性,其贴附生长能力,分泌Ⅱ型胶原能力较P G A,P L A支架组强。
(2)支架经过多聚赖氨酸包埋后,软骨细胞的贴附生长及分泌Ⅱ型胶原能力均较对照组好。
结论多聚赖氨酸处理的P L G A三维支架适合软骨细胞贴附生长和分泌Ⅱ型胶原,可作为软骨组织工程的细胞载体。
【关键词】软骨细胞;细胞支架;多聚赖氨酸E x p e r i m e n t a l s t u d y o n r e g e n e r a t i o n o f a r t i c u l a r c a r t i l a g e o n P L A,P G A,P L G A s c a f f o l d b y t i s s u e e n g i n e e r i n g8/5).’2K2+,,A<);2%M%+,L I UA2+,N B2E-@3M2+3*K J@3’*E27%=Q,A%@Q3<K K%1%-327/*Q E%3-1,)-+G%+,C27%=-1U+%O2@Q%3D,)-+G%+,210029,8/I)<【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T o s t u d y t h e a b i l i t y o f p o l y l a c t i c a c i d(P L A),p o l y g l y c o l i c a c i d(P G A),P L G A i ns u p p o r t i n g t h e g r o w t ho f r a b b i t c h o n d r o c y t e s,a n d t o r e c o n s t r u c t a r t i c u l a r c a r t i l a g eb y t i s s u e e n g i n e e r i n g.M e t h o d s C o a t e dP L A,P G A,P L G Aw i t h p o l y-l-l y s i n e,f r e e c h o n d r o c y t e s i s o l a t e d f r o m r a b b i t a r t i c u l a r c a r-t i l a g ew e r e s e e d e do n t o t h r e ek i n d s o f s c a f f o l d s a f t e r e x p a n s i o nb y i nv i t r o c u l t u r e.T h e c o m p l e xo f c e l l-s c a f f o l dw a s t h e n c u l t u r e d i n v i v o.A f t e r4w e e k s o f c u l t u r e,t h e c o m p l e xw a s a s s e s s e d b y h i s t o l o g i c a l s t a i-n i n g o fH-E a n dM a s s o n.I m m u n o h i s t o c h e m i c a l a n a l y s i sw a s p e r f o r m e d t o e v a l u a t e c o l l a g e n t y p eⅡs y n t h e-s i s.R e s u l t s(1)A r t i c u l a r c h o n d r o c y t e s w e r e w e l l d i s t r i b u t e d a n d a d h e r e d t o P G A,P L G A s c a f f o l d s a n dm a i n-t a i n e d t h e i r c h a r a c t e r i s t i c s o f a r t i c u l a r c a r t i l a g e t h r o u g h o u t t h e c u l t u r e p e r i o d.(2)C h o n d r o c y t e sw e r ew e l ld i s t r i b u te d a n d a d h e r e d t o s c af f o l d s a f t e r c o a t e dw i t h p o l y-l-l y s i n e,a n d s e c r e t e dm o r e t y p eⅡc o l l ag e n i n c o n-t r a s t t o n o n-c o a t e d s c a f f o l d s.C o n c l u s i o n P L G A s c a f f o l d c o a t e dw i t h p o l y-l-l y s i n e c a n s u p p o r t t h e c h o n d r o-c y t e p r o l i f e r a t i o nw i t hm a i n t e n a n c e o f t h e i r p h e n o t y p e,a nd c a n be s u i t a b l e c a r r i e r sf o r t i s s u e e ng i n e e r i n g o fa r t i c u l a r c a r t i l a g e.【K e y w o r d s】C h o n d r o c y t e;S c a f f o l d;P o l y-l-l y s i n e[(%-+,Q9C27(,<9,9Q32005,31(8):599S601N]由于软骨自身修复能力有限,创伤等病因导致关节软骨缺损后,常继发成为骨关节炎。
Ⅱ型胶原酶消化时间对兔软骨细胞生物学特性的影响
Ⅱ型胶原酶消化时间对兔软骨细胞生物学特性的影响袁德超;陈竹;邓尚;冯刚【摘要】Objective To investigate the best digestion time for rabbit rib cartilage cells separation by collagenase Ⅱ diges‐tion method .Methods Rabbit cartilage tissue was taken from 3‐month‐old New Zealand white rabbits ,and then digested in 0 .2%collagenase Ⅱ solution for 4 ,8 ,12 ,16 and 20 h under vibration at 37 ℃ ,respectively .The corresponding experiments were named as group A ,B ,C ,D ,and E .The obtained primary cells were cultured and passaged after counting .The cellmorphology ,proliferation rate ,secretion of extracellular matrix of passage 2 cells were compared to chose the best digestion time .Results The primary chon‐drocytes obtained in group C ,D and E were more than the other two group A and B .The chondrocytes cytoactive in group C and D were better than the other three group A ,B and E .The passage 2 chondrocytes in group C ,D had better secretion of extracellular matrix capability than the other three groups .Conclusion The best collagenase Ⅱ digestion time is 12 to 16 h ,at this digestion time period ,more primary chondrocytes with high cytoactive and strong proliferation capability canbe obtained ,and the phenotype of their passage 2 cells is quite good .%目的：探索Ⅱ型胶原酶消化法分离兔肋软骨细胞的最佳消化时间。
Ⅱ型胶原酶构建在体角膜扩张动物模型的可行性研究
照 。于 造 模 前 及 造 模 后 １ ４ ｄ ， 采 用 手 持 电 子 角 膜 曲 率 计 和 手 持 角 膜 超 声 测 厚 仪 分 别 测 定 角 膜 平 均 曲率 （ Ｋ ｍ） 及 中央 角 膜 厚 度 （ Ｃ Ｃ Ｔ ） ， 造模后 １ ４ ｄ 采用 Ｃ ｏ ｒ ｖ ｉ ｓ Ｓ Ｔ行 在 体 角 膜 生 物 力 学 参 数 测 定 ， 过 量 麻 醉 法 处 死 实 验 兔 并 收集角膜组织行 组织 病理 学 及透 射 电子 显 微镜 检 查 。 结 果 造 模 前 ， 模 型组 和 对 照组兔 Ｋ ｍ 值 分 别 为
ＤＯＩ ： １ ０ ． ３ ７ ６ ０ ／ ｃ ｍａ ． Ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ２ ０ ９ ５ — ０１ ６ ０． ２ ０ １ ７． １ １ ． ０ ０ ６
【 摘要】 背景 圆锥角膜 以角膜 中央或旁 中央进行性变 薄膨 出、 高度散光或 角膜瘢痕为 临床特征 ， 其发
病 机 制 和 防 治是 研 究 热 点 ， 但 目前 尚无 公 认 的 圆锥 角 膜 动 物 模 型 建 立 方 法 。圆 锥 角 膜 的 解 剖 病 理 基 础 是 角 膜
【 关键词 】 生 物力 学 ；角 膜／ 病 理 状 态 ； Ⅱ型 胶 原 酶 ；最 大 压 陷 深 度 ；圆 锥 角 膜 ； 角 膜 扩 张／ 化 学 诱 导 ；兔 ；可视 化 角膜 生 物 力 学 分 析 仪
基 金 项 目 ： 国家 自然 科 学 基 金 项 目 （ １ １ ３ ７ ２ ０ １ １ ） ；非 线 性 力 学 国家 重 点 实 验 室 开 放酶 构 建 在 体 角 膜 扩 张模 型 的 可行 性 。 方 法
选 取 健 康 新 西 兰 白兔 １ ０只 ， 刮 除兔 眼 角 膜 上 皮 后 ， 将 直
兔子Ⅱ型胶原ColⅡ酶联免疫分析ELISA
兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定兔子血清，血浆及相关液体样本中Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) 的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) 水平。
用纯化的兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) ，再与HRP标记的Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) 呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) 浓度。
注意事项：1．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
2．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
5．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
PRK手术对兔眼角膜生物力学性质的影响
［］ ２ 闫彩风 ， 张志利 ， 清华 ． 郭 Ｔ细胞接种对环磷 酰胺处理 Ｎ Ｄ小 鼠糖 Ｏ 尿病 的影响 ［］ 中华 内分泌代谢杂志 ，０ １ ｌ： １ Ｊ． ２０ ，７ １ ．
中 国 实验 诊 断 学
２ １ ７月 ００年
第 １ ２
重； 血糖 逐渐 升高 ， 糖 与发病 率 同步升 高 并非 突发 血
过程 ， 至第 ４周 时才达 到并 稳定 在一 个 较 高水 平 ； 血 清胰 岛素水 平 下 降 ； 明从 胰 岛 ８细 胞 代 谢 偏 移 到 说 糖尿 病 发 作 经 过较 长 时 间 的 潜 临床 状 态 ， 胰 岛 的 对 损 害是一个 渐进 发生 、 步加重 的过程 。 Ｄ 逐 Ｍ组 小 鼠 胰 岛 内可 见 炎性 细胞 浸 润 ， 分 胰 岛 细胞 发 生 空 泡 部
ｏｊｅｉ ｐ ｃｅｔ ｅ －ｅ ｓＪ ．Ｄａｅ ｓ１９ ， （ ）７３ ｘ ｎ ａ ｒ ｉ ｂｔ ｃｌ［ｊ ｉ ｔ ，９５４ ７ ：３ ． ｄ ｎ ａ ｃ ａ ｌ ｂｅ ４ ［］ ｗ ｎＮ ，ｅ Ｈ， ｈｉＣ ，ｔ １Ｎｔｃｏｉ ｅｅ ｔｎｆｍ ｓｅｔｚ— ９ Ｋ ｏ Ｓ ＬｅＳ Ｃ ｏ Ｓ ｅ ａ． ｉｉ ｘ ｅｇｎｒ ｉ ｒ ｔ ｐ ｏ ｒ ｄ ａｏ ｏ ｒ ｏ
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市 100069)
DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1282
ORCID: 0000-0002-9450-1169(陈昕妍)
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Ⅱ型胶原酶干预会使兔角膜力学特性发生哪些变化？
滴加Ⅱ型胶原酶溶液(18 g/L， 200 L),静置 30 min
陈昕妍，女，1997 年生， 福建省人，汉族，首都医 科大学在读硕士，主要从 事眼生物力学方面的研 究。
Abstract BACKGROUND: Many pathological states of the cornea are associated with abnormal expression of collagenase type II, which can cause corneal matrix degradation and may result in the changes of corneal mechanical properties. The mechanical properties of the cornea are closely related to the corneal shape and refractive state. OBJECTIVE: To observe the changes in the mechanical properties of the rabbit cornea after treatment with collagenase type II. METHODS: After anesthesia and epithelial debridement, a collagenase type II solution (18 g/L, 200 μL) was
Effect of collagenase type II on the biomechanical properties of rabbit cornea
Chen Xinyan, Qin Xiao, Zhang Haixia, Li Lin (School of Biomedical Engineering, Capital Medical University, Beijing Key Laboratory of Fundamental Research on Biomechanics in Clinical Application, Capital Medical University, Beijing 100069, China)
正常 饲养 3个
月
在体光学相干断层 扫描仪检查 离体组织切片 HE
染色 离体单轴拉伸实验
组织变化
弹性模量变化 应力松弛变化
力学特性 改变
通讯作者：李林，博士， 教授，博士生导师，首都 医科大学生物医学工程学 院，首都医科大学临床生 物力学应用基础研究北京 市重点实验室，北京市
100069
文题释义： Ⅱ型胶原酶：也称基质金属蛋白酶 8，是一种只作用于胶原或胶原变形水解产物明胶，而不作用于其他蛋白 的酶类。Ⅱ型胶原酶可通过切断胶原分子的多肽链而水解Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原和Ⅲ型胶原，从而导致细胞外 基质的变性。 角膜生物力学特性：角膜是人眼的主要屈光介质，同许多其他生物软组织一样，具有非线性、黏弹性和各向 异性的复杂生物力学特性。角膜的生物力学特性对维持角膜正常形态及功能具有重要作用，对角膜生物力学 特性的检测有利于疾病的诊断与治疗。
《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research
Ⅱ型胶原酶对兔角膜生物力学特性的影响
·研究原著·
陈昕妍，秦 晓，张海霞，李 林(首都医科大学生物医学工程学院，首都医科大学临床生物力学应用基础研究北京市重点实验室，北京
Corresponding author: Li Lin, MD, Professor, Doctoral supervisor, School of Biomedical Engineering, Capital Medical University, Beijing Key Laboratory of Fundamental Research on Biomechanics in Clinical Application, Capital Medical University, Beijing 10006ter candidate, School of Biomedical Engineering, Capital Medical University, Beijing Key Laboratory of Fundamental Research on Biomechanics in Clinical Application, Capital Medical University, Beijing 100069, China
文献标识码:B 稿件接受：2019-03-20
摘要 背景：Ⅱ型胶原酶的异常表达与许多角膜的病理状态相关，其作用导致的角膜基质降解可能引起角膜力学性 质的改变，而角膜的力学特性又与角膜形态维持、屈光状态密切相关。 目的：观察Ⅱ型胶原酶作用后兔角膜生物力学性质的变化。 方法：6 只实验兔麻醉后左眼角膜去上皮，滴加Ⅱ型胶原酶溶液(18 g/L，200 μL)静置 30 min。正常饲养 3 个月。实验经首都医科大学动物实验及实验动物福利委员会的批准，伦理批号：AEEI-2014-066。 结果与结论：与对照眼相比，实验眼在低、高应变区的弹性模量分别减少 51.5%和 29.9%，总体上实验眼 的松弛程度小于对照眼。提示Ⅱ型胶原酶作用后角膜力学特性有所改变，弹性模量降低，应力松弛程度总体 上减少，角膜整体承载能力下降。 关键词： Ⅱ型胶原蛋白酶；角膜；生物力学特性；单轴拉伸；弹性模量；应力松弛；应力；应变 中图分类号：R443；R318 基金资助： 国家自然科学基金项目(31470914)，项目负责人：张海霞；国家自然科学基金项目(31370952)，项目负 责人：李林