菠菜色素实验报告

合集下载

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告
一、实验目的:
本次实验的主要目的是学习和掌握菠菜色素的提取和分离技术,了解菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。

二、实验方法:
1、制备样品:将新鲜的菠菜叶片洗净晾干,切碎成小块备用;
2、提取菠菜色素:将切碎的菠菜叶片加入适量无水乙醇,研
磨成泥状物,过滤后取得浸提液;
3、进一步提取:将浸提液过滤并再次提取,过滤得到过滤液;
4、分离:将过滤液使用氯仿进行分离,水相和氯仿相层的色
素分离;
5、测定:将得到的色素溶于适量乙醇,测定菠菜色素的吸光度。

三、实验结果:
经过提取和分离,得到了深绿色的液体,与纯菠菜色素溶液比
较后发现两者颜色相似。

测定得到吸光度为0.54。

四、实验分析:
本次实验成功提取和分离了菠菜色素,并得到了较为准确的测定值。

在实验中,氯仿和无水乙醇是常用的有机溶剂,主要是因为在这些溶剂中菠菜色素的溶解度较高。

但是,在实验操作过程中需要注意保持实验环境的卫生和安全,氯仿是一种易挥发的有机物,需要注意防火和防烟。

五、实验结论:
通过本次实验,我们成功地提取和分离了菠菜色素,并且得到了较为准确的测定值。

同时,我们也了解了菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。

本次实验的成功对于今后相关实验研究以及实际应用具有一定的指导意义。

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告菠菜色素的提取和分离实验报告引言:菠菜是一种常见的绿叶蔬菜,富含多种营养物质,其中包括一种被称为菠菜色素的成分。

菠菜色素是一类天然的色素,具有良好的生物活性和抗氧化性质。

本实验旨在通过提取和分离的方法,研究菠菜色素的性质和应用。

实验材料和方法:材料:新鲜菠菜叶片、无水乙醇、丙酮、石油醚、二氯甲烷、硅胶G柱、色谱柱、色谱试纸等。

方法:1. 取适量新鲜菠菜叶片,洗净并切碎成细末状。

2. 将菠菜末置于研钵中,加入适量无水乙醇,浸泡30分钟,搅拌均匀。

3. 将菠菜浸提液过滤,收集滤液。

4. 取少量滤液,加入石油醚,振荡混合,使菠菜色素溶于石油醚中。

5. 将石油醚层收集,加入少量无水乙醇,使溶液变为淡绿色。

6. 将淡绿色溶液倒入色谱柱中,以无水乙醇为洗脱剂,收集洗脱液。

7. 将洗脱液浓缩,得到菠菜色素。

实验结果和讨论:通过以上实验步骤,我们成功地从菠菜中提取和分离出了菠菜色素。

在实验过程中,我们使用了无水乙醇作为提取剂,因为乙醇能够有效溶解菠菜中的色素成分。

同时,我们使用石油醚作为分离剂,因为石油醚能够与菠菜色素发生亲和作用,使其溶于石油醚中。

在分离过程中,我们使用了色谱柱和色谱试纸进行分离和检测。

色谱柱是一种常见的分离工具,通过其内部填充的固定相材料,能够将混合物中的成分按照其亲和性和分子大小进行分离。

我们选择了硅胶G柱作为固定相材料,因为硅胶G柱对菠菜色素具有较好的亲和性。

通过使用无水乙醇作为洗脱剂,我们成功地将菠菜色素从硅胶G柱中洗脱出来。

在实验中,我们观察到菠菜色素呈现淡绿色。

这是因为菠菜色素主要由叶绿素和类胡萝卜素等成分组成,这些成分赋予了菠菜独特的颜色。

叶绿素是一种绿色的色素,具有光合作用的功能。

类胡萝卜素则是一类黄、橙、红等颜色的色素,具有抗氧化和免疫调节等作用。

菠菜色素不仅在食品工业中有广泛应用,还在医药和化妆品等领域发挥着重要作用。

菠菜色素富含抗氧化物质,能够有效清除自由基,延缓衰老和预防疾病。

菠菜色素提取实验报告

菠菜色素提取实验报告

菠菜中色素的提取和色素【2 】分别绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿).胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种自然色素.叶绿素消失两种构造类似的情势即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)),差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所代替.它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合感化所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点.饮料水等中,添加于胶姆糖中还可清除口臭.植物中a的含量平日是b的3倍.尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基构造使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂.胡萝卜素(C40H56)是具有长链构造的共轭多烯.它有三种异构体α—,β—,和γ—胡萝卜素,个中β—异构体含量最多,也最主要.发展期较长的绿色植物中,异构体中β—的含量多达90%.β—具有维生素A的心理活性,其构造是两分子维生素A在链端掉去两分子水联合而成.生物体内,β—体受酶催化氧化即形成维生素A.今朝,β—体可作为维生素A应用,也可作为食物工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功效.叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合感化中能起收集光能的感化.在绿叶中平日是胡萝卜素的两倍.较易溶于醇而在石油醚中消融度较小.由此可见,叶绿素等自然色素有普遍的用处,对于色素的提取与分别就显得很主要了.本试验就提取和分别做了相干的研讨.1 试验部分1.1仪器与试剂仪器:研钵.分液漏斗.显微载玻片.毛细管.层析柱(20×10 cm).UV-240紫外分光光度计试剂:石油醚.乙醇(95%).菠菜叶.丙酮(化学纯).乙酸乙酯(化学纯).无水硫酸钠.硅胶G.中性氧化铝(150目~160目)1.2 提取与分别1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新颖的菠菜叶,参加20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混杂液,恰当研磨(不要研成糊状,不然会给分别造成艰苦),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇.洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化.弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠湿润,湿润后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L.1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h.拔取后果最好的一块进行点样.睁开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样,放入预先选定睁开剂的广口瓶.瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入睁开剂中,盖上瓶盖.待睁开剂上升至划定高度时,掏出层析板,晾干,做出标记.分别用两种睁开剂睁开,比较不同睁开剂的睁开后果.不雅察斑点在板上的地位并分列出胡萝卜素.叶绿素和叶黄素的Rf值的大小.留意改换睁开剂时,需湿润层析瓶,不许可前一种睁开剂带入后一体系.1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯顶用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部.在层析柱中加15cm石油醚.参加中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中聚积.装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面).将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面降低到柱面以下1mm,封闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面降低,几回重复,使色素全体进入柱体.在柱顶加 1.5cm洗脱剂——9:1(体积比)石油醚—丙酮.打开活塞,用锥形瓶收集.当第一个有色成分即将滴出时,取另一锥形瓶收集,得橙黄色溶液,即胡萝卜素.2.成果与评论辩论2.1提取因为甲醇与乙醇的极性邻近,但是乙醇易得.无毒,所以用3:2的石油醚一乙醇经由过程浸泡的办法提取菠菜色素,而不是用石油醚—甲醇.2.2分别薄层层析薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分别和定性剖析少量物资的一种很主要的试验技巧,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的长处,可以用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分别.试验中涉及的菠菜色素的比移值(Rf)(薄层色谱法华夏点到斑点中间的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值)列表如下菠菜色素的比移值(Rf)睁开剂体积比胡萝卜素叶绿素叶黄素石油醚一丙酮8:2 0.05 0.92 0.11石油醚一丙酮6:4 0.33 0.92 0.5在必定的色谱前提下,特定化合物的Rf值是一个常数,是以有可能依据化合物的Rf值判定化合物.菠菜色素中各类色素的比移值Rf大小为:胡萝b素> 叶黄素>叶绿素,按此次序它们的非极性依次削弱.物资极性的断定为柱层析中洗脱剂的选择供给了参考价值.柱层析胡萝卜素极性最小,是以胡萝卜素的洗脱剂用极性较小的9:l的石油醚-丙酮溶剂后果较好.但要收集其他几种色素得换用其他的洗脱剂,因为色素的极性各不雷同,且有必定差别.如用7:3石油醚-丙酮分别叶黄素.分别出胡萝卜素和叶黄素后,可加大溶剂极性以较快速度洗脱叶绿素.用3:1:1的丁醇-乙醇-水洗脱剂洗脱叶绿素.3.结论采用浸泡法提取色素比抽滤法更好.在薄层层析时,用石油醚-丙酮=8:2时,能更显著的看到分层.在柱色谱洗脱剂的选择上,基于薄层剖析的极性断定选择了石油醚-丙酮=9:1的溶剂作为洗脱剂,取得了异常好的后果.经由过程试验,进一步熟悉到洗脱剂在柱层析中的主要性.。

菠菜色素实验报告

菠菜色素实验报告

2014年山东英语作文With the rapid development of technology, the educational landscape in Shandong Province has undergone significant changes in 2014. This essay aims to explore the impact of technological advancements on the education system, focusing on how it has transformed teaching methods, student engagement, and the overall learning experience.Firstly, the integration of technology in classrooms has led to a more interactive and dynamic learning environment. Teachers are now able to utilize multimedia tools such as interactive whiteboards and digital projectors to enhance their lessons. These tools not only make the learning process more engaging for students but also allow for a more diverse range of teaching materials to be introduced, including videos, animations, and online resources.Secondly, the advent of online learning platforms has provided students with access to a wealth of knowledge beyond the traditional classroom setting. In 2014, Shandong Province saw a surge in the number of educational websites and online courses available to students. This has facilitated a more self-directed approach to learning, where students can explore subjects of interest at their own pace and according to their individual learning needs.Moreover, the use of technology has also improved administrative efficiency within schools. Digital managementsystems for enrollment, grading, and scheduling have streamlined these processes, allowing educators to focus more on teaching and less on paperwork. This has also led to more accurate record-keeping and better communication between schools, teachers, and parents.However, the integration of technology in education is not without its challenges. One of the major concerns is the digital divide, where students from less affluent backgrounds may not have access to the same level of technology as their peers. This can lead to disparities in educational outcomes and exacerbate existing inequalities.In conclusion, the year 2014 marked a significant milestonein the integration of technology into the educational system of Shandong Province. While there are challenges to overcome, the benefits of technology in enhancing the learning process and improving administrative efficiency are clear. It is crucial for educational policymakers to address the digital divide and ensure that all students, regardless of their socioeconomic background, can reap the benefits of technological advancements in education.。

从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一:菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素,它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。

菠菜是叶绿素含量较高的植物之一,因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素,探索最有效的提取方式。

2.材料与方法2.1 材料:- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法:- 方法一:无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的无水乙醚,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醚中,然后离心10分钟收集上层液体。

- 方法二:丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的丙酮,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于丙酮中,然后离心10分钟收集上层液体。

- 方法三:乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的乙醇,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醇中,然后离心10分钟收集上层液体。

3.结果在三种提取方法中,通过观察可以发现,方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色,而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。

利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度,发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高,而方法三的吸光度较低。

4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂,乙醚能有效溶解叶绿素,并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。

方法二使用丙酮作为提取溶剂,丙酮也能有效溶解叶绿素,并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。

方法三使用乙醇作为提取溶剂,乙醇对叶绿素的溶解能力较差,导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。

5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较,我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素,并且吸光度较高。

因此,在菠菜中提取叶绿素的实验中,建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。

实验报告二:叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一,它在光合作用中起着关键作用。

本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。

菠菜叶中色素的提取实验报告

菠菜叶中色素的提取实验报告

菠菜叶中色素的提取实验报告一、实验目的1、了解菠菜叶中所含色素的种类和化学性质。

2、掌握从菠菜叶中提取和分离色素的实验方法。

3、学习使用分光光度计测定色素溶液的吸光度。

二、实验原理菠菜叶中含有多种色素,如叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素等。

这些色素在有机溶剂中的溶解度不同,因此可以通过萃取的方法将它们分离出来。

叶绿素 a 和叶绿素 b 为吡咯衍生物,可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。

叶绿素 a 为蓝绿色,叶绿素 b 为黄绿色。

叶黄素和胡萝卜素属于类胡萝卜素,叶黄素为黄色,胡萝卜素为橙黄色,它们也能溶于有机溶剂。

根据不同色素在层析液中的溶解度不同,在层析过程中,溶解度大的色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度小的色素扩散得慢,从而将不同的色素分离开来。

三、实验材料与仪器1、材料:新鲜菠菜叶2、仪器:研钵、漏斗、玻璃棒、分液漏斗、容量瓶、分光光度计、滤纸、脱脂棉等。

3、试剂:无水乙醇、石油醚、丙酮、层析液(石油醚:丙酮=9:1)四、实验步骤1、提取色素称取 5g 新鲜菠菜叶,剪碎后放入研钵中,加入 5mL 无水乙醇、少许碳酸钙和石英砂,充分研磨成匀浆。

将研磨好的匀浆用漏斗过滤到分液漏斗中,用 5mL 无水乙醇冲洗研钵和漏斗,将滤液合并到分液漏斗中。

轻轻振摇分液漏斗,静置分层,放出下层的水相,保留有机相。

2、制备色素溶液将有机相转移到容量瓶中,用无水乙醇定容至 25mL,得到色素提取液。

3、色素的分离取一块干燥的滤纸,剪成 15cm×3cm 的长条,在一端剪去两角,在距离剪角一端 1cm 处用铅笔轻轻画一条横线。

用毛细吸管吸取少量色素提取液,在铅笔线处点样,每次点样后吹干,重复多次,使点样处形成一条细而直的色素线。

将点样好的滤纸放入装有层析液的层析缸中,层析液液面不能超过滤纸的铅笔线。

盖上盖子,进行层析。

当层析液前沿接近滤纸的上端边缘时,取出滤纸,用铅笔标记出色素带的位置。

4、色素的鉴定用分光光度计分别测定叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素溶液在不同波长下的吸光度,绘制吸光度波长曲线,确定最大吸收波长。

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告(精选3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告篇1【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。

2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。

当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。

【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。

【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。

2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。

按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。

3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。

4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。

5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。

6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。

【实验记录】虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。

【结果与讨论】1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。

2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。

3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇从菠菜中提取叶绿素实验报告 (1)1.1 仪器与试剂仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。

洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。

弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。

1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h。

选取效果最好的一块进行点样。

展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。

瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。

待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。

分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。

观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。

注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。

1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。

在层析柱中加15cm石油醚。

加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。

装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。

将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

竭诚为您提供优质文档/双击可除菠菜色素实验报告篇一:菠菜中色素的提取预习实验报告实验名称:菠菜中的色素提取一:实验目的:了解薄层色谱在有机物分离中的应用,掌握薄层色的基本原理;加强有机物分离提纯技术的训练。

二:实验基本原理:菠菜的叶片中含有叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)、叶黄素及胡萝卜素等天然色素。

叶绿素是绿色植物的主要色素,分子由脱镁叶绿素母环、叶绿酸、叶绿醇、甲醇、二价镁离子等部分构成。

高等植物中有两种叶绿素即叶绿素a和叶绿素b共存,叶绿素a为一蓝黑色固体粉末,在乙醇溶液中为蓝绿色,并有深红色荧光。

而叶绿素b为暗绿色固体粉末,其乙醇溶液为黄绿色,并有红色荧光。

叶绿素不溶于水,易溶于有机溶剂,常可用极性有机溶剂,例如丙酮、乙醇、乙酸乙酯等。

从植物匀浆中提取它。

叶绿素存在于植物细胞的叶绿体中,与类胡萝卜素、类脂物质及脂蛋白复合在一起,分布在叶绿体内的蝶形体的片层膜上。

胡萝卜素是一种橙色的天然色素,属于四萜类,为一长链共轭多烯。

有α、β、γ三种异构体,其中β异构体最多。

叶黄素是一种黄色色素,与叶绿素同存在与植物体内,是胡萝卜素的羟基衍生物,较易溶于乙醇,在石油醚中溶解度较小。

根据它们的化学特性,可将它们从植物叶片中提取出来,并通过萃取、沉淀和色谱方法将它们分离出来。

色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同,或和其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组份分开。

薄层层析是一种微量、快速和简便的色谱方法。

由于各种化合物的极性不同,吸附能力不相同,在展开剂上移动,进行不同程度的解析,根据原点至斑点中心及展开剂前沿的距离,计算比移值。

化合物的吸附能力与它们的极性成正比,具有较大极性的化合物吸附较强。

在给定的条件下(吸附剂、展开剂、板层厚度等),化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常数,其大小只与化合物本身的结构有关,因此可以根据Rf值鉴别化合物。

五、实验简单操作步骤1、制板将硅胶加0.8%cmc溶液,调成浆状,将其余涂在载玻片上,并使其平坦,放在干净平坦的台面上,晾干之后放入105℃烘箱活化1h,取出放入干燥器内待用。

2、叶绿素的提取在研钵中放入几片菠菜叶。

加入10mL2:1石油醚和乙醇混合液,适当研磨。

将提取液用滴管移至分液漏斗中,加入10mL饱和nacl溶液除去水溶性物质,分去水层,再用蒸馏水洗涤两次。

将有机层干燥的小锥形瓶中,加入无水硫酸钠干燥。

干燥后的液体倾至另一锥形瓶中。

3、点样用一根内径1mm的毛细管,吸取适量提取液,轻轻地点在距薄板一端1cm处,平行点两点,两点相距1cm 左右。

可多点几次,但点样斑点直径不得超过2mm.4、展开先在展开槽中放入展开剂,加盖使缸内蒸气饱和10min,再将薄层板斜靠于展开槽内壁。

点样端家畜展开剂但样点不能浸没于展开剂中,密闭展开槽。

待展开剂上升到距薄层板另一端约1cm时,取出平放,用铅笔或小针划前沿线位置,晾干薄层板。

5、分离如需提取色素,可分别将不同组分的薄层板硅胶小心挂下,收集同组分的硅胶于小锥形瓶中,用有机溶剂浸泡后,将硅胶过滤掉。

有机溶剂蒸干即可得到不同组分的色素。

姓名:班级:时间:篇二:菠菜色素提取实验报告菠菜色素的提取和色素分离曾丽兰(山西大学化学化工学院山西太原030006)摘要:在用抽滤法提取色素的过程中,由于抽滤时不好控制,非极性溶剂难免会被抽去,且在几次转移中损失较多,程序繁杂.用浸泡法操作简便易行,损失少,产率高。

故在实验中采取了浸泡法提取色素,使用薄层色谱、柱色谱对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行了分离。

薄层层析时使用了石油醚-丙酮=8:2,石油醚-乙酸乙酯=6:4的两种不同展开剂,对比展开效果。

在柱层析时,用不同洗脱剂分离得到不同物质,结果证明石油醚-丙酮=9:1做洗脱剂分离胡萝卜素效果最好。

将得到的胡萝卜素进行紫外光谱测定,检验实验成果。

关键词:菠菜色素;提取;分离;胡萝卜素;紫外光谱测定绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。

叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(c55h72o5n4mg)和叶绿素b(c55h70o6n4mg)),差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。

它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。

植物中a的含量通常是b的3倍。

尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。

胡萝卜素(c40h56)是具有长链结构的共轭多烯。

它有三种异构体α—,β—,和γ—胡萝卜素,其中β—异构体含量最多,也最重要。

生长期较长的绿色植物中,异构体中β—的含量多达90%。

β—具有维生素A的生理活性,其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。

生物体内,β—体受酶催化氧化即形成维生素A。

目前,β—体可作为维生素A使用,也可作为食品工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功能。

叶黄素(c40h56o2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。

在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。

较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。

由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了.本实验就提取和分离做了相关的研究。

1实验部分1.1仪器与试剂仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10cm)、uV-240紫外分光光度计试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶g、中性氧化铝(150目~160目)1.2提取与分离1.2.1浸泡法提取色素在研钵中放入10g新鲜的菠菜叶,加入20mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。

洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。

弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约lmL。

1.2.2薄层层析取四块显微载玻片,硅胶g经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°c活化1h。

选取效果最好的一块进行点样。

展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。

瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。

待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。

分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。

观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。

注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。

1.2.3柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。

在层析柱中加15cm石油醚。

加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。

装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。

将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。

在柱顶加1.5cm洗脱剂——9:1(体积比)石油醚—丙酮。

打开活塞,用锥形瓶收集。

当第一个有色成分即将滴出时,取另一锥形瓶收集,得橙黄色溶液,即胡萝卜素。

1.3β—胡萝卜素的紫外光谱鉴定将橙黄色试样稀释后加到1cm的比色皿中,以石油醚做空白试剂,用分光光度计测定400—600nm范围内的吸收,指出测定的λmax值。

2.结果与讨论2.1提取由于甲醇与乙醇的极性相近,但是乙醇易得、无毒,所以用3:2的石油醚一乙醇通过浸泡的方法提取菠菜色素,而不是用石油醚—甲醇。

2.2分离薄层层析薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,可以用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离。

实验中涉及的菠菜色素的比移值(Rf)(薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值)列表如下菠菜色素的比移值(Rf)在一定的色谱条件下,特定化合物的Rf值是一个常数,因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。

菠菜色素中各种色素的比移值Rf大小为:胡萝b素>叶黄素>叶绿素,按此顺序它们的非极性依次减弱。

物质极性的判断为柱层析中洗脱剂的选择提供了参考价值。

柱层析胡萝卜素极性最小,因此胡萝卜素的洗脱剂用极性较小的9:l的石油醚-丙酮溶剂效果较好。

但要收集其他几种色素得换用其他的洗脱剂,因为色素的极性各不相同,且有一定差别。

如用7:3石油醚-丙酮分离叶黄素.分离出胡萝卜素和叶黄素后,可加大溶剂极性以较快速度洗脱叶绿素.用3:1:1的丁醇-乙醇-水洗脱剂洗脱叶绿素。

2.3紫外光谱测定胡萝卜素的参考数据为481(123027),453(141254),实验所测数据与此有差距,可能是系统误差所导致。

有关紫外光谱情况见紫外光谱如下3.结论采用浸泡法提取色素比抽滤法更好。

在薄层层析时,用石油醚-丙酮=8:2时,能更明显的看到分层。

在柱色谱洗脱剂的选择上,基于薄层分析的极性判断选择了石油醚-丙酮=9:1的溶剂作为洗脱剂,取得了非常好的效果。

通过实验,进一步认识到洗脱剂在柱层析中的重要性。

参考文献:1.兰州大学、复旦大学化学系有机化学教研室.有机化学实验(第2版)I-m3.北京:高等教育出版社,19942.王福来.有机化学实验[m].武汉:武汉大学出版社,20XXAbstractandseparateofspinachpigmentZengLi-lan(schoolofchemistryandchemicalengineeringrshanxiuniv ersity,Taiyuan030006,china)。

相关文档
最新文档